二甲双胍治疗多囊卵巢综合征机制研究

目的探讨二甲双胍在治疗多囊卵巢综合征(PCOS)中对Treg细胞和Th17细胞的作用及其机制。方法雌性Wistar大鼠45只,来曲唑灌胃建立PCOS大鼠模型,随机抽取5只确立成模后,按完全随机分组原则分为二甲双胍组[300 mg/(kg·d)]、达英组[180 mg/(kg·d)]、二甲双胍[300 mg/(kg·d)]与达英[180 mg(kg·d)]联合治疗组及模型组,每组10只;另选取10只大鼠作为对照组。成模后,各治疗组采用相应药物灌胃治疗,模型组给予等量生理盐水,均连续处理28 d,观察各组大鼠每周体质量变化。苏木精-伊红(HE)染色法观察卵巢组织学变化,流式细胞术检测脾脏中Treg细胞和Th17细胞数量及表型的改变,ELISA法检测血清中IL-6和TGF-β水平,RT-PCR法测定卵巢组织转录因子Foxp3、ROR-γt的表达水平。结果模型组大鼠体质量、脾脏中Treg细胞、Th17细胞数量以及Treg/Th17比例、血清中IL-6及TGF-β水平以及卵巢组织中转录因子Foxp3的相对表达量显著高于对照组(P<0.05);二甲双胍组、达英组与联合治疗组体质量与模型组相比显著降低(P<0.05),与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);二甲双胍组、达英组及联合用药组囊性扩张卵泡较模型组明显减少;二甲双胍组脾脏Treg细胞、Th17细胞、血清IL-6水平及卵巢组织中转录因子ROR-γt的表达水平较模型组显著升高(P<0.05),达英组及联合用药组脾脏Th17细胞、血清IL-6水平与模型组相比显著降低(P<0.05),而卵巢组织中转录因子Foxp3的表达水平较模型组显著升高(P<0.05)。结论二甲双胍治疗PCOS的作用机制可能是通过影响血清细胞因子IL-6表达水平,调节Treg、Th17细胞的数量及比例,进而改善卵巢组织微环境。

苏云金芽孢杆菌cry1Da5基因的克隆与表达

采用5对引物组合经2轮PCR扩增对苏云金芽孢杆菌QL75-2菌株中的cry基因进行鉴定,克隆得到1个cry1Da型基因片段。通过设计全长引物扩增得到该cry基因的全长序列,转入原核表达载体pET-28a中,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,最后对表达蛋白进行生物活性分析。序列分析结果表明,该cry1Da基因全长3495 bp,推测其编码1164个氨基酸,组成分子量约132.01 ku的蛋白质。该预测蛋白质与已知的Cry1Da3蛋白质具有最高的序列同源性(99.7%),该基因被国际杀虫晶体蛋白基因命名委员会正式命名为cry1Da5。生物活性分析结果表明,Cry1Da5蛋白质对鳞翅目的甜菜夜蛾幼虫具有较强的杀虫活性,其LC 50为21.47μg/mL,而对鳞翅目的棉铃虫幼虫无杀虫活性。因此,cry1Da5基因可作为一个新的cry基因资源在甜菜夜蛾的生物防治中应用。

论新形势下政工师做好思政工作的方法

近些年来,随着社会经济的飞速发展,企业在市场中面临的竞争也越来越激烈,员工的工作任务也更加繁重。在这样的条件下,员工的精神面貌和思想境界对于其工作和生活来说至关重要,而政工师正是企业中为员工思想工作服务的灵魂工程师,他们能够有效促进企业文化的形成、发展和成熟,为员工的心理健康建设作出相应的贡献。政工师应当坚持以人为本,实事求是,提高自身修养和综合素质,并创新工作方法,激发员工潜能,树立服务意识,熟悉员工思想动态并帮助他们解决思想问题。

仙人掌多糖对糖尿病大鼠模型血糖及饮食等调控影响

目的 旨在研究仙人掌多糖对2型糖尿病大鼠的血糖、饮食、体重、调节肝脏代谢的作用。方法 本实验以四氧嘧啶为造模试剂,Wistar大鼠为载体构建2型糖尿病大鼠模型,后将建模成功的大鼠随机分成五组,每组六只分别给予低〔0.1g/(kg·d)〕、中〔0.2g/(kg·d)〕、高〔0.4g/(kg·d)〕三种剂量的仙人掌多糖,以及二甲双胍100mg/(kg·d)、生理盐水进行灌胃处理,同时以正常Wistar大鼠作平行对照,测量大鼠每天的血糖、摄食量、饮水量、体重,测算肝脏系数进而判断仙人掌多糖是否有降糖、调节饮食、控制体重、调节肝脏代谢作用。结果 高灌糖组对糖尿病大鼠的降血糖效果显著(P<0.05),优于二甲双胍组,而中、低灌糖组则无明显效果;中、高灌糖组对糖尿病大鼠的饮食具备一定的调控作用,能够显著减少糖尿病大鼠的摄食量和饮水量(P<0.05);中灌糖组、二甲双胍组与空白对照组在控制体重有显著性差异(P<0.05);中、高灌糖组和二甲双胍组对糖尿病大鼠的肝脏代谢较空白对照组有极显著差异(P<0.01)。结论 一定剂量〔0.2~0.4g/(kg·d)〕仙人掌多糖不仅能够显著降低2型糖尿病大鼠血糖,调控饮食,控制体重,而且具有调节肝脏代谢作用。

两株番茄细菌性斑点病拮抗放线菌的鉴定及功能基因筛查

本研究从分离自新疆巴里坤盐湖的放线菌中筛选到两株抗菌活性放线菌GWB1-7和ZW2-11,该菌株对番茄细菌性斑点病致病菌(丁香假单胞杆菌番茄致病变种,Pseudomonas syringae pv.tomato)具有显著的抗菌活性。采用平板对峙法对上述菌株进行菌株拮抗分析,并对其进行菌株形态观察、系统进化树分析及抗生素合成相关功能基因筛查。结果表明:放线菌GWB1-7和ZW2-11不仅对丁香假单胞杆菌番茄致病变种具有显著抗菌活性,而且对大肠杆菌(Escherichia coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的拮抗作用明显;放线菌GWB1-7在进化关系上与拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis)放线菌最相近,而放线菌ZW2-11同链霉菌属(Streptomyces)放线菌聚类在相同的分支;这两株菌均携带有Nrps和Aph基因,另外GWB1-7菌株中还含有I型Pks基因,而ZW2-11菌株还含有II型Pks基因。放线菌GWB1-7和ZW2-11的鉴定及抗生素合成相关功能基因的筛查,为后期分离这些菌株中的活性代谢产物奠定理论基础。

对棉铃虫高杀虫活性苏云金芽胞杆菌菌株的筛选

采用生物活性测定方法对实验室分离保存的73株Bt菌株进行杀棉铃虫幼虫的筛选,获得了3株对棉铃虫具有显著杀虫活性的菌株,其胞晶混合物对棉铃虫幼虫的LC50值为413. 43～574. 30μg·m L-1。对这3株Bt菌株研究发现,其产生的伴胞晶体类型包括菱形和方形,伴胞晶体蛋白编码基因的类型主要有cry1Aa、cry1Ab、cry1Ac、cry1Ia、cry2Ac、cry2Ah、cry4Ba、cry9Ea、cyt2Aa等,这些Bt菌株均表达约60 k Da和130k Da伴胞晶体蛋白。这3株Bt菌株的鉴定为棉铃虫的生物防治提供新的菌株资源和基因资源。

新疆达坂城盐湖土壤中可培养放线菌多样性及其活性筛选

【背景】近年来,新疆的一些盐湖和盐碱地如艾比湖、七角井盐湖和罗布泊等地不断有新的放线菌菌株被发现,而达坂城盐湖土壤分离放线菌的相关报道较少。【目的】研究新疆达坂城盐湖土壤中可培养放线菌的多样性并进行酶活性筛选,以期发现新的药用微生物资源,为新抗生素的发现奠定基础。【方法】采用纯培养分离技术和基于16S rRNA基因序列的系统发育分析研究达坂城盐湖土壤中可培养放线菌的多样性;采用PCR检测分析pksI、pksII、nrps和aph这4种抗生素合成相关基因的分布;利用琼脂块扩散法进行抗菌活性初筛;以9种酶活底物为指示物,结合琼脂块扩散法对可培养的放线菌进行功能酶活性筛选。【结果】从达坂城盐湖的14份土壤中共分离到65株放线菌,隶属于5个目5个科9个属,其中2株放线菌为潜在新种,优势菌属为链霉菌属(Streptomyces)和拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis);抗生素功能基因筛选出较为丰富的与抗生素合成相关的基因;筛选到一株对革兰氏阳性、革兰氏阴性及真菌都有拮抗效果的菌株D21E05;达坂城盐湖土壤中含丰富的产蛋白酶、脂酶、过氧化氢酶、纤维素酶和淀粉酶等生物活性酶的菌株。【结论】达坂城盐湖土壤中含有较为丰富的药用放线菌资源,具有从中发现放线菌新物种和新抗生素的潜力。

猕猴桃细菌性溃疡病生防放线菌的筛选与鉴定

对分离自新疆巴里坤盐湖和达坂城盐湖的179株放线菌进行拮抗丁香假单胞杆菌猕猴桃致病变种筛选,从中筛选到8株具有拮抗作用的放线菌,其中ZBW8-1、E14-3和ZB5-6抗菌活性最显著,其抑菌圈直径分别为27.5 mm、23.6 mm和26.2 mm。针对这3株放线菌进行菌落形态观察,16s rRNA扩增、测序及系统进化分析,并对其进行抗生素合成相关基因的PCR鉴定。结果表明,放线菌ZBW8-1、E14-3和ZB5-6分别与糖霉菌属(Glycomyces)的Glycomyces fuscus TRM 49117、原小单孢菌属(Promicromonospora)的维也纳原小单孢菌(Promicromonospora vindobonensis)V45T以及拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis)的Nocardiopsis terrae YIM 90022T 16s rRNA序列同源性最高,分别为99.86%、99.10%和99.86%。在系统进化关系上,这3株菌也分别与上述菌株聚类在同一个分支上。ZBW8-1、E14-3和ZB5-6菌株中均携带有NRPS基因,其中ZBW8-1和ZB5-6菌株中还含有PKS-II基因,且ZBW8-1菌株中还含有PKS-I基因。对这3株抗菌活性放线菌进行进化地位分析及抗生素合成相关功能基因的鉴定,将为研究这些菌株中的活性次生代谢产物奠定理论基础。

三株抗多重耐药性金黄色葡萄球菌的放线菌分离筛选与鉴定

为了筛选对人体常见病原菌具有显著抑菌活性的放线菌资源,本研究采用六种培养基(GA、CMKA、GW、MM、SCK、HV)对新疆乌鲁木齐南山地区土壤样本中放线菌资源进行分离、并选取8株临床标准致病菌株和1株分离自临床耐药金黄色葡萄球菌RS作为指示菌,通过平板对峙法进行抑菌活性放线菌的筛选,最后对具有显著抑菌活性的放线菌进行菌落形态观察和基于16S rRNA序列的系统进化树分析。在分离的109株放线菌中筛选得到3株(C2-4、D4-2和E1-2)均对多重耐药性金黄色葡萄球菌RS(对苯唑西林、四环素、红霉素及青霉素G均有耐药性)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)具有显著抑菌活性的放线菌菌株。系统进化树分析表明,放线菌C2-4和D4-2与拟无枝酸菌属(Amycolatopsis)放线菌亲缘关系最近,放线菌E1-2与链霉属(Streptomyces)放线菌进化关系较近。抑菌活性放线菌C2-4、D4-2和E1-2的鉴定,将为其活性次级代谢产物的分离奠定了基础。

苏云金芽胞杆菌cyt2Ba16基因的克隆表达

[目的]获得苏云金芽胞杆菌QL32-1中杀虫晶体蛋白基因,并分析其杀虫活性。[方法]采用cyt基因通用引物、两步法染色体步移的方法对QL32-1中cyt基因进行鉴定和全长克隆,再构建重组质粒pET-28a-2Ba16,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,最后对表达蛋白进行杀虫活性分析。[结果]克隆得到1个全长783 bp cyt2B基因,其编码260个氨基酸,推导分子量约29.69 kDa,此氨基酸序列与已知的Cyt2Ba1蛋白同源性最高,为92.4%。该基因被国际杀虫晶体蛋白基因命名委员会正式命名为cyt2Ba16。杀虫活性分析表明:cyt2Ba16对双翅目的库蚊(Culex quinquefasciatus)具有显著的杀虫活性,LC50为9.73μg/mL。[结论]cyt2Ba16基因是一个对库蚊具有较高杀虫活性的新型cyt基因,为QL32-1菌株的应用提供理论基础。