茶树叶糖蛋白分离及鉴定的初步研究

茶叶是一种有益健康的保健食品,保健功能在于它有多种化学活性成分.近年来研究表明,茶叶糖蛋白可能是茶叶的保健因子之一.从茶树叶中提取了总蛋白、45%～70%硫酸铵分级总蛋白、分级蛋白Sephadex G-100凝胶层析分离出粗糖蛋白,根据糖蛋白糖链及蛋白的对照染色鉴定出多种茶树叶糖蛋白,并从SDS-胶上快速纯化了三种茶叶糖蛋白.ConA-Sepharose 4B亲和层析从茶树叶总蛋白中分离出16种天然活性糖蛋白.

水稻NADP-苹果酸酶的原核表达、纯化和抗体制备

构建了水稻NADP-ME_2基因cDNA的原核表达载体pQE30,并诱导表达出有生物学功能的融合蛋白。用Ni-NTA琼脂糖亲和层析纯化出NADP-ME_2融合蛋白,并测定了融合蛋白酶学特性(V_(max)、K_m、K_(cat)、底物特异性)。用纯化的NADP- ME_2融合蛋白免疫家兔,制备出抗水稻NADP-ME特异性抗体。全蛋白双向电泳后Western印迹表明水稻中至少有4个NADP-ME家族蛋白质成员。

星星草质膜型Na^+/H^+逆向转运蛋白基因的克隆和特性分析

用RT-PCR及RACE方法从盐生植物星星草中分离了Na^+/H^+逆向转运蛋白基因的cDNA(PtSOS1,GenBank登录号EF440291),PtSOS1的cDNA长度为3 775 bp,5′非翻译区为69 bp,3′非翻译区为292 bp,开放阅读框为3 414 bp,编码1137个氨基酸。氨基酸同源性分析表明,PtSOS1与小麦、水稻和拟南芥质膜型Na^+/H^+逆向转运蛋白的一致性分别为88%、79%和66%。预测分析表明,PtSOS1具有11个跨膜结构区域,基因组DNA的Southern分析表明PtSOS1是单拷贝基因。半定量RT-PCR结果显示,PtSOS1的mRNA受盐胁迫上调表达,暗示PtSOS1可能在星星草较强的抗盐碱能力中起作用。

过量表达星星草PtSOS_1提高拟南芥的耐盐性

将星星草中分离的质膜型Na^+/H^+逆向转运蛋白基因PtSOS_1(GenBank登录号EF440291)构建到pGWB_2植物表达载体上,转化拟南芥,获得抗卡那霉素的抗性植株。PCR和Northern检测表明,PtSOS_1已整合到拟南芥基因组中并过量表达。耐盐性实验表明,PtSOS_1过量表达提高了拟南芥植株的耐盐性。盐分测定表明,盐胁迫下PtSOS_1转基因植株中Na^+积累低于野生型的,K^+含量则高于野生型的,转基因植株中K^+/Na^+比值高于野生型。

毛尖山水电站跨流域引水流量的选择

跨流域开发梯级水电站具有一水多用的多重效益，然而，如何经济合理的选择跨流域引水流量，现行的教材、参考书及水文、水能计算规范都没有明确规定。文章结合实际，介绍此问题的一般计算方法。

毛尖山水电站跨流域引水流量的选择

跨流域开发梯级水电站具有一水多用的多重效益。结合毛尖山水电站跨流域引水工程实际,介绍经济合理地确定跨流域引水流量的一般计算方法。表4个。

逆境下水稻(Dryza sativa L.)rHsp90基因的克隆及功能分析

本研究中,利用差异显示法,在碳酸盐逆境下,从水稻(OryzasativaL.)根的cDNA文库中克隆得到了水稻热激蛋白90基因(rHsp90,GenBankAccessionNo.AB037681)。Northern杂交结果表明,在水稻根中,rHsp90基因的转录水平在包括盐(NaCl,NaHCO3和Na2CO3),PEG,高pH(pH8.0和pH11.0)以及热激(50℃)逆境下,都受到了不同程度的诱导。同时,适量表达rHsp90基因的酵母(Saccharomycescerevisiae)在各种盐逆境以及热激逆境中,生长状态要好于对照。对转水稻rHsp90基因烟草的抗盐(NaCl,NaHCO3)分析表明,转基因烟草的生长势要好于野生型烟草。通过以上研究表明,水稻rHsp90基因与逆境之间具有一定的应答关系,并在植物适应环境逆境过程中起着重要的作用。

“植物细胞内pH调控系统”是适应环境逆境的一个耐性机制?

本研究把“植物细胞内 pH调控系统”与植物抗逆性的关系作为研究对象 ,并探讨了参与植物细胞内pH调控相关的基因在碳酸盐 (Na2 CO3,NaHCO3)等逆境下的表达特性 ,其结果表明 :NADP苹果酸酶(NADP MalicEnzyme,NADP ME)基因、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 (PhosphoenolpyruvateCarboxylase,PEP Case)基因 ,还有细胞膜H+ ATPase (plasmamembraneH+ ATPase ,P H+ ATPase)基因、液泡膜H+ AT Pase (vacuolarmembranceH+ ATPase ,V H+ ATPase)基因、液泡膜H+ PPase (vacuolarmembranceH+ PPase ,V H+ Ppase)基因等的表达与NaCl逆境、碳酸盐逆境、外界环境 pH逆境有应答关系 ,显示了这些基因在逆境下的表达有被强化的趋势。通过对逆境胁迫后植物根活体切片进行的pH变化趋势的观察 ,结果表明 :植物根细胞在组织学水平上 pH有明显的变化。在逆境下水稻根的组织学水平的观察 ,暗示了根组织有被酸性化的趋势 ,从而我们推测在逆境胁迫下细胞内 pH发生了改变 ,不正常的细胞内 pH会抑制细胞的生长发育 ,使植物受害。由此 ,我们提出细胞内 pH调控系统是植物在长期的进化过程中获得的抗逆机制。在逆境下强化“细胞内pH调控系统”的调控能力能够提高植物的抗性。

植物体内钙的存在形式研究进展(综述)

钙是一种很重要的矿质元素 ,主要以 Ca2 +和钙结合蛋白等形式存在。

水稻质膜H^+-ATPase基因对拟南芥遗传转化及其抗盐性分析

RT-PCR扩增得水稻质膜H+-ATPase全长cDNA(PM-H+-ATPase),构建了植物表达载体获得质粒pBI121-PM-H+-ATPase,农杆菌介导、真空渗入法转化PM-H+-ATPase基因入拟南芥,得35株T1代卡那抗性植株。抗性植株PCR分析表明,抗性植株整合了目的基因。Northern杂交分析进一步表明T3代转基因拟南芥表达了目的基因。抗盐(NaHCO3和NaCl)性分析表明:转基因植株的耐盐能力明显高于野生型;盐碱胁迫下转基因植株开花优先于野生型植株。

杨树SHMT基因家族分析及PtrSHMT9突变体创制

丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)在植物细胞一碳代谢途径上起着重要作用。我们识别毛果杨PtrSHMT家族有9个基因成员,eFP数据显示7个PtrSHMTs基因在多个组织内有转录表达,其中PtrSHMT9在木质部表达水平最高。进一步定量PCR和Aspwood检测显示,PtrSHMT9表达量在茎木质组织次生壁加厚阶段呈现高水平,这表明它可能参与杨树木材形成。用Cas9/gRNA基因编辑技术,制备PtrSHMT9被编辑产生的突变体,获得4个不同株系ptrshmt9敲除突变体。这些研究结果为深入探究树木SHMT及PtrSHMT9功能,提供了基础信息和遗传材料。

拟南芥根毛功能基因AtGDPD-Like3关键氨基酸位点鉴定

AtGDPD-Like3是编码甘油磷酸二酯磷酸二酯酶(GDPD)类似基因,拟南芥该家族基因AtGDPD-Like3突变体shv3存在严重的根毛发育缺陷。为了鉴定AtGDPD-Like3关键氨基酸位点,我们构建S 538 A、V 556 A和D 628 A单点突变AtGDPD-Like3,分别转化atgdpdl3突变体并观察其恢复根毛缺陷程度。结果显示V 556 A、D 628 A位点突变AtGDPD-Like3完全恢复atgdpdl3根毛生长缺陷表型,但S 538 A突变AtGDPD-Like3只是部分恢复根毛缺陷。这些结果表明Ser 538是AtGDPD-Like3较为关键的氨基酸位点,突变影响其蛋白质功能行使,同时暗示AtGDPD-Like3还存在其它的关键氨基酸位点。此研究结果为进一步探究AtGDPD-Like3蛋白功能行使的作用机制奠定了基础。

茶色素酶法工业化生产(简报)

利用茶多酚工业化生产设备 ,经适当改进 ,运用酶技术成功地实现了天然茶色素的工业化生产。茶色素得率为 10～ 12 % ,茶黄素 (TF)及茶红素 (TR)含量分别达 2 0 %及 30 % ,成本仅为工业化生产茶多酚 1.

东北白桦COMT1基因克隆及其植物表达载体构建

采用同源克隆法结合cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆东北白桦(Betula platyphylla)咖啡酸/5-羟基阿魏酸-O-甲基转移酶(COMT)基因COMT1,测序结果显示东北白桦COMT1 cDNA序列全长1 367 bp(GenBank登录号:KC292201),其中完整编码区长度1 095 bp,编码365个氨基酸。利用Gateway技术分别构建了东北白桦COMT1植物过量表达和反义表达载体。

平原城市备用水源人工湖泊规划实践——以温州市某县人工湖泊规划为例

在联合国千年大会上,中国政府向国际社会承诺,在2015年前基本解决饮用水安全问题。在平原地区,受地形限制,没有条件建设饮用水水库,饮用水源来自于其他行政区,导致建设费用大,原水、自来水价格高,供水水源单一,必须建设应急备用水源。以浙江省温州市某县人工湖泊规划工作为例,对规划选址、规划标准、工程规模、水质保护、工程布置等方面进行了详细论述。可为类似工程的规划工作提供参考。

茶叶多糖及其生物活性

茶叶多糖（TPS）是一种酸性多糖，不同制备原料及制备方法其含量及单糖组成等均有差异；茶多糖络合有多种金属元素，具广泛的生物活性，如降血糖、降血脂、抗凝血及抗血栓、降血压及耐缺氧等。

AtGDPD-Like 6和AtGDPD-Like 7基因启动子表达特性及AtGDPD-Like 6蛋白定位

以野生型(Col-0)拟南芥为试材,采用RT-PCR法,研究AtGDPDL6和AtGDPDL7基因组织表达特性。以ProAtGDPDL6::GUS和ProAtGDPDL7::GUS转基因拟南芥为试材,采用GUS组织化学染色法,研究AtGDPDL6和AtGDPDL7基因启动子表达模式,并以Pro35S::AtGDPDL6-GFP转基因拟南芥为试材,采用激光共聚焦显微镜进行荧光观察,研究AtGDPDL6蛋白的细胞内定位。结果表明:AtGDPDL6基因在拟南芥花组织中特异表达;AtGDPDL7基因在花和角果中特异表达。AtGDPDL6和AtGDPDL7基因特异表达在拟南芥成熟的花粉囊和柱头中。AtGDPDL6蛋白定位于细胞膜和细胞壁区域。

高校传播力与影响力提升路径研究——以南京审计大学为例

随着国际化进程发展,各个高校在自身传播力与影响力建设方面进行了探索。高校应该进一步加强思想重视,充分利用信息化手段,开展国际化建设等渠道,实现高校的发展及传播力与影响力提升。

红茶水分散特征分析及聚沉值的测定

本文采用物理化学方法对红茶水分散特征及聚沉不稳定性进行研究。实验证明红茶水为介于胶体与粗分散系之间的一种分散系;红茶水在内含物浓度为0.008925千克/升时,颗粒近似球状,90％颗粒直径为1～2.5μm,这些颗粒拼接在一起形成大颗粒,但并不完全融合;红茶颗粒带负电,电解质特别是高价阳离子的加入对红茶水稳定性具有显著的破坏作用。

赴美学习水利建设与管理概况及其思考

美国经济社会高度发达,水利建设起步早、保障程度较高。通过赴美学习,认识到美国在水库防洪、海绵城市、多水源尤其是多水库保障城市供水、雨水收集与中水回用、蓝色碳库建设、净化入河雨水、流域综合治理、水利管理等领域或领域的某些方面,值得我们学习、借鉴,从而为我国水利建设与管理服务。但美国当时的设计理念、设计水平等有其局限性,国体、国情与我国也有所不同,借鉴时一定要结合实际、因地制宜、与时俱进。我国在生态河道建设等部分领域已经超越美国,我国的集中力量办大事、快办事制度优越性,是美国无可比拟的。