气相色谱-串联质谱同时测定白酒中20种吡嗪类化合物

本研究采用直接进样结合气相色谱-串联质谱技术建立测定白酒中20种吡嗪类化合物的方法,并对10种香型不同品牌白酒中的吡嗪类化合物进行测定。该方法在0.01~10.00 mg/L的质量浓度范围内具有良好的线性关系,决定系数R^(2)在0.998 3~0.999 7的范围内,检出限在0.16×10^(-3)~3.25×10^(-3) mg/L范围内,不同浓度条件下的加标回收率在81.26%~113.13%之间,日内日间相对标准偏差在1.42%~4.98%之间。10种香型白酒中吡嗪类化合物的定量分析结果表明,吡嗪类化合物在酱香型白酒中含量最高,质量浓度范围为2.63~16.88 mg/L,其次是芝麻香型和兼香型。该方法与气相色谱-质谱法相比具有更高的准确度及灵敏度,适用于不同香型白酒中吡嗪类化合物的分析。

金果榄质量HPLC评价研究

目的:建立同时测定金果榄药材中古伦宾、蜕皮激素和生物碱类成分的含量的方法,并寻找金果榄药材中的质量差异标志物。方法:采用HPLC法同时测定古伦宾、蜕皮激素、非洲防己碱、药根碱和巴马丁的含量,并以检测出的含量为指标,结合聚类分析和偏最小二乘判别分析进一步确定金果榄药材中的质量差异标志物。结果:测定方法精密度、稳定性和重复性良好,聚类分析和偏最小二乘判别分析结果均显示20批样品可分为三大类,变量权重结果证实非洲防己碱、古伦宾、巴马汀为金果榄药材主要质量差异标志物。结论:所建方法利用DAD检测器特性,同时监测多个波长,方便快捷,能显著提高药材质量控制效率;聚类分析和偏最小二乘判别分析结果也可为金果榄药材种植、栽培提供依据。

川射干叶的化学成分研究

目的:研究川射干叶的化学成分。方法:采用70%乙醇提取,硅胶柱层析及Sephadex LH-20色谱、薄层色谱对川射干叶的化学成分进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据分析鉴定化合物结构。结果:从川射干叶中分离得到12个化合物,分别为5,7,4′-三羟基-6-甲氧基黄酮(1)、金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷(2)、5-羟基-4′,7-二甲氧基异黄酮(3)、射干苷(4)、射干苷元(5)、野鸢尾苷(6)、二甲基射干苷元(7)、染料木素(8)、原儿茶酸(9)、异鼠李素-7-O-β-D-葡萄糖苷(10)、胡萝卜苷(11)、十四酸(12)。结论:化合物1、2、3均为首次从该属植物中分离得到,该研究为川射干叶质量评价奠定了一定基础。

基于FRET技术构建破伤风毒素和B型肉毒毒素酶类抑制剂高通量体外筛选方法

目的利用FRET技术构建破伤风毒素和B型肉毒毒素酶类抑制剂高通量体外筛选方法。方法构建针对破伤风毒素和B型肉毒毒素的双荧光标记底物的重组表达质粒,表达并纯化荧光标记底物重组蛋白;利用A型肉毒毒素轻链(ALc),B型肉毒毒素轻链(BLc)和破伤风毒素轻链(TLc)分别对目的蛋白进行酶切反应。对基于双荧光标记底物高通量体外筛选方法的条件进行优化。酶动力学参数分别测定TLc和BLc切割底物荧光标记底物的Km和Kcat值。结果设计并成功构建荧光标记底物的重组表达质粒。表达并纯化后获得纯度为90%左右的重组蛋白,命名为CYVAMP。利用ALc、BLc和TLc分别对CYVAMP进行酶切,CYVAMP能被BLc和TLc识别切割而不能被ALc切割。对基于双荧光标记底物高通量体外筛选方法的条件优化得到:CYVAMP较适宜的范围为0.2~32μmol/L,酶标仪滤光片灵敏度设定的较合适的设置范围在65~110;(对于96孔板)动态实时检测间隔时间2 min较为合适,检测持续时间从30 min到120 min较合适。CYVAMP在内肽酶BLc作用下随反应时间变化与荧光值528与485比值作图最大时在1.5左右,最小在0.5左右。酶动力学参数测定得到BLc酶切CYVAMP的Km和Kcat值分别为(17.6±2.6)μmol/L和(4.16±0.28)s-1。TLc酶切CYVAMP的Km和Kcat值分别为(40.8±3.5)μmol/L和(2.65±0.32)s-1。结论成功构建基于FRET技术的分析法能满足对破伤风毒素和B型肉毒毒素的检测及抑制剂的高通量体外筛选所需。

丹参标准提取物质量标准研究

目的:建立丹参标准提取物的质量标准。方法:采用定性、定量分析方法,依照《中华人民共和国药典》2005年版二部有关规定,对丹参标准提取物各项指标进行检测。结果:3批丹参标准提取物的水分<5%,炽灼残渣<1.0%,重金属<20ppm,砷盐<2ppm,高效液相色谱法测定丹参酮ⅡA含量>0.25%,丹酚酸B含量>6.0%。结论:各项指标均符合标准提取物的相关规定,所建标准可用于丹参标准提取物的质量控制。

A型肉毒毒素轻链的原核表达、纯化及活性鉴定

目的:在大肠杆菌中表达、纯化A型肉毒毒素轻链(Bo NT/A LC),研究其生物学活性。方法:根据Gen Bank中报道的Bo NT/A LC基因序列设计特异引物,从肉毒梭菌中扩增Bo NT/A LC基因片段,构建重组大肠杆菌p ET-32a Bo NT/A LC/BL21(DE3)Rosetta,IPTG诱导目的蛋白高效表达,表达产物经Ni螯合亲和层析纯化,SDS-PAGE鉴定目的蛋白,并利用相应底物对纯化产物进行生物活性分析和酶活动力学测定。结果与结论:构建了重组大肠杆菌p ET-32a Bo NT/A LC/BL21(DE3)Rosetta,原核表达获得高水平可溶性重组Bo NT/A LC,纯化得到纯度较高的蛋白质,重组Bo NT/A LC的酶活略高于A型肉毒毒素全毒素,可作为试剂用于Bo NT/A LC抑制剂高通量体外检测方法研究。

B型肉毒毒素轻链的高效制备及活性鉴定

目的:在大肠杆菌中高效表达B型肉毒毒素轻链(BoNT/BLC)并纯化,研究其生物学活性。方法:根据报道的BoNT/B LC基因序列设计引物,从肉毒梭菌中扩增BoNT/BLC基因片段,将其克隆至原核表达载体pET-22b中,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)Rosetta感受态细胞,构建重组大肠杆菌pET-22b BoNT/BLC/BL21(DE3)Rosetta,在20℃条件下用IPTG诱导目的蛋白表达,表达产物经His Trap FF柱纯化,用SDS-PAGE对目的蛋白进行鉴定,并利用相应底物对纯化产物进行生物活性分析。结果与结论:构建了重组大肠杆菌pET-22b BoNT/BLC/BL21(DE3)Rosetta,BoNT/BLC表达量达到了细菌总蛋白的30%左右,通过一步亲和纯化目的蛋白后经SDS-PAGE检测其纯度在95%以上,制备的重组LC的酶活略高于B型肉毒毒素全毒素,可作为试剂用于BoNT/BLC抑制剂高通量体外检测方法的研究。

基于FRET构建A型肉毒毒素活性检测的高通量方法

目的利用荧光共振能量转移(FRET)构建针对A型肉毒毒素酶活性检测的高通量体外方法。方法构建只识别A型肉毒毒素的基于双荧光标记底物的重组表达质粒,将其构建的质粒转入大肠杆菌表达系统进行表达,对表达后的荧光标记底物重组蛋白进行纯化和透析并保存备用;利用A型肉毒毒素轻链(ALc)对重组蛋白进行酶切检测活性;对本检测方法的条件进行优化;ALc切割荧光标记底物测定其酶动力学参数K_(m)与K_(cat)值。结果重组表达质粒构建成功,通过大肠杆菌表达系统表达后检测明显出现目的条带,对其纯化后获得的重组蛋白纯度在90%左右,命名重组蛋白为CYA。对CYA通过酶ALc、B型肉毒毒素轻链(BLc)进行酶切鉴定,结果显示CYA只能被ALc酶切产生与预期相符的两个蛋白片段,不能被BLc酶切。对基于FRET底物的条件优化得到:设定滤光片灵敏度在65~110之间;实时动态检测间隔为2 min/次,动态检测时间为30~120 min,底物CYA合适的浓度范围0.5~32μmol/L。CYA在ALc酶作用下随时时间的变化与荧光值528与485的比值作图最小在0.5左右,最大时约为0.9。酶动力学参数测定ALc切割CYA的值K_(cat)值为(5±0.4)s^(-1)和K_(m)为(2.33±0.21)μmol/L。结论成功构建了基于FRET技术的A型肉毒毒素活性检测的高通量体外分析方法。

Fe-C二元合金凝固过程强制对流作用下柱状晶生长行为的数值模拟

文章在前期建立的微观元胞自动机模型的基础上,耦合动量传输模型、质量传输模型和热量传输模型,建立了考虑流体流动的宏微观多尺度二维枝晶生长数学模型CA-FVM。并采用CA-FVM模型研究了强制对流作用下Fe-0.82C二元合金凝固过程枝晶生长规律。数值模拟表明:强制对流明显地改变了枝晶生长规律,靠近强制对流入口处枝晶生长受抑制作用较明显,枝晶生长较慢,远离强制对流入口处枝晶受抑制作用较弱,枝晶生长较快。同时,随着强制对流强度的增加,枝晶生长受熔体流动的影响更加明显,加剧了枝晶的非对称生长。

卵巢未成熟畸胎瘤的MR、CT诊断对比分析

目的探讨卵巢未成熟畸胎瘤的MRI及CT表现,分析MRI及CTT对其诊断的准确性、敏感性及特异性。方法回顾分析经过手术和病理证实的8例卵巢未成熟畸胎瘤的CT及MR表现。结果 8例均为单发,其中3例行MR及CT检查,3例只行MR检查,2例只行CT检查,肿块以实质性成分为主的囊实性肿块。结论笔者认为CT诊断未成熟畸胎瘤较MR有明显优势,诊断准确性、敏感性及特异性均较高。

川射干总黄酮片的处方设计及稳定性研究

目的:确定川射干总黄酮片的最佳处方,并研究其稳定性,为其质量标准的制定及包装、贮存提供科学依据。方法:选用PVPP和CMS-Na作为崩解剂,以体外崩解时间为指标,正交试验优化处方,并进行影响因素试验和加速试验,重点考察性状、水分、崩解时限和总黄酮含量的变化。结果:最佳处方为:川射干总黄酮提取物525g,交联聚维酮(PVPP)42g,羧甲基淀粉钠(CMS-Na)10.5g,硬脂酸镁2.625g,压片力为5 kg/cm2,且稳定性良好。结论:本实验所得的处方和工艺可以制备质量稳定的川射干总黄酮片。

卵巢甲状腺肿的MRI、CT诊断价值

目的了解并分析卵巢甲状腺肿的MRI及CT表现,探讨MRI及CT对其的诊断价值。方法回顾统计分析该院2010年1月—2016年7月经过手术病理证实9例卵巢甲状腺肿的CT及MR表现及特征。结果 9例病例均为单发囊实性良性肿块;囊性部分CT值均较高、超过膀胱内尿液密度,磁共振上T2WI序列极低信号;实性成分CT上密度较高且强化明显;5例伴发卵巢成熟性畸胎瘤。结论笔者认为卵巢甲状腺肿囊在CT及MR检查具有特有征象,MR及CT综合检查对诊断有较大帮助。

微电影创作中的摄影技法表现

随着经济的发展,人们的生活节奏也越来越快,微电影作为一种新的电影形式也以其投资小、制作时间短、传播性强等特点在当前的电影行业发展得越来越快,并随着互联网的快速发展开拓出了越来越广大的发展空间。对微电影来说,其拍摄技法是表现电影主题的主要手段,本文主要以微电影的概述与微电影的类型为研究基点,分析微电影创作过程中的拍摄技法,以期能够让更多人了解微电影。

紫外分光光度法测定川射干须根中总黄酮的含量

目的建立川射干须根中总黄酮含量测定的方法。方法采用紫外分光光度法测定川射干须根中的总黄酮含量,以射干苷为对照品,测定波长为266 nm。结果射干苷在0.824 4-9.068 4μg/m L时与吸光度呈良好的线性关系（r=0.999 8）;平均回收率为100.45%,相对标准偏差为1.15%;川射干须根中总黄酮的平均含量为1.03%。结论紫外分光光度法操作简便、灵敏、准确,具有良好的重复性和较高的回收率,可作为川射干须根的总黄酮含量测定方法。

我国职业经理人激励机制探究

目前,我国现存职业经理人激励机制存在着薪酬分配与管理不合理、实行股权激励制度受限等问题。构建我国职业经理人激励机制,应完善股权激励制度和经理人市场的竞争机制及评价体系,优化培育职业经理人的外部环境,转变职业经理人薪酬支付方式,增强职业经理人的道德需要,从而保证经理人行为长期化、规范化,并加速与国际接轨。

关系营销在房地产行业中的应用

本文在关系营销一般理论的基础上,阐述了房地产企业与顾客、竞争者和销售者的关系,并提出了关系营销在房地产行业的应用策略。

电子政务与政府管理创新

电子政务是我国深化改革、扩大开放的必然要求,是当今我国政府管理创新的必要途径。本文通过分析我国电子政务中存在的问题,提出了一系列发展我国电子政务的策略。

基于4P理论的网络营销策略研究

本文研究和分析了网络营销下传统4P理论,并制定基于4P理论的网络营销策略,即将4P与4C相整合,在网络环境下实施产品策略,定价策略,渠道策略和促销策略,使其更好地服务于网络营销。

立德树人-技能培养融合的现代机械工程师专业实习路径探索

为提高机械专业实习的效果,该文在分析国内外实习教学模式、特点的基础上,针对当前实习方法的成功之处和局限性,结合同济大学机械专业的要求和特点,探索立德树人-技能培养融合的机械专业实习路径,并对所完成的机械专业实习过程予以说明。从整体看,融合思政过程的专业实践模式取得较为理想的效果,提高机械专业学生实践技能水平,培养学生奉献机械行业,热爱本专业的热情。

基于微分方程曲面求交跟踪法的包容式节点相贯区域建模研究

包容式节点是一种新型管状相贯式节点,其形态是一种典型的薄壁自由曲面结构。在进行曲面造型过程中会涉及曲面求交的问题,而曲面求交是计算机辅助几何设计(CAGD)领域中的关键技术之一。本文构建了包容式节点非均匀有理B样条(NURBS)曲面模型,将求包容式节点中的相贯线问题转化为NURBS曲面的求交问题。基于微分方程的跟踪算法原理,在分割法求得初始交点的基础上,采用微分方程追踪法求出所有交点,最后将所求得交点进行曲线拟合,交线包围区域即为包容式节点与腹杆相贯焊接区域。