犬瘟热病毒RT-LAMP检测方法的建立及初步应用

环介导等温基因扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种特异、灵敏、快速的检测方法。为提高犬瘟热病毒(CDV)检测效率、降低检测成本,针对犬瘟热病毒N基因保守区的8个位点设计了6条引物进行RT-LAMP一步法扩增。对反应体系及条件优化,检测特异性、敏感性,扩增产物通过凝胶电泳、显色反应和浑浊度比较进行判定。试验结果表明,该方法特异性强、敏感度高,操作简便、快速、便于观察,适用于门诊和现场检测。

犬瘟热病毒研究概况

犬瘟热(CD)是由犬瘟热病毒(CDV)引起的一种急性、高度接触性传染病,流行范围广,发病率、致死率高,临床症状多样。CDV感染宿主广泛,所有日龄的犬都有可能感染。CDV属于副黏病毒科麻疹病毒属,有囊膜包裹的单股负链线性RNA病毒。CDV基因组编码6种蛋白:核衣壳(N)蛋白、磷(P)蛋白、基质膜(M)蛋白、融合(F)蛋白、血凝素(H)蛋白和大(L)蛋白。N、P和L蛋白与病毒复制有关;M蛋白与病毒的装配和出芽有关;F、H蛋白在病毒的侵染过程中起到关键作用。近年来,随着我国宠物业、毛皮经济养殖业的迅速发展,CD在我国的发病率有升高的趋势。论文对CDV分子生物学研究进展进行归纳总结。

牛副流感病毒3型RT-LAMP检测方法的建立及应用

本试验根据GenBank中登录的牛副流感病毒3型(BPIV-3)基因序列,利用在线软件Primer Explorer V4Software和Primer Premier 5.0,针对BPIV-3 NP基因序列的保守区设计并筛选了一套环介导逆转录等温核酸扩增(RT-LAMP)引物,建立BPIV-3特异性检测的RT-LAMP方法。在Bst DNA聚合酶作用下,63℃恒温反应1h即可完成扩增过程,扩增产物通过浑浊度比较、凝胶电泳和肉眼可视化进行判定。结果表明,该方法比RT-PCR敏感度更高,最低检出量可达0.069fg/μL。该方法可用于牛副流感病毒3型的实验室检测和临床初步诊断。

Ⅰ型牛疱疹病毒潜伏感染机制研究进展

Ⅰ型牛疱疹病毒（BoHV-1）主要引起牛传染性鼻气管炎（infectious bovine rhinotracheitis,IBR）、母牛传染性脓疱性外阴阴道炎（infectious pustular vulvovaginitis,IPV）、公牛传染性脓疱性龟头包皮炎（infectious pustular balanoposthitis,IPB）。病毒形成潜伏感染是病毒的生存策略,尽管机体对病毒感染能形成显著的免疫反应,

高致病性PRRSVNsp2基因RNA干扰对病毒复制的影响

旨在构建针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)TJ株Nsp2基因的siRNA的表达载体,研究Nsp2基因的表达抑制对PRRSV复制的影响。设计并合成针对PRRSV TJ株Nsp2基因的3对优势小发卡RNA(shRNA),连接到pRNAT-U6.1/Neo,构建shRNA表达载体,将鉴定正确的载体质粒转染Marc-145细胞,6 h后接毒,每日观察CPE;在接毒PRRSV TJ株后不同时间点取上清样品,测定样品TCID50;并以β-actin为内参,RT-PCR对PRRSV Nsp2 mRNA进行半定量。结果表明,选取的3条Nsp2基因的优势siRNA均能够抑制PRRSV TJ株在Marc-145细胞上增殖,其中shRNA载体S-1和S-2抑制效果明显,与空载体相比较差异极显著。本研究构建的PRRSV Nsp2基因特异性shRNA载体能够有效抑制PRRSV的复制,可使病毒滴度TCID50最多降低103.38。

牛传染性鼻气管炎病毒VP22基因的克隆及序列分析

为了研究牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)即Ⅰ型牛疱疹病毒(BoHV-1)VP22基因及其功能,试验采用设计的特异性引物通过PCR法对VP22基因进行扩增,并成功构建了VP22克隆载体,经序列测定后,用DNAStar软件对该序列和已发表的IBRV参考株、5型牛疱疹病毒(BoHV-5)、Ⅰ型人单纯疱疹病毒(HSV-1)、马立克病毒Ⅰ型(MDV-1)和伪狂犬病毒(PRV)的VP22基因序列及氨基酸序列进行比对分析。结果表明:分离自我国的BoHV-1与NCBI上发表的参考株的基因同源性为99.6%,氨基酸同源性为100%;4种疱疹病毒VP22的N端氨基酸相似性不高;BoHV-1和BoHV-5VP22基因和氨基酸序列同源性分别为81.9%和76.4%;BoHV-1 VP22基因的密码子偏嗜性较均一。

顺德区珠宝市场分析

运用问卷调查法、实地观察法、访谈法等深入调研顺德区珠宝市场的品牌竞争、商圈分布、定价策略、本地居民的消费习惯和消费倾向等,分析区内珠宝市场的未来发展趋势并对珠宝企业提出相应的对策建议。

软件项目管理之高效团队合作

互联网的不断发展给予了软件产业莫大的机遇。当今,如何在规定的时间、预定的成本内开发出高质量、高性能的软件成为我们研究的重中之重。而软件项目管理成为了一个团队能否开发成功软件项目的重要部分。人作为软件项目管理的关键部分,由此,如何组成一个高效的团队也成为了我们的研究部分。

基于JavaEE的智慧校园校车查询网站

本文描述了一款基于JAVA EE的校车查询软件,本软件采用Struts2框架以及Spring技术进行开发,详细的介绍Web开发的一些技术,并且结合软件开发的流程,包括软件项目管理、软件测试等进行描述。本文也将详细介绍此网站的功能以及设计流程并展开相应的论述。

建筑教育切忌遮华损实

当今建筑教育界存在着一个普遍的弊端:无论教师还是学生都执意于建筑形式的表现,学生只能看到建筑的表象而忽略了内在的本质——在形式的底下,建筑师对材料的创新运用和新技术的应用。本文尝试运用引古论今的方式,回看20世纪建筑风格诞生时期出现的一些"天子大酒店"和"CCTV大楼",并从它们的消亡与流传和后来人们对其的评价中探讨当今建筑中的真实之美以及作为一名建筑设计教师应该抱着如何的信念指导学生。

为商业空间设计课程点一盏明“灯”

商业归根到底就是交换,在商业空间中的照明设计从一开始就注定要具备招徕顾客,刺激消费的作用。通过对商业空间照明的基本概念、设计原理和设计的程序与方法的解读,及对彩色照明、动态照明与独特灯具这些特殊照明效果的探讨,让学生掌握商业空间当中照明设计的技巧是本文的重点。

规培护士职业韧性在临床归属感与职业认同感的中介效应分析

目的 探讨规范化培训护士职业韧性在临床归属感与职业认同感间的中介效应。方法 采用临床归属感量表、职业韧性量表和护士职业认同感量表对武汉市四所三级甲等医院的临床护士进行问卷调查。结果 312名规培护士临床归属感得分(106.53±38.37)分,职业韧性得分(66.14±23.57)分,职业认同感得分(105.73±29.90)分;规培护士的临床归属感与职业韧性、职业认同感均呈正相关(r=0.543,P<0.01;r=0.552,P<0.01),职业认同感与职业韧性呈正相关(r=0.665,P<0.01);职业韧性在临床归属感与职业认同感之间起部分中介作用,中介效应对总效应的贡献率为50.92%。结论 规培护士临床归属感对职业认同感有直接预测作用,职业韧性在临床归属感与职业认同感之间起部分中介作用,可通过提高职业韧性与临床归属感来增加规培护士的职业认同感。

全髋关节置换术后病人运动恐惧现状及影响因素分析

目的调查全髋关节置换术(THA)后病人运动恐惧现状及其影响因素,为临床干预提供依据。方法选取2023年3月至2023年6月武汉市3所三级甲等医院THA术后1~2d的病人,使用一般资料调查表、Tampa运动恐惧症量表(TSK)、运动自我效能感量表(SEE)、Groningen骨科社会支持量表(GO-SSS),广泛性焦虑障碍量表(GAD)-2、2条目病人健康问卷(PHQ-2)、疼痛视觉模拟量表(VAS)进行调查。结果共发放问卷261份,有效回收249份,有效回收率为95.40%。249例THA术后病人TSK得分为(39.14±7.65)分,恐动症发生率为43.78%(109/249例)。多元线性回归分析结果显示,年龄、文化程度、合并慢性疾病、运动自我效能、焦虑抑郁情绪及疼痛程度是THA术后病人发生恐动症的主要影响因素(P<0.05)。结论THA术后病人恐动症发生率较高,医护人员需加强对恐动症病人的早期评估及管理,鼓励多学科团队的合作,整合认知运动训练、行为疗法和心理干预等多种方法,提高病人康复锻炼积极性和自主性。

北方三省(区)牛副流感病毒3型的血清学调查

为了解我国北方三省(区)牛副流感病毒3型(BPIV3)的感染状况,从内蒙古、吉林、山西3个省采集牛血清样品482份。采用病毒中和试验方法进行BPIV3抗体检测。结果显示,482份血清中BPIV3阳性共439份,阳性率为91.08%。吉林、内蒙、山西3省区中血清BPIV3阳性率分别97.35%、84.31%、95.15%。研究表明,中国北方三省(区)牛群中普遍存在BPIV3的感染。

基于质谱流式技术的蛋白组学在肝癌肿瘤异质性的研究

目的:利用质谱流式技术建立研究肝细胞癌(HCC)肿瘤异质性的方法。方法:收集肝癌患者样本并制备成单细胞悬液。通过质谱流式技术用15种肿瘤干细胞标志物和28种免疫细胞相关的标志物对肝癌组织及其癌旁组织进行蛋白组学检测。结果:质谱流式分析有效地分出肝癌干细胞样亚群,并将免疫细胞分为25个细胞亚群。肝癌组织与其癌旁组织在肿瘤干细胞表达及免疫微环境组成方面存在差异。结论:质谱流式技术可实现对肿瘤干细胞样细胞和免疫细胞的精细分群,是检测肿瘤异质性的有效方法。

专案改善对肩关节镜手术患者术后尿管留置时间的影响研究

目的探讨专案改善在缩短全身麻醉下行肩关节镜手术患者术后尿管留置时间中的实践效果。方法成立专案改善小组,确定改善主题,以开展专案改善活动前在本科住院且全麻下行肩关节镜手术并留置导尿管的80例患者为对照组,以实施专案改善后行肩关节镜手术并留置导尿管的80例患者为试验组,通过人、物、法、环四个方面对患者术后尿管留置时间进行原因分析,确定主要原因后制订并实施对策,最后进行效果评价,对比专案改善实施前后患者尿管的留置时间、拔管后尿管重置率、患者术后回病室至首次下床活动时间等的差异。结果试验组术后尿管的留置时间短于对照组(P<0.001);试验组拔管后尿管的重置率与对照组相比,差异无统计学意义(P=0.443);试验组患者术后首次下床活动时间明显早于对照组(P<0.001);试验组术后首次排尿时间也晚于对照组(P<0.001)。结论专案改善能有效缩短全麻下行肩关节镜手术患者术后尿管的留置时间,促使患者术后尽早下床活动,有利于患者术后康复。

基于生成对抗网络的数字音频信号多声道增强方法

基于生成对抗网络的数字音频信号多声道增强方法,提升数字音频清晰度、降低噪声对其的干扰。以结合傅里叶的双边语谱图滤波算法初步实现数字音频多声道信号去噪;构建基于对抗神经网络的数字音频信号多声道增强模型,将去噪后的数字音频多声道信号作为该模型的输入数据,输出增强的多声道数字音频信号,完成数字音频信号多声道增强。实验结果表明:该方法增强后的数字音频信号传输效果较好,同时信噪比和音频客观评判基准较高,且去噪后语谱图中噪点以及模糊区较少,能够有效去除信号中的噪声,提升数字音频信号质量。

生物钟与骨质疏松症相关性研究进展

近年来,生物钟与骨质疏松症间的关系引起各领域研究人员的广泛兴趣。生物钟可以调节机体的节律,并维持其正常的生理功能。许多研究证实骨代谢过程同样由生物钟基因调控,一旦节律被破坏,就会导致骨量丢失,出现骨质疏松症的症状和体征。生物钟与骨质疏松症之间的密切联系也为骨质疏松症的临床防治提供了新思路。本文通过回顾过往文章,总结了生物钟影响骨代谢的途径以及骨质疏松症治疗的新路径,以期为临床上预防和治疗骨质疏松症提供参考。

基于单细胞质谱流式技术分析膀胱肿瘤微环境中免疫细胞的组成

目的探讨单细胞质谱流式技术(single-cell mass cytometry,CyTOF)分析膀胱癌组织与癌旁组织浸润性免疫细胞亚群特征的效果,为膀胱癌异质性研究提供新的策略。方法收集4例膀胱癌患者新鲜癌组织及其癌旁组织,通过酶解法联合机械法解离制备成单细胞悬液。采用CyTOF检测肿瘤浸润性免疫细胞中26种免疫相关标志物的表达情况。结果通过细胞相似性分析,将膀胱CD45^+免疫细胞分成25个亚群(CD4^+T细胞簇7个、CD8^+T细胞簇8个、巨噬细胞簇4个、B细胞簇2个、树突状细胞簇1个和其他类型的免疫细胞簇3个)。膀胱癌组织与癌旁组织浸润性免疫细胞亚群相对含量存在差异,膀胱癌组织中T细胞相对富集,占比为76.73%;癌旁组织中B细胞和巨噬细胞相对富集,占比分别为15.20%和23.82%。膀胱癌组织中CD4^+Treg细胞的平均占比高于癌旁组织(2.20%vs 0.81%,P=0.016)。结论CyTOF可有效区分膀胱肿瘤微环境中的免疫细胞亚群,实现对肿瘤异质性的检测,可为膀胱癌的精准治疗提供依据。