陕北白绒山羊FGF5基因多态性分析

陕北白绒山羊是以辽宁白绒山羊为父本,本地黑山羊为母本,历经25年培育而成的绒肉兼用山羊新品种。具有产绒量高、羊绒纤维细长、绒色纯白和光泽好等优点。绒毛纤维的细度是分析绒毛品质和使用价值的重要指标,可决定山羊绒的纺织性能和经济价值。

羊绒、羊毛品质相关基因研究进展

羊绒、羊毛品质不仅影响绒山羊、绵羊养殖的经济效益,还影响绒毛纺织品的质量。目前已有大量的研究筛选和鉴定控制绒毛品质性状的主效基因及其表达机制。该文综述了近年来关于KRTs、KRTAPn、HOX、FGF5和ncRNA等遗传因素对绒毛品质的调控作用,为产绒及产毛羊品种的不断优化提供参考,加快遗传选育的进展。

家庭适度规模下湖羊与陕北白绒山羊经济效益调查与分析

本试验选择陕北白绒山羊和湖羊品种作为研究对象,在不限制采食和饮水前提下,采用相同饲养管理条件进行育肥并计算羔羊成本、饲草料成本等效益指标,对陕北白绒山羊和湖羊的经济效益进行比较分析,结果表明育肥陕北白绒山羊的只均利润大约比育肥湖羊的利润高127.26元/只。

EB病毒IgM、IgG及DNA检测在儿童呼吸道感染性疾病中的诊断价值分析

目的分析EB病毒(EBV)IgM、IgG及EBV-DNA在儿童呼吸道感染性疾病中的诊断价值。方法选取400例呼吸道感染患儿作为观察组,100例非呼吸道感染住院患儿作为对照组,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测患儿的EBV-IgM和IgG,荧光定量PCR(FQ-PCR)检测病毒DNA。比较观察组和对照组患儿的EBV-IgM、IgG及EBV-DNA阳性率,评价不同指标的诊断价值。结果观察组患儿EBV-IgM阳性率51.00%,EBV-IgG阳性率58.50%,EBV-DNA阳性率56.25%;对照组患儿EBV-IgM阳性率4.00%,EBV-IgG阳性率11.00%,EBV-DNA阳性率5.00%,差异具有统计学意义(P<0.05)。EBV-IgM灵敏度51.00%,特异度96.00%,曲线下面积0.617;EBV-IgG灵敏度58.50%,特异度89.00%,曲线下面积0.583;EBV-DNA灵敏度56.25%,特异度95.00%,曲线下面积0.642。结论 EBV-IgM、IgG及EBV-DNA在儿童呼吸道感染中具有诊断价值。

夏枯草提取物对MDR-MTB感染小鼠细胞免疫功能的影响

目的探讨夏枯草提取物对耐多药结核分枝杆菌(multiple drugs resistant Mycobacterium tuberculosis,MDR-MTB)感染小鼠免疫功能的调节作用。方法将30只健康雄性小鼠随机分为3组,每组10只。2组用MDR-MTB菌液尾静脉注射,建立小鼠MDR-MTB感染病理模型,分别为模型组和夏枯草灌胃模型组,另1组为正常对照组。用ELISA法检测小鼠血清中IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12含量的变化;用RT-PCR法检测单个核细胞中IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-12及颗粒裂解肽(granulysin,GLS)的mRNA变化。结果夏枯草灌胃模型组与模型组比较,小鼠血清中IFN-γ[(1.98±0.67)pg/mL vs(1.18±0.38)pg/mL,P<0.05]、IL-12[(3.02±0.86)pg/mL vs(2.19±0.57)pg/mL,P<0.05]含量明显升高;IL-10[(12.13±3.43)pg/mL vs(16.10±2.21)pg/mL,P<0.05]含量明显下降。与正常对照组比较,IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12的含量变化差异无统计学意义(P>0.05)。在mRNA表达水平,夏枯草灌胃模型组IFN-γ、IL-12和GLS表达明显升高,IL-10 mRNA表达明显下降(P<0.05),IL-4变化不明显。结论夏枯草提取物可通过上调基因转录水平增强小鼠的细胞免疫功能,为临床应用夏枯草治疗耐多药结核病提供了理论依据。

金黄色葡萄球菌L型的药敏试验分析

本文从血液和骨髓标本中分离出的金黄色葡萄球菌Ｌ型，分别用Ｌ型平板和ＭＨ平板做药敏试验，结果显示庆大霉素（ＧＥＮ）、氯霉素（ＣＭＰ）、红霉素（ＥＲＹ）、氧哌青霉素（ＰＩＰ）、卡那霉素（ＫＡＮ）、万古霉素（ＶＡＮ）在ＭＨ平板上比在Ｌ型平板上的药物敏感率高，耐药中低（Ｐ＜０．０５）；而氨苄青霉素（ＡＭＰ）、羧苄青霉素（ＣＡＲ）、先锋霉素（ＣＥＦ）、丁胺卡那霉素（ＡＫＮ）、氟哌酸（ＦＰＡ）、先锋必（ＥＦＯＢＩＤ））、螺旋霉素（ＳＰＩ）药物敏感中比Ｌ型平板上低，耐药率高（Ｐ＜０．０５）。苯唑青霉素（ＯＸＡ）、菌必治（ＲＯＣ）、利福平（ＲＩＦＰ）、麦迪霉素（ＭＩＤ）则在两种培养基上的敏感和耐药率基本相同（Ｐ＞０．０５）。

PCR-SSCP技术在检测煤工尘肺并发肺结核患者感染的结核分枝杆菌耐药基因突变中的应用

目的探索尘肺结核患者感染的结核分枝杆菌(M.tuberculosis)耐药基因突变与耐药性的关系,及聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)的临床应用价值。方法在102例淮南矿区煤工尘肺并发结核患者中分离出M.tuberculosis菌株32株,采用PCR-SSCP法检测katG、rpoB和rpsL基因突变,与采用常规药敏试验(AST)法检测的耐药结果进行对比分析。结果采用PCR-SSCP法检测katG、rpoB和rpsL基因,突变率分别为43.75%(14/32),53.13%(17/32)和31.25%(10/32);采用AST法检测INH、RFP和SM,耐药率分别为53.13%(17/32),65.63%(21/32)和40.63%(13/32),其中多耐药株19例(59.38%),包括耐3种药物的11例(42.31%),耐2种药的8例(30.77%),单耐药株7例(26.92%),敏感株6例,耐药率81.25%。PCR-SSCP法检出3个基因联合突变的有7株(7/26,26.92%),与AST法的符合率为63.64%(7/11);2个基因突变的6株(6/26,23.08%),符合率为50.00%(4/8);单基因突变的8株(8/26,30.77%),符合率为57.14%(4/7)。结论PCR-SSCP技术适用于淮南矿区煤工尘肺并发结核患者感染的M.tuberculosis katG、rpoB和rpsL耐药基因突变的筛选,将其与AST法联合应用,在指导临床用药方面具有着重要的意义。

延黄牛ARID5B基因多态性及其与体尺和肉质性状的相关性研究

试验旨在研究延黄牛富含AT相互作用功能域5B(AT-rich interactive domain 5B,ARID5B)基因多态性及其与体尺和肉质性状的相关性。选取18月龄的99头延黄牛母牛为研究对象,利用PCR测序查找ARID5B基因13个外显子的SNP位点,通过HRM分型的方法分析SNP位点的多态性,使用SPSS 19.0软件分析该基因多态性与延黄牛体尺和肉质性状的关联性。结果表明,延黄牛ARID5B基因外显子10 Chr28:18186635 bp处存在A/G突变,有3种基因型:AA、AG和GG,其中AA基因型为优势等位基因型,A为优势等位基因;经卡方适合性检验,该SNP位点在延黄牛群体中处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),但A/G突变位点的杂合度相对较低,在延黄牛群体中的变异较小,属于中度多态(0.25<PIC<0.5)。关联分析结果表明,ARID5B基因外显子10 GG基因型与延黄牛体尺性状中的体高、胸围和腹围以及肉质性状中的肌内脂肪含量存在显著差异(P<0.05)。本试验揭示了ARID5B基因与牛肉用性状的相关性,为探讨其作为有效遗传标记的可行性提供了参考,为延黄牛分子育种提供试验依据。

延黄牛ALDH1A1基因多态性及其与体尺和肉质性状的相关性研究

为揭示乙醛脱氢酶1A1(ALDH1A1)基因多态性对延黄牛体尺和肉质性状的影响,实验以ALDH1A1基因作为体尺和肉质性状的候选基因,以16月龄的99头延黄牛母牛为研究对象,采用PCR扩增产物Sanger直接测序的方法对延黄牛ALDH1A1基因13个外显子的单核苷酸多态性(SNP)进行研究,利用SSPS19.0软件分析ALDH1A1基因SNP位点与体尺和肉质性状的关联性。结果表明:在延黄牛ALDH1A1基因第4外显子处检测到T/G突变,且引起编码氨基酸的改变;经卡方适合性检验,该SNP位点在延黄牛群体中处于Hardy-Weinberg平衡状态,但T/G突变位点的杂合度(He)相对较低,在延黄牛群体中的变异较小,属于低度多态(PIC<0.25),仅能提供少量遗传信息;关联分析结果表明,ALDH1A1基因第4外显子不同基因型与延黄牛体尺性状中的十字部高、胸围、腹围和管围存在显著相关(P<0.05),与肉质性状中的背膘厚存在显著相关(P<0.05),与肌内脂肪具有一定的相关性(P>0.05)。综上所述,ALDH1A1基因外显子在延黄牛中存在多态性,且与延黄牛体尺和部分肉质性状存在显著性差异,能否作为延黄牛肉质和体尺性状的遗传标记有待于扩大样本数量进一步验证。

延黄牛ELOVL6基因cDNA序列克隆及其在各组织间的表达差异

为研究超长链脂肪酸延伸酶6(ELOVL6)基因功能,本实验以延黄牛肝组织总RNA为模板,根据GenBank公布的基因序列设计引物,应用RT-PCR技术扩增ELOVL6基因,将扩增产物构建到PMD18-T载体进行测序,获得延黄牛ELOVL6完整CDS序列,应用生物信息学软件分析序列及其蛋白结构。以延黄牛心、肝、肺、肾、胃、十二指肠、皮下脂肪和背最长肌总RNA为模板,通过实时定量荧光PCR技术,检测ELOVL6基因在延黄牛各个组织间的表达差异。结果表明:延黄牛ELOVL6基因共编码264个氨基酸,预测其分子量为31.282 ku,理论等电点为9.46,为疏水性蛋白,无典型的信息肽切割位点,含有18个氨基酸磷酸化位点(分值>0.5),在延黄牛皮下脂肪组织中的表达量显著高于其他组织(P<0.05)。本研究首次成功克隆获得延黄牛ELOVL6基因CDS完整序列,对其结构、蛋白理化特性以及该基因在延黄牛各组织间的表达差异进行详细分析研究,为开展延黄牛ELOVL6基因的功能及肉质基因筛选的工作提供理论基础和科学依据。

ELOVL6基因研究现状

ELOVL6基因是超长链脂肪酸延伸酶（ELOVLs）家族成员之一,可以催化饱和和单不饱和脂肪酸的延伸,主要参与脂肪酸延伸和脂酰CoA的生物合成。目前对ELOVL6基因的研究主要集中在脂肪酸代谢、氧化应激、炎症反应等多种代谢性疾病方面,其在抑制某些肿瘤细胞中也发挥着重要的作用。ELOVL6作为牛的重要的脂肪酸代谢调控基因,国内外的研究相对较少,文章对国内外关于该基因的结构、表达情况和生理功能以及牛ELOVL6基因的研究进展进行了较为详细的综述。

ALDH1A1基因研究进展

乙醛脱氢酶（ALDH）超家族参与许多人体代谢反应,而作为超家族中的一员乙醛脱氢酶1A1（ALDH1A1）更是在许多代谢反应中发挥着重要的作用。文章就目前已知的ALDH1A1基因的结构、表达情况和生理功能等研究现状作了较为详细的阐述。深层次的研究ALDH1A1基因的功能及其分子机制,将进一步拓展对其在其他领域的认知,如在视黄醛代谢和脂代谢中的影响,为治疗人类肥胖、神经性疾病、代谢性疾病,了解肿瘤的发生和治疗提供有价值的信息,尤其是在动物肉用性能和经济性状的选育方面,可从现代分子生物学角度提供技术支持。

延黄牛ALDH1A1基因内含子4多态性及其与肉用性状的相关性分析

试验旨在研究乙醛脱氢酶1A1(acetaldehyde dehydrogenase 1A1,ALDH1A1)基因内含子4多态性及其对延黄牛肉用性状的影响。选取99头18月龄延黄牛母牛,采用PCR扩增产物Sanger直接测序法测定99头延黄牛ALDH1A1基因内含子4的单核苷酸多态性(SNP),运用SPSS 19.0软件分析ALDH1A1基因内含子4SNP与延黄牛肉用性状(体高、体斜长、十字部高、胸围、腹围、管围、体重、背膘厚、眼肌面积和肌内脂肪)的关联性。结果显示,延黄牛ALDH1A1基因内含子4存在C/T突变位点,该位点的突变引起了编码氨基酸(谷氨酰胺,Q)的改变;共发现3种基因型:TT、TC和CC,2种等位基因:T和C,其中TC为优势等位基因型,C为优势等位基因。卡方适合性检验结果发现,该SNP在延黄牛群体中处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。群体遗传参数分析发现,该突变位点的杂合度(He)相对较低,表明其在延黄牛群体中的变异较小,该位点属于中度多态(0.25<PIC<0.5),说明该遗传标记能够提供遗传信息。关联分析结果表明,延黄牛体尺和肉质性状指标在不同基因型间差异均不显著(P>0.05)。结果表明,ALDH1A1基因内含子4在延黄牛中存在突变,能否作为延黄牛肉用性状的遗传标记有待于扩大样本数量进一步研究。

延黄牛ALDH1A1基因CDS序列克隆及其在各组织中的表达差异研究

为探索乙醛脱氢酶1A1(acetaldehyde dehydrogenase 1A1,ALDH1A1)基因功能,本试验以16月龄延黄牛母牛为研究对象,屠宰后采集心脏、肝脏、肺脏、肾脏、胃、十二指肠、皮下脂肪和背最长肌,提取总RNA。根据GenBank上公布的牛ALDH1A1基因mRNA序列(登录号:NM_174239.2),利用Oligo 7.0软件设计引物,应用RTPCR扩增ALDH1A1基因,将扩增产物连接pMD18-T载体进行克隆测序,获得延黄牛ALDH1A1基因完整CDS序列,应用生物信息学软件分析核苷酸序列及其蛋白结构。以延黄牛不同组织总RNA为模板,通过实时荧光定量PCR技术检测ALDH1A1基因在延黄牛各组织间的表达差异。结果显示,ALDH1A1基因CDS序列全长1 506bp,编码501个氨基酸;延黄牛ALDH1A1基因序列与野牛、牛的同源性最高(≥99.7%),与猫和豹的同源性分别为89.4%和89.6%,符合物种进化规律。ALDH1A1蛋白分子质量为54.805ku,理论等电点为7.16,亲水性较强,占86.4%,酸性氨基酸和碱性氨基酸分别占11.4%和12.2%,属于可溶性蛋白,但不是分泌性蛋白,无典型信号肽切割位点;存在31个氨基酸磷酸化位点(分值>0.5)。延黄牛ALDH1A1蛋白二级结构含有α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲,分别占42.12%、16.17%、8.18%和33.53%,与该蛋白三级结构预测结果相同。实时荧光定量PCR结果表明,ALDH1A1基因在延黄牛肝脏、胃、皮下脂肪、十二指肠和肾脏组织中极显著表达(P<0.01);在背最长肌中显著表达(P<0.05)。本试验结果为进一步开展延黄牛ALDH1A1基因功能及肉质基因筛选研究提供了参考依据。

慢性乙肝患者干扰素治疗后干扰素抗体的表达及其意义

目的探讨慢性乙肝患者干扰素治疗后干扰素抗体的表达水平及其对干扰素治疗的影响。方法选择126例慢性乙肝患者以α2b-IFN治疗,剂量为5MU/次,间日1次,疗程为1年,动态检测乙肝血清标志物、HBV-DNA及抗α2b-IFN-IgG表达水平。结果α2b-IFN治疗后抗α2b-IFN-IgG阳检率为4.76%(6/126),与常规治疗组相比差异无显著性(P>0.05)。治疗前、治疗6个月和1年后,抗α2b-IFN-IgG阳检率分别为0%(0/126)、2.38%(3/126)和4.76%(6/126),无显著性差异(P>0.05)。α2b-IFN治疗后HBeAg、HBV-DNA阴转率分别为38.89%(49/126)和48.41%(61/126),常规治疗组治疗后HBeAg、HBV-DNA阴转率分别为12.50%(5/40)和15.00%(6/40),两者相比差异有显著性(P<0.05)。结论IFN抗原性较弱,仅能诱导机体产生低水平抗α2b-IFN-IgG,其对α2b-IFN的抑制作用较弱。α2b-IFN对HBeAg、HBV-DNA阴转具有较好疗效,优于常规治疗。

牛至油对绵羊生长性能和甲烷产量的影响

试验通过饲养试验旨在研究牛至油对绵羊生产性能和CH4排放的影响。试验选用20只平均体重为(32.16±4.02) kg的东北细毛羊(Northeast finewool sheep)×美利奴(Merino)杂交的公绵羊,随机分为4组,选用单因素完全随机试验设计,每组5只,对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂基础饲粮中添加0.015%、0.030%和0.045%牛至油的试验饲粮。试验持续70 d,其中预试期10 d,正试期60 d,测定绵羊的生长性能、血清生化指标和CH4产量。结果表明:①添加0.015%牛至油组绵羊的干物质采食量(dry matter intake, DMI)、平均日增重(average daily gain, ADG)和饲料转化效率(feed conversion efficiency, FCE)均显著高于对照组(P<0.05),其余各处理组间差异不显著(P>0.05);②各处理组绵羊的血清生化指标和甲烷(methane,CH4)产量均未出现显著差异(P>0.05)。由此可知,绵羊饲粮中添加0.015%牛至油可提高绵羊生长性能,但对血清生化指标和CH4产量无显著影响。

草原红牛Acot2基因克隆及其在各组织中的表达差异研究

本研究旨在探究草原红牛酰基辅酶A硫酯酶2(Acot2)的基因功能,并对其进行生物信息学分析,检测Acot 2基因在草原红牛不同组织中的表达差异。根据GenBank中公布的牛Acot 2基因序列(登录号:NM_001101938.1)设计引物,PCR扩增获得草原红牛Acot 2基因的完整CDS并进行测序,利用分析软件进行序列同源性比对并构建系统进化树;获得对应的氨基酸序列并分析蛋白理化特性及蛋白亚细胞结构、亲疏水性和磷酸化位点,预测蛋白二级结构并构建蛋白质三级结构模型;利用实时荧光定量PCR方法检测Acot 2基因在不同组织中的表达差异。结果显示,草原红牛Acot 2基因CDS大小为1395 bp,编码464个氨基酸,其核苷酸序列与亚洲水牛的同源性较高(98.3%),与猕猴和黑猩猩的同源性较低(80.5%和80.4%)。Acot2蛋白分子式为C2317H3606N640O628S14,分子质量为50.924 ku,理论等电点为8.84。蛋白质不稳定指数为37.50,氨基酸残基多数为亲水性残基,总平均亲水性为-0.094。亚细胞定位分析表明,Acot2蛋白分布在内质网(30.4%)、线粒体(26.1%)、高尔基体(17.4%)、细胞质(17.4%)、液泡(4.3%)和细胞质(4.3%)中;磷酸化位点分析发现,Acot2蛋白存在20个磷酸化位点。二级结构主要形式有α-螺旋(21.8%)、β-转角(33.4%)、β-折叠(18.4%)和无规则卷曲(26.4%),三级结构预测结果与其相一致。实时荧光定量结果显示,Acot 2基因在草原红牛胃中表达量最高,在肺脏中表达量极少。Acot 2基因在生物进化过程中具有低保守性,其编码氨基酸组成的蛋白质结构稳定,属于水溶性蛋白,在线粒体和内质网中发挥作用,在草原红牛不同组织的表达量有明显差异。本研究结果为进一步探究Acot 2基因对家畜脂代谢的影响和筛选草原红牛肉质候选基因提供资料。

草原红牛Bcl2L13的CDS克隆及其在不同组织的表达规律研究

本研究旨在初步探究草原红牛Bcl2L13的基因功能,并对其进行生物信息学分析,检测Bcl2L13在草原红牛不同组织中的表达差异。本实验以草原红牛为研究对象,根据GenBank公布的牛Bcl2L13基因序列(GenBank登录号:NM001078082.2)设计引物,PCR扩增获得Bcl2L13的完整CDS并进行测序,利用分析软件进行序列同源性比对并构建系统进化树;获得对应的氨基酸序列并分析蛋白理化特性及蛋白亚细胞结构、蛋白亲疏水性和磷酸化位点;预测蛋白二级结构并进行蛋白质三级结构模型构建;采用实时荧光定量PCR方法检测Bcl2L13基因在草原红牛各组织中的表达规律。结果显示:草原红牛Bcl2L13基因核苷酸序列与普通牛和牦牛的同源性高(100%和99.3%),与瘤牛和亚洲水牛的同源性较高(91.8%、90.5%);Bcl2L13基因CDS大小为839bp,编码279个氨基酸,该蛋白质分子式为C1348H2108N348O439S5,分子量为30.374 ku,理论等电点为4.51,蛋白质不稳定指数为77.71,总平均亲水性为-0.250。亚细胞定位分析表明,Bcl2L13蛋白分布在内质网(4.3%)、线粒体(4.3%)、过氧化物酶体(8.7%)、细胞质(65.2%)、细胞骨架(4.3%)、细胞核(13.0%);磷酸化位点分析发现Bcl2L13蛋白存在33个磷酸化位点;二级结构主要形式有α-螺旋(22.4%)、β-转角(12.1%)、β折叠(31.0%)、无规则卷曲(34.5%),与三级结构预测相同;Bcl2L13在背最长肌中表达量最高,在肺组织中表达量最少。综上,Bcl2L13基因在生物进化过程中具有低保守性,其编码的氨基酸组成的蛋白质结构不稳定,属于水溶性蛋白,主要在细胞质中发挥作用,在草原红牛不同组织的表达量有显著差异。