高血压病的防控探索及生理学分析

目的:树立居民高血压病防控理念,改变不良生活方式和行为。方法:将107例高血压患者随机分为两组:实验组45例,在降压药物治疗基础上,辅以心理疏导,指导合理膳食,戒烟、限酒,适量运动,对照组62例,单纯药物治疗。实验期均为1年,观察两组患者的血压下降情况。结果:社区高血压患者采用药物治疗加防控理念干预,降压效果明显优于单纯药物治疗(P<0.05或P<0.01)。结论:建立居民高血压病防控理念,改变不良生活方式和行为,能取得更好的降压效果。

眼镜蛇长链神经毒素镇痛效应及可能机制

目的探究眼镜蛇长链神经毒素(CBT)的镇痛作用及可能机制。方法采用在体细胞外记录方法记录慢性炎症痛模型大鼠脊髓背角神经元的痛诱发放电,分别对六组实验大鼠注射生理盐水(5μL)、CBT(20、40、80 ng/kg)、阿托品(2 mg/kg)、阿托品(2 mg/kg)+CBT(40 ng/kg),观察不同含量CBT对脊髓背角神经元痛诱发放电的影响,同时观察胆碱能受体拮抗剂阿托品能否翻转其镇痛效应。结果不同含量CBT均可以显著抑制慢性炎症痛大鼠脊髓背角神经元的痛诱发放电,各含量CBT组放电频率与生理盐水组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),且该效应可被阿托品所阻断,阿托品+CBT组在20、30、40、50、60 min放电频率与CBT(40 ng/kg)组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论CBT具有显著的镇痛效应,该效应有一定的剂量依赖性,胆碱能受体系统参与了其镇痛过程。

心脑血管疾病与肾素血管紧张素醛固酮系统

肾素-血管紧张素-醛固酮系统(renin-angiotensin-aldosteronesystem,RAAS)的激活不但和多种心血管疾病如高血压、心肌肥厚、动脉粥样硬化、动脉中层硬化及心力衰竭等的发生发展关系极为密切,还可引起脑水肿的发生,加重缺血性脑组织的损害。

甲胎蛋白在不同发育时期的大鼠胃组织中的表达及定位

目的:研究大鼠正常发育的各个阶段胃组织中甲胎蛋白(AFP)的表达情况及定位。方法:提取大鼠胚胎发育18.5天(e18.5d),e20.5d,新生大鼠(p0d),p7d,p14d,p21d以及成年大鼠的胃组织。检测各时期AFP的蛋白与AFP mRNA的表达以及在胃组织中的定位。结果:AFP在e18.5d大鼠的胃组织中蛋白和mRNA表达量均显著高于其他各时期,出生后表达量稳步下降,成年后消失;AFP在大鼠的胃组织中与间充质细胞标志物波形蛋白(vimentin)呈共表达。结论:AFP在发育的各个时期均特异性表达在大鼠胃间充质细胞,可能对胃结构的形成和功能的完善起着重要作用。

L型Ca^(2+)通道CaV1.3在培养的小鼠Cajal间质细胞的表达

目的:建立稳定的ICC分离培养方法,明确L-Ca^(2+)通道CaV1.3在ICC的表达。方法:取出生1—2天正常的BALB/c小鼠小肠,Ⅱ型胶原酶消化,过筛网、梯度离心后接种至铺有鼠尾胶原的培养瓶中培养。RT-PCR技术检测ICC特异性标志c-kit mRNA的表达情况;免疫荧光检冽c-kit蛋白的表达和定位;流式细胞术检测ICC纯度。RT-PCR技术检测CaV1.3 mRNA的表;免疫荧光双染检测c-kit蛋白和CaV1.3蛋白在ICC的定位。结果;培养的ICC贴壁细胞多角形,核大,细胞突起形成网状连接。RT-PCR和免疫荧光技术检测到ICC特异性标志c-kit mRNA和c-kit蛋白的表达。流式细胞术所得ICC纯度为81.97%。结论:运用Ⅱ型胶原酶消化-密度梯度离心法,我们建立了稳定的ICC培养方法,获得了相对较纯的单一细胞,为ICC进一步的基础研究奠定了坚实的基础。L-Ca^(2+)通道CaV1.3在ICC细胞膜大量表达,与ICC起搏功能存在相关性。

汉防己乙素对人肺癌95D细胞凋亡的诱导作用及机制

目的观察汉防己乙素对人肺癌95D细胞凋亡的诱导作用,并探讨其可能的作用机制。方法取人肺癌95D细胞分为4组,实验1、2、3组分别加入8、16、32μmol/L的汉防己乙素,溶剂对照组加入等体积0.1%的DMSO。采用流式细胞仪测算各组细胞凋亡率,H_2DCF-DA法测定细胞内活性氧(ROS)水平,Caspase-3活性测定试剂盒检测Caspase-3活性,半定量RT-PCR法检测BCL-2、BAX mRNA。结果实验1、2、3组及溶剂对照组细胞凋亡率分别为6.71%±1.26%、17.07%±1.88%、25.78%±0.44%、5.41%±1.40%,ROS水平分别为117.7%±5.5%、151.0%±4.6%、212.0%±5.6%、100.0%±0.0%,Caspase-3活性分别为119.3%±5.7%、175.0%±13.1%、251.3%±17.0%、100.0%±3.0%,BCL-2 mRNA相对表达量分别为0.93±0.02、0.75±0.04、0.61±0.04、1.00±0.03,BAX mRNA相对表达量分别为1.10±0.02、1.63±0.04、1.85±0.04、1.00±0.02,实验1、2、3组与溶剂对照组相比P<0.05或<0.01。结论汉防己乙素可诱导人肺癌95D细胞凋亡,这可能是通过升高细胞内ROS水平、活化Caspase-3、激活BAX、抑制BCL-2实现的。

蛇床子素对肺癌H1299细胞增殖和凋亡的作用

目的探讨蛇床子素对人肺癌H1299细胞增殖、凋亡的作用及可能的机制,为临床治疗提供理论依据。方法以不同浓度蛇床子素(0、20、40、60、80、100、120、140和160μmol/L)处理H1299细胞48 h后,采用MTT法检测细胞增殖活性,以确定后续实验浓度。经不同浓度蛇床子素(0、40、80、120和160μmol/L)处理体外培养的肺癌H1299细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化,Western blot法检测B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、核因子κB(NF-κB)和磷酸化NF-κB(pNF-κB)的表达。结果与溶剂对照组(0μmol/L)比较,40、80、120、160μmol/L浓度的蛇床子素均可明显抑制人肺癌H1299细胞增殖(P<0.05)。80、120和160μmol/L蛇床子素处理H1299细胞48 h后可以明显地诱导细胞凋亡,降低BCL-2和pNF-κB的表达,升高Bax蛋白的表达(P<0.05),但对NF-κB的表达无显著影响(P>0.05)。结论蛇床子素可抑制人肺癌H1299细胞增殖并促进细胞凋亡,其机制可能与促进激活促凋亡因子Bax的表达、抑制抗凋亡因子Bcl-2的表达以及下调pNF-κB的表达有关。

雷公藤红素对肠癌细胞CCL-244干性的作用机制

目的研究雷公藤红素对人肠癌细胞CCL-244增殖、干性的作用及可能的机制。方法体外培养人肠癌细胞CCL-244,经不同浓度雷公藤红素处理,采用MTT法检测雷公藤红素对细胞增殖活性的影响;克隆形成法测定雷公藤红素对细胞克隆形成能力的影响;RT-PCR法测定雷公藤红素对CD133、CD44和Oct4基因表达的影响;免疫印迹法测定雷公藤红素对CD133、CD44和AKT信号通路蛋白表达的影响。结果雷公藤红素可明显抑制人肠癌CCL-244细胞的增殖;与对照组比较,雷公藤红素处理后可明显抑制肠癌细胞CCL-244的克隆形成;降低干性相关基因CD133、CD44和Oct4的表达;降低干性相关蛋白CD133和CD44的表达;抑制pAKT的磷酸化表达。结论雷公藤红素可抑制人肠癌CCL-244细胞增殖和克隆形成,这可能与抑制干性相关基因和蛋白CD133、CD44等的表达、抑制AKT信号通路有关。

低表达SLC1A4在卵巢癌顺铂耐药中的作用研究

目的探讨溶质载体家族1成员4(solute carrier family 1 member 4,SLC1A4)在卵巢癌铂类化疗耐药性中的作用。方法通过GEO、TCGA数据库分析工具分析SLC1A4在卵巢癌或铂类耐药性卵巢癌中的表达;通过GEO数据库分析SLC1A4在铂类药物处理的卵巢癌细胞系中的表达;通过Kaplan Meier-plotter分析SLC1A4表达量与卵巢癌患者总生存期(overall survival,OS)、无疾病进展生存率(progression free survival,PFS)的相关性;通过DepMap平台分析SLC1A4基因效应与卵巢癌化疗药物敏感相关性;通过流式细胞试验和肿瘤细胞克隆集落形成试验验证低表达SLC1A4介导卵巢癌细胞顺铂耐药;通过TargetScan预测靶向于SLC1A4的微小RNA(miRNA),并在TCGA数据库卵巢癌样本中验证其相关性;运用COREMINE工具进行文本挖掘分析SLC1A4介导卵巢癌化疗耐药性的生物过程。结果SLC1A4在卵巢癌患者及铂类耐药性的卵巢癌中的显著降低(P<0.05),而且与患者的OS、PFS显著相关(P<0.05);铂类药物处理卵巢癌细胞增加SLC1A4的表达;SLC1A4对卵巢癌的基因效应与铂类药物敏感性正相关;过表达SLC1A4增加顺铂引起的卵巢癌细胞凋亡和减少肿瘤细胞克隆集落形成;hsa-let-7c-5p靶向于SLC1A4并在耐药性卵巢癌患者样本中呈显著负相关。结论低表达SLC1A4介导卵巢癌铂类耐药性,并且有可能与hsa-let-7c-5p调控有关。

蛇床子素对宫颈癌Hela细胞凋亡的作用研究

目的探讨蛇床子素对人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡的作用及可能的机制。方法经不同浓度蛇床子素处理体外培养的宫颈癌Hela细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞内活性氧(ROS)水平,半定量RT-PCR法检测Bcl-2和Bax mRNA的表达。结果与对照组比较,不同浓度的蛇床子素均可明显抑制人宫颈癌Hela细胞增殖、诱导细胞凋亡,增高细胞内ROS水平,降低Bcl-2/Bax的表达比例,且具有一定的剂量依赖性。结论蛇床子素抑制人宫颈癌Hela细胞增殖并促进细胞凋亡,与升高细胞ROS水平、促进激活促凋亡因子Bax的表达和抑制抗凋亡因子Bcl-2的表达有关。

贝伐单抗对实验大鼠机械通气引发急性肺损伤的预防效应

目的研究贝伐单抗对机械通气引起的肺损伤的预防作用。方法 18只Wistar大鼠随机均分为三组:假手术(A)组、机械通气(B)组和贝伐单抗20mg/kg治疗(C)组。通气结束后,常规取肺泡灌洗液与肺组织,ELISA法检测灌洗液中的血管内皮生长因子(VEGF)浓度,Brodfard法测定蛋白含量,依文氏蓝含量和肺干/湿重比值评价肺毛细血管通透性,HE染色观察肺组织的病理改变并计算肺损伤指数。结果与A组相比,B组肺泡灌洗液中VEGF浓度、肺毛细血管通透性与肺损伤均显著增加(P<0.05),而C组上述指标均较B组明显降低(P<0.05)。结论贝伐单抗对机械通气引起的肺损伤有一定的预防效应。

miR-21对食管癌细胞增殖、凋亡及PI3K/Akt信号通路的影响

目的:探讨miR-21对食管癌细胞增殖及凋亡影响与分子机制。方法:将食管癌细胞分成miR-21-NC组、miR-21组、LY294002组、LY294002+miR-21组、对照组5组,检测miR-21表达情况及食管癌细胞系中PI3K、Akt与p-Akt表达情况。结果:食管癌细胞系的miR-21相对表达量明显高于正常食管上皮细胞系(P<0.05);miR-21组在miR-21相对表达量高于对照组、miR-21-NC组(P<0.05);在Eca-109细胞增殖率上,结果显示而miR-21组的细胞增值率要远比对照组、miR-21-NC组的指标更高,对比差异有统计学意义(P<0.05);LY294002组在Eca-109细胞增值率上比对照组低,差异有统计学意义(P<0.05);LY294002+miR-21组在Eca-109细胞增值率上比LY294002组明显更高,差异有统计学意义(P<0.05);miR-21组细胞中PI3K、p-Akt相对表达量均高于对照组,LY294002组PI3K、p-Akt相对表达量均低于对照组(P<0.05)。结论:miR-21可通过调节PI3K/Akt信号通路,促进食管癌细胞的增殖及凋亡,为食管癌靶向治疗提供一定理论依据。