复方野菊花抗感软胶囊清热解毒作用的实验研究

目的观察复方野菊花抗感软胶囊的清热解毒作用。方法以体内外抗流感病毒实验,体内外抗菌、解热实验,评价复方野菊花抗感软胶囊的清热解毒作用。结果复方野菊花抗感软胶囊可明显抑制甲型H1N1流感病毒导致的肺部病变,降低其死亡率(P<0.05),但在最大无毒浓度下(1.56μg/mL)对甲型H1N1流感病毒无血凝抑制作用;明显降低感染金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌小鼠的死亡率(P<0.05),对乙型溶血性链球菌和肺炎链球菌的最小抑菌浓度为2.5 mg/mL;可明显缓解干酵母致热大鼠和大肠杆菌内毒素致热家兔的体温升高。结论复方野菊花抗感软胶囊可通过抗流感病毒、抗菌、解热等药理作用发挥其清热解毒功效。

精制蟒蛇油抗炎抗过敏止痒作用的实验研究

目的:研究蟒蛇油抗炎、抗过敏、止痒的作用。方法:用二甲苯致小鼠耳肿胀法和组胺致小鼠皮肤毛细血管扩张法观察其抗炎作用;用2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导小鼠迟发性超敏反应(DTH)观察其抗过敏作用;用4-氨基吡啶(4-AP)诱导小鼠皮肤过敏性瘙痒观察其止痒作用。结果:蟒蛇油能显著对抗二甲苯所致小鼠耳肿胀和抑制组胺所致小鼠皮肤毛细血管扩张,同时降低DNCB诱导的小鼠过敏反应,并且能明显减少4-AP诱导的瘙痒反应的舔体次数。结论:蟒蛇油有显著的抗炎、抗过敏、止痒作用。

广藿香醇的急性毒性研究

目的观察广藿香醇对小鼠的急性毒性,评价其安全性,为新药研发和临床用药提供理论依据。方法采用口服和腹腔注射给药途径,观察小鼠给予不同剂量广藿香醇花生油溶液后的死亡率,Bliss法计算半数致死量。结果广藿香醇花生油溶液的灌胃给药的LD50是4.693 g/kg,95%的置信区间上限是5.498 g/kg,下限是4.038 g/kg;广藿香醇花生油溶液的腹腔注射给药的LD50是3.145 g/kg,95%的置信区间上限是3.675 g/kg,下限是2.663 g/kg。结论广藿香醇的安全性较高,属于低毒药物。

复方野菊花抗感软胶囊免疫调节及抗过敏作用的实验研究

目的研究复方野菊花抗感软胶囊的免疫调节作用和抗过敏作用。方法通过血清免疫球蛋白水平测定、巨噬细胞吞噬功能测定,以及抗组胺致Ⅰ型速发型过敏反应和2,4-二硝基氯苯(DNCB)致Ⅳ型迟发型超敏反应等实验观察复方野菊花抗感软胶囊对免疫调节功能的影响。结果复方野菊花抗感软胶囊可明显提高血清IgG、IgM型免疫球蛋白含量,促进巨噬细胞吞噬功能;可一定程度抑制免疫器官的萎缩,同时可明显抑制皮肤迟发性过敏反应,而对组胺引起的Ⅰ型速发型超敏反应没有抑制作用。结论复方野菊花抗感软胶囊可通过增强免疫功能和抗过敏发挥其扶正固表作用。

黄芩汤通过调控内质网应激减轻小鼠溃疡性结肠炎

目的观察黄芩汤对小鼠溃疡性结肠炎(UC)细胞凋亡的影响并探讨其作用机制。方法将雄性Balb/c小鼠随机分为:正常组、模型组、美沙拉嗪组(5-ASA,200 mg/kg)、黄芩汤低、中、高剂量组(HQDL,2.275 g/kg;HQDM,4.55 g/kg;HQDH,9.1 g/kg),8只/组。各组自由饮食,除正常组自由饮用无菌水外,其余各组小鼠自由饮用3%DSS溶液,持续7d以建立UC模型。取结肠组织采用HE、AB-PAS和TUNEL染色分别观察结肠损伤和细胞凋亡情况,采用ELISA法检测炎症因子表达变化;采用Western blotting、免疫组化和qRT-PCR法分别检测肠道化学屏障、机械屏障、内质网应激等相关指标的蛋白或基因表达变化。结果与模型组相比,黄芩汤干预下的UC小鼠,DAI评分和宏观评分下降(P<0.01),TUNEL染色荧光强度下降(P<0.01)。促炎因子IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-8表达减少(P<0.01),MUC2和TFF3的基因表达升高(P<0.05),Claudin-1、Occludin和E-cadherin的蛋白表达升高(P<0.05),GRP78、CHOP和Caspase-12的基因和蛋白表达下降(P<0.01)、PERK、eIF2α和IRE1α的磷酸化表达降低(P<0.05),Bcl-2/Bax蛋白表达比例升高(P<0.01)和Caspase-3的蛋白表达降低(P<0.01)。结论黄芩汤能够抑制UC小鼠的细胞凋亡反应并改善肠道屏障功能,其机制可能与PERK和IRE1α信号通路介导的内质网应激有关。

喂食蛹虫草的小鼠血清对小鼠脾淋巴细胞增殖及活化的影响

探讨喂食蛹虫草(Cordyceps militaris)的小鼠血清对脾淋巴细胞的影响。将20只雄性BALB/c小鼠分为两组。蛹虫草组用蛹虫草水提物(10 mL/kg·d),对照组用等体积纯净水,连续灌胃30 d。收集上述两组小鼠血清,通过小鼠脾淋巴细胞体外增殖实验检测不同浓度(5%、10%、20%)血清对小鼠脾淋巴细胞增殖和活化的影响。采用流式细胞术检测T细胞(CD^3+)、B细胞(CD^19+)、辅助性T细胞(helper T,Th)(CD^3+CD^4+)、细胞毒性T细胞(cytotoxic T cell,Tc)(CD^3+CD^8+)在淋巴细胞中所占百分比,以及细胞表面共刺激因子CD28和早期活化蛋白CD69的表达量。采用酶联免疫吸附法测定小鼠脾淋巴细胞上清液中干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)和白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)的表达量。结果表明:与对照组相比,培养基中添加10%和20%喂食蛹虫草的小鼠血清可刺激脾淋巴细胞增殖,刺激指数分别为(105.25±2.40)%和(134.54±5.99)%;喂食蛹虫草的小鼠血清可明显提高小鼠脾淋巴细胞中T细胞和B细胞的百分比,与对照组相比,添加10%和20%喂食蛹虫草的小鼠血清使T细胞在淋巴细胞总数中的百分比分别提高了(3.00±0.20)%和(7.20±0.21)%,添加20%喂食蛹虫草的小鼠血清使B细胞的百分比提高了(8.53±0.25)%;喂食蛹虫草的小鼠血清可促进Th细胞、Tc细胞分化,上调T细胞及其亚群中CD28分子的表达,提高T细胞和B细胞中CD69分子的表达,促进淋巴细胞活化,还可显著促进小鼠脾淋巴细胞中免疫调节因子IFN-γ和IL-2的表达;添加20%喂食蛹虫草的小鼠血清IFN-γ表达量为(101.92±12.76)ng/L,添加10%和20%喂食蛹虫草的小鼠血清IL-2表达量分别为(369.56±30.98)ng/L 和(417.69±15.94)ng/L。

牛樟芝醇提物体外抗炎活性研究

目的:研究牛樟芝醇提物(Ethanol extract from Antrodia cinnamomea,AC-E)对T细胞及T细胞亚群的影响,探讨牛樟芝的抗炎作用。方法:使用为3μg/mL刀豆蛋白A(Concanavalin A,ConA)刺激BALB/c小鼠脾淋巴细胞建立体外模型,以不同浓度AC-E(12.5、25.0、50.0μg/mL)干预72 h。以3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(MTS)试剂检测细胞活力;应用流式细胞术(Flowcytometry,FCM)分析其凋亡情况和T细胞及其亚群的比例变化情况;以酶联免疫吸附测定法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)分析培养上清液中γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(Tumor nerosis factor-α,TNF-α)的分泌情况。结果:MTS检测表明,高剂量AC-E可明显抑制ConA诱导的淋巴细胞增殖;流式细胞术结果表明,中高剂量组AC-E可明显诱导被刺激后的细胞发生凋亡,AC-E能使增殖的T细胞及T细胞亚群凋亡;ELISA检测结果表明,AC-E能抑制促炎因子TNF-α、IFN-γ的分泌,给药组的细胞因子浓度接近于正常组。结论:AC-E可通过使激活增殖的T细胞凋亡进而使机体的免疫系统趋于平衡,为牛樟芝抗炎的食药用价值及深入开发提供理论依据。

兰茂牛肝菌含药血清对小鼠脾淋巴细胞的影响

为探讨兰茂牛肝菌(Lanmaoa asiatica)含药血清对小鼠脾淋巴细胞的影响,采集连续30d灌胃给予该菌子实体水提物(4g/kg)的小鼠含药血清,通过脾淋巴细胞体外增殖实验和流式细胞术检测含药血清(5%、10%和20%)对小鼠脾淋巴细胞免疫功能的调节作用。结果表明:兰茂牛肝菌含药血清可明显提高小鼠脾淋巴细胞增殖能力,提高T(CD^(3+))、B(CD^(19+))细胞比例,同时可促进T细胞亚群辅助性T细胞(Th,CD^(3+)CD^(4+))与细胞毒性T细胞(Tc,CD^(3+)CD^(8+))生成,并可上调上述T细胞及T细胞亚群内抗原非特异性共刺激分子CD28的表达,提高T细胞活化程度。因此兰茂牛肝菌含药血清可通过增强以T、B细胞为代表的适应性免疫功能,对机体免疫系统产生潜在的正向调节作用。

赤芝子实体乙酸乙酯提取物的化学成分研究

用乙酸乙酯对赤芝(Ganoderma lucidum)子实体进行提取,并采用多种柱层析方法分离得到10个化合物,经质谱和核磁共振方法鉴定这10个化合物分别为拱状灵芝素A(1)、拱状灵芝素B(2)、对苯二甲酸正丁异丁二醇酯(3)、对苯二甲酸二丁酯(4)、α-羟基-24-烷酸(5)、棕榈酸(6)、硬脂酸(7)、N-苯乙基-苯甲酰胺(8)、原儿茶酸(9)和琥珀酸(10),其中化合物3、4、8、9和10是首次从赤芝子实体中分离得到的。

广藿香油及藿香油的研究概况

广藿香油又称百秋李油，是从唇形科刺蕊草属植物广藿香Pogostemon cablin（Blanco）Benth．中提取的挥发油，是广藿香的主要药用成分。藿香油是从唇形科藿香属植物（土）藿香Agasrathe rugosa（Fisch．et Meyer）0．ktze中提取的挥发油，是常见的天然香料。两者来源不同，但目前在应用上有人不加以区分。这一做法是否合理？两者是否可以混用？为此，笔者将从历史沿革、成分研究、药理研究和安全性研究进行简要综述，以期为广藿香油及藿香油的合理运用提供依据。

黄芩汤通过调节ILC3s-Th细胞反应减轻小鼠的溃疡性结肠炎

目的探讨黄芩汤在治疗溃疡性结肠炎(UC)过程中对三型固有淋巴细胞(ILC3)及辅助性T细胞(Th)免疫反应的调控作用。方法将雄性Balb/c小鼠随机分为6组:正常组、模型组、美沙拉嗪组、黄芩汤低、中、高剂量组(HL,2.275 g/kg;HM,4.55 g/kg;HH,9.1 g/kg)。各组自由饮食,除正常组自由饮用蒸馏水外,其余各组小鼠自由饮用3%葡聚糖硫酸钠溶液,持续7d以建立UC模型,同时美沙拉嗪组和黄芩汤低、中、高剂量组小鼠每日分别给予美沙拉嗪及低、中、高剂量黄芩汤灌胃1次。流式细胞术分析结肠固有层淋巴细胞中ILC3s细胞比例及其表面主要组织相容性复合物Ⅱ类(MHCⅡ)分子表达变化以及Th细胞中Th1与调节性T细胞(Treg)的比例变化。采用Milliplex多因子测定方法检测结肠组织中多个细胞因子含量的变化。结果与模型组相比,黄芩汤各剂量组小鼠溃疡性结肠炎症状得以缓解,疾病活动指数评分及宏观评分下降(P<0.001)。流式细胞术结果表明,黄芩汤各剂量组小鼠结肠中ILC3s细胞比例增加(P<0.05)且MHCⅡ分子表达增多(P<0.05),其中黄芩汤低、中剂量组Th1细胞比例降低(P<0.05)而Treg细胞比例增加(P<0.05)。Milliplex多因子测定结果表明,黄芩汤各剂量组小鼠结肠组织中Th细胞相关的促炎性细胞因子如白介素-2、白介素-17A、白介素-23、α肿瘤坏死因子、γ干扰素含量降低(P<0.05)。结论黄芩汤通过增加ILC3s细胞数目及其MHCⅡ的表达,调节Th细胞免疫反应,从而缓解DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎。

HPLC同步测定丽安康片中阿魏酸和淫羊藿苷含量

目的:建立高效液相色谱法同步测定丽安康片中阿魏酸和淫羊藿苷含量的方法。方法:采用Phenomenex Luna C18柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-0.1%醋酸溶液作为流动相进行梯度洗脱,检测波长为316nm,流速为1.0mL·min-1。结果:阿魏酸在0.0528～0.1848μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为99.8%～101.1%(n=6);淫羊藿苷在5.68～19.88μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为99.9%～101.5%(n=6)。结论:所建立的方法准确、快速、灵敏、重复性好,可用于丽安康片质量控制。

苦木注射液高效液相色谱指纹图谱研究及多成分定量分析

目的:建立苦木注射液的HPLC指纹图谱,并同时测定3种咔巴啉类生物碱的含量,全面评价其内在质量。方法:采用Phenomenex Gemini C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-30 mmol.L-1乙酸铵(冰乙酸调pH4.5)溶液梯度洗脱,用国家药典委员会"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004 A版"处理分析,建立苦木注射液的HPLC指纹图谱共有模式。结果:在指纹图谱研究中,标定了16个共有峰,指认了7个化合物,分析的11批苦木注射液与共有模式之间相似性良好,相似度均在0.9以上;3种咔巴啉类生物碱在含量分析测定条件下,各组分分离良好,相关系数均为0.999 9,线性范围分别为0.020 0～0.300 0,0.102 0～1.530 0,0.015 2～0.228 0μg,加样回收率在99.5%～102%。结论:本法灵敏度高、专属性强,HPLC指纹图谱结合多成分含量测定为苦木注射液的质量控制提供科学依据。

鹿茸柱前衍生化高效液相指纹图谱研究

目的:建立鹿茸的柱前衍生化高效液相指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供有效可靠的方法。方法:采用2,4-二硝基氟苯(DNFB)为衍生化试剂对鹿茸药材进行处理。高效液相色谱条件为PhenomenexLuna 5u C18(2)100R(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,甲醇-醋酸钠缓冲液梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温20℃,检测波长360 nm。结果:在本实验条件下测定10批鹿茸药材,其色谱指纹图谱可反映鹿茸所含的17种氨基酸成分,当中所含的10种必需氨基酸的含量与市售价格有较好的一致性。结论:该方法精密度、稳定性、重复性好,为鹿茸的质量控制提供了思路和导向。

正交试验优选丽安康片提取工艺

目的:优选丽安康片提取工艺。方法:水提取部分以黄芪甲苷为指标,乙醇提取部分以淫羊藿苷为指标,分别采用正交试验优化提取工艺条件。结果:最佳提取工艺为黄芪、当归水提共煎,加8倍量水煎煮3次,每次1.5 h,70℃减压干燥;淫羊藿加14倍量70%乙醇提取2次,每次1 h。结论:优选的提取工艺合理、稳定、可行,可作为丽安康片的提取工艺。

硫酸盐还原菌与肠道疾病相关性的研究进展

硫酸盐还原菌(sulfate-reducing bacteria,SRB)是肠道菌群的重要组成成员之一。SRB在其增殖与新陈代谢过程中会产生硫化氢。现有研究显示,SRB的过度繁殖与炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)、肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)、乳糜泻(celiac disease,CLD)和结直肠癌(colorectal cancer,CRC)等密切相关,但目前尚无相关文献对SRB在肠道疾病中扮演的角色、致病机理和肠道微生态等研究进行系统性的综述。SRB在肠道疾病中的分布特征及其致病机制值得进一步总结与探讨。本文收集过去10年来发表的关于SRB与肠道疾病的文献并进行详细分析与归纳,对SRB在宿主肠道内的分布与生理特征、SRB在不同肠道疾病的相关分布特点,以及SRB致病机制的研究进展等方面进行详细论述,以期增加本领域研究人员对SRB的重视。同时,本文对未来如何深化SRB在肠道相关疾病的研究方向进行探讨,以期为SRB相关肠道疾病的预防与治疗提供一定参考。