多位点序列分型技术在鲍曼不动杆菌同源性分析中的应用

目的了解我院ICU病房鲍曼不动杆菌的分子流行特征,分析其基因同源性,为医院感染控制提供实验室依据。方法收集暨南大学附属第一医院ICU病房分离的107株鲍曼不动杆菌,采用多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术,PCR扩增gltA、gyrB、gdhB、recA、cpn60、gpi和rpoD 7个管家基因片段,测序结果与PubMLST数据库比对分析,利用eBURST软件绘制不同基因型之间的进化关系图。结果 107株鲍曼不动杆菌被分为4个基因型,分别是ST-136(31株)、ST-195(7株)、ST-208(58株)和一个新的基因型(11株),其中ST136、ST195和ST208基因型具有同源相关性。结论我院ICU病房的鲍曼不动杆菌具有水平传播特征,多位点序列分型技术可用于临床鲍曼不动杆菌的基因分型。

121例慢性细菌性前列腺炎病原菌检测及耐药谱分析

目的:了解引起我院慢性细菌性前列腺炎的病原菌分布及其耐药谱特征,为临床诊断和治疗细菌性前列腺炎提供依据。方法:用无菌方法采集前列腺炎患者的前列腺液进行细菌培养,利用VITEK2 Compact生物鉴定系统对细菌培养阳性的菌株进行种属鉴定,参照美国临床和实验室标准协会(CLSI)推荐的方法,采用K-B法进行体外药敏试验,用WHONET 5.6软件分析病原菌的耐药谱特征。结果:121例细菌性前列腺炎患者中,革兰阳性细菌感染患者93例(76.8%),革兰阴性细菌28例(23.2%),其中分离率前3位的细菌分别是金黄色葡萄球菌(29例,23.9%)、溶血性葡萄球菌(23例,19.0%)和表皮葡萄球菌(18例,14.9%)。药敏试验结果显示,3种主要革兰阳性细菌对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺全部敏感,对庆大霉素、红霉素、克林霉素、头孢西丁、苯唑西林和环丙沙星存在不同程度的耐药(7.1%～78.4%),对青霉素的耐药率高达90%以上;大肠埃希菌对亚胺培南、美罗培南和厄他培南全部敏感,对头孢噻肟、头孢曲松、环丙沙星、四环素、复方新诺明等抗生素有不同程度的耐药(14.5%～69.7%)。结论:我院慢性细菌性前列腺炎患者的病原菌主要是金黄色葡萄球菌、溶血性葡萄球菌、表皮葡萄球菌和大肠埃希菌。慢性细菌性前列腺炎患者的治疗应以药敏试验结果为依据,合理选用抗菌药物。

小儿NK/T细胞淋巴瘤(鼻型)误诊1例

患儿男，11岁，因反复发热伴鼻塞、流涕1个月入院。患儿于1个月前无明显诱因出现发热，体温高达39．20℃，伴有鼻塞、流涕，无咳嗽、咳痰，无寒战、抽搐，无腹痛及腹泻。病后食欲欠佳，身体较前消瘦。在当地医院做胸片检查提示心肺及隔未见明显异常；做鼻部CT检查，意见为：右侧额窦炎，双侧鼻息肉。曾用抗生素、中药及对症治疗，病情无好转，体温波动于37．0～38．5℃之间。近3年来，常有鼻塞及流涕，多次诊断为“鼻窦炎”。否认家族中有肿瘤病史。

肝癌患者手术前后T细胞亚群的变化特点及其意义

目的:探讨肝癌患者手术前后外周血T淋巴细胞亚群的变化特点。方法:应用APAAP法测定30例肝癌患者手术前后的CD3、CD4和CD8细胞的阳性细胞百分率及其比值,并与正常对照组比较分析。结果:30例肝癌患者手术前CD3,CD4及CD4/CD8比值明显低于正常对照组,差异有显著性(P<0.01),手术后CD4/CD8的比值有明显提高,差异也有显著性(P<0.01),提示肝癌患者手术前后CD4/CD8比值有显著改变。结论:监测外周血CD4/CD8的比值可作为评价肝癌患者病情及手术后预后的一个参考指标。

Taqman探针实时荧光定量PCR检测肝脏疾病患者血清中miR-122的表达水平及其临床意义

目的:运用Taqman探针实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测肝脏疾病患者血清中miR-122的表达水平并探讨其临床意义。方法:设计miR-122及U6 snRNA的茎环引物和Taqman探针,运用Taqman探针实时荧光定量PCR检测27例肝癌术前(HCC)患者、15例乙型肝炎(hepatitis B)患者、15例丙型肝炎(hepatitis C)患者、15例正常对照者(HC)、11例肝癌术后(PHCC)患者及10例肝癌术后复发(recurrence)患者血清中miR-122的表达水平,并分析miR-122与肝脏疾病相关标志物的关系。结果:Taqman探针实时荧光定量PCR方法能检测血清中miR-122的表达。HCC、hepatitis B、hepatitis C及recurrence患者血清中miR-122的表达水平均高于HC和PH-CC患者(P<0.05),hepatitis C患者血清miR-122表达水平高于HCC、hepatitis B和recurrence患者(P<0.05),但HCC、hepatitis B和recurrence患者血清miR-122的表达水平无明显差异(P>0.05),PHCC患者血清miR-122的表达水平比HCC和recurrence患者低(P<0.05)。血清乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性和(或)乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阳性患者血清miR-122的表达水平高于阴性者(P<0.05)。血清丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)阳性患者血清miR-122的表达水平高于阴性者(P<0.05)。血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)与miR-122的表达水平有正相关性(r=0.34,P<0.05)。血清甲胎蛋白(AFP)≥400μg/L组血清miR-122的表达高于AFP<400μg/L组(P<0.05)。结论:Taqman探针实时荧光定量PCR适用于检测血清miR-122的表达水平。在HCC、hepatitis B、hepatitisC及recurrence患者血清中miR-22均有不同程度的增高,尤其是hepatitis C患者,且PHCC患者血清miR-122表达下降,复发后升高。血清miR-122的表达与肝脏疾病的某些指标有关,提示血清miR-122可作为肝脏疾病,特别是肝癌早期诊断、手术疗效及预后判断的新指标。

血清miR-21在糖尿病肾病中的诊断价值

目的：评价血清miR-21对糖尿病肾病的诊断价值,探讨糖尿病肾病诊断的分子标志物.方法：对25例糖尿病肾病患者、25例Ⅱ型糖尿病患者A[尿微量白蛋白（UmAlb）＜14.29 mg/L]、25例Ⅱ型糖尿病患者B（UmAlb＞14.29 mg/L）、25例糖尿病肾病引发的尿毒症患者及25例正常对照组的血清标本进行总RNA提取,并进行miR-21的实时荧光定量PCR检测,分析血清miR-21相对表达量与相关临床指标的关系,评估血清miR-21对糖尿病肾病的诊断效能.结果：miR-21在糖尿病肾病患者血清中的相对表达量显著低于正常对照组、糖尿病A组及B组,同时显著高于尿毒症组（均P＜0.01）,糖尿病肾病患者血清miR-21水平与胱抑素C、UmAlb、UmAlb/尿肌酐呈显著负相关（P〈0.01,P〈0.05,P〈0.05）.经logistic回归及ROC曲线分析,血清miR-21在糖尿病肾病患者与正常对照组、糖尿病A组、糖尿病B组、糖尿病A组＋正常对照组、糖尿病B组＋正常对照组和糖尿病A组＋糖尿病B组中诊断糖尿病肾病的曲线下面积（AUC）为0.848（95%CI：0.737～0.959）、0.896（95%CI：0.812～0.980）、0.782（95%CI：0.641～0.922）、0.838（95%CI：0.743～0.933）、0.796（95%CI：0.675～0.917）和0.808（95%CI：0.704～0.911）,敏感性和特异性分别为80.0%和72.0%、72.0%和88.0%、72.0%和84.0%、76.0%和77.0%、76.0%和82.0%、70.0%和86.0%;在4组人群中诊断糖尿病肾病的AUC为0.845（95%CI：0.752～0.939）,敏感性和特异性分别为76.0%和77.3%.结论：血清miR-21可作为糖尿病肾病的分子诊断标志物.

MCV和RDW测定在地中海贫血和巨幼细胞性贫血中的临床价值

目的:探讨平均红细胞体积(m ean corpuscu lar volum e,MCV)及红细胞体积分布宽度(red b lood cell volum e d istribution w idth,RDW)对地中海贫血(简称地贫,MD)和巨幼细胞性贫血(简称巨幼贫血,MA)诊断的临床价值。方法:利用血细胞自动分析仪测定不同病因的贫血患者的MCV和RDW值。结果:MD患者,MCV降低,RDW升高,且α-地贫与β-地贫无差异;MA患者,MCV和RDW升高;急性失血性贫血和再生障碍性贫血(ap lastic anem ia,AA)患者,MCV和RDW正常。结论:MCV和RDW红细胞参数,可作为贫血病因诊断及鉴别诊断的参考线索,对地贫和巨幼贫血的诊断和治疗有一定的指导意义。

用巢氏PCR检测防止香港型地中海贫血漏诊

目的探讨经α-地中海贫血基因诊断试剂盒检测为-α3.7/αα(右向缺失,静止型)的样本中是否携带anti4.2片段,以判断是否存在漏诊的香港型地中海贫血(HKαα)。方法设计HKαα和anti4.2片段的引物,用巢式PCR检测50例-α3.7/αα样本中是否存在anti4.2片段,并结合平均红细胞体积(MCV)及血红蛋白A2(HbA2)比较分析。结果巢式PCR结果表明,50例-α3.7/αα样本中存在8例为HKαα型,漏诊率为16%;且HKαα携带者的MCV明显高于-α3.7/αα携带者,差异有统计学意义(t=7.04,P<0.05)。结论巢式PCR可鉴别HKαα与-α3.7/αα携带者,提高其检出率。

冠心病患者血清超敏C反应蛋白的检测及其临床意义

目的:探讨血清超敏C反应蛋白(Hs-CRP)在冠心病患者中的变化及其临床意义。方法:采用胶乳增强免疫比浊法分别测定3例稳定性心绞痛(SAP)、48例不稳定性心绞痛(UAP)、12例缺血性心肌病(ICM),29例急性心肌梗死(AMI)及29例急性心肌梗死恢复期患者血清Hs-CRP含量,并与40例健康人做比较,同时探讨Hs-CRP与肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)的关系。结果:SAP、UAP、ICM、AMI和AMI恢复期组血清Hs-CRP质量浓度分别为:(0.78±0.52)mg/L、(1.43±1.27)mg/L、(1.67±0.89)mg/L、(31.64±37.37)mg/L及(0.56±0.27)mg/L,经与对照组(0.55±0.23)mg/L比较,UAP、ICM、AMI均显著性升高(P<0.01)。结论:Hs-CRP与冠心病发生有关,对冠心病的预测、发展及预后判断有重要的临床价值。

胃肠道恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞rDNA转录活性的监测

目的 :初步探讨胃肠肿瘤患者外周血T淋巴细胞rDNA转录活性及其临床意义、治疗效果。方法 :对 48例胃肠道恶性肿瘤患者术前、术后T淋巴细胞rDNA转录活性进行了对比研究。结果 :术前T淋巴细胞rDNA转录活性明显低于术后 ,也明显低于正常对照。结论 :T淋巴细胞rDNA转录活性可以灵敏地反映出恶性肿瘤患者的免疫状态 ,可用于胃肠道恶性肿瘤患者手术的临床监测。

应用全自动电泳系统筛查地中海贫血和异常血红蛋白病

目的:探讨全自动电泳系统在筛查婚前、产前人群及新生儿地中海贫血(简称地贫)和异常血红蛋白病中的作用。方法:应用法国seb ia电泳仪对3 800例婚前、产前及新生儿血液标本作全自动琼脂糖凝胶电泳分析。结果:3 800例血液标本中检出地中海贫血及异常血红蛋白病816例(占21.5%),其中地贫795例(占20.9%),异常血红蛋白病21例(占0.55%)。结论:全自动电泳系统筛查地中海贫血和异常血红蛋白病具有很高的分辨率,可显示清晰区带,及检出微量成分,扫描定量准确,大大提高对地贫及异常血红蛋白病的检出率。

miR-155-5p在宫颈癌血清中的表达及其对宫颈癌细胞的影响

目的:检测miR-155-5p在不同宫颈疾病患者血清中的表达差异,并分析其对宫颈癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响,探讨miR-155-5p在宫颈癌发生、发展中的可能作用机制。方法:采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法,检测并分析比较miR-155-5p在不同宫颈疾病患者血清中的表达差异。利用miR-155-5p mimic或inhibitor提高或降低宫颈癌细胞中miR-155-5p的表达。CCK-8法和流式细胞术检测宫颈癌细胞的增殖、细胞周期和凋亡。结果:宫颈癌组血清中miR-155-5p的表达高于宫颈炎组和健康对照组(P<0.05),宫颈上皮内瘤样病变组和宫颈癌组血清中miR-155-5p的表达差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组、脂质体组和阴性对照组相比,转染100 nmol/L和200 nmol/L miR-155-5p mimic的SiHa细胞中,S期细胞比例升高,凋亡细胞比例降低(P<0.05)。转染100 nmol/L和200 nmol/L miR-155-5p inhibitor的SiHa细胞中,G2/M期细胞比例明显增多(P<0.05)。结论:(1)宫颈癌患者血清中miR-155-5p表达较健康对照人群上调,可能作为宫颈癌早期诊断的肿瘤分子标志物。(2)miR-155-5p对宫颈癌HeLa细胞增殖、细胞周期和凋亡无明显影响。(3)miR-155-5p可促进宫颈癌SiHa细胞进入S期,并抑制SiHa细胞凋亡,提示miR-155-5p可能在宫颈鳞癌发生、发展中起作用。

雷帕霉素对小鼠星形胶质细胞体外诱导凋亡的影响

目的:探讨雷帕霉素(rapamycin,Rapa)对小鼠星形胶质细胞体外凋亡的影响。方法:无菌分离并体外培养C57BL/6J幼鼠脑组织星形胶质细胞。通过MTT比色法测定并分析Rapa浓度对幼鼠星形胶质细胞存活的影响;SYTOXGreen荧光染色联合荧光酶标仪检测并分析Rapa对H2O2、ionomycin、deferorxamine等诱导剂作用一定时间内细胞存活的影响;Di OC6(3)染色分析Rapa在H2O2氧化应激损伤条件下对星形胶质细胞线粒体膜电势的影响;分别采用H2DCFDA和Mito SOXTMRed荧光染色联合流式细胞术检测Rapa预适应对星形胶质细胞ROS生成以及线粒体内ROS含量的影响。结果:Rapa能促进H2O2以及ionomycin联合deferorxamine损伤作用下的星形胶质细胞的存活,对线粒体膜电势有保护作用,可降低H2O2损伤作用下星形胶质细胞ROS的产生并可以维持胞内线粒体ROS的含量在较低水平。结论:Rapa能够减少细胞内ROS的生成量并降低胞内线粒体内ROS水平;能够减轻H2O2对细胞线粒体膜的损伤破坏,维护线粒体膜电势的稳定性,进而对氧化应激损伤介导细胞凋亡有一定的抑制作用。

透射比浊法与散射比浊法检则ApoA1,ApoB的方法比较

目的：比较透射比浊法与散射比浊法测定载脂蛋白A（ApeA1）和载脂蛋白B（ApoB）的优劣性。方法：使用BeckmanCX7全自动生化分析仪（透射比浊法ITA）和BeckmanARRA360蛋白测定系统（散射比浊法INA）。结果：本文从线性范围，精密度，准确性，差异性，抗干扰能力方面作了比较。结论：散射比浊法比速射比浊法好，但透射比浊法值得推广应用。

诗词四首

长安雅集与会喜吟；水调歌头·谒秦始皇陵；马嵬吟；重读《长恨歌》偶题。

诗二首

看世界杯 热闹人间六月天， 足球杯赛南非传。 球迷相聚添豪兴， 啤酒高谈是盛筵。

诗三首

桂林口占 有山皆画境，无水不澄清。 山水流连处，逍遥示性情。