单倍体联合脐血造血干细胞移植治疗范可尼贫血1例

范可尼贫血（fanconi’s anemia，FA）是一种以进行性骨髓造血功能衰竭（bone marrow failure，BMF）、先天性发育异常和易患肿瘤性疾病的倾向为特征的疾病，只有依靠丝裂霉素C（mltomycin C，MMC）或二氧环丁烷诱导的染色体断裂实验方能与再生障碍性贫血（aplastic anemia，AA）等疾病相鉴别。

CD19 CAR-T细胞治疗:1例难治性原发性中枢神经系统弥漫大B细胞淋巴瘤的疗效分析

原发性中枢神经系统淋巴瘤(primary central nervous system lymphoma,PCNSL)是罕见类型的结外非霍奇金淋巴瘤,病灶只累及中枢神经系统。既往研究显示,嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T,CAR-T)细胞治疗可改善PCNSL患者的缓解深度和生存。CD19 CAR-T细胞疗法已成功治疗多种B细胞谱系恶性肿瘤,但其在中枢神经系统(central nervous system,CNS)表现的B细胞非霍奇金淋巴瘤中的应用尚有限,主要因为潜在的毒性。本文报告1例接受CD19 CAR-T细胞治疗后未出现任何级别的细胞因子释放综合征和免疫效应细胞相关神经毒性综合征且获完全缓解的难治性PCNSL患者,以期为该类患者的临床治疗提供借鉴。

分子靶向药物联合CAR-T细胞疗法在淋巴瘤治疗中的应用进展

嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T,CAR-T)细胞疗法在淋巴瘤中的疗效得到了肯定,但部分患者存在耐药,安全性等方面问题也影响其预后。分子靶向药物可以调节肿瘤微环境、增强肿瘤特异性抗原表达能力,有助于减少抗原逃逸的发生。部分小分子靶向药物可以通过调节抗凋亡和促凋亡信号传导之间的平衡,诱导肿瘤细胞死亡;还可以调节免疫抑制和免疫激活信号通路提高CAR-T细胞疗法的抗肿瘤功效,逆转CAR-T细胞的耗竭表型,增强其抗肿瘤效果。分子靶向药物与CAR-T细胞在淋巴瘤中联合使用的疗效、安全性及发挥作用的机制也越来越受关注。本文就CAR-T细胞疗法联合常用分子靶向药物在淋巴瘤治疗中的研究进展进行综述。

CD34+自体干细胞移植联合DC-CIK细胞免疫治疗复发难治性淋巴瘤疗效观察

目的研究CD34+自体造血干细胞移植联合树突细胞-细胞因子诱导杀伤细胞(DC-CIK)免疫治疗复发难治性淋巴瘤的临床疗效及安全性。方法选择2011年1月—2014年5月48例复发难治性淋巴瘤患者作为研究对象,按临床治疗方法分为对照组和观察组,每组24例,对照组在淋巴瘤常规治疗基础上加用CD34+自体干细胞移植治疗,观察组在对照组基础上联合DC-CIK细胞免疫治疗。治疗结束后比较评价两组临床疗效、不良反应以及预后情况。结果观察组临床总有效率明显高于对照组(P<0.05)。两组治疗期间不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组平均生存时间20个月,中位生存时间18个月;对照组平均生存时间16个月,中位生存时间14个月。观察组总体生存率明显高于对照组(P<0.05)。结论 CD34+自体造血干细胞移植联合DC-CIK细胞免疫治疗复发难治性淋巴瘤患者可取得较好的临床疗效,安全性高,不良反应少,且预后效果尚可。

以噬血细胞综合征为首发表现的黑热病1例

1临床资料患者,男性,24岁,武警黄金部队战士,于2011年4月进入西藏地区进行矿产勘察工作,因＂发热12 d,神志淡漠4 d＂于2011年8月7日急诊入住我院呼吸内科ICU病房。患者于入院前12 d受凉后出现发热,体温39～40℃,头痛、腹泻（黄色稀便2～3次/d）,无明显咳嗽、咳痰,

DC-CIK细胞联合内分泌治疗骨髓侵润性前列腺癌初探

目的探讨DC-CIK细胞联合内分泌治疗骨髓侵润性前列腺癌的疗效及副作用。方法对3例骨髓侵润的前列腺癌患者采用DC-CIK细胞输注联合内分泌治疗。结果 3例患者经治疗后临床症状好转,PSA下降,随访8～13个月,病情稳定。结论 DC-CIK细胞联合内分泌治疗骨髓侵润的前列腺癌安全有效。

bFGF预防小鼠半相合造血干细胞移植后a-GvHD的实验研究

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对半相合造血干细胞移植(HSCT)小鼠急性移植物抗宿主病(a-GVHD)的影响及其可能机制。方法建立小鼠半相合HSCT模型,随机分为分为实验1组(n=12):每只小鼠按100μg/kg输注bFGF;实验2组(n=12):每只小鼠按20μg/kg输注bFGF;空白对照组:半相合HSCT移植后不作任何处理。观察各组小鼠的a-GVHD临床表现及生存时间,移植后14 d对小鼠皮肤、肝脏和小肠进行病理分析,并检测小鼠间充质干细胞(MSC)变化情况。结果和对照组相比,实验组的GVHD明显减轻。Kaplan-Meier生存曲线显示实验1组的生存率明显高于实验2组和对照组(P<0.05)。病理切片显示实验1、2组的GVHD严重程度显著轻于对照组,实验1组骨髓间充质干细胞增殖良好。结论 bFGF对半相合HSCT小鼠的a-GVHD具有一定的预防作用。

噬血细胞综合征21例临床分析

目的探讨噬血细胞综合征(HPS)的临床特点。方法回顾性分析21例噬血细胞综合征患者的病因、临床表现、实验室检查指标、治疗方案及治疗转归情况。结果 21例HPS中感染12例(57.1%),其中EBV感染6例,血液系统恶性肿瘤3例(14.2%),经过HLH-2004方案为基础的治疗后,死亡9例(42.8%),其中早期死亡6例,3个月后死亡3例。结论 HPS病因多样,预后差,需要早诊断,早治疗。

负载自体肿瘤抗原的DC-CIK细胞联合自体造血干细胞移植治疗难治性淋巴瘤的临床研究

目地观察负载自体肿瘤抗原的DC-CIK细胞联合自体造血干细胞移植治疗难治性淋巴瘤的疗效。方法选取难治性淋巴瘤35例,采用MAC预处理方案,用自体淋巴瘤抗原致敏DC-CIK细胞,于移植预处理后5—10d,将DC-CIK细胞回输给患者。结果35例难治性淋巴瘤中,29例完全缓解(82.86%),4例部分缓解(14.43%),移植过程中死亡2例(5.71%)(均死于严重混合性感染)。所有完全缓解和部分缓解病例均随访3—49个月:4名部分缓解患者分别于移植后3、6、10、13个月后病情进展死亡;完全缓解患者中有3人于移植后11、17、20个月再次复发死亡;现存活26例。结论负载自体肿瘤抗原的DC-CIK细胞联合自体造血干细胞移植治疗难治性淋巴瘤高于单纯自体外周血造血干细胞的疗效,且无明显毒副作用。

荷载自体白血病抗原的DC-CIK细胞预防急性髓细胞性白血病自体造血干细胞移植后复发的临床研究

目的探讨荷载自体白血病抗原的树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞(DC-CIK)细胞对于预防急性髓细胞性白血病(AML)自体造血干细胞移植后复发的作用。方法实验组:选取初治AML CR1期、自愿接受自体造血干细胞移植联合荷载自体白血病抗原的DC-CIK细胞治疗的患者32名,采用常规预处理方案,于移植+5—+10 d将荷载自体白血病抗原的DC-CIK细胞回输患者,采用流式细胞术、ELISA等方法测定DC-CIK细胞各指标情况;对照组:选取同期未采用DC-CIK细胞治疗的AML CR1期移植患者21名;观察、比较2组患者造血恢复情况、移植相关不良反应,评估3年总生存率。结果实验组患者CIK经荷载自体白血病抗原的DC致敏后,CD3+CD8+和CD3+CD56+细胞比例分别为(80.1±3.3)%和(37.1±4.5)%,较对照组[(56.1±3.8)%和(18.1±3.1)%]均有所上调(P<0.05),分泌IFN-γ的水平为(3 985.4±223.1)pg/ml,较对照组[(1 688.5±162.1)pg/ml]明显升高(P<0.05),除一过性发热、寒颤外,无其他不良反应。造血恢复情况、移植相关不良反应2组差异无统计学意义,自体造血干细胞移植后经DC-CIK细胞输注,3年的总生存率为75.0%(24/32),较同期未使用荷载白血病抗原DC-CIK细胞的自体造血干细胞移植患者的生存率明显提高。结论荷载自体白血病抗原的DC-CIK细胞用于预防AML自体造血干细胞移植后复发是安全和有效的。

急性白血病患者血清IFN-γ、TGF-β、IL-6和IL-17水平及临床意义

目的研究急性白血病患者血清干扰素-γ(IFN-γ)、转化生长因子-β(TGF-β)、白介素-6(IL-6)和IL-17表达情况以及临床意义。方法选取2014年4月—2016年3月收治的96例急性白血病患者为观察对象,按FAB分型标准分为急性淋巴细胞白血病(ALL)组35例,急性髓细胞白血病(AML)组61例。另选同期健康体检者96例为对照组。采用酶联免疫吸附法检测急性白血病患者治疗前后及对照组血清IFN-γ、TGF-β、IL-6和IL-17的表达情况。结果治疗前,ALL组与AML组血清IFN-γ水平明显低于对照组(P<0.05),TGF-β、IL-6、IL-17水平明显高于对照组(P<0.05)。ALL组血清IFN-γ与IL-6水平高于AML组(P<0.05)。ALL组和AML组治疗后,完全缓解患者血清IFN-γ水平高于未缓解患者(P<0.05),TGF-β、IL-6和IL-17水平低于未缓解患者(P<0.05)。ALL组和AML组中,IFN-γ与TGF-β、IL-6和IL-17呈负相关(P<0.05),TGF-β与IL-6和IL-17呈正相关(P<0.05),IL-6与IL-17呈正相关(P<0.05)。结论血清IFN-γ、TGF-β、IL-6和IL-17与急性白血病的发生、发展有关,可作为临床诊断急性白血病与评价其预后的重要指标。

荷载自体白血病抗原的HLA半相合DC-CIK联合CAG方案治疗老年AML

目的观察荷载自体白血病抗原的HLA半相合树突状细胞．细胞因子诱导的杀伤细胞（DC．CIK）联合CAG方案治疗老年急性髓系白血病（AML）的安全性和有效性。方法选取老年AML124例，采用化疗CAG方案，其中65例CAG方案化疗后输注荷载自体白血病抗原的HLA半相合DC．CIK细胞作为细胞组，其余59侧单纯使用CAG方案化疗作为对照组。对2组中达到完全和部分缓解的患者均按各自的原方案巩固治疗，半年内每2个月1次、半年后每3个月1次、1年以上每半年1次，并对其跟踪随访。结果所有124名患者均完成了2个以上的疗程，细胞组：65例中完全缓解（CR）54例（83．08％）、部分缓解（PR）7例（10．77％）、未缓解（NR）4例（6．15％），总有效率93．85％；对照组：59例中完全缓解34例（57．63％）、部分缓解10例（16．95％）、未缓解15例（25．42％），总有效率74．58％。巩固治疗实施后细胞组、已随访6—53个月，存活〉12个月者32例、〉24个月者16侧；对照组已随访7～31个月，存活〉12个月者22例、〉24个月者4例，使用Kaplan-Meier分析两组总生存率有统计学差异（P〈0．05）。

化疗联合半相合供者淋巴细胞输注治疗难治性非霍奇金淋巴瘤实验及临床研究

目的观察化学治疗联合有血缘关系HLA半相合淋巴细胞输注治疗难治性非霍奇金淋巴瘤的安全性和有效性。方法通过测定半相合供者淋巴细胞与患者淋巴瘤细胞共培养后淋巴瘤细胞的凋亡率,确定HLA半相合供体淋巴细胞体外抗淋巴瘤细胞的有效性。选取难治性非霍奇金淋巴瘤24例,在常规化疗后,输注有血缘关系HLA半相合淋巴细胞,对完成两个联合疗程的患者进行评价。结果淋巴瘤细胞培养过程中加入HLA半相合供体淋巴细胞可促进淋巴瘤细胞凋亡。24例共完成47个疗程的联合治疗,19例完成两个疗程以上,13例患者完全缓解,中位随访时间18个月,7例处于无病生存状态。半相合淋巴细胞输注后,低度发热5例,轻度皮肤潮红伴散在皮疹3例,对症处理后消失。结论常规化疗联合有血缘关系HLA半相合淋巴细胞输注治疗安全有效。

EB病毒-细胞毒性T细胞免疫治疗改善EB病毒相关非霍奇金淋巴瘤化疗效果的实验研究观察

目的探讨EB病毒(EBV)特异性细胞毒性T细胞(CTL)免疫治疗对EBV相关非霍奇金淋巴瘤(NHL)化疗效果的影响及机制。方法通过细胞学实验成功诱导并扩增出大量的EBV特异性CTL;建立人EBV相关NHL的Balb/c裸雌鼠动物模型,设单纯免疫(EBV-CTL)治疗组、单纯化疗(CHOP)组、免疫治疗联合化疗疫(EBV-CTL+CHOP)治疗组以及空白对照组,5只/组,观察各组动物肿瘤生长情况;治疗结束后剥离肿瘤组织检测瘤内免疫细胞变化情况。结果体外杀伤实验显示伴随效靶比的增加,EBV-CTL杀伤能力逐渐增大:效靶比例分别在2.5∶1、5.0∶1与、10∶1及20∶1时,杀伤效率(%)分别为9.41±1.23、19.45±3.54、50.34±6.77和55.26±7.21(P<0.01);动物实验显示自免疫治疗d3起,与对照组相比,3组实验组抑制淋巴瘤生长率(%)分别为28.57、57.9、76.7(P<0.01)。进一步检测肿瘤相关免疫微环境实验发现,治疗后肿瘤内浸润性CTL及巨噬细胞(TIM)平均比率(%),EBV-CTL+CHOP组、EBV-CTL组、CHOP组及空白对照组分别为13.65±1.48、4.33%±1.04%,10.24±1.2%、3.82±0.54,6.83±0.16、0.95±0.07,6.32±0.18、1.96±0.24(P<0.05)。结论 EBV特异性CTL可能通过激活TIM增殖而间接促进肿瘤免疫应答。EBV-CTL免疫治疗能有效改善EBV相关NHL化疗疗效,或对EBV相关NHL的治疗起到一定指导作用。

异基因造血干细胞移植术治疗自体造血干细胞移植术后复发的恶性淋巴瘤17例效果分析

目的观察异基因造血干细胞移植治疗自体造血干细胞移植后复发的恶性淋巴瘤的临床效果。方法本科2000-2011年采用异基因亲缘造血干细胞移植术治疗自体造血干细胞移植术后复发的恶性淋巴瘤患者17例,HLA配型全相合(6/6相合)10例,5/6相合5例,4/6相合2例。预处理方案采用环磷酰胺120 mg/kg分2 d静滴,马利兰12～14 mg/kg分4 d口服,氟达拉滨30 mg/m2×5 d。全相合供体采用CsA+MTX+MMF预防移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD),不全相合供体采用ATG+CsA+MTX+MMF预防GVHD。移植物均为外周血造血干细胞加骨髓。结果 17例患者均获造血重建,发生急性GVHD 9例(52.94%),发生慢性GVHD 11例(64.71%)。随访12～120个月,6例患者分别于移植后8、11、15、19、21、34个月疾病复发而死亡,3例患者死于GVHD合并感染,余8例健康存活。结论异基因造血干细胞移植是治疗自体造血干细胞移植后复发的恶性淋巴瘤患者的有效方法。

纯化的自体外周血造血干细胞移植治疗难治性幼年型类风湿性关节炎的初步研究

目的探索采用纯化的自体外周血造血干细胞移植治疗难治性幼年型类风湿性关节炎的临床效果。方法对3例难治性幼年型类风湿性关节炎患者进行纯化的CD34+细胞移植,动员得到外周血单个核细胞分别为8.23×108/kg、11.94×108/kg和9.32×108/kg;经CliniMACS CD34+细胞分选仪分选后得到CD34+细胞数分别为7.32×106/kg、8.75×106/kg和5.37×106/kg。采用BEAM+ATG预处理方案。结果发热的2例患者体温均降至正常,大关节肿痛均完全消失,四肢活动自如,血沉、C反应蛋白、类风湿因子各项指标正常,随访中疾病仍呈稳定状态。结论采用纯化的自体外周血造血干细胞移植可使患者造血功能得到较快重建,近期临床症状改善,是有效和安全的。

miR-181a-5p对T淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖和凋亡的影响

目的探究miR-181a-5p对T淋巴细胞白血病(T lymphocytic leukemia, TLL)Jurkat细胞增殖及凋亡的影响。方法采用miR-181a-5p mimic、pc-B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma 2, BCL-2)不同组合方式转染Jurkat细胞,并将细胞分为Jurkat组、mimic-scramble组、miR-181a mimic组、pc-BCL-2组和mimic+pc-BCL-2组。RT-PCR检测miR-181a-5p的表达及pc-BCL-2 mRNA水平,Western Blot检测BCL-2蛋白表达,CCK8和流式细胞学检测细胞增殖和凋亡情况。结果与mimic-scramble组比较,miR-181a mimic组miR-181a-5p表达水平显著升高,BCL-2 mRNA水平下降,差异有统计学意义(P<0.01)。与Jurkat组比较,miR-181a mimic组BCL-2蛋白表达量及细胞增殖倍数降低,细胞凋亡率明显升高,pc-BCL-2组BCL-2蛋白表达量及细胞增殖倍数升高,细胞凋亡率降低,差异有统计学意义(P<0.01);与miR-181a mimic组比较,mimic+pc-BCL-2组BCL-2蛋白表达量及细胞增殖倍数升高,细胞凋亡率显著下降,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 miR-181a-5p通过靶向抑制BCL-2表达以抑制TLL细胞系Jurkat细胞增殖、诱导细胞凋亡。

Flud+Bu+CCNU+Ara-C预处理单倍体造血干细胞移植治疗白血病13例的疗效

目的 初步探讨使用＂氟达拉滨（Flud）＋马利兰（Bu）＋司莫司汀（CCNU）＋阿糖胞苷（Ara-C）＂预处理方案行异基因造血干细胞移植治疗白血病的临床疗效.方法 13例患者中,慢性粒细胞白血病（CML）5例,急性淋巴细胞白血病5例,急性非淋巴细胞白血病3例.预处理方案为Flud 30 mg/（m2·d）×4 d,Bu 1 mg/（kg·次）×4 d,CCNU 250 mg/m2×1 d,Ara-C 2-4 mg/m2×2 d.供者均为亲缘HLA配型半相合;输注外周血造血干细胞有核细胞数（3.5-4.5）×108/kg受体体重（中位数为4×108/kg）,骨髓有核细胞数（3.5~4.5）×108/kg受体体重（中位数为4×108/kg受体体重）.采用＂ATG＋环孢霉素＋短疗程甲氨喋呤＋晓悉＂预防移植物抗宿主病（GVHD）.前列腺素E1（PGE1）＋低分子肝素钠＋丹参预防肝静脉闭塞症.结果 骨髓移植后全部患者重建造血,移植后骨髓嵌合及基因检测证实患者骨髓中造血细胞为完全供者细胞植入.结论 Flud＋Bu＋CCNU＋Ara-C预处理方案移植治疗白血病疗效较好,安全可行,为无HLA完全相合供者白血病患者提供了有效的治疗手段.

非典型急性白血病九例误漏诊临床分析

目的探讨非典型急性白血病(AL)的误漏诊原因,提高诊治水平。方法对我院2008年1月—2016年5月收治的9例以非典型临床症状为首发表现的AL的临床资料进行回顾性分析。结果本组误漏诊时间为(12.20±8.36)d,误诊为粒细胞缺乏症2例,败血症、血小板减少性紫癜、风湿热伴风湿性节炎各1例;漏诊4例,其中诊断为消化性溃疡伴荨麻疹2例,慢性胃炎伴荨麻疹、钩虫病伴继发性贫血各1例。所有患者均行骨髓穿刺细胞学检查,确诊为急性淋巴细胞白血病4例,急性嗜碱粒细胞白血病3例,急性粒细胞白血病2例。2例行骨髓移植治疗,7例行化疗及对症治疗,均病情好转出院。随访3年,病情平稳,未见复发。结论遇及以不典型症状为首发表现的血液系统异常的患者时,要考虑到AL可能,及时行相关实验室检查,争取早诊断、早治疗,改善预后,降低误漏诊率。