下丘脑Kiss1系统在产前应激诱导男性后代生殖功能异常中的潜在作用

下丘脑Kiss1系统是下丘脑-垂体-性腺轴中的一个重要组成部分,其通过促进促性腺激素释放激素的分泌,来调节生殖功能。最近研究发现,产前应激对男性后代生殖功能具有影响。然而,产前应激诱导的男性后代生殖功能下降的机制仍未阐明。通过对下丘脑Kiss1系统的治疗可能改善产前应激,诱导男性后代的生殖功能,该综述将讨论下丘脑Kiss1系统在产前应激诱导男性后代生殖功能异常中的潜在作用。

疏肝补肾毓麟汤通过Keap1/Nrf2/GPX4通路抑制睾丸细胞铁死亡改善肝郁肾虚型少弱精子症小鼠的精子质量

目的探讨疏肝补肾毓麟汤改善肝郁肾虚型少弱精子症小鼠生精功能和精子质量的作用及其可能机制。方法60只雄性KM小鼠,随机分为空白组、模型组、疏肝补肾毓麟汤高、中、低剂量组和司他丁-1(Ferrostatin-1,Fer-1)组(Fer-1是铁死亡抑制剂)。除空白组外,其余组以1.25 g·kg^(-1)腺嘌呤灌胃(Intragastrical administration,ig.)+慢性束缚刺激构建肝郁肾虚型少弱精子症小鼠模型。给予相应药物干预后:精密天平称取小鼠体质量、睾丸质量、附睾质量计算睾丸指数、附睾指数;苏木素-伊红(Hematoxylin-eosin staining,HE)染色观察睾丸组织病理变化并对睾丸生精功能进行评分;全自动精子分析仪检测精子密度和活动率;苯胺蓝染色法观察精子成熟度;布鲁斯蓝染色法观察睾丸组织铁沉积;免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)检测睾丸组织谷胱甘肽过氧化物酶4(Glutathione peroxidase 4,GPX4)、溶质载体家族7成员11(Recombinant Solute Carrier Family 7 Member 11,SLC7A11)蛋白表达;生化法检测睾丸组织超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量;蛋白免疫印迹法(Western Blot,WB)检测睾丸组织Kelch-样ECH相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein-1,Keap1)、核因子E2相关因子2(Nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)、GPX4、SLC7A11蛋白表达。结果与空白组比较,模型组小鼠睾丸指数、附睾指数、睾丸生精功能、精子密度及活动率、精子成熟度均显著下降(P<0.05,P<0.01);经疏肝补肾毓麟汤及Fer-1干预后,上述指标均有显著改善(P<0.05,P<0.01),且睾丸组织铁沉积显著降低,Keap1表达显著降低,Nrf2、SLC7A11、GPX4表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论疏肝补肾毓麟汤能明显改善肝郁肾虚型少弱精子症,其机制可能与调控Keap1/Nrf2/GPX4信号通路抑制睾丸细胞铁死亡有关。

疏肝补肾毓麟汤通过PINK1/Parkin通路调控自噬流提高精子活力的研究

目的 明确疏肝补肾毓麟汤畅通自噬流,通过PTEN诱导假定激酶1(PTEN-induced putative kinase 1,PINK1)/帕金蛋白(Parkin)通路,调节线粒体功能,提高精子活力的作用机制。方法 通过随机数字表法将SD大鼠分为正常组、模型组、疏肝补肾毓麟汤高剂量组、疏肝补肾毓麟汤低剂量组、五子衍宗丸对照组。采用腺嘌呤(0.05 g·kg^(-1))灌胃14 d,复制少弱精症大鼠模型。正常组与模型组给予等容0.9%氯化钠溶液,疏肝补肾毓麟汤高、低剂量组给药32.4 g/(kg·d)、8.1 g/(kg·d),五子衍宗丸对照组给药2.6 g/(kg·d)。全自动精子分析仪检测精子活力,透射电镜观察睾丸组织中线粒体自噬的超微结构变化、JC-1线粒体膜电位检测试剂盒与流式细胞仪检测线粒体膜电位水平变化、免疫荧光标记线粒体外膜易位酶20(Translocase of the outer membrane ofmitochondrion 20,TOMM20)与微管相关蛋白1轻链3II(Microtubule-associated protein 1 light chain 3II,LC3II)的共定位、PCR与Western Blot检测睾丸组织PINK1、Parkin、选择性自噬接头蛋白62(Selective autophagy adaptor protein 62,P62)、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3II/I)的表达。结果 与正常组相比,模型组的精子活动力下降(P<0.05),线粒体膜电位比例下降(P<0.05),线粒体超微结构出现核周聚集,嵴受损或丢失,除了碎裂外,还有暗基质,以及外膜不规则,并且受损的线粒体与包括线粒体吞噬体在内的线粒体空泡相关,免疫双染中发现LC3II的存在量明显增多,LC3II与TOMM20的双重标记也增加,自噬相关指标PINK1、Parkin、LC3II/I、P62的基因与蛋白表达增加(P<0.05)。与模型组相比,疏肝补肾毓麟汤高剂量组、疏肝补肾毓麟汤低剂量组、对照组的精子活动力升高(P<0.05),线粒体膜电位比例增加(P<0.05),超微结构下正常形态的线粒体比例明显增多,且线粒体溶酶体的数量也减少,免疫双染中发现LC3II的存在量明显减少,LC3II与TOMM20的双重标记减少,自噬相关指标PINK1、Parkin、LC3II/I、P62的基因与蛋白表达减少(P<0.05)。与对照组相比,高剂量组的线粒体膜电位比例增加(P<0.05);疏肝补肾毓麟汤高剂量组、疏肝补肾毓麟汤低剂量组超微结构下正常形态的线粒体比例明显增多,且线粒体溶酶体的数量也减少,免疫双染中发现LC3II的存在量明显减少,LC3II与TOMM20的双重标记减少,自噬相关指标PINK1、Parkin、LC3II/I、P62的基因与蛋白表达减少(P<0.05)。结论 疏肝补肾毓麟汤能改善精子活力低下症模型大鼠的精子活动力,可能是通过提高模型大鼠的线粒体膜电位水平,保护线粒体功能,下调PINK1、Parkin、LC3 II/I、P62的表达,并畅通自噬流,减轻线粒体的过度自噬来发挥作用。

医学院校环境生物气溶胶分布特征研究

目的生物气溶胶近年受到广泛关注,本研究拟对湖北中医药大学校园内生物气溶胶以及气载抗性基因的分布情况进行本底调查及健康风险评估,为中医药相关生物气溶胶的研究提供新的参考。方法采用自研生物气溶胶收集器,对中医院校中5个典型环境中的生物气溶胶收集后进行高通量测序,进而对微生物的分布特征,多样性、相关性进行分析,了解对应环境中气溶胶微生物的种类以及相对丰度,分析种属相关性。在此基础上,对气载抗性基因进行检测,统计不同环境中的阳性率。结果研究区间采集样本显示,在门分类水平上,中医院校内优势菌群分别为变形菌门(proteobacteria)、放线菌门(actinobacteria)、厚壁菌门(firmicutes)和拟杆菌门(bacteroidetes),不同样点优势菌群存在统计差异。寡养单胞菌属(stenotrophomonas)丰度最高,各样点优势菌属及含量差异显著。同期抗性基因检测结果显示,四环素抗性基因与磺胺类抗性基因为样本环境中主要抗性基因。结论实验室中气载抗性基因具有最高的多样性,可能与日常实验中干预药物的广泛使用有关。

化痰活血通络方调节肠道菌群抑制脂多糖介导的炎症通路改善动脉粥样硬化小鼠血管损伤

目的从肠道菌群探讨化痰活血通络方治疗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的机制,为化痰活血通络方临床应用提供依据。方法25只雄性ApoE^(-/-)小鼠,高脂饲料喂养12周,制备AS模型;分为模型组、全方组、通络组、化痰组、他汀组各5只,另设C57BL/6J雄性小鼠5只作为正常组,各组相应药物灌胃治疗12周。采用16S rRNA扩增子测序检测肠道菌群;苏木素-伊红(HE)染色法观察小鼠主动脉及肠道的病理形态;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清中相关指标,Western blot法检测Toll样受体4(TLR4)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、核因子-κB(NF-κB)、白介素-6(IL-6)蛋白含量。结果与正常组相比,模型组中物种丰富度及多样性下降明显,厚壁菌门(Firmicutes)与拟杆菌门(Bacteroidetes)的比例(F/B)显著上升,血清中脂多糖(LPS)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),主动脉中TLR4、NLRP3、NF-κB、IL-6蛋白含量显著上升(P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量显著下降(P<0.01),小鼠主动脉斑块面积显著增加(P<0.01)并伴有大量泡沫细胞及炎性浸润,肠内有大片绒毛脱落与固有层裸露,与模型组相比全方组可显著增加物种丰富度及多样性,降低F/B的比例(P<0.01),提高有益菌的相对丰度,降低有害菌的相对丰度,在全方组与阿托伐他汀组中LPS、TG、TC、LDL-C、TLR4、NLRP3、NF-κB、IL-6均显著下降(P<0.01),HDL-C显著上升(P<0.01),并且可明显缓解上述病理改变。结论化痰活血通络方可改善肠道菌群的组成及脂代谢,减少LPS的产生,并通过TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路下调主动脉中炎性因子的表达,减少脂质的积累来缓解ApoE^(-/-)小鼠的动脉粥样硬化。

高尿酸血症对小鼠生精功能和精子质量的影响及其机制

目的 探讨高尿酸血症(HUA)通过氧化损伤诱导睾丸细胞凋亡、降低小鼠生精功能和精子质量的机制。方法 36只雄性昆明小鼠随机分6组:氧嗪酸钾1 d、7 d、14 d组,对照1 d、7 d、14 d组。其中氧嗪酸钾组腹腔注射氧嗪酸钾悬液600 mg/(kg·d)。生化法检测血清尿酸(UA)、肌酐(Cre)、尿素氮(BUN)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、黄嘌呤氧化酶(XO)和睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA);HE染色法观察肝、肾、睾丸组织病理学变化并对睾丸HE切片进行生精功能评分;全自动精子分析仪检测精子密度和活动率;蛋白免疫印迹法检测睾丸组织B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白X(Bax)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)的表达。结果 与各自对照组比较,氧嗪酸钾1 d组UA升高,氧嗪酸钾7 d组UA、BUN、AST、XO均升高,氧嗪酸钾14 d组UA、BUN、AST均升高(均P<0.01)。氧嗪酸钾7 d、14 d组肝、肾组织形态均有病变,氧嗪酸钾7 d组较14 d组轻微。与对照7 d组比较,氧嗪酸钾7 d组睾丸组织有明显病变,生精功能、精子密度和活动率降低(P<0.05),MDA含量升高,SOD、CAT活性降低(P<0.05),Bax、Caspase-3蛋白表达量及Bax/Bcl-2比例上升(P<0.05),Bcl-2蛋白表达量下降(P<0.05)。结论 HUA小鼠生精功能和精子质量降低,其机制可能为睾丸氧化损伤诱导细胞凋亡。

补肾固胎合剂通过调控PKA/CREB/AQP5通路改善流产模型大鼠子宫蜕膜组织及螺旋动脉血供的机制

目的观察补肾固胎合剂通过PKA-CREB信号通路对羟基脲片联合米非司酮诱导的流产大鼠模型子宫血供的作用及安胎机制。方法将SPF级SD大鼠以2∶1比例合笼,制备孕鼠60只,依其妊娠顺序随机分为6组,每组10只,分别为正常组、模型组、补肾固胎合低、中、高剂量剂组(0.5、1.0、2.0 g·kg^(-1)),及地屈孕酮组(3.02 mg·kg^(-1))。除正常组外,余下每组采用妊娠1-9天羟基脲灌胃(450.0 mg·kg^(-1)),妊娠第10天予米非司酮灌胃(4.0 mg·kg^(-1))复制流产模型。妊娠第1-9天,给予对应药物灌胃治疗,模型组和正常妊娠组予等量0.9%生理盐水灌胃。末次给药24 h取子宫蜕膜组织;苏木素-伊红(HE)染色观察子宫蜕膜组织中螺旋动脉管腔直径及管壁厚度;免疫组化学染色方法(IHC)检测血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在蜕膜组织中的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组孕鼠子宫蜕膜组织中磷酸化蛋白激酶A(Phosphorylated protein kinase A,p-PKA)、蛋白激酶A(Protein kinase A,PKA)、磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(Phosphorylated cyclic adenosine monophosphate response element binding protein,p-CREB)、cAMP反应元件结合蛋白(Cyclic Adenosine monophosphate response element binding protein,CREB)、水通道蛋白5(Aquaporin 5,AQP5)的蛋白表达情况;DNA断裂的原位末端标记(TUNEL)法检测蜕膜细胞凋亡水平。结果与模型组比较,螺旋动脉管壁厚度均高于其他组(P<0.05)管腔直径均低于其他组(P<0.05),VEGF蛋白表达量低于其他组(P<0.05);与模型组比较,补肾固胎合剂高、中、低剂量组和地屈孕酮组流产大鼠子宫蜕膜组织蜕膜细胞凋亡水平不同程度的减轻。补肾固胎合剂可上调流产大鼠子宫蜕膜组织p-PKA/PKA、p-CREB/CREB水平(P<0.01),促进AQP5蛋白的表达(P<0.01),具有统计学意义。结论补肾固胎合剂可以通过激活PKA、CREB磷酸化,上调AQP5表达水平,促进螺旋动脉生理性重铸以及VEGF的高表达,发挥改善流产大鼠子宫血供的作用。

补肾调和气血方对血瘀流产孕鼠早孕期子宫螺旋动脉重铸的影响

目的 探讨补肾调和气血方对血瘀流产孕鼠早孕期子宫螺旋动脉重铸的影响及其机制。方法 将妊娠SD大鼠随机分为正常组、模型组、阿司匹林组和补肾调和气血方低、中、高剂量组,每组10只。正常组和模型组自妊娠第1天起给予蒸馏水灌胃,阿司匹林组给予6.75 mg/kg阿司匹林灌胃,补肾调和气血方低、中、高剂量组分别给予6.525 g/kg、13.05 g/kg、26.10 g/kg补肾调和气血方灌胃,均1次/d,连续11 d;在此过程中,模型组、阿司匹林组和补肾调和气血方各剂量组孕鼠每日皮下注射盐酸肾上腺素,于妊娠第8天给予米非司酮灌胃。实验结束后,检测各组孕鼠子宫动脉血流搏动指数(PI)、阻力指数(RI)、收缩峰与舒张期末期血流速比(S/D),计算各组孕鼠流产率,检测血清血管内皮生长因子(VEGF)和可溶性类fms酪氨酸激酶-1(sFlt-1)水平。结果模型组孕鼠子宫动脉PI、RI、S/D和流产率、血清sFlt-1水平均明显高于正常组(P均<0.05),血清VEGF水平明显低于正常组(P<0.05);补肾调和气血方组孕鼠子宫动脉PI、RI、S/D和流产率、血清sFlt-1水平均明显低于模型组(P均<0.05),血清VEGF水平均明显高于模型组(P均<0.05);阿司匹林组孕鼠子宫动脉PI、RI、S/D明显低于模型组(P均<0.05)。结论 补肾调和气血方可能通过提高VEGF水平、降低sFlt-1水平促进子宫血管重铸,从而降低子宫动脉血流阻力,改善宫腔血流灌注而对早孕期血瘀流产大鼠发挥保胎作用。

恐伤孕鼠对其仔鼠长骨早期发育影响的研究

目的:根据肾主骨生长发育理论,研究先天肾虚影响长骨早期发育的情况,论证补肾填精法的作用。方法:采用模拟地震振动、光电刺激复合应激恐吓孕鼠造成子代先天肾虚。将孕鼠分为正常、模型、补肾3组,补肾组灌服左归丸浓缩剂。动态检测出生后仔鼠20 d内平均身长、5周内股骨平均长度、Micro CT检测股骨皮质骨及松质骨微结构参数、第5周股骨钙、磷、羟脯氨酸含量。结果:模型组仔鼠平均身长、股骨平均长度显著降低(P<0.05或P<0.01);各时间点模型组皮质骨厚度、外径周长、皮质骨面积、皮质骨密度减少;股骨矿物质、基质胶原含量减少。上述指标与另两组比较差异显著(P<0.05)。结论:先天肾虚可以影响长骨早期生长发育,出现骨量减少,成骨活性降低,皮质骨发育不良。中药补肾填精治疗,可有效改善先天肾虚仔鼠长骨早期发育不良。

弱精子症的中医健康管理模式初探

弱精子症(AS)病因复杂、病程绵长、迁延难愈,给男性的身心健康带来极其严重的危害。在诊治AS的过程中,引入中医健康管理的理念,有利于提高患者对该病的认知水平,加强医患间信息沟通,提高治疗效果。基于AS的临床特点,结合中医健康管理的服务模式,初步探讨该病在健康档案建立、健康状态辨识、疾病风险预警、健康干预、效果评价等流程中的具体实施方案,构建该病的中医健康管理框架,以改善现存的患者认知不够、疾病反复、迁延难愈、医患沟通障碍等问题,为患者康复创造有利条件。

肝司生殖浅析

人的生殖活动过程非常复杂,与人体各个脏腑都有密切关系。肝具有疏泄、藏血、调节血量的功能;肝气调达、肝血充足,则冲任得以协调,精气得以疏泄,宗筋得以荣养,女子则能胎孕,男子则能生育,从而调节和维持人的生殖机能,故肝司生殖。

肝气郁结对雄性大鼠精子质量影响的研究

目的:研究肝气郁结对雄性大鼠精子质量的影响,为临床从肝论治男性不育奠定一定的实验基础。方法:Wistar雄性大鼠30只随机分正常对照组、模型组、逍遥丸组,每组10只。采用"夹尾激怒法"复制大鼠肝气郁结模型,造模完成后各组给予相应的处理,观察各组大鼠睾丸和附睾脏器系数、精液参数、睾丸组织形态学等各项指标的变化。结果:与模型组比较,逍遥丸组大鼠精子数及精子活率显著升高(P<0.05,P<0.01),精子畸形率无显著性差异(P>0.05);光镜观察,逍遥丸组大鼠睾丸曲细精管形状规整,生精上皮细胞排列紧密,管腔内有生精细胞,与模型组比较有显著改善。结论:肝气郁结对模型大鼠精液参数、睾丸组织形态有一定影响。

不同肝气郁结动物模型行为学指标的对比研究

目的:比较几种常见肝郁动物模型的稳定性,重复性,为后续的基础研究提供合理的动物模型。方法:采用夹尾法、束缚筒及束缚架法造模,记录并分析大鼠行为变化,评价模型质量。结果:各模型组大鼠的糖水消耗量和糖水偏爱率显著降低,与正常组比较均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。束缚架组、束缚筒组大鼠不动时间明显延长及挣扎次数明显少于正常对照组,均有统计学意义(P<0.01)。束缚架组、束缚筒组旷场实验各行为指标与正常对照组比较均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:束缚架组、束缚筒组模型制备方法可行性较好。

番茄红素与枸杞协同增强小鼠免疫力的实验研究

目的观察番茄红素与枸杞对增强小鼠免疫功能的协同作用。方法昆明种小鼠随机分为4组:空白对照组、枸杞组、番茄红素组、番茄红素+枸杞组,每组10只。连续灌胃10d,测定小鼠免疫器官指数,碳廓清能力和迟发型变态反应,及血清IL-2水平。结果番茄红素+枸杞组免疫器官重量明显增加,碳廓清能力显著增加,迟发型变态应明显增加,血清IL-2水平明显增加,与空白组比较均有明显差异(P<0.05,P<0.01),并明显高于番茄红素和枸杞单味药的效果。结论番茄红素与枸杞对增强小鼠免疫功能具有协同作用。

亚麻籽油对脂代谢紊乱大鼠血脂及瘦素的影响

目的:观察亚麻籽油对脂代谢紊乱大鼠血脂水平及瘦素的影响。方法:雄性Wistar大鼠60只,随机分为正常对照组、模型对照组、亚麻籽油高、中、低及极低剂量组。正常对照组给予普通饲料喂养,其余各组喂饲高脂饲料,同时预防性给予亚麻籽油高、中、低及极低剂量灌胃给药,每日1次,连续30天,检测血清血脂及瘦素(LEP)水平。结果:与模型组比较,亚麻籽油高、中、低及极低剂量组大鼠血清TG含量显著降低(P<0.05);高、中剂量组TC含量显著降低(P<0.05);亚麻籽油高、中、低剂量及低剂量组大鼠血清HDL-C含量显著升高(P<0.05);亚麻籽油高剂量组大鼠血清瘦素含量明显降低(P<0.05)。结论:亚麻籽油具有降低脂代谢紊乱大鼠血脂、瘦素的作用。

肝气郁结对雄性大鼠精子质量的影响

目的：观察肝气郁结对雄性大鼠精子质量的影响，为临床从肝论治男性不育奠定一定的实验基础。方法：Wistar雄性大鼠40只，随机分正常组、模型组、五子衍宗丸组、逍遥丸组，每组10只。采用夹尾激怒法复制大鼠肝气郁结模型，造模完成后各组给予相应的处理，14天后观察各组大鼠睾丸和附睾脏器系数、精液参数、睾丸组织形态学等各项指标的变化。结果：与正常组比较，模型组大鼠精子数量、精子活率明显降低，精子畸形率明显升高；与模型组比较，逍遥丸组大鼠精子数量及精子活率显著升高（P〈0．05，P〈0．01），精子畸形率无显著性差异（P〉0．05）。光镜观察，模型组大鼠较正常组大鼠呈现生精细胞排列疏松，生精细胞脱离基底部，支持细胞和生精细胞核染色质凝聚成絮状，管腔内精子减少；逍遥丸组大鼠睾丸曲细精管形状规整，生精上皮细胞排列紧密，管腔内有生精细胞，与模型组比较有显著改善；五子衍宗丸组改善不明显。结论：肝气郁结对大鼠精液参数、睾丸组织形态有一定影响，逍遥丸对其有明显的干预作用。

中药红油膏对大鼠创面愈合影响的实验研究

目的探讨红油膏促进大鼠创面愈合的作用机制。方法实验大鼠经手术造成背部创面,随机分为2组,实验组用红油膏涂布创面,对照组采用龙珠软膏。观察大鼠创面愈合时间;动物造模后第3,5,7天,创面取分泌物检测巨噬细胞以及创面肉芽组织测定蛋白质含量;造模后第1,3,5,7天,测定血清C反应蛋白(CRP)含量。结果与对照组比较,实验组能缩短大鼠创面愈合时间;实验组在相应时间内的巨噬细胞数量高于或显著高于对照组(P<0.05或0.01);经红油膏治疗的大鼠皮肤创面,其组织中蛋白含量高于对照组(P<0.05或0.01);术后第1天,实验组与对照组CRP均升高,之后实验组CRP下降,较对照组有显著性差异(P<0.05或0.01)。结论红油膏能有效促进大鼠创面愈合。

外用红油膏促创面愈合抗炎作用的机理研究

目的:探讨中药红油膏促机体创面愈合的抗炎作用机理。方法:将实验小鼠分为3组,分别为红油膏组、龙珠软膏组及生理盐水组。各药膏组药物经稀释后与生理盐水分别进行小鼠腹腔注射,检测巨噬细胞激活率;通过检测吞噬鸡红细胞及吞噬酵母菌实验,衡量各组药液对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能;另将小鼠背部正中作皮肤机械创面,分别用红油膏和龙珠软膏涂布创面,每日换药至创面愈合,于造模后1、3、5、7天时取创面中心肉芽组织按ELISA法测TNF含量。结果:红油膏组较其他组在小鼠腹腔巨噬细胞激活率、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能方面均有显著性优势;红油膏较龙珠软膏在第1天的创面肉芽TNF含量无显著性差异,在第3、5、7天有不同程度差异。结论:红油膏具有较好的抗炎功效。

补肾活血方调节卵巢储备功能下降大鼠生殖激素水平的实验研究

目的探讨补肾活血方对卵巢储备功能下降(diminished ovarian reserve,DOR)大鼠生殖激素水平及卵巢组织形态的影响。方法采用Ataya法复制DOR大鼠模型。随机分为6组,每组10只。空白组不予处理;模型组给予蒸馏水;戊酸雌二醇组给予戊酸雌二醇水溶液(90μg/kg),补肾活血方低、中、高剂量组给予补肾活血方水煎剂(7.875、15.750、31.500 g/kg)。按大鼠体质量1 mL/100 g的容积灌胃,每日1次,共14 d。每天观察并记录各组大鼠一般生理反应。造模结束7 d后,从第8天开始,每日早上9点抓取各组大鼠,行阴道涂片观察。14 d治疗结束后,HE染色光镜下观察卵巢组织的形态,ELISA法检测血清中卵泡刺激素、黄体生成素、雌二醇及抗米勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)的含量。结果在增加DOR模型大鼠卵泡计数上,补肾活血方高剂量组优于戊酸雌二醇组(P<0.05),也优于补肾活血方低剂量组(P<0.05);在调节AMH上,补肾活血方高、中剂量组优于戊酸雌二醇组(P<0.05),更优于补肾活血方低剂量组(P<0.01)。结论补肾活血方可能通过增加DOR模型大鼠卵泡数、提高AMH水平、促进性激素分泌、调节动情周期,进而改善DOR模型大鼠的卵巢储备功能。

沉默Cx43基因对左归丸促MC3T3-E1细胞分化作用的影响

目的：研究沉默Cx43基因对左归丸含药血清促MC3T3-E1细胞分化作用的影响。方法：采用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默Cx43基因,将培养细胞分为正常对照A组、含药血清B组、基因沉默C组。细胞培养第3、5、7、9天进行ALP活性测定、第21天矿化结节茜素红染色,进行组间对比。结果：左归丸含药血清可以促进MC3T3-E1细胞的分化,与A组比较：ALP活性增强,其中第5、7、9天差异显著（P〈0.05）;茜素红染色面积增加（P〈0.01）。C组与B组比较：ALP活性降低,其中第7、9天差异显著（P〈0.05）;茜素红染色面积明显减少（P〈0.05）。结论：沉默细胞Cx43基因导致左归丸含药血清促MC3T3-E1细胞分化作用明显下降。