基于网络药理学及动物实验研究温肾宣痹汤抗骨质疏松的机制

目的应用网络药理学、分子对接及体内实验技术,预测以及验证温肾宣痹汤(wenshen xuanbi tang,WSXBT)抗骨质疏松(osteoporosis,OP)的作用机制。方法利用网络药理学筛选WSXBT治疗OP的关键成分及核心靶点,Metascape数据库对核心靶点进行基因本体论(gene ontology,GO)功能分析和京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,AutoDockTools 1.5.7软件进行分子对接模拟关键活性成分与核心靶点的结合活性。切除大鼠双侧卵巢建立OP大鼠模型,研究WSXBT对OP大鼠的药效及验证相关靶点通路。酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中OPG、PINP、RANKL水平,生物力学测试仪测定大鼠股骨生物力学,Micro-CT检测股骨骨密度,进而通过Western blot法检测PI3K和Akt的蛋白表达水平。结果筛选出WSXBT活性成分156个,涉及229个潜在作用靶点,筛选核心靶点23个,共涉及145条信号通路;分子对接结果显示,槲皮素、异补骨脂黄酮、β-谷甾醇等关键成分与PIK3R1、AKT1核心靶点均拥有良好的结合能力。体内实验结果表明,WSXBT可明显升高OP大鼠骨密度,改善OP大鼠骨组织微结构,提高大鼠股骨生物力学,增加大鼠PINP表达及OPG/RANKL比值,Western blot结果显示,WSXBT可明显升高p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值。结论WSXBT可能通过PI3K/Akt信号通路及升高OPG/RANKL比值改善绝经后OP大鼠骨密度。

老年股骨颈骨折患者术后死亡的危险因素及预测列线图的构建

背景:针对不断增多的老年股骨颈骨折患者,提高关节置换后死亡风险的筛查能力并及时实施个性化干预方案,是改善患者术后状态、延长生存预期的关键。目的:探讨老年股骨颈骨折患者术后死亡的危险因素,并构建预测其死亡风险的列线图模型。方法:以2016年1月至2021年1月因股骨颈骨折于同一治疗组行关节置换的155例老年患者(≥65岁)为研究对象,将符合纳入标准的147例患者进行结果分析。收集可能影响患者术后死亡的临床资料,先后采用单因素与多因素Cox回归分析筛选与术后死亡相关的独立危险因素,并使用Rstudio软件构建列线图模型,并对模型进行验证。结果与结论:①年龄、虚弱度(年龄校正Charlson合并症评分)、术前活动状态、骨质疏松、术后血清白蛋白水平是老年股骨颈骨折患者术后死亡的5个独立危险因素(P<0.05);②根据多因素分析结果构建列线图模型,一致性指数为0.819(95%CI:0.771-0.868),受试者工作特征曲线分析显示1,3年死亡预测的曲线下面积分别为0.8543,0.7263,说明列线图具有良好区别度和预测能力;校准曲线与决策曲线分析也显示出模型良好的鉴别力和临床实用价值;③构建的列线图模型具有良好的诊断效能及准确度,可有效评估患者术后死亡风险。

老年股骨颈骨折全髋或半髋关节置换的中远期状态:倾向性评分匹配法评价

背景:关节置换是治疗老年移位性股骨颈骨折的主要手段,全髋关节置换与半髋关节置换的选择是目前具有较大争论的焦点。目的:基于倾向性评分匹配法对比直接前入路下全髋与半髋关节置换治疗老年移位性股骨颈骨折的中远期生存状态。方法:选择2016年1月至2021年1月收治的147例老年移位性股骨颈骨折患者(≥65岁),其中88例行全髋关节置换,59例行人工股骨头置换(半髋关节置换)。对于患者术前合并症采用年龄校正Charlson合并症评分表,计算患者虚弱度,并采用倾向性评分匹配法对两组患者进行1∶1匹配,比较匹配后两组患者的手术时间、出血量、术后住院时间、住院费用、营养指标、术后并发症、死亡率和术后生存时间,其中术后生存时间采用Kaplan-Meier生存分析。结果与结论:①倾向性评分匹配后,两组共有42对匹配成功,匹配后两组患者术前资料均衡可比(P>0.05);②与半髋关节置换组相比,全髋关节置换组手术时间(79.71 min vs.59.07 min,P<0.001)、出血量(839.64 mL vs.597.83 mL,P=0.001)、住院费用(56508.15元vs.41702.85元,P<0.001)明显增加,但全髋关节置换组死亡率低于半髋关节置换组(36%vs.57%,HR=0.44,95%CI:0.23-0.87,P=0.018),平均生存时间长于半髋关节置换组(59.4个月vs.43.7个月,P=0.024);③两组患者在术后住院时间、术前术后营养指标、术后整体并发症发生率上,差异均无显著性意义(P>0.05);但在术后疼痛方面,半髋关节置换组疼痛发生率明显高于全髋关节置换组(24%vs.7%,P=0.035);④整体来看,全髋关节置换具有更好的长期预后生存效果,但对于身体素质差的患者则更适合行半髋关节置换;同时,术后的疼痛可能很大程度上会对患者髋关节置换后的生活质量及存活时间产生影响。

固相萃取-高效液相色谱法检测油炸猪肉中丙烯酰胺

建立油炸猪肉中丙烯酰胺的固相萃取-高效液相色谱检测方法。油炸猪肉样品经正己烷脱脂,2 mol/L氯化钠溶液提取,乙酸乙酯萃取,固相萃取小柱净化后,以甲醇-水(5∶95,V/V)为流动相,Hypersi10DS2-C18色谱柱分离,内标法定性、定量分析丙烯酰胺。结果表明:丙烯酰胺的定性检出限为6 μg/kg,定量检出限为20 μg/kg,线性定量范围0.05~1.00 μg/m L,线性相关系数(R2)为0.999 8,本方法的加标回收率稳定在90%~92%范围,相对标准偏差小于3.5%。

补肾活血汤干预骨-血耦连改善大鼠激素性股骨头坏死的作用机制研究

目的:探讨补肾活血汤改善激素性股骨头坏死大鼠的作用机制。方法:64只雄性SD大鼠随机分成对照组、模型组、阳性药物组和补肾活血汤低、中、高药物组(简称低、中、高剂量组)。除对照组外,其余组别均建立激素性股骨头坏死疾病模型,药物组分别给予对应的药物及剂量干预8周,干预后收集大鼠股骨组织,采用micro-CT检测股骨形态;HE染色观察股骨头形态;Western blot、RT-qPCR检测BMP2、VEGFA、DLL4蛋白表达;免疫荧光检测股骨髓组织Osterix、vWF表达情况。结果:与对照组相比,模型组大鼠股骨内骨小梁紊乱,骨小梁面积比明显减小(P<0.05),空骨陷窝率明显增加(P<0.05),BMP2、VEGFα蛋白表达明显下调(P<0.05),DLL4蛋白表达明显上升(P<0.05),免疫荧光下可见骨髓中Osterix、vWF分泌减少;各治疗组骨小梁紊乱改善,除低剂量组外骨小梁面积比明显增大(P<0.05),空骨陷窝率明显增加(P<0.05),BMP2、VEGFα蛋白表达明显上调(P<0.05),DLL4蛋白表达明显下调(P<0.05);高剂量组免疫荧光中可见Osterix、vWF分泌较模型组明显增加。结论:补肾活血汤能促进激素性股骨头坏死大鼠股骨头内成骨、成血管分化,从而改善股骨头坏死病程。

乳制品中A1β-酪蛋白、A2β-酪蛋白含量的测定

本检测方法在已有检测方法资料的基础上,通过改变柱温和梯度洗脱条件,提高A1 β-酪蛋白和A2 β-酪蛋白的分离效果,以便更好的分析乳制品中A1 β-酪蛋白和A2 β-酪蛋白的含量。本检测方法使用盐酸胍、二硫苏糖醇使β-酪蛋白变性,流动相选择B(乙腈),A(0.1%三氟乙酸水溶液),流速0.5 mL/min,梯度洗脱,柱温50℃,反相色谱柱进行分离,紫外检测器214 nm检测。采用本方法可以较好地分离牛乳中的A1 β-酪蛋白和A2 β-酪蛋白,并且出峰时间稳定。A1 β-酪蛋白在0.16~1.65 mg/mL浓度范围内线性关系良好,回归方程y=1.25×10^(6)x-1.44×10^(5),R^(2)=0.9985,R=0.9992,回收率范围96.4%~105.0%,精密度小于2.0%;A2β-酪蛋白在0.34~3.35 mg/mL浓度范围内线性关系良好,回归方程y=3.16×10^(6)x-3.16×10^(5),R^(2)=0.9988,R=0.9994,三浓度水平加标回收率范围97.5%~105.0%,精密度小于2.0%。结果表明,方法操作简单、重现性好、准确度高,可为牛乳中A1 β-酪蛋白和A2 β-酪蛋白的进一步研究和应用作技术参考。

乳制品中A1β-酪蛋白、A2β-酪蛋白检测方法研究进展

随着消费者对A2β-酪蛋白的关注度提升,A2β-酪蛋白相关产品不断更新换代。A2β-酪蛋白常用检测方法有反相高效液相色谱法(RP-HPLC)、液相色谱-高分辨串联质谱法、毛细管区带电泳法、试剂盒检测法等。本文对β-酪蛋白遗传变体A1β-酪蛋白和原始形态A2β-酪蛋白的功能特点、检测方法、定量分析进行综述,说明检测方法的原理和试剂药品的作用机理,加强对A1β-酪蛋白、A2β-酪蛋白检测方法的改进与优化,为A2β-酪蛋白应用于功能性食品、婴幼儿配方食品提供理论依据。

动态对比增强核磁评价股骨头坏死微循环灌注的改变

背景:目前股骨头坏死血运的临床观察多使用数字减影血管造影技术,通过观察对比剂的进出情况评估股骨头营养血管的通畅与否。数字减影血管造影虽然能直观观察到股骨头营养血管,但不能对灌注情况进行量化。另外,股骨头塌陷与否与疾病预后密切相关,但对于围塌陷期股骨头内血运变化的研究较少。目的:比较股骨头坏死不同区域以及不同分期微循环灌注的差异,总结股骨头坏死微循环灌注特征改变,观察动态对比增强核磁在评估股骨头微循环灌注情况中的作用。方法:回顾性收集2022-02-16/09-01于江苏省中医院就诊的股骨头坏死37例(69髋)患者的临床资料,其中男29例,女8例;年龄(35.35±12.19)岁(18-65岁)。采用动态对比增强核磁扫描患者双侧股骨头及股骨近端,扫描过程中静脉注射钆特酸葡胺,扫描完成后使用Geniq软件进行数据后处理得到股骨头微循环灌注参数。在坏死区、修复反应区、大转子处绘制感兴趣区域,获得感兴趣区的时间-信号强度曲线并对其进行分类。使用配对t检验评估坏死区、修复反应区及大转子灌注参数之间的差异以及坏死不同分期股骨头灌注之间的差异;采用χ2检验评估坏死区、修复反应区及大转子时间-强度曲线分型的差异。结果与结论:(1)对比不同区域的灌注参数,坏死区增强信号强度峰值、曲线下面积、最大斜率、容积转移常数、血管外细胞外间隙容积分数小于大转子,差异有显著性意义(P<0.05),容积速率常数无明显差异(P>0.05);(2)修复反应区信号峰值、曲线下面积、最大斜率、容积转移常数、速率转移常数、血管外细胞外间隙比值大于坏死区及大转子,差异有显著性意义(P<0.05);(3)ARCOⅡ期坏死区信号峰值及最大斜率大于ARCOⅢ期,差异有显著性意义(P<0.05);曲线下面积、速率转移常数、容积转移常数、血管外细胞外间隙比值对比无明显差异(P>0.05);(4)ARCOⅡ期修复反应区信号峰值、曲线下面积、最大斜率、容积转移常数、速率转移常数、血管外细胞外间隙比值小于ARCOⅢ期,差异有显著性意义(P<0.05);(5)提示股骨头坏死区微循环灌注速度、血流量及毛细血管渗透性显著降低,修复反应区微循环灌注速度、血流量及血管渗透性较正常区域显著提高,随着塌陷的发生,坏死区血流灌注速度及血流量进一步降低,修复反应区的灌注得到增强。

直接前方入路全髋关节置换术中髋臼骨折1例并文献复习

直接前方入路(DAA)具有创伤小、肌肉保留完整、术后康复快等优势,被广泛地应用于全髋关节置换(THA)手术。DAA-THA术中髋臼骨折较为少见,完备的术前规划及精准的术中操作可有效避免其发生。该文报道了1例侧卧位DAA-THA术中髋臼骨折病例,并复习了相关文献。

高效液相色谱-可见光检测法测定奶粉中叶黄素

目的:研究了奶粉中叶黄素的高效液相色谱测定方法。本文作者改进了国标GB/T 23209-2008中规定的方法。同时作者也摸索了叶黄素添加剂的检测方法。方法:采用饱和盐溶液溶解样品,BHT丙酮提取叶黄素,通过梯度洗脱分离,用高效液相色谱可见光检测器检测。结果:线性方程为Y=640015X-2420.1,相关系数R2=0.9998。本方法回收率可达到95%～102%,相对标准偏差为3.28%,线性范围是0.1～1.0ug/mL,方法检出限为0.02mg/kg。结论:本方法操作简便,快速,准确,稳定,很适合于测定奶粉以及添加剂中叶黄素的含量。

基于候选基因关联分析的非创伤性股骨头坏死基因组学研究进展

非创伤性股骨头坏死(Non-Tramatic Osteonecrosis of the Femoral Head,NONFH)是股骨头坏死(Osteonecrosis of the Femoral Head,OFH)按病因学分类的一个亚型,也是临床最常见的ONFH类型。引发NONFH的危险因素包括皮质内固醇使用、酗酒、减压病、镰刀细胞贫血等;。但一些因风湿免疫疾病而长期服用激素的患者却终生没有出现NONFH,而一些仅接受短期激素治疗的患者却罹患该疾病。

基于“三柱结构”的中日友好医院分型L2型及L3型股骨头坏死标本骨微结构及病理学研究

目的 通过分析中日友好医院(CJFH)分型L2及L3型股骨头坏死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH)标本的外侧柱、中间柱、内侧柱在骨小梁等骨微结构、细胞凋亡表型上的异同,对ONFH“三柱结构”进行量化,并为股骨颈基底部旋转截骨术治疗ONFH提供研究支持。方法 以2020年4月—2021年2月16例(16髋)CJFH分型L2型及L3型ONFH患者行人工全髋关节置换术后产生的废弃股骨头标本为研究对象。首先使用Micro-CT三维分割股骨头“三柱结构”,分析外侧柱、中间柱、内侧柱结构中骨体积分数(bone volume to total volume,BV/TV)、骨表面积骨体积比(bone surface area to bone volume ratio,BS/BV)、骨小梁分离度(trabecular spacing/separation,Tb.Sp)、骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th)和骨小梁数量(trabecular number,Tb.N)等指标,比较三柱间骨量和骨小梁结构相关参数的异同。然后用摆锯切割标本制作石蜡切片,行HE染色和细胞凋亡相关因子B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)免疫组织化学染色,通过比较空骨陷窝率、阳性细胞率评估CJFH分型L2型及L3型ONFH标本三柱间细胞凋亡表型的异同。结果 CJFH分型L2型ONFH股骨头,三柱间BV/TV、Tb.Th和Tb.N比较差异均有统计学意义(P<0.05),内侧柱最大,外侧柱最小;外侧柱BS/BV和Tb.Sp显著大于内侧柱和中间柱(P<0.05),内侧柱和中间柱比较差异无统计学意义(P>0.05)。L3型ONFH股骨头三柱间各骨参数指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。CJFH分型L2型和L3型ONFH股骨头三柱间空骨陷窝率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学染色出现大量组织切片脱片,未脱片的切片仅见少量非特异性染色,无法进行阳性细胞率计算。结论CJFH分型L2型ONFH的中间柱和内侧柱较外侧柱拥有更好的骨小梁结构,L3型ONFH三柱间骨小梁结构无显著差异。

虚拟现实技术联合股骨头缩小成形术治疗扁平髋的研究

目的探讨虚拟现实技术(virtual reality,VR)联合股骨头缩小成形术治疗扁平髋的可行性,并评估其临床疗效。方法以2018年10月—2020年10月收治的3例扁平髋男性患者为研究对象,年龄为15~24岁。术前应用VR技术行手术规划,将髋关节256排CT数据导入软件,生成三维图像,模拟手术过程,确定头臼匹配关系。术中依据术前规划行外科脱位下股骨头缩小成形术、股骨颈相对延长术及髋臼周围截骨术,透视下确认股骨头缩小截骨大小和髋臼旋转角度。术后影像学复查评估截骨愈合情况;记录患者手术前后髋关节功能Harris评分、疼痛视觉模拟评分(VAS);根据X线片测量股骨头圆形指数、髋关节中心边缘(center-edge,CE)角、股骨头覆盖率。结果3例患者顺利完成手术,手术时间分别为460、450、435 min,出血量分别为733、716、829 mL;术前VR技术设计股骨头缩小截骨大小分别为9.87、12.42、14.59 mm,术中实际截骨大小为11.4、9.4、12.2 mm,两者相差1.53、3.02、2.39 mm。术后均输注3 U悬浮少白红细胞和300 mL冰冻病毒灭活血浆。术后未出现感染、双下肢深静脉血栓形成等并发症。3例患者均获随访,随访时间分别为25、30、15个月;3个月时复查CT示截骨处均愈合良好。术后12个月及末次随访时VAS评分和Harris评分,以及术后12个月股骨头圆形指数、髋关节CE角、股骨头覆盖率均较术前明显改善;术后12个月根据Harris评分评价3例髋关节功能均获良。结论VR技术联合股骨头缩小成形术治疗扁平髋可获得满意的早期疗效。