猪ZP4B细胞表位人源化定点突变

目的 :对编码猪ZP4的cDNA序列进行人源化定点突变 ,使原来编码LDPENLTL八肽表位的序列突变成编码相应人卵透明带上LDPEKLTL序列 ,同时保持其他序列不变。方法 :采用PCR重叠延伸法 ,连续进行 3次PCR ,对PZP4B细胞LD PENLTL八肽表位进行定点突变。第 3次PCR以前两次PCR的产物为模板 ,最终得到所需的突变体hpZP4和dpZP4。结果 :突变后的cDNA序列通过重组DNA技术 ,在突变体片段 5′及 3′末端分别引入SalI和NcoI内切酶位点 ,使其克隆入pBV2 2 1表达质粒中 ,制成hpZP4 pBV2 2 1,pZP4 pBV2 2 1和dpZP4 pBV2 2 1重组质粒。经测序 ,证明均为目的序列。结论 :通过定点突变产生人源化猪ZP4B细胞表位是可行的。研究将为人类克隆并制备新的人卵透明带避孕疫苗奠定基础。

骨吸收三种尿生化指标的敏感性比较

骨吸收三种尿生化指标的敏感性比较袁敏敏宋美芳高怡（上海医科大学妇产科医院，上海２０００１１）关键词绝经后恶性肿瘤尿钙／肌酐羟脯氨酸吡啶酚传统的测定骨吸收的生化指标如尿钙／肌酐比值（ｕＣａ／Ｃｒ）及羟脯氨酸（ＨＹＰ）已在临床应用多年，但不能很敏感地反映...

公共场所集中空调设计的卫生问题

目前，宾馆饭店、休闲娱乐场所普遍采用集中空调系统来对室内空气的温度、湿度、气流速度等进行有效的调节一集中空词可斟使用和管理不当引发空气污染和传染病的爆发流行，特别是在SARS之后，得到了社会和有关部门的高度关注一笔者介绍了公共场所集中空凋设计相关的卫生问题及影响因素，并提出了对策与措施，

项目化管理的实施与实践探索

项目化管理是当前管理学界的一个研究热点,该文作者旨在通过几年来开展重点工作项目化管理的具体组织和实践,探索项目化管理实施的科学性和有效性,指出项目化管理不仅是针对项目的科学管理方法,也是具有巨大应用前景和广泛适用性的有效管理手段。

施工监督在预防性卫生监督中的卫生学意义

预防性卫生监督是以国家和地方政府制订与颁布的法律、法规、条例和卫生标准为依据,依法对城乡规划和新建、改建、扩建的建设项目的可行性报告、方案设计、扩初设计、施工设计进行审核,作出卫生学评价,对施工过程进行卫生监督,对建成项目进行竣工验收,使之投入使用后,不致于发生局部不良环境危害和污染外界环境的一项具有战略意义的重要工作.

17D_3pZP单克隆抗体对卵透明带及卵巢等组织的免疫学反应

目的: 观察单克隆抗体17D3pZP对猪卵透明带,人卵透明带及人卵巢等组织的免疫学反应。方法: ABC酶免疫组织化学技术。结果: 17D3pZP单克隆抗体能特异性识别猪卵透明带及人卵透明带抗原,而与人卵巢及其他各重要脏器组织无反应。结论: 17D3pZP单克隆抗体能识别卵透明带抗原,而与机体其他组织抗原无交叉反应。有望通过它进一步提取并纯化相应靶抗原,为制备卵透明带免疫避孕疫苗奠定基础。

补肾宁心方对单核-内皮细胞在动脉粥样硬化中相互作用的影响

目的 探讨补肾宁心方对动脉粥样硬化中单核 -内皮细胞相互作用的影响。方法 以培养人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)作为靶细胞 ,在内皮细胞培养基中加入氧化型低密度脂蛋白 (ox- LDL)并在试验体系中加入灌服补肾宁心方的兔血清 ,收集内皮细胞条件培养基 ,作用于人单核细胞系 U937细胞 ,检测内皮细胞条件培养基中 MCP- 1的含量及内皮细胞表面粘附分子、细胞间粘附分子 - 1 (ICAM- 1 )、血管细胞粘附分子 - 1(VCAM- 1 )的表达 ,同时测定 U937细胞 CCR2、LFA- 1以及 VL A- 4 m RNA水平。结果 ox- LDL显著升高内皮细胞条件培养基中 MCP- 1的含量 ,明显促进内皮细胞表面 ICAM- 1、VCAM- 1的表达 ,且在内皮细胞条件培养基作用下单核 U937细胞 CCR2、L FA- 1以及 VL A- 4 m RNA水平明显升高。如在试验体系中加入灌服补肾宁心方的动物血清 ,则 MCP- 1含量明显下降 ,内皮细胞表面 ICAM- 1、VCAM- 1的表达显著下调 (P<0 .0 1 ) ,且在条件培养基作用下单核 U937细胞 CCR2、LFA- 1以及 VLA- 4 m RNA水平明显下调。结论 补肾宁心方含药血清可能通过抑制内皮细胞分泌趋化因子、下调内皮细胞表面粘附分子的表达 ,抑制内皮细胞对单核细胞的趋化及相互粘附 ,从而发挥对血管内皮细胞的保护作用。

人早孕期绒毛组织和滋养细胞趋化因子受体转录水平

目的:研究早孕期绒毛组织及滋养细胞18种趋化因子受体的转录水平,以揭示趋化因子受体在母-胎界面生理性调节作用。方法:提取人早孕期绒毛组织及滋养细胞总RNA,半定量RT-PCR检测绒毛组织和滋养细胞18种趋化因子受体mRNA的表达水平。结果:CXCR4及CXCR6在绒毛组织中普遍高表达;CCR6、CCR7、XCR1及CX3CR1呈普遍中等表达;CCR1-CCR5、CCR8-CCR10、CXCR1-CXCR3在部分绒毛组织中表达,部分绒毛组织不表达或表达量很低;早孕人绒毛组织不表达CXCR5。早孕期滋养细胞表达CCR1、CCR3-CCR5、CCR8-CCR9、CXCR1-CXCR4、CXCR6、XCR1、CX3CR1;不表达CCR2、CCR6、CCR7、CCR10及CXCR5。结论:早孕期绒毛组织及滋养细胞表达多种趋化因子受体,它们在正常妊娠中具有重要的生理学意义。

人早孕期绒毛和绒毛外细胞滋养细胞的分离、培养及鉴定

目的:建立人早孕期绒毛细胞滋养细胞(villous cytotrophoblasts,VCT)及绒毛外细胞滋养细胞(extravillous cytotrophoblasts,EVCT)的分离、培养方法。 方法:利用不同的胰酶消化条件,收集人早孕期绒毛组织的VCT及EVCT并分别培养。倒置显微镜、扫描电镜观察VCT及EVCT的形态学特征;免疫细胞化学鉴定细胞来源及纯度。 结果:胰酶短期、温和消化获得的EVCT,可生长于Matrigel包被的培养器皿上,并表达特异性标志物c-crbB-2;延长消化时间、增加胰酶浓度获得的VCT,种植于塑料或玻璃培养器皿上可聚集并融合形成合体滋养细胞。VCT不表达c-crbB-2。结论:采用不同的胰酶消化及体外培养条件,可简单、快捷地分别获得高纯度人早孕期VCT及EVCT。

补肾宁心方对去势高脂血症家兔主动脉血管细胞粘附分子1表达的调节

为了探讨补肾宁心方对去势雌兔动脉粥样硬化形成的影响及其可能的机制,将26只3月龄新西兰雌兔随机分为正常对照组、假手术组、去势对照组和治疗组(卵巢切除并灌以补肾宁心中药复方),除正常对照组外均于术后2周给予高脂饮食,治疗组同时灌胃给药,连续3个月。12周末测定血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平;取主动脉行组织形态学及扫描电镜观察,并应用免疫组织化学方法检测主动脉血管细胞粘附分子1的蛋白表达。结果发现,与去势对照组比较,补肾宁心方对血脂变化无明显影响,但能明显降低主动脉粥样斑块面积与动脉内膜比值,降低内膜中膜厚度比,减轻主动脉病理损害,抑制主动脉血管细胞粘附分子1的蛋白表达。结果提示,补肾宁心方可能通过抑制主动脉血管细胞粘附分子1的表达从而阻止动脉粥样硬化的发生发展。

补肾宁心方对去卵巢兔动脉粥样硬化的保护作用

目的研究补肾宁心方对去卵巢兔动脉粥样硬化形成的影响。方法 2 6只 3月龄新西兰雌兔随机分为正常组、假手术组、对照组 (卵巢切除 )、中药组 (卵巢切除并灌以补肾宁心方 ) ,除正常组外均于手术2周后给予高脂饮食 ,中药组同时灌胃给补肾宁心方中药 ,连续 3个月。各组于第 12周末测定血脂 (TC、TG、LDL C和HDL C)以及一氧化氮 (NO)水平 ;取主动脉行组织形态学观察以及在光镜和扫描电子显微镜下行病理学检查 ,利用图像分析仪计算动脉粥样硬化斑块内膜面积比和内膜中膜厚度比、面积比。结果 12周末除正常组外 ,各组动物血脂测定结果比较 ,差异无显著性。与对照组比较 ,中药组血清NO水平明显升高 ,主动脉硬化斑块面积与动脉内膜比值 ,内膜中膜厚度比、面积比均明显降低 ,主动脉病理变化减轻。结论补肾宁心方可抑制去势雌兔动脉粥样硬化形成 。

孕早期干预CD80/CD86协同刺激信号对自然流产模型免疫活性细胞协同刺激分子表达的影响

目的 :探讨孕早期干预协同刺激信号对自然流产模型孕鼠免疫活性细胞MHC Ⅱ类抗原和协同刺激分子的调控作用。方法 :建立自然流产模型组CBA×DBA 2和协同刺激信号干预组CBA×DBA 2 (CBA小鼠在孕 4天腹腔注射CD80及CD86mAb各 0 1mg)。分别于孕第 14天计数两组的胚胎吸收率 ,于孕第 9天采用流式细胞技术分析孕鼠脾细胞MHC Ⅱ类抗原与协同刺激分子CD80 (B7 1)、CD86 (B7 2 )、CD2 8和CD15 2 (CTLA 4 )的表达。结果 :孕早期干预协同刺激信号后 ,孕第 14天的胚胎吸收率显著下降 (P <0 0 5 ) ;孕第 9天免疫活性细胞CD80、CD86和CD2 8的表达显著下降 (P <0 0 1) ;CTLA 4的表达则显著升高 (P <0 0 5 ) ;而MHC Ⅱ类抗原的表达无显著改变 (P >0 0 5 )。结论 :孕早期体内干预协同刺激信号使免疫活性细胞协同刺激分子CD80、CD86、CD2 8表达下调和CTLA 4表达上调 ,及母胎界面Th2型免疫偏离 ,从而诱导系统性母

表达hCGβ的乳酸杆菌经阴道粘膜免疫的研究

目的 :用乳酸杆菌表达人绒毛膜促性腺激素 β亚单位 (hCGβ) ,并经阴道粘膜免疫小鼠 ,分析阴道局部hCGβ抗体水平。方法 :在获得稳定、分泌性表达hCGβ的菌株后 ,接种于 8周龄BALB C雌性小鼠的阴道粘膜。于免疫后 2周取阴道洗液 ,放免法检测hCGβ水平 ,间接ELISA检测抗hCGβIgA抗体水平。结果 :Lb casei工程菌在无选择压力下培养 5 0代并冻存后 ,仍可分泌性表达hCGβ蛋白。阴道免疫 2周后 ,小鼠阴道洗液中可检测到hCGβ ,阴道洗液中的抗hCGβIgA抗体OD值为 0 2 97,明显高于阴性对照组 (P <0 0 1) ,而与DNA免疫组无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 :hCGβ在Lb caseiCECT5 2 76中得到了稳定的分泌性表达。重组hCGβ乳酸杆菌可在阴道粘膜局部定居 ,并通过粘膜免疫在局部刺激产生抗hCGβIgA抗体。

Cyclosporin A通过MEK/ERK1/2信号通路调节滋养细胞titin表达

探讨MEK/ERK1/2信号通路在Cyclosporin A(CsA)诱导滋养细胞表达titin中的作用。应用RT-PCR、Western blot检测CsA诱导的滋养细胞titin的表达水平,Western blot检测CsA作用于滋养细胞后ERK1/2的活化程度,并观察MEK特异性抑制剂U0126对其mRNA转录的影响。发现CsA以时间和剂量依赖方式诱导titin表达,并刺激滋养细胞ERK1/2的活化,U0126以剂量依赖方式抑制CsA诱导的titin表达。结果表明CsA通过活化MEK/ERK1/2信号通路诱导滋养细胞titin 的表达,改变其生物学行为,从而有利于胚胎着床及早期发育。

分子佐剂C3d上调Raji细胞协同刺激分子B7-1和B7-2的表达(简报)

我们在以往研究中，引入选择性增强体液免疫效应的新型分子佐剂C3d，成功构建了重组避孕疫苗hCGβ-C3d3，通过免疫Th2型优势的BALB／c小鼠和Th1型优势的C57BL／6小鼠．显示分子佐剂C3d在不同品系小鼠均使免疫效应从Th1型细胞免疫向Th2型体液免疫偏倚。

智媒体时代大学生社交圈层化研究

基于智媒体社交所具有的信息私密性、虚拟封闭性、时空跨越性、身份掩饰性等特性,社交圈层化成为智媒体时代大学生社交的基本形态。分析了智媒体时代大学生社交圈的特征及类型,阐述了智媒体时代大学生社交圈层构建策略。

17β-雌二醇对子宫内膜间质细胞体外分泌趋化因子IL-8、MIP-1α、RANTES和I-309的影响

目的探讨17β-雌二醇对子宫内膜间质细胞分泌IL-8、MIP-1α、RANTES和I-309的调控,以解析雌激素在子宫内膜异位症发生发展中的作用机制。方法用不同浓度17β-雌二醇处理子宫内膜间质细胞48小时;此后选用10-9mol/L17β-雌二醇处理子宫内膜间质细胞12、24、36和48小时,ELISA法分析刺激前后培养上清中IL-8、MIP-1α、RANTES和I-309分泌水平。结果子宫内膜间质细胞体外高水平自然分泌IL-8,17β-雌二醇能抑制IL-8的分泌,呈剂量依赖性。RNATES和MIP-1α分泌水平较IL-8低,经雌激素刺激子宫内膜间质细胞后MIP-1α表现出与IL-8相同的分泌方式,但对RANTES分泌无明显影响。子宫内膜间质细胞经雌激素刺激前后均未检测到I-309。结论雌二醇可能参与子宫内膜白细胞和单核巨噬细胞的募集,但不是异位灶中上述趋化因子高表达的原因。