短程术前放疗对直肠癌治疗效果的临床研究

目的术后局部复发是直肠癌手术治疗失败的主要原因;如何减少直肠癌术后局部复发并改善其预后是临床上亟需解决的问题。为提高直肠癌患者的治疗效果,文中通过分析短程术前放疗对T2、T3期直肠癌患者疗效的影响,探讨短程术前放疗的临床应用价值。方法对63例直肠癌短程术前放疗患者、87例术前常规放疗患者、108例术后放疗患者以及56例单纯手术患者进行腔内超声(endoscopic ultrsonography,EUS)、术后病理、生存率及术后并发症比较,分析不同治疗手段对疗效的影响。结果短程术前放疗、术前常规放疗的手术并发症与术后放疗及单纯手术治疗无显著差异,P>0.05;短程术前放疗EUS、术后病理及局部复发率与术前常规放疗疗效相当,但短程术前放疗、术前常规放疗1年生存率分别高于术后放疗组及单纯手术组,P<0.05;局部复发率明显低于术后放疗及单纯手术,P<0.05。结论术前放疗疗效优于术后放疗及单纯手术,其中短程术前放疗安全有效,疗效相当于术前常规放疗,值得进一步研究与推广。

手术联合^(125)I粒子在治疗直肠癌Miles术后局部复发中的应用

目的如何提高晚期直肠癌患者的生存率一直是临床的难题。文中探讨手术联合125I粒子术中植入治疗直肠癌miles术后局部复发的效果。方法将72例直肠癌miles术后局部复发患者分成3组:手术切除组(A组),24例;手术+放疗组(B组),28例;手术切除联合125I粒子植入组(C组),20例。跟踪随访3组生存期;同时比较各组并发症的发生情况。结果3组患者生存期分别为18、19和25个月。分析表明,C组患者的生存期略高于A组和B组(P<0.05)。A组和C组患者并发症的发生率比B组低,而C组与A组相比其并发症差异无显著性。结论手术联合125I粒子植入术是治疗直肠癌miles术后局部复发的有效方法。

带绿色荧光蛋白的米非司酮诱导表达腺病毒载体的构建及表达

目的在基因表达和基因治疗研究中,目的基因过度表达或不适当的表达将影响实验结果,实现对目的基因表达时间和表达水平的精确调控是关键问题。文中旨在构建带绿色荧光蛋白(enhanced green fluorecence protein,EGFP)并可经米非司酮诱导表达的重组腺病毒载体,以期用于基因治疗研究。方法酶切含有EGFP基因和启动子以及含有米非司酮调控系统的质粒pRS-17,亚克隆到穿梭质粒PDC313上,筛选阳性克隆,测序鉴定正确,将其与Admax腺病毒包装系统的辅助质粒共转染293细胞后,构建出可调控的重组腺病毒载体,利用报告基因引物对病毒进行鉴定,扩增后用氯化铯密度梯度离心纯化病毒,用最终稀释法测定其滴度,并在SW620细胞中检测其基因调控效果。结果成功地构建了携带有米非司酮调控系统的可调控腺病毒载体Ad-RUEGFP,病毒滴度达到6.6×1010pfu/ml。当给予诱导剂米非司酮后,腺病毒载体可以诱导表达EGFP,两者在一定范围内呈正比,而没有米非司酮时,几乎无报告基因的表达。结论腺病毒Ad-RUEGFP能调控外源基因的表达,为下一步体内基因治疗实验奠定了实验基础。

大肠癌原发灶和肝转移灶DCC基因存在状态的研究

目的:了解DCC基因在大肠癌复发、转移过程中的变化及其与肝转移的关系.方法:采用免疫组化和多聚酶链反应一单链构象多态性分析(PCR-SSCP)对136例大肠癌术后复发患者和30例有肝转移的大肠癌原发灶及肝转移灶进行了DCC基因存在状态的研究.结果:大肠癌DCC基因蛋白多数呈阴性表达,且与局部复发关系密切,局部复发者DCC表达下降明显.肝转移者多数发生DCC表达失活,DCC蛋白阴性者92.9%(26/28)失去再手术的机会或虽勉强手术但不到1年内即复发,而DCC蛋白阳性者71.4%(5/7)可再手术且术后存活期较长.经SSCP分析,有肝转移的大肠癌原发灶DCC基因cDNA序列变异率为40%(14/35),皆为DCC蛋白阴性的患者,肝转移灶变异率为48.8%(17/35).结论:DCC基因失活可能是影响大肠癌预后的重要因素之一,肝转移者发生DCC表达失活的主要机制是发生了基因突变.

直肠癌淋巴结转移相关影响因素的临床研究

目的：探讨直肠癌淋巴结转移的规律，为临床诊断及治疗提供参考。方法：对1992～2005年手术治疗的918例直肠癌的资料进行分类整理，分析其与淋巴结转移的关系。结果：肿瘤所在部位与淋巴结转移无明显关系（P〉0．05）。Logistic多因素回归分析得出相关因素与淋巴结转移的密切程度依次为：分化程度〉浸润深度〉侵犯肠管周径〉大体类型，分化程度是影响淋巴结转移的最主要因素。结论：直肠癌淋巴结转移与患者年龄、肿瘤大小、侵犯肠管周径、浸润深度、分化程度、大体类型、生长方式相关，其中肿瘤的分化程度是影响淋巴结转移的最主要因素。

超低位结肠-肛管吻合术在低位直肠癌的应用(附87例报告)

目的:探讨双吻合器套入式完整保留齿状线和肛门内括约肌的超低位结肠-肛管吻合术的应用。方法:87例低位直肠癌在完成全直肠系膜切除(TME)后,保留距离齿状线≤1cm的直肠,剥离直肠黏膜,保留齿状线,近端结肠内置入肛门支撑吻合管,经肛门拖出与直肠残端吻合。结果:87例保留内括约肌的超低位结肠-肛管吻合术无手术死亡及吻合口漏,随访2-60个月,随访率89%,无吻合口复发;盆腔内软组织肿瘤复发3例,闭孔淋巴结复发2例,异时肝转移6例。术后12个月吻合口狭窄6例。术后6个月对79例排便功能进行评价,平均每日排便2-3次,可以区分排气和排便,可以控制半成形便,排便不规律52例。结论:在盆底分离较低的情况下,套入法可以完成保留肛门内括约肌的超低位结肠-肛管吻合术。

肾细胞癌肿瘤抑制基因VHL的变异多药耐药基因Mdr的表达

目的 探讨人肾细胞癌中的VHL肿瘤抑制基因的变异和Mdr基因的表达水平 ,同肾癌发生发展的关系。方法 采用多聚酶链式反应 (PCR) ,DNA单链多态性分析和DNA测序的方法分析了 4 0例肾细胞癌标本 (其中包括 30例富糖原型 ,6例是嗜染型、3例多形性、1例颗粒型 )。用免疫组织化学法检测了正常肾组织和 35例肾细胞癌组织切片。结果 19 30 ( 63% )的富糖原型肾细胞癌的VHL肿瘤抑制基因发生了变异 ,其中包括 13例缺失、3例插入、2例错译和 1例无义。而在对照组未发现基因变异。而Mdr表达与组织学类型相关 ,且表达量与肿瘤分级有关。结论 富糖原型肾细胞癌可能在分子遗传学水平上与其它类型的肾细胞癌有所区别。

Mdr表达与人肾细胞癌组织学类型相关

目的:研究Mdr基因与肾细胞癌(Rcc)的关系.方法:采用免疫组织化学法检测了正常肾组织和35例Rcc组织切片.结果:Mdr表达与组织学类型相关,且表达量与肿瘤分级有关.结论:Mdr基因在Rcc发生中起重要作用.

卵巢癌患者的血清唾液酸SSEA-1抗原水平及其临床意义

为了研究血清唾液酸ＳＳＥＡ１ 抗原水平与卵巢癌的关系，采用单抗ＦＨ６ 检测卵巢癌患者血清中的唾液酸ＳＳＥＡ１ 抗原水平。５０％（２５／５０） 患者的抗原水平增高，富糖原型癌患者的阳性率最高。唾液酸ＳＳＥＡ１ 抗原水平与临床病程、预后密切相关，可作为临床监控的有效指标之一。

DC-CIK细胞治疗晚期结直肠癌的临床疗效

目的:评价自体树突状细胞(dendritic cell,DC)联合细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞治疗晚期结直肠癌患者的临床疗效和安全性。方法:采集2011年7月至2015年3月解放军第81医院肿瘤生物治疗科收治的142例Ⅲ~Ⅳ期结直肠癌患者的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),经实验室体外诱导培养DC和CIK细胞。DC细胞通过结肠癌细胞株COLO 320或直肠癌细胞株HCT-116裂解物致敏后与CIK细胞回输至结直肠癌患者,观察DC-CIK细胞治疗的临床疗效和安全性。结果:142例晚期结直肠癌患者经DC-CIK细胞免疫治疗后,客观缓解率为16.2%,疾病控制率为60.6%;1年生存率为47%,2年生存率为31%,3年生存率为31%;经细胞治疗后外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD3+CD56+NK细胞、CD4+CD25+Treg细胞比例、CD4+/CD8+比值及癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)水平均无显著变化;单因素分析显示,TNM分期(P=0.015)、治疗次数(P=0.037)及治疗前CEA值的正常与否为DC-CIK治疗结直肠癌的预后影响因素;多因素分析显示,治疗次数(P=0.024)和年龄(P=0.015)与DC-CIK治疗结直肠癌的预后密切相关。结论:DC-CIK细胞免疫治疗可能改善晚期结直肠癌患者远期生存率,可产生临床获益,无明显不良反应,安全可行。

DC-CIK细胞治疗局部晚期和晚期胰腺癌患者的临床疗效

目的:探讨树突状细胞(dendritic cell,DC)联合细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞治疗局部晚期和晚期胰腺癌的安全性和有效性。方法:采集2011年7月至2012年5月在解放军第81医院生物治疗科治疗的24例Ⅲ～Ⅳ期胰腺癌患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),体外诱导培养DC和CIK细胞。DC经胰腺癌细胞株(PANC-1)裂解物致敏后与CIK细胞回输至胰腺癌患者,观察DC-CIK细胞治疗前后患者外周血淋巴细胞亚群、血清肿瘤标志物的改变以及临床疗效。结果:DC-CIK细胞治疗3个月后,胰腺癌患者外周血CD3+T细胞、CD8+T细胞和CD4+CD25+Treg细胞比例均显著下降(均P<0.05),CD4+/CD8+比值升高[(1.1±0.7)vs(1.5±0.9),P<0.05]。血清肿瘤标志物CA19-9在治疗后1个月[(382.8±277.7)vs(213.8±214.6),P<0.05]和治疗后3个月[(213.8±214.6)vs(154.0±118.2),P<0.01)持续下降。24例患者无1例完全缓解,其中3例部分缓解,4例疾病稳定,17例疾病进展;治疗有效率为12.5%,疾病控制率为29.2%;中位生存期为5.7个月,6个月生存率为33%,9个月生存率为27%。治疗期间所有患者均未出现3～4级不良反应。结论:DC-CIK细胞治疗局部晚期和晚期胰腺癌患者安全可行,可改善患者免疫功能并产生临床获益。

三氧化二砷诱导人胰腺癌细胞凋亡的实验研究

目的 :研究三氧化二砷 (As2 O3)体外抑制人胰腺癌细胞株 SW1990增殖及诱导其凋亡的作用。 方法 :以不同浓度的As2 O3处理 SW1990 ,用 MTT法测定细胞增殖情况 ,并利用 Annexin 早期凋亡检测试剂盒、电子显微镜、流式细胞仪以及免疫组化染色等检测细胞凋亡情况。结果 :(1) As2 O3抑制 SW1990细胞增殖的作用与相同浓度的顺铂相似。(2 ) 10 μg/ m l As2 O3作用 12 h后即观察到细胞凋亡明显增多 ,48h后凋亡率达 2 4% ;免疫组化染色证实 As2 O3作用后细胞 Bcl- 2表达阳性率较作用前及对照组明显减少 ,Bcl- 2 / Bax比值下降。 结论 :As2 O3体外可抑制 SW1990增殖 。

肾细胞癌MN/CA9蛋白的表达及其生物学意义

目的 :研究MN/CA9蛋白的表达和肾细胞癌的关系 ,探讨MN/CA9蛋白在肾细胞癌诊断研究中的应用。方法 :应用免疫组化和免疫印迹的方法 ,对正常肾组织、良性肾损害和肾细胞癌组织的MN/CA9蛋白的表达进行了分析。结果 :正常人肾组织和良性肾损害均为MN/CA9阴性 ,而在 30例肾癌中却有 2 8例为MN/CA9阳性 ,尤其是 2 6例富糖原型RCC均呈现MN/CA9强阳性。结论

DC-CIK免疫细胞治疗晚期乳腺癌患者的临床疗效

目的:观察自体DC联合CIK细胞治疗晚期乳腺癌患者的安全性及临床疗效,并分析相关预后因素。方法:回顾性分析2011年8月至2014年12月在解放军第81医院进行DC-CIK细胞治疗的42例晚期乳腺癌患者临床资料,采用实体瘤疗效评价标准评价近期疗效,并观察DC-CIK细胞治疗的安全性。分析患者生存期,评价远期疗效,单因素及多因素分析预后因素,并采用配对t检验分析患者治疗前后免疫功能。结果:42例晚期乳腺癌患者经DC-CIK细胞治疗后,客观缓解率为38.1%(16/42),疾病控制率为61.9%(26/42);1年生存率为59%,2年生存率为48%,3年生存率为48%;肿瘤标记物CA153治疗后显著性降低;外周血淋巴细胞亚群除辅助性T细胞(CD3^+CD4^+)水平显著性升高外,其他淋巴细胞亚群无显著性变化。单因素分析结果显示,肿瘤部位(P=0.012)、治疗前CA153水平(P=0.000)是DC-CIK细胞治疗预后的影响因素;多因素分析结果显示,治疗前CA153水平(P=0.003)是DC-CIK细胞治疗的独立预后因素。结论:晚期乳腺癌患者经DC-CIK细胞治疗后,无明显不良反应,可能提高患者长期生存率,产生临床获益,安全可行。

DC-CIK细胞免疫治疗胃癌的临床疗效及预后分析

目的:回顾性分析自体DC联合CIK(DC-CIK)细胞治疗96例胃癌患者的临床疗效和安全性。方法:采集2011年8月至2016年4月解放军第86医院肿瘤科及解放军第81医院肿瘤生物治疗中心收治的96例胃癌患者的外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),经实验室体外诱导培养DC和CIK细胞,DC通过胃癌MGC-803细胞裂解物致敏后与CIK细胞回输给患者,观察DC-CIK细胞治疗胃癌患者的临床疗效和安全性。结果:96例胃癌患者经DC-CIK细胞免疫治疗后,客观反应率为15.6%,疾病控制率为55.2%;1年生存率为56.0%,36~56个月总生存率维持在37.0%。免疫细胞治疗前后患者外周血肿瘤标志物CEA、CA199和CA724值均无明显变化。细胞治疗后患者外周血CD4^+CD25^+细胞比例显著下降[(3.22±1.20)%vs(2.46±1.04)%,P<0.01],CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD3^+CD56^+细胞百分比及CD4^+/CD8^+比值均无显著变化(P>0.05)。单因素分析显示,TNM分期、细胞治疗次数、治疗前CEA和CA199值为DC-CIK治疗胃癌预后的影响因素(P<0.05);多因素分析显示,细胞治疗次数、治疗前CEA和CA199值与DC-CIK细胞治疗胃癌患者的预后相关(P<0.05)。结论:DC-CIK细胞免疫治疗对于胃癌患者是一种安全有效的治疗方式,多次治疗可能提高患者远期生存率。

结直肠肿瘤TIMPs表达定量研究

目的 探讨组织金属蛋白酶抑制物 (TIMPs)表达与结、直肠癌转移的关系。方法 用免疫组织化学的方法回顾性检测 60例结、直肠肿瘤石蜡标本中TIMP 1,TIMP 2的表达。应用图像分析的方法定量分析TIMP 1、TIMP 2在肿瘤组织及间质中的表达 ,并进一步探讨与肿瘤转移潜能之间的关系。结果 TIMP 1在肿瘤细胞中表达高于间质 (P <0 0 1) ,同时肿瘤细胞TIMP 1表达高于TIMP 2 (P <0 0 1)。无血管转移组TIMP 2表达高于有血管转移组 (P <0 0 1)。腺瘤组织TIMP 1、2表达均高于癌组织 (P <0 0 1)。结论 TIMPs在结直肠癌中的表达与抑制肿瘤转移相关。

DC-CIK细胞治疗晚期卵巢癌的临床疗效

目的:评价自体DC-CIK细胞治疗晚期卵巢癌患者的临床疗效和安全性。方法:采集2011年8月至2016年1月解放军第81医院肿瘤生物治疗科收治的28例Ⅳ期卵巢癌患者的PBMC,经实验室体外诱导培养获得DC和CIK细胞。DC通过卵巢癌细胞(HO-8910)裂解物致敏后与CIK细胞回输至患者体内,观察DC-CIK细胞治疗前后患者临床疗效和安全性。结果:28例晚期卵巢癌患者经DC-CIK细胞免疫治疗后,ORR为7.1%(2/28),DCR为64.3%(18/28);12、36、50个月的累积生存率分别为有75%、53%和42%。经DC-CIK细胞治疗后患者外周血CD3^+CD8^+细胞比例显著升高[(23.35±7.52)%vs(29.49±8.16)%;t=-3.340,P<0.01],CD4^+/CD8^+比例显著下降[(1.61±0.84)%vs(1.21±0.74)%;t=2.785,P<0.05],CD3^+、CD3^+CD4^+、CD3^-CD56^+、CD4^+CD25^+细胞比例及CA125、CA199、TSGF水平均无显著变化(均P>0.05);患者治疗后均无明显不良反应。结论:DC-CIK细胞治疗可改善晚期卵巢癌患者免疫状态,提高其中远期生存率,患者无明显不良反应,安全可行。