羊驼属(Lama)动物球虫种类与世界分布

为了解羊驼属(Lama)动物球虫的种类及在世界各地的分布状况,本文收集整理了世界上有关报道羊驼属动物球虫的相关文献,按虫种学名的字母为序,介绍了6种从羊驼属动物检出与命名的艾美耳球虫(Eimeria),每种球虫包括中文名称与学名、宿主名称、寄生部位、地理分布,地理分布按照国家和地区的英文或拼音字母为序。在收录的15个国家中,阿根廷、玻利维亚、德国、秘鲁、英国、美国记录有5种球虫,澳大利亚、日本、新西兰记录有4种球虫,智利、中国记录有2种球虫,厄瓜多尔、意大利、俄罗斯、瑞士记录有1种球虫;有13个国家记录了马库萨尼艾美耳球虫(E.macusaniensis),10个国家记录了奥帕艾美耳球虫(E.alpacae)、羊驼艾美耳球虫(E.lamae)、普诺艾美耳球虫(E.punoensis),5个国家记录了爱维他艾美耳球虫(E.ivitaensis),2个国家记录了秘鲁艾美耳球虫(E.peruviana)。介绍了6种球虫中文名称的来源,以及在南美洲考古粪便化石中发现马库萨尼艾美耳球虫、爱维他艾美耳球虫和在德国的美洲驼(Lama guanicoe glama)粪便中检出一种艾美耳球虫未定种(Eimeria sp.)的相关报道。本文基本能反映出羊驼属动物球虫在世界范围的分布状况,为全面了解羊驼属动物球虫的地理分布提供了一份较为完整的基础资料。

柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白EtRON2_(L2)特性与功能初步分析

利用RT-PCR、间接免疫荧光实验、免疫印迹实验、抗体中和实验以及BiFC等方法对柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白2同源分子—Et RON2_(L2)的特性和功能进行研究。结果发现Et RON2_(L2)氨基酸序列与常规的Et RON2仅有26.63%的同源性,mRNA水平在第二代裂殖子中最高,而蛋白水平在第二代裂殖子和子孢子阶段最高;Et RON2_(L2)在游离的第二代裂殖子和子孢子阶段主要分布于胞质,而在入侵后子孢子中主要分布于虫体表面;抗rEt RON2_(L2)多克隆血清处理组明显抑制子孢子入侵细胞;Et RON2_(L2)与EtAMA3之间存在互作关系。本研究为探究Et RON2_(L2)在球虫入侵过程中的作用机制奠定基础。

柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白Et RON2 L1-2特性与功能初步分析

为研究柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白2(RON2)同源分子——Et RON2 L1-2的分子特性与功能,利用实时荧光定量PCR、Western blot、入侵抑制试验、间接免疫荧光试验以及双分子荧光互补实验(BiFC)等方法分析其生物学特征。结果发现Et RON2 L1-2蛋白序列与Et RON2仅有29.69%的同源性,转录水平和蛋白水平均在第二代裂殖子阶段最高。抗r Et RON2 L1-2抗体对子孢子入侵细胞有明显抑制作用。Et RON2 L1-2蛋白主要分布于经PBS孵育子孢子的胞质和表面,并分布于经完全培养基孵育或入侵DF-1细胞后2 h子孢子的顶端;其表达量在滋养体和未成熟裂殖体增加,且在带虫空泡膜也有分布;在第二代裂殖子中主要分布于整个胞质。Et RON2 L1-2与柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原4(AMA4)之间存在互作关系。

柔嫩艾美耳球虫保守蛋白EtCHP35特性和功能初步研究

鸡球虫病是由几种艾美耳属寄生虫寄生引起的一种家禽肠道疾病。目前,对于该病控制仍然主要依赖于抗球虫药物,但长期广泛地使用药物造成了球虫耐药性的产生。为研究球虫耐药性产生的分子机制,本实验室前期对柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株、地克珠利耐药株、马杜拉霉素耐药株以及敏感株进行了转录组测序并获得了敏感株与耐药株的差异表达基因,发现柔嫩艾美耳球虫保守蛋白35(EtCHP35)在盐霉素耐药株和马杜拉霉素耐药株mRNA转录水平显著上调。本研究以柔嫩艾美耳球虫敏感株孢子化卵囊cDNA第一链为模板,成功克隆了柔嫩艾美耳球虫保守蛋白35(EtCHP35)基因,并在原核表达系统中成功表达了重组蛋白(rEtCHP3)。利用实时荧光定量PCR分析了该基因在柔嫩艾美耳球虫不同发育阶段以及不同虫株(敏感株和耐药株)的mRNA转录水平,结果显示EtCHP35基因在敏感株孢子化卵囊的mRNA转录水平最高;与敏感株相比,EtCHP35的mRNA转录水平在马杜拉霉素耐药株和盐霉素耐药株上调,但在地克珠利耐药株mRNA转录水平无差异,且随着盐霉素耐药株浓度的升高,EtCHP35的mRNA转录水平也升高。间接免疫荧光定位结果表明该蛋白主要分布在子孢子和第二代裂殖子的表面和顶部。因此,推测该蛋白可能参与了虫体在宿主体内的生长发育、对宿主细胞的识别附着、逃避宿主免疫应答以及球虫对离子载体类药耐药性产生的过程。

柔嫩艾美耳球虫微管蛋白β链基因EtTBC的克隆、表达及特性的初步分析

鸡球虫病是一种由艾美耳属原生动物寄生虫引起的肠道疾病,是影响家禽业的最重要疾病之一。目前,球虫病的控制主要依赖于抗球虫药物的使用,但由于药物的长期广泛使用导致了球虫的严重耐药性。为研究其耐药性机制,本实验室前期对柔嫩艾美耳球虫敏感株、地克珠利耐药株、马杜拉霉素耐药株、盐霉素耐药株进行了转录组测序分析,发现与敏感株相比,柔嫩艾美耳球虫微管蛋白β链(Et TBC)仅在地克珠利耐药株高表达。本研究在此基础上,克隆、表达了EtTBC,并初步分析了其功能及与地克珠利的关系;以柔嫩艾美耳球虫敏感株cDNA为模板成功克隆了EtTBC基因,构建了原核表达重组质粒pET28a-Et TBC,并成功诱导表达了重组蛋白r Et TBC;利用qPCR对柔嫩艾美耳球虫敏感株不同发育阶段以及不同虫株(耐药株、敏感株和田间耐药株)的mRNA转录水平进行了分析,结果显示,该基因的转录水平在敏感株未孢子化卵囊阶段最高,且其mRNA转录水平仅在地克珠利耐药株上调;间接免疫荧光定位结果表明该蛋白主要分布在子孢子除折光体外的细胞质和表面,第二代裂殖子的细胞质和表面。

安徽省淮北市集约化养鸡场鸡球虫种类鉴定及耐药性调查研究

鸡球虫病是由几种不同致病特征的艾美耳球虫混合寄生鸡肠道引起的一种全球性寄生虫病。目前,该病的防治主要还是依赖于药物。由于抗球虫药物长期广泛使用,球虫耐药性已成为当前球虫病防控中最主要的障碍之一。为了解安徽淮北集约化养鸡场鸡球虫感染的现状和对常规抗球虫药物的耐药程度,本研究利用传统形态鉴定和多重PCR等方法对来自安徽省3个集约化鸡场的鸡球虫种类进行了鉴定。结果显示:3个鸡场的球虫有4种,即柔嫩、堆型、和缓和巨型艾美耳球虫;利用鸡体药物敏感性试验评价了3个鸡场鸡球虫对5种常规抗球虫药物(地克珠利、盐霉素、癸氧喹酯、甲基盐霉素、氯苯胍)的敏感性,以抗球虫指数、最适抗球虫活性百分率、病变记分减少率和相对卵囊产量四项指标综合判定鸡球虫对药物的耐药程度,结果显示,除1个鸡场鸡球虫(AH2)对氯苯胍中度耐药外,其余鸡场球虫虫株对其他药物完全耐药,说明安徽淮北部分鸡场的球虫耐药性比较严重。本调查结果可为安徽淮北市集约化养鸡场制定防治球虫病合理用药方案提供信息基础。

抗球虫药球佳防治鸡艾美耳球虫5个虫种的笼饲试验

抗球虫新药“球佳”由中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所仿制国外同类产品Ｄｉｃｌａｚｕｒｉｌ的一种化学合成药。为了证明该药对鸡艾美耳球虫防治效果，作者以鸡艾美耳球虫中５个主要危害较严重的虫种（Ｅ．ｔｅｎｅｌ－ｌａ，Ｅ．ｎｅｃａｔｒｉｘＥ．ｍａｘｉｍａ...

上海地区奶牛场球虫感染现状调查

为了解上海地区规模化奶牛场奶牛感染球虫的情况，我们对上海地区17个牧场的奶牛球虫感染状况进行了随机抽样调查，分别于2005年10月和2006年4月按不同年龄阶段共采集粪样316份。调查结果显示：17个牧场都有球虫感染，1个牧场的感染率最高达70％，其中10月份调查的感染率为36．45％，4月份调查的感染率为40．05％，两者没有明显的差异；从不同年龄阶段奶牛的感染情况来看，发现感染率最高的2个阶段为0～2月龄和4～6月龄，感染率高达为45％，感染率最低的年龄阶段为12月龄以上的奶牛，感染率为25％；从感染强度来看，上海地区牧场奶牛的球虫感染强度大部分平均OPG低于1000，占58．82％，只有一个牧场的平均OPG比较高，为14250；从本次调查结果发现有6种艾美耳球虫（Eimeria），分别是牛艾美耳球虫（E．boris）、椭圆艾美耳球虫（E .ellipsoidallis）、邱氏艾美耳球虫（E.zurnii）、怀俄艾美耳球虫（E．wyomingensis）、柱状艾美耳球虫（E．cylindrica）、亚球形艾美耳球虫（E.subspherica），优势虫种为牛艾美耳球虫、邱氏艾美耳球虫、椭圆艾美耳球虫，其他3种球虫所占比例较少。

鸡球虫广东清远分离株对七种药物的抗药性试验

为了了解广东清远某鸡场球虫抗药性的产生程度 ,并制定出合理的用药方案 ,给延长药物的使用周期提供科学的依据 ,我们从该鸡场现场采集了新鲜粪便 ,实验室分离和繁殖卵囊 ,并在实验室进行球虫的抗药性研究。经检测粪中含堆型艾美耳球虫 (E.acervulina)和变位艾美耳球虫 (E.mivati)共 81.3 % ,柔嫩艾美耳球虫 (E.tenella) 18.7%。试验选择目前常用的 7种抗球虫药物 ,分别为球佳 (地克珠利 Diclazuril)、杜球 (马杜拉霉素 Madu-ramicin)、欲可胖 (莫能菌素 Monensin)、球安 (拉沙里霉素 Lasalocid)、氨丙啉 (Amprolian)、球克 (海南霉素 Hainan-mycin)、氯苯胍 (Robenidine)。试验设 7个药物组和感染不用药、不感染不用药 2个对照组 ,每组 10只鸡。在 15日龄 ,除不感染不用药组外 ,每组接种孢子化卵囊 12× 10 4个。以抗球虫指数 (ACI)、病变记分减少率 (RLS)、相对卵囊产量 (ROP)、最适抗球虫活性百分率 (POAA)为试验指标 ,进行综合评定。结果显示鸡球虫广东清远株对球佳为轻度抗药 ,对杜球、欲可胖、球安、氨丙啉为完全抗药 ,对球克。

五种抗球虫药对肉鸽球虫病的防治研究

为筛选有效的抗鸽球虫药物,选用地克珠利(1 mg/kg)、磺胺喹恶啉钠(300 mg/kg)、磺胺氯吡嗪钠(300 mg/kg)、托曲珠利(25 mg/kg)、白头翁散(500 mg/kg)等5种抗鸡球虫药物进行了本试验,试验重复3次,每次分为用药感染组和不用药感染组,人工感染主要含有拉氏艾美耳球虫和鸽艾美耳球虫的混合孢子化卵囊,剂量为15×104个,以相对卵囊减少率作为抗球虫效果的指标。结果显示磺胺喹恶啉钠、磺胺氯吡嗪钠效果最好,相对卵囊减少率分别为99.9%和99.5%;其次是托曲珠利、白头翁散,相对卵囊减少率分别为96.7%和92.0%;地克珠利效果最差,相对卵囊减少率仅为75.6%。

2005年上海地区乳牛球虫感染的季节动态

为了解上海地区乳牛球虫感染的季节变化情况，对上海地区3个牧场乳牛抽样直肠采集粪便，检查了718头乳牛粪样。结果，查出球虫阳性牛269头，平均感染率为37．46％，其中1月龄以内牛的感染率为33．89％，1～12月龄牛的感染率为42．33％，12月龄以上牛的感染率为25．95％。平均感染率最高的4月份为44．44％，最低的8月份为28．57％。3个牧场球虫阳性牛的感染强度（OPG值）为0～169000个，平均OPG值为9477个，其中1月龄以内牛的OPG值为8270个，1～12月龄牛的OPG值为4318个，12月龄以上牛的OPG值为145个。调查发现了6种球虫，分别是牛艾美球虫（Eimeria boris）、椭圆艾美球虫（E．ellipsoidalis）、邱氏艾美球虫（E．zurnii）、怀俄明艾美球虫（E．wyomingensis）、柱状艾美球虫（E．cylindrica）、亚球形艾美球虫（E．subspherica）。结果表明，2005年上海地区乳牛球虫感染率无明显季节差异，12月龄内乳牛的球虫感染率与感染强度均明显高于12月龄以上乳牛，乳牛球虫的优势虫种为牛艾美球虫、椭圆艾美球虫、邱氏艾美球虫。

巨型艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫早熟株对8种抗球虫药的敏感试验

为检测巨型艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫早熟株对常用抗球虫药的敏感性,选用地克珠利、氯苯胍、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜米星、盐霉素和拉沙洛西等8种抗球虫药进行鸡体试验,通过抗球虫活性百分比(percent of optimum anticoccidial aetivity,POAA)、病变记分减少率(reduction of lesion scores,RLS)、相对卵囊产量(relative oocyst production,ROP)和抗球虫指数(anticoccidial index,ACI)4项指标进行综合评价。结果表明,巨型艾美耳球虫早熟株对8种药物敏感;柔嫩艾美耳球虫早熟株对盐霉素轻度敏感,对地克珠利、氯苯胍、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜米星和拉沙洛西敏感。本研究结果可为对球虫早熟株疫苗的开发与应用提供实验依据。

安徽两个鸡场球虫的抗药性试验

[目的]研究安徽2个鸡场球虫抗药性程度,为制定出合理的用药方案提供依据。[方法]从鸡场采集新鲜粪便,经实验室分离增殖,并人工感染孢子化卵囊,测定对地克珠利、氯苯胍、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜拉霉素、盐霉素和拉沙洛西钠8种药物的抗药性。[结果]安徽1号鸡场球虫对癸氧喹酯无抗药性,尼卡巴嗪中度抗药,其余6种药物完全抗药;安徽2号鸡场,对癸氧喹酯河尼卡巴嗪无抗药性,氯苯胍中度抗药,其余5种药物完全抗药。[结论]安徽两鸡场球虫对多数药物已产生抗药性。

柔嫩艾美耳球虫早熟株免疫剂量研究

为了确定柔嫩艾美耳球虫（Eimenatenella）早熟株合适的免疫剂量，本文设立7个早熟株免疫攻虫组、1个不免疫攻虫组和1个不免疫不攻虫组，免疫组的免疫剂量为孢子化卵囊100、200、400、600、800、1000和2000个／羽，经嗉囊感染，7日龄首次免疫，14日龄以同等剂量进行第二次免疫，21日龄以8×10^4个／羽的同源母株进行攻虫，28日龄结束试验，以存活率、增重、肠道病变记分、血便数量、卵囊减少率为观测指标。对免疫保护效果较好的3个免疫剂量进行重复试验，同时设置商品化球虫疫苗对照组，免疫方法、试验周期、试验指标同第一批试验。结果显示：攻虫后，不免疫攻虫组出现5％死亡，而各免疫组来出现死亡；各免疫组卵囊减少率在61．57％～69．52％；200～2000免疫组的增重与不免疫不攻虫组差异不具备显著统计学意义（P〉0．05）；600～2000免疫组的肠道病变记分和血便数量均明显少于不免疫攻虫组（P〈0．05）。用600、800和1000进行重复试验，三个免疫组攻虫期间均来出现死亡，而不免疫组和疫苗对照组均出现5％死亡；三个免疫组的增重均明显高于不免疫攻虫组和疫苗对照组（P〈0．05）；早熟株免疫组的肠道病变记分和血便数量明显低于不免疫攻虫组（P〈0．05），而疫苗对照组与不免疫攻虫组的相当（P〉0．05）；卵囊减少率在66.30％-78．75％，高于疫苗对照组的51．82％。结果表明，该柔嫩艾美耳球虫早熟株保持了良好的免疫原性，不同免疫剂量均能诱发鸡产生免疫保护力，其中600、800和1000个／羽的免疫效果均优于疫苗对照组，可考虑以600个／羽作为该早熟株在疫苗制备中的推荐免疫剂量。

抗球虫新药球佳的药效试验

抗球虫新药球佳的药效试验赵其平吴薛忠陈兆国黄兵史天卫（中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所２００２３２）鸡球虫病是危害集约化养鸡的主要疾病之一，目前对鸡球虫病的防治仍以药物为主。在药物防治中，常由于不合理的使用，在短期内出现对某种抗球虫药的耐药虫株，...

布氏艾美耳球虫某些生物学特性测定

布氏艾美耳球虫某些生物学特性测定赵其平，黄兵，吴薛忠，陈兆国，史天卫（中国农科院上海家畜寄生虫病研究所２００２３２）布氏文美耳球虫（Ｅ．ｂｒｕｎｅｔｔｉ）是９种鸡球虫中致病性较强的一个种，其感染后死亡率中等，但对鸡增重影响较明显，该种球虫主要寄生于鸡...

巨型艾美耳球虫早熟株免疫剂量研究

为了确定巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)早熟株合适的免疫剂量,本文设立7个早熟株免疫攻虫组、7个母株免疫攻虫组、1个不免疫攻虫组和1个不免疫不攻虫组,7个早熟株/母株免疫组的免疫剂量为孢子化卵囊100、200、400、600、800、1000和2000个/羽,经嗉囊感染,7日龄首次免疫,14日龄以同等剂量进行第二次免疫,21日龄以8×104个/羽的同源母株进行攻虫,28日龄结束试验,以增重、肠道病变记分和卵囊减少率为试验指标。对早熟株中免疫保护效果较好的2个免疫剂量进行重复试验,免疫方法、试验周期、试验指标和攻虫剂量同第一批试验。结果显示:早熟株和母株200、400、600、800、1000、2000个/羽免疫组攻虫后的增重与健康对照组差异不显著(P>0.05),100个/羽免疫组明显低于健康对照组(P<0.05);各免疫组的卵囊减少率均达90%以上,肠道病变记分均与不免疫攻虫组差异不显著(P>0.05)。用早熟株200、400个/羽进行免疫重复试验,两个免疫组攻虫期间的增重和肠道病变记分均与健康对照组差异不显著(P>0.05),而与不免疫攻虫组差异显著(P<0.05),其卵囊减少率均在86%以上。研究结果表明,该巨型艾美耳球虫早熟株保持了良好的免疫原性,每只鸡免疫200或400个孢子化卵囊均可诱发鸡产生良好的免疫保护力,可考虑以200个孢子化卵囊作为该早熟株在疫苗制备中的推荐免疫剂量。

上海市市售蟾蜍寄生蠕虫感染情况初步调查

为了解上海市市售蟾蜍寄生蠕虫的感染情况,对60只中华大蟾蜍进行剖检,按脏器检查、收集寄生虫虫体,统计寄生虫的感染率与感染强度。结果显示,蟾蜍寄生虫感染率为100%,平均感染强度为28.23条。不同种类寄生虫的感染情况明显不同,线虫、吸虫、绦虫和棘头虫的感染率分别为93.33%、73.33%、8.33%和15.00%,感染强度分别为17.52、14.48、10.40和2.67条。不同脏器寄生虫的感染情况不同,肠道和肺脏的寄生虫感染率最高,分别为100%和88.33%;肠道、肺脏、肌肉寄生虫的感染强度分别为15.63、12.28和11.33条,明显高于其他器官。不同种类寄生虫的寄生虫部位明显不同,线虫主要来源于肺部和肠道,吸虫和棘头虫主要来源于肠道,绦虫主要来源于肌肉。通过对检出虫体的形态进行初步观察,吸虫、线虫、绦虫和棘头虫种类分别约有3、4、1和1种,但具体种类尚需进一步鉴定。本调查结果为掌握上海市市售蟾蜍寄生虫感染状况和做好寄生虫病防控提供了基础数据。