论信息化指标体系研究中的几个理论问题——兼评《国家信息化指标构成方案》

文章分析了信息化水平测度指标应具有的几个特点以及指标的主要类型,并据此对<国家信息化指标构成方案>进行了评析,提出了一些修改建议.

一种新型家蚕核多角体病毒Bac to Bac系统的构建

用家蚕核型多角体病毒的全基因组DNA与AcBacmidDNA共转染家蚕BmN细胞,构建转座一穿梭载体BmBacmid。另一供体质粒以转座方式将乙肝病毒e抗原基因HBeAg整合到BmBacmid的attTn7位点上成为重组rBmHBe。结果表明BmBacmid既能在大肠杆菌中以质粒的形式复制,又能在家蚕BmN细胞和草地夜蛾Sf9细胞中复制,形成感染性病毒粒子。Southernblotting证实重组病毒的构建是正确的。BmN细胞能正确识别与切割HBeAg信号肽序列,SDSPAGE表明HBeAg基因在家蚕细胞中高效表达,ELISA测定培养上清中HBeAg效价达1∶32000,细胞内HBeAg效价为1∶2000,培养液及细胞内的HBcAg含量极低(〈1∶160)。

携带猪囊虫表位的嵌合蛋白疫苗的构建及其免疫学研究

用PCR法将猪囊虫抗原表位n1、n2插入乙肝病毒核心蛋白（HBc）序列的第78～79位之间，将猪囊虫抗原表位n3接在149位之后，再将该序列克隆入pET28a载体中，构建了重组表达质粒pET28a—△c-3n，在大肠杆菌中表达出融合蛋白。命名为PCCE。将PCCE纯化后免疫小鼠，以ELISA检测小鼠的体液免疫应答，Western blot检测抗体的特异性．Dot ELISA验证所选表位的保护性。另用绦虫卵攻击免疫小鼠，以观察疫苗的保护作用。测序结果表明，重组质粒构建成功；SDS—PAGE显示，融合蛋白表达正确，电镜证实有蛋白颗粒形成。对免疫小鼠应用ELISA检测到高滴度抗体；Western blot结果表明。免疫鼠体内诱导出了3种特异性抗体；Dot ELISA结果表明，所逸表位对宿主可能具有保护性。绦虫卵攻击免疫小鼠试验表明，疫苗PCCE的相对保护率为89％。结论：成功地表达和纯化了以HBc为载体的携带3个猪囊虫表位的融合蛋白（PCCE），以PCCE作为疫苗免疫小鼠，能诱导较强的特异性体液免疫反应，免疫小鼠对绦虫卵攻击具有较好的免疫保护作用。

汉坦病毒和恙虫病东方体复合感染的实验研究

目的了解汉坦病毒(HV)和恙虫病东方体(Ot)在宿主体内能否共生及其共生特征。方法采用HV和Ot先后交替、重复感染实验鼠,20 d后取鼠脏器切片和刮片用IFAT和Giemsa染色观察其感染率和脏器分布;并用Vero-E6细胞体外培养法研究HV、Ot在宿主细胞内的共生特征。用RT-PCR和PCR进行基因鉴定。结果HV和Ot先后交替、重复感染的各组实验鼠中,均可发现两种病原体的复合感染,其中HV和Ot单纯感染组的阳性率均显著高于HV、Ot先后和同时感染组。5组感染Vero-E6细胞培养检测结果发现:先后、同时和单纯实验感染的5组细胞中,HV和Ot先后、同时接种感染组在细胞传至第3代时检测均见有HV和Ot的双重感染,阳性率随传代次数增加而增加。而HV和Ot单纯分别感染组细胞传第2代时即可检测到HV和Ot,阳性率亦随传代次数的增加而增加。在传代培养中单纯感染组的阳性率均显著高于先后和同时感染组。用PCR和RT-PCR进行了基因鉴定得到一致的结果。结论研究结果提示HV和Ot可重复感染宿主动物,在同一宿主细胞内的感染初期有相互抑制作用,这对HV和Ot的流行病学有一定的理论意义。

用杆状病毒载体在家蚕细胞中表达HBeAg基因

以ＰＣＲ技术扩增含有ＰｒｅＣ信号肽序列及完整的ＨＢｅＡｇ基因的序列（即ＨＢｃＡｇ基因５′端４４７ｂｐ），在５′端加上合适的酶切位点，克隆到家蚕核多角体病毒转移载体ｐＢｍ０３０上，与野生型ＢｍＮＰＶＤＮＡ共转染家蚕ＢｍＮ细胞，空斑纯化后得到多角体基因失活的重组病毒。ＥＬＩＳＡ法测定表明培养液上清中ＨＢｅＡｇ效价达１∶３２０００，细胞内ＨＢｅＡｇ效价为１∶２０００，培养液及细胞内的ＨＢｃＡｇ含量极低（＜１∶１６０）。研究结果表明，ＢｍＮ细胞能正确识别与切割ＨＢｅＡｇ信号肽序列，所表达的ＨＢｅＡｇ效价高，纯度好。

杆状病毒早期启动子载体的构建及报道基因的表达

目的 :用苜蓿尺蠖核多角体病毒 (Ac NPV)的 IE1基因启动子构建杆状病毒早期基因启动子载体。 方法 :以 Ac NPV p10基因为侧翼序列 ,并将新霉素抗性基因 (neo)插入 IE1基因启动子下游 ,得到转移载体 p Ac PIneo。将它和野生型 Ac NPV DNA共转染昆虫细胞 Sf9,由于 neo基因的表达 ,通过 G418的选择和富集作用 ,得到重组病毒 v Ac PIneo的纯培养。 结果 :用酶切和 Southern印迹杂交证明 ,neo基因整合于 Ac NPV基因组的 p10基因位相。 结论 :成功地构建了杆状病毒早期启动子载体 。

调查引擎与图书馆网站建设

调查引擎 (Surveyengine)是一种免费为调查申请者定制个性化站点调查的开放式调查系统。本文分析了调查引擎在图书馆网站建设中的作用和特点 ,论述了图书馆利用调查引擎进行读者调查的步骤和方法 ,总结了使用调查引擎时需要注意的事项 ,并对调查引擎存在的问题进行了探讨。

用原位RT-PCR分子杂交定位检测螨(革螨、恙螨)原代培养细胞内HV-RNA的研究(Ⅱ)

目的 研究革螨、恙螨在传播肾综合征出血热病毒 (Hemorrhagicfeverwithrenalsyndromevirus,HFRSV)中的媒介作用。方法 采用革螨、恙螨饲养繁殖的子代幼虫、若虫和成虫 ,消化后作螨细胞原代培养制螨细胞片 ,用原位RT -PCR分子杂交法检测HV -RNA在螨组织细胞内分布和定位。结果 HV -RNA多分布于螨消化系统的上皮细胞 ,卵巢组织细胞内 ;革螨子 4代、子 3代和恙螨若虫组织细胞内HV阳性颗粒较革螨子 2代、子 1代和恙螨幼虫多且密集。结论 革螨、恙螨作为HFRS的生物学媒介有细胞分子水平的直接证据。

重组病毒/家蚕细胞系统稳定高效表达HBeAg基因的研究

以 HBe Ag(乙型肝炎病毒 e抗原 )基因置换家蚕核多角体病毒 (Bm NPV)中多角体蛋白基因编码序列 ,获得高效表达 HBe Ag的重组病毒 r Bm HBe。在重组病毒复制过程中 ,家蚕 Bm N细胞的病理变化与野生型病毒的感染相同 ,但不能形成多角体。重组病毒的复制为典型的一步生长曲线 ,感染后 2 4 h～ 36h,病毒效价递增并达到最高。感染后 2 4 h,培养液中可检测到表达产物HBe Ag,72 h达到高峰。病毒感染复数的改变对 HBe Ag表达的影响是时限性的。低感染复数时HBe Ag产量较高。细胞接种密度及病毒接种时间对 HBe Ag的表达有较大的影响 ,最适的细胞接种密度为 3.2～ 6.4× 1 0 5 细胞 /瓶 ,在细胞指数生长前期 (48h～ 60 h)接种重组病毒 ,对于获得较高的重组病毒复制效价和 HBe Ag的产量都是有利的。在采用最佳技术参数组合的条件下 ,ELISA法检测细胞培养液中 HBe Ag滴度可达 1∶ 32 0 0 0。以上研究结果有助于在生产中高效稳定地制备HBe Ag,以满足供应配套乙肝 HBe Ag/抗

因特网用户信息检索与浏览行为研究

分别揭示了因特网用户信息检索、信息浏览行为的特点,比较了网上信息浏览与检索行为中的用户信息需求认知建构过程,并在此基础上提出了浏览/检索整合式的网上信息查寻模式.

用微载体技术培养家蚕BmN细胞的实验研究

观察了家蚕ＢｍＮ（从Ｓｉｌｋｗｏｒｍ Ｂｏｍｂｙｘ ｍｏｒｉ获得的细胞系）细胞在微载体Ｃｙｔｏｄｅｘ３上的贴壁分布，提出其分布符合Ｐｏｉｓｓｏｎ规律，并由此估计了不同细胞接种浓度时裸球的百分比，与实际观测结果基本符合；研究了不同接种浓度与微载体浓度时细胞的生长情况，家蚕ＢｍＮ细胞在Ｃｙｔｏｄｅｘ ３上生长的临界接种数为一珠粒６．４个细胞。当微载体浓度为３ｇ／Ｌ时，最低的接种浓度为１．０×１０＾５／

重组家蚕核多角体病毒（rBmNPV）的复制及所载HuIFN－α基因的表达

报道了重组家蚕核多角体病毒（ＢｏｍｂｙｘｍｏｒｉｎｕｃｌｅａｒＰｏｌｙｈｅｄｒｏｓｉｓＶｉｒｕｓＢｍＮＰＶ）在家蚕细胞ＢｍＮ中复制的细胞病理学变化，除了不形成多角体以外，与野生型病毒相同．研究了病毒感染复数、细胞接种密度和细胞生长阶段对重组病毒复制和α－干扰素（ＩＦＮ－α）表达量的影响．在一定低感染复数时，α－干扰素的产量较高．对于重组病毒的复制，最适的细胞接种密度为３．６～７．０×１０５细胞／瓶．在细胞指数生长前期（４８～６０ｈ）接种重组病毒，对于获得较高的重组病毒复制效价和α－干扰素的产量都是有利的．

满足因特网用户信息需求的人文思考

辩证地思考了因特网技术在信息交流应用中的工具理性与价值理性的问题 ,认为网络技术的工具理性帮助人类在较大程度上改善了信息交流环境与手段 ,提高了信息交流效率 ,但同时也带来了人文价值的弱化问题 ;欲改变工具理性与价值理性分离的局面 ,就应该确立正确的价值导向 ,强化法律、道德、信息素质的人文关怀作用。就因特网信息服务系统而言 ,要实现对用户的人文关怀 ,必须树立真正的用户中心理念 :从用户满意到社会满意 ,从满足用户需求到增进用户利益 ,从满足用户需求到超越用户期望 。

乙肝病毒e抗原基因在大肠杆茵中高表达

取pZD 8703质粒DNA(本室构建的高表达乙肝核心抗原基因质粒)用Ava Ⅰ酶切开,Bal 31酶消化,加四种核甘酸dNTP、DNA聚合酶大片段酶补平后,用T_4 DNA连接酶连接,再用EcoRI酶消化,回收EcoRI小片段连接到pJLA 503的EcoRI位点,转化受体菌JM103,获得在P_RP_L启动子控制下,由温度调节CIts 857开启和关闭的高表达乙肝e抗原(HBeAg)的重组体。用抗HBe-β)单克隆酶标抗体配套的ELISA双抗体夹心法测定经超声波处理的细菌原液,HBeAg的终效价在1:10240以上,只含少量HBeAg。可以代替血清HBeAg用作配套检测试剂。

信息教育与创新人才的培养

本文重点分析了培养创新人才的创新教育与信息活动间的本质联系．没有信息教育、创新教育就会丧失其根本目标。因此，采用多种方法加强学生的信息意识和信息能力培养已成为培养人才工作刻不容缓的任务。

家蚕核多角体病毒双穿梭载体的构建及GFP和HBeAg融合蛋白的表达

用ＡｃＮＰＶ穿梭载体Ａｃ－Ｂａｃｍｉｄ与野生型ＢｍＮＰＶＤＮＡ共转染家蚕ＢｍＮ细胞，通过同源重组得到整合了ｌａｃＺ／Ｔｎ７ａｔ／ｍｉｎｉＦ表达盒的ＢｍＮＰＶＢａｃｍｉｄ，除能在大肠杆菌／ＢｍＮ细胞中穿梭复制外，还能感染ＢｍＮ－ＰＶ的非允许细胞Ｓｆ９，成功地构建了ＢｍＮＰＶ的双穿梭载体．经与重组转座质粒ｐＦＧＨｅ转座，获得了插入ｇｆｐ／ＨＢＶｅ融合基因的重组ｒＢｍ－Ｂａｃｍｉｄ（ｒＢｍＧＨｅ），在家蚕细胞中表达了既能发射绿色荧光又具有ＨＢｅＡｇ抗原性的双功能融合蛋白．

家蚕BmN细胞的微载体培养及HBeAg的高效表达

选择微载体Ｃｙｔｏｄｅｘ３对家蚕ＢｍＮ（从ＳｉｌｋｗｏｒｍＢｏｍｂｙｘｍｏｒｉ获得的细胞系）细胞进行高密度培养，并获得成功。观察了家蚕ＢｍＮ细胞在微载体Ｃｙｔｏｄｅｘ３上的贴壁分布，研究了不同接种浓度与微载体浓度时细胞的生长情况，并筛选出最佳的技术参数。在１０００ｍＬ滚瓶中用微载体Ｇｙｔｏｄｅｘ３培养家蚕细胞，在合适的培养条件下（细胞接种浓度３．６×１０５细胞／ｍＬ、微载体浓度５ｇ／Ｌ），５ｄ后，细胞的终密度达到２．８×１０６细胞／ｍＬ，细胞增长指数为７．９。在细胞指数生长期（传代后４８～６０ｈ）用载有ＨＢｅＡｇ基因的重组病毒（ｒＢｍＨＢｅ）接种（感染量为０．４ＰＦＵ／细胞），５ｄ后，培养上清中ＨＢｅＡｇ滴度为１∶９．６×１０４，是用方瓶静止培养的家蚕细胞表达量的３倍。

革螨、恙螨细胞培养及其特征的初步研究

目的 建立螨类细胞培养方法 ,为从细胞分子水平研究革螨、恙螨作为HFRS媒介提供条件。方法 采用革螨、恙螨的若虫、幼虫进行螨类细胞培养 ,建立螨细胞系。革螨、恙螨若虫、幼虫经消毒、胰酶消化处理后 ,接种于含15 %FBS改良TC199培养基中培养。结果 两种螨细胞 2周后细胞生长良好 ,并形成单层 ,现已传了 4代。细胞形态以梭形为主 ,染色体 2n =6 ,细胞对数期群体倍增时间 2 0 .5 0h。最能适应在TC199培养基上生长。动态观察对氨基酸要求 ,发现谷氨酸、酪氨酸、鸟氨酸 ,胱氨酸和精氨酸需量最大。结论 本结果为研究HFRSV在螨体内增殖。

西南师范学院图书博物馆专修科办学述评

西南师范学院图书博物馆专修科是20世纪50年代初期我国图书馆学教育的三个办学单位之一。文章评述了图博科的创办背景、办学经过与办学特色。

图书馆学专业核心课程浅议

本文探讨了图书馆学专业核心课程的涵义及作用，提出了确立核心课程的三个基本原则，并就核心课程建设中的若干具体问题进行了讨论。