岗梅转录组及其乌索烷型三萜皂苷生物合成相关酶基因的发掘

目的:发掘与岗梅乌索烷型三萜皂苷生物合成相关的酶基因。方法:利用Illumina测序平台对岗梅根进行转录组测序,通过基因注释、同源分析、系统发生分析等生物信息学手段,发掘可能参与合成的单基因簇(Unigenes)。结果:在岗梅根转录组中发现了272条与萜类生物合成相关的Unigenes。这其中包括72条可能参与萜类生物合成上游途径的Unigenes,以及26条可能与三萜合成途径下游母核合成、氧化和糖基化相关的Unigenes。对其中部分Unigenes进行系统发生分析,进一步揭示了这些Unigenes与同源基因间的进化关系。利用酵母表达系统,鉴定了两个香树酯醇合酶IaAS1和IaAS2,其中IaAS1为少数以α-香树脂醇为主要产物的香树酯醇合酶之一。结论:本文从岗梅根转录组数据库中发掘到一系列可能与岗梅乌索烷型三萜皂苷生物合成相关的酶基因。对这些基因的进一步研究,有助于从分子水平揭示岗梅中乌索烷型三萜皂苷的生物合成途径。

岗梅实时荧光定量PCR内参基因的筛选

为筛选适用于岗梅实时荧光定量PCR的内参基因。应用实时荧光定量PCR技术,分析18S r RNA(18S)、Actin(ACT)、α-tubulin(TUA)、β-tubulin(TUB)、Cyclophili(CYP)、Elongation factor 1-α(EF-1α)和Polyubiquitin(UBQ)共7个看家基因在岗梅的8个不同组织部位中的表达情况,并利用Ge Norm、Norm Finder和Best Keeper共3个软件对每个看家基因的表达稳定性进行评价。3个软件的分析结果均表明:18S、ACT和TUA看家基因的稳定性和相关性均较好,可在这3个看家基因中选择1个或以18S-ACT、18S-TUA组合作为岗梅基因研究的内参基因。

近5年冬青属药用植物化学成分及药理作用研究进展

综述2008～2012年冬青属药用植物中化学成分和药理作用研究进展。冬青属植物的化学成分主要有三萜及其苷类、黄酮及多元酚类、苯丙素类等,具有抗病原微生物、抗炎、抗肿瘤、保护心脑血管及降糖降脂等多种药理作用。系统的药理药效学研究和化学成分研究,有利于揭示冬青属药用植物的药理活性及其物质基础,为更好地开发药物、有效合理地利用该属的药用植物资源提供参考。

桂枝甘草药对抗心律失常有效部位的筛选

【目的】筛选桂枝甘草药对抗心律失常的有效部位。【方法】选用KM小鼠,随机分为空白对照组,模型组,维拉帕米组(剂量为0.1 g.kg-1.d-1),桂甘原液组、挥发油部位组、乙酸乙酯部位组、正丁醇部位组、母液部位组(剂量均为37 g.kg-1.d-1);采用经典水提法,系统溶剂萃取分离各部位,采用氯仿致小鼠心律失常动物模型,观察各组小鼠心律失常的发生率、死亡率、心率和心律失常持续时间。【结果】挥发油部位组和乙酸乙酯部位组小鼠的心律失常发生率显著低于模型组,死亡率显著低于维拉帕米组,且能显著减慢模型小鼠的心率,显著缩短模型小鼠的心律失常持续时间(均P<0.05)。【结论】挥发油部位和乙酸乙酯部位可能为桂枝甘草药对抗心律失常的有效部位。

桂枝甘草汤挥发性成分的GC-MS测定研究

目的探讨桂枝甘草汤(桂枝、炙甘草)中主要的挥发性成分。方法采用GC-MS方法分析10批次样品挥发油主要化学组分,用归一化法测定其百分含量。在进样口温度250℃,检测器温度260℃,载气流速为1mL.min-1,分流比为50∶1,柱温60℃,保持3 min,10℃.min-1升至150℃,3℃.min-1升至180℃,10℃.min-1升至250℃,保持2 min的色谱条件下,挥发油主成分可以达到较好分离。结果共鉴定了桂枝甘草汤中33个挥发性成分,占挥发性总成分的93%以上;主要为苯甲醛、苯丙醛、反式肉桂醛、肉桂醛(61.02%±9.13%)、2'-甲氧基肉桂醛,红没药醇、十六酸等。结论桂枝甘草汤中挥发油成分主要来自桂枝挥发油成分;该方法准确、稳定、可靠,可用于桂枝甘草汤挥发性化学成分的分析研究。

基于ITS2条形码的南药巴戟天真伪鉴别

本研究旨在建立基于ITS2条形码的巴戟天及其混伪品的真伪鉴别方法。采用试剂盒提取巴戟天植物样品的总DNA,以一对通用引物对其ITS2条形码进行PCR扩增并测序;从Genbank数据库获取巴戟天及其混伪品ITS2序列。采用DNAMAN、ClustalX软件拼接比对序列,以及利用MEGA5.1软件构建NJ树。获得的22条ITS2序列的长度范围为224~244 bp,GC含量范围为59.8%~70.1%。巴戟天与8种混伪品的ITS2序列存在155处变异,种间K2P遗传距离远大于种内K2P遗传距离。基于ITS2条形码的NJ聚类树能直观地区分巴戟天及其混伪品。因此,ITS2条形码适用于南药巴戟天及其混伪品的鉴别,可为其基原研究提供重要的分子鉴定证据。

HPLC-ELSD测定鸡蛋中胆固醇的含量

应用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）对不同种类鸡蛋中胆固醇的含量进行测定。采用C18色谱柱为固定相，以甲醇为流动相，流速为1mL·min^-1柱温为25℃；蒸发光散射检测器的氮气流速为2L·min^-1漂移管温度为85℃。结果表明，胆固醇进样量在4．008-40．080μg范围内，其对数与峰面积的对数呈良好的线性关系，相关系数R=0．9991，低、中、高三个浓度回收率为95．4％～99．1％。该方法操作简便、快速，精密度好，结果准确可靠。

利用psbA-trnH片段鉴定罗汉果和山药破壁草本

[目的]解决罗汉果和山药破璧草本DNA提取困难,而无法用分子生物学鉴定的问题。[方法]通过比较常用DNA提取试剂盒法和改良的CTAB法,利用psbA-trnH片段鉴定罗汉果和山药破壁草本。[结果]改良的CTAB法可从罗汉果和山药的药材、破壁粉末和破壁草本3种形态中成功地提取出基因组DNA,并可进一步利用DNA条形码的psbA-trnH片段进行分子鉴定。[结论]该方法稳定可行,可用于罗汉果和山药的药材、破壁粉末和破壁草本的DNA条形码鉴别。

广东省水生耐盐药用植物资源现状及其产业发展探讨

在第四次全国中药资源普查试点工作的基础上,对广东省境内水生、耐盐药用植物资源调查结果进行梳理和分析发现,广东省水生药用植物共160种,隶属54科90属,涉及国家重点调查药材12种;耐盐药用植物269种,隶属63个科197属,涉及国家重点调查药材22种。该省人工种植的水生、耐盐药用植物有30多种,规模超过22 000 hm^(2),占全省中药材种植总面积的10.5%;来源于水生、耐盐植物的药食同源中药材20余种,种植规模达9000 hm^(2)。广东省水生、耐盐药用植物资源丰富,建议根据生态环境和区域内产业需求对水生、耐盐药用植物资源进行合理、有效地开发利用。

广东金钱草糖基转移酶基因DsUGT11的克隆和功能分析

目的对广东金钱草中参与黄酮类化合物生物合成途径的糖基转移酶基因DsUGT11展开研究,通过生物信息分析、基因克隆、原核表达等技术解析其编码蛋白的功能。方法利用生物信息分析法分析和预测DsUGT11的序列特征和可能的生物功能,从新鲜叶片中提取RNA并反转录成cDNA,从中扩增和克隆得到DsUGT11基因,并通过异源表达和体外酶促反应对其编码蛋白的功能进行验证。结果从广东金钱草的转录组中筛选鉴定了1个糖基转移酶基因DsUGT11,该基因的开放阅读框长度为1426 bp,编码蛋白分子量52.14 KDa。生物信息结果表明DsUGT11具有UGT家族特有的“PSPG”的保守基序。本研究成功扩增得到DsUGT11并将其克隆至原核表达载体pMALc5X中,接着成功诱导得到重组蛋白。体外酶促反应结果表明,DsUGT11可以催化底物2-OH-柚皮素和UDP-葡萄糖生成3种化合物,包括芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(又称大波斯菊苷,Apigetrin)和两个未知化合物。结论本研究成功从广东金钱草中鉴定并克隆了DsUGT11基因,其编码蛋白是一个黄酮-氧糖苷转移酶,可以催化底物2-OH-柚皮素和UDP-葡萄糖生成大波斯菊苷等3种产物。

黄芪破壁粉的粉体学性质

为尝试现代高分子材料科学的研究方法和技术,初步明确黄芪破壁粉粉体特性的表征指标及分析方法,以黄芪破壁粉为例,研究黄芪破壁粉粉体特性的表征指标及分析方法。制备10批次黄芪破壁粉,考察其粒径分布、堆密度、比表面积、休止角、色度的影响因素,确定黄芪破壁粉粉体指标测定的方法,建立黄芪破壁粉的粉体学指标。结果表明:建立的测定黄芪破壁粉粒径、比表面积、堆密度、流动性、色度的方法可以用于粉体测定,且最佳粒径分布在16.417~44.113μm之间,堆密度为0.17~0.28g/mL,比表面积为1.6448~2.5098m2/g,休止角平均值为48.87°,色度为87.22~89.57。

黄芪破壁饮片的DNA条形码鉴别与黄酮类成分HPLC指纹图谱研究

目的:利用DNA条形码技术对黄芪破壁饮片进行物种鉴定,再建立其黄酮类成分HPLC指纹图谱,为其质量控制和鉴定提供依据。方法:提取15批样品的DNA进行序列分析和物种鉴定。物种鉴定后采用高效液相色谱法,色谱柱:Agilent ZORBAX SB-Aq C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.15%甲酸溶液梯度洗脱;流速0.6 m L/min;检测波长254 nm;柱温25℃;结果:经DNA条形码鉴定,实验所用的15批样品均被鉴定为蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao。在此基础上建立了15批样品的HPLC指纹图谱,标定11个共有峰,15批样品的相似度在0.9-1.0之间。结论:DNA条形码和指纹图谱两种方法可对黄芪破壁饮片进行物种鉴定和全面反映黄芪破壁饮片中的成分信息,可用于黄芪破壁饮片的真伪鉴定和批间一致性评价。

黄芪破壁饮片4种黄酮类成分分析及重金属含量测定

目的评价黄芪破壁饮片的有效性和安全性。方法利用高效液相色谱法建立一种可以同时测定黄芪破壁饮片中4种黄酮类成分(毛蕊异黄酮葡萄糖苷、刺芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素)含量的方法,同时采用电感耦合等离子体质谱法对黄芪破壁饮片中5种重金属(Cd、Cu、Pb、Hg、As)的含量进行监测。结果黄芪破壁饮片中4种黄酮类成分的线性关系良好(r≥0.999 5),加样回收率在98.6%~106.3%之间,方法的重复性和稳定性良好,表明该方法可用于黄芪破壁饮片的4种黄酮类成分含量的同时监测,可为黄芪质量控制提供更全面的参考;10批黄芪破壁饮片中5种重金属[镉(Cd)、铜(Cu)、铅(Pb)、汞(Hg)、砷(As)]的含量均符合相关限量规定。结论同时进行4种黄酮类成分分析及重金属含量测定,可以从有效物质基础和有害元素多个角度综合评价黄芪的质量和安全性。

DNA条形码在中药破壁饮片物种鉴定的应用

目的:建立中药破壁饮片的DNA条形码鉴定方法。方法:通过提取15个品种的中药破壁饮片的基因组DNA,并利用DNA条形码鉴定技术中的ITS2和psb A-trnH两个片段进行物种鉴定。结果:ITS2可以成功地对这15个品种进行鉴定;psbA-trnH也可对大部分的样品进行鉴定。结论:说明DNA条形码技术在中药破壁饮片的物种鉴定上可以得到很好的应用;同时也验证了以ITS2为主,psbA-trnH为辅助的药用植物DNA条形码鉴定思路的正确性和可行性。另外,psbA-trnH的数据库也可能存在不足,需补充完善更全面的物种序列信息,以供日后的物种鉴定提供更全面的基因模板信息作为参考和对照。

紫花杜鹃及其混淆品的微性状及显微鉴别研究

目的研究紫花杜鹃及其混淆品的性状、微性状及显微鉴别特征,为紫花杜鹃基原植物鉴别提供科学依据。方法采用性状鉴别法、微性状鉴别法、显微观察法,对紫花杜鹃及其混淆品进行系统的性状及显微鉴别研究。结果紫花杜鹃具扁平糙伏毛、不具刚毛、腺头毛,毛被与茎干成30°~60°着生,显微镜下可见木质化非腺毛较长,且先端平滑,基部呈半球形隆起;其混淆品毛被着生的角度、类型、长短、形态等差异明显。结论采用微性状和显微鉴别方法,可快速、简便地鉴别紫花杜鹃其及近缘混淆品,为紫花杜鹃的质量控制提供实验依据。

中药饮片粉末的历史与应用

中药饮片粉末入药是中药饮片自古以来就存在的一种应用形式。中药饮片粉末保留了原中药饮片的全部化学成分,因其具有全成分入药的优势而成为调剂或制剂原料应用的主要方式之一。本文通过对中药多种临床应用形式进行剖析、总结中药饮片粉末入药的历史及应用方式、分析中药物质基础利用的特点,探讨中药饮片粉末入药的特征和规律,以期为中药饮片粉末入药的现代研究与应用提供参考。

岗梅药材的TLC鉴别和HPLC指纹图谱

目的：建立岗梅药材的TLC鉴别方法和HPLC指纹图谱。方法：TLC鉴别采用Merck预制硅胶薄层板，以三氯甲烷．甲醇-乙酸乙酯-水-甲酸（20：20：40：10：2）为展开剂，10％硫酸乙醇105qC显色，366am紫外光下检视，HPLC指纹图谱采用PhenomenexSynergiFusionC18柱（4．6mm×250mm，4μm），柱温25℃，乙腈-0．05％磷酸梯度洗脱，流速1mL·min^-1，203nm波长检测；采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版”进行相似度计算。结果：岗梅与同属易混淆品毛冬青、铁冬青、满树星等的TLC图有较明显差异，可相互区别。不同来源的岗梅相似度为0．716～0．890，各混淆品与岗梅共有模式的相似度均〈0．630。结论：建立的方法可用于岗梅药材的真伪鉴别，为完善岗梅药材的质量标准提供了借鉴。

地榆药材的TLC鉴别和HPLC指纹图谱研究

目的：为全面评价和有效控制地榆药材质量提供依据。方法：参照2010年版《中国药典》（一部）方法对地榆药材进行薄层色谱（TLC）鉴别,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（6∶3∶2,V/V/V）为展开剂,于254 nm紫外光灯下检视。建立地榆药材的高效液相色谱指纹图谱：色谱柱为Phenomenex Synergi Fusion C18（250 mm×4.6 mm,4μm）,柱温为25℃,流动相为甲醇-0.05%磷酸溶液（梯度洗脱）,流速为1 ml/min,检测波长为277 nm。利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2004A版）软件对14批药材进行相似度评价。结果：TLC图中存在品种差异特征斑点,HPLC指纹图谱相似度为0.54-0.98;两种方法的试验结果均表明14批样品的来源较为复杂,包括了2个以上不同品种。结论：所建方法可用于全面评价地榆药材的质量。

古今岭南名医（一）

岭南地区因为地理环境、气候条件和生活习俗都有别於中原，在漫长的历史发展中形成了独具一格的“岭南医药学”。

古今岭南名医（二）

何克谏（公元1633——？），字其言．号青萝山人，广东番禺人。何氏出身明代名门望族．早年习儒致仕．明朝亡後随父兄隐居番禺青萝山中，以采药、行医、着书终其一生。何氏的着作有《生草药性备要》和《增注备载食物本草》。