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课程思政与大学英语“金课”构建研究
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作者 郑辉 张力 +1 位作者 杨亚丽 姜睿萍 《齐齐哈尔大学学报(哲学社会科学版)》 2024年第3期150-153,共4页
在打造高校英语教学“金课”工程的进程中,利用多媒体和信息技术,把课堂思政教学内容和语言课程进行有机结合,在以学生为中心,培养学生的英语自主学习能力的同时,通过通过融入习近平新时代中国特色社会主义思想,引导语言学习者牢固理想... 在打造高校英语教学“金课”工程的进程中,利用多媒体和信息技术,把课堂思政教学内容和语言课程进行有机结合,在以学生为中心,培养学生的英语自主学习能力的同时,通过通过融入习近平新时代中国特色社会主义思想,引导语言学习者牢固理想信念;融入中华优秀传统文化的英文表达,帮助学习者更加深入理解中华优秀传统文化的理论精髓与社会意义;融入对爱国、诚信等内容的现代理解,把民族精神、时代精神内化为学生的精神追求。有助于将大学英语课程打造成知识、技能和文化相融合的“金课”。 展开更多
关键词 传统文化 核心价值观 民族精神 自主学习
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双碳背景下场段设计与综合应用——以南宁地铁5号线那洪车辆基地为例
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作者 郑辉 《铁道标准设计》 北大核心 2024年第5期183-188,共6页
地铁场段作为城市大宗用地、大宗能源消耗的大户,其在落实碳达峰、碳中和政策方面具有十分重要的作用。为探究场段响应并实施双碳政策的技术路径,进一步厘清双碳战略下场段可实施的具体技术措施及效果,以南宁地铁5号线那洪车辆基地为例... 地铁场段作为城市大宗用地、大宗能源消耗的大户,其在落实碳达峰、碳中和政策方面具有十分重要的作用。为探究场段响应并实施双碳政策的技术路径,进一步厘清双碳战略下场段可实施的具体技术措施及效果,以南宁地铁5号线那洪车辆基地为例,以区域规划诉求、环境融合、智慧智能发展为导向,采取统筹规划、提前策划等手段,全过程采用双碳设计解决措施实现场段低碳节能。通过分析场段,可采取绿色生态体系建立、节能减排设计、智能化设计3个方面实现场段低碳节能。运营实践后表明,实施系列化双碳解决措施后,场段在节水、节电、节省人工方面效果显著,减少折合碳排放约23%,为后续城市轨道交通低碳节能提供有效参考。 展开更多
关键词 地铁 车辆段 1+N生态体系 节能减排 装配式综合管廊 智能运维小系统
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中华优秀传统文化融入高职英语课程的创新方法
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作者 郑辉 《英语广场(学术研究)》 2024年第25期112-116,共5页
高职院校是我国培养优秀人才的摇篮,英语作为国际交流的主要语言,其教学内容和方法的创新显得尤为重要。中华优秀传统文化包含了深厚的历史、哲学、文学及艺术等元素,是中华文化认同和传承的核心。本文通过对中华优秀传统文化融入高职... 高职院校是我国培养优秀人才的摇篮,英语作为国际交流的主要语言,其教学内容和方法的创新显得尤为重要。中华优秀传统文化包含了深厚的历史、哲学、文学及艺术等元素,是中华文化认同和传承的核心。本文通过对中华优秀传统文化融入高职英语课程价值的探讨、现状的总结、创新方法的提出,期望能丰富高职英语课程内容,提升教学质量,同时增强学生的国际视野和跨文化交际能力,为培养具有国际竞争力的高素质人才提供参考。 展开更多
关键词 中华优秀传统文化 高职院校 英语课程 创新方法
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北京2022年冬奥会和冬残奥会遗产特征研究
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作者 孙葆丽 王猛 +7 位作者 冯雅男 郑辉 杜孟尤 张昊 安学涛 禹庆喆 宋奇然 吕方 《西安体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2024年第4期443-450,共8页
北京2022年冬奥会和冬残奥会留下了宝贵而丰富的遗产。基于对北京2022年冬奥会和冬残奥会遗产规划、创造、维系过程的回顾,归纳出北京2022年冬奥会和冬残奥会遗产的首创性、杰出性、多样性、可持续性、区域性、挑战性、传承性等7大特征... 北京2022年冬奥会和冬残奥会留下了宝贵而丰富的遗产。基于对北京2022年冬奥会和冬残奥会遗产规划、创造、维系过程的回顾,归纳出北京2022年冬奥会和冬残奥会遗产的首创性、杰出性、多样性、可持续性、区域性、挑战性、传承性等7大特征。分析北京2022年冬奥会和冬残奥会遗产特征,既对北京2022年冬奥会和冬残奥会遗产重大议题形成更清晰的认识,丰富北京2022年冬奥会和冬残奥会相关理论,同时也为奥林匹克遗产可持续发展提供一定理论借鉴。 展开更多
关键词 奥林匹克遗产 北京2022年冬奥会和冬残奥会遗产 可持续发展
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非洲猪瘟疫苗安全性评价部分关键指标研究现状与思考
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作者 徐天刚 郑辉 +7 位作者 于小静 左媛媛 巩明霞 王筱真 李金明 魏荣 戈胜强 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2024年第10期47-52,共6页
非洲猪瘟疫苗研发是业界公认的世界级难题。近年来,随着现代生物技术的不断发展,非洲猪瘟疫苗尤其是弱毒活疫苗的实验室研究,再次掀起新一轮热潮并取得积极进展。但是针对候选疫苗的安全性评价指标,尤其是在接种试验、怀孕母畜安全性试... 非洲猪瘟疫苗研发是业界公认的世界级难题。近年来,随着现代生物技术的不断发展,非洲猪瘟疫苗尤其是弱毒活疫苗的实验室研究,再次掀起新一轮热潮并取得积极进展。但是针对候选疫苗的安全性评价指标,尤其是在接种试验、怀孕母畜安全性试验、疫苗水平传播试验和毒种毒力返强试验等方面,尚没有统一的参考标准,这在一定程度上给当前的非洲猪瘟疫苗客观评价工作带来不便。本文对国内外发表文献中涉及的非洲猪瘟疫苗安全性评价部分关键指标,如疫苗接种后临床表现、水平传播能力、毒力返强能力、对怀孕母猪安全性等的研究情况进行了梳理总结,客观概述了相关研究进展以及取得的成果与存在的问题,以期为国内相关研究人员提供参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 疫苗 安全性评价 关键指标
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非洲猪瘟基因Ⅰ型/Ⅱ型重组病毒研究现状及思考
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作者 戈胜强 沙洲 +7 位作者 郑辉 刘春菊 左媛媛 胡永新 王晓华 刘爽 魏荣 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2024年第3期68-72,共5页
基因重组在非洲猪瘟病毒(ASFV)基因组间广泛存在,它是造成ASFV遗传多样性的原因之一。ASFV基因Ⅱ型毒株2018年传入我国,2021年国内又报道发现基因Ⅰ型毒株和基因Ⅰ型/Ⅱ型重组病毒。我国分离的ASFV基因Ⅰ型/Ⅱ型重组毒嵌合了两个基因型... 基因重组在非洲猪瘟病毒(ASFV)基因组间广泛存在,它是造成ASFV遗传多样性的原因之一。ASFV基因Ⅱ型毒株2018年传入我国,2021年国内又报道发现基因Ⅰ型毒株和基因Ⅰ型/Ⅱ型重组病毒。我国分离的ASFV基因Ⅰ型/Ⅱ型重组毒嵌合了两个基因型序列并部分整合了二者的生物学特性,毒力与基因Ⅱ型强毒株相当,某些致病指标甚至更高;基因Ⅱ型减毒活疫苗株不能对该重组毒株产生有效保护。该重组毒株在国内的流行演变可能会显著影响ASFV的进化方向,并对ASFV疫苗研究带来新的挑战。本文通过对国内ASFV基因Ⅰ型/Ⅱ型重组病毒进行综述,就相关研究进展进行总结归纳,以期为我国ASF防控提供参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 重组病毒 疫苗研发
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尼帕病毒病疫苗研究进展
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作者 张慧 戈胜强 +6 位作者 刘爽 王晓华 郑辉 王淑娟 赵永刚 魏荣 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2024年第7期54-60,共7页
尼帕病毒病是一种人兽共患病,1998年在马来西亚首次出现。引起该病的病原为尼帕病毒,它是一种单负股RNA病毒,可感染猪、马、犬、猫等多种动物,对人的致死率可达75%以上。目前,尚无有效疫苗上市。该病毒的表面糖蛋白是目前疫苗研究的主... 尼帕病毒病是一种人兽共患病,1998年在马来西亚首次出现。引起该病的病原为尼帕病毒,它是一种单负股RNA病毒,可感染猪、马、犬、猫等多种动物,对人的致死率可达75%以上。目前,尚无有效疫苗上市。该病毒的表面糖蛋白是目前疫苗研究的主要靶标。以此为靶标,已有多种候选疫苗在不同动物模型中表现出良好的免疫效果,其中亚单位疫苗、重组活载体疫苗和mRNA疫苗是当前研究热点,已有3种相关人用候选疫苗进入临床试验。目前尼帕病毒病兽用疫苗研究进展缓慢,而兽用疫苗的使用可以有效预防病毒的跨种传播,符合“同一健康”理念,因此应加大兽用疫苗的研发力度。本文对尼帕病毒病不同类型疫苗相关研究进展进行了综述,并探讨了疫苗研究中的问题,以期为尼帕病毒病疫苗研究提供参考。 展开更多
关键词 尼帕病毒 疫苗研究 人兽共患病
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NEU%、CRP及IL-6水平对白血病合并肺部感染的诊断价值探讨 被引量:1
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作者 赵鑫 郑辉 刘燕子 《四川生理科学杂志》 2024年第2期250-252,共3页
目的:研究联合中性粒细胞百分比(Percentage of neutrophils,NEU%)、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)及白介素-6(Interleukin-6,IL-6)在白血病合并肺部感染中的诊断价值。方法:选取2019年1月到2023年1月在我院收治的81例白血病患者... 目的:研究联合中性粒细胞百分比(Percentage of neutrophils,NEU%)、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)及白介素-6(Interleukin-6,IL-6)在白血病合并肺部感染中的诊断价值。方法:选取2019年1月到2023年1月在我院收治的81例白血病患者作为研究对象。根据感染标准分为未感染组(36例)和感染组(45例)。感染组患者进一步根据感染程度分级,分为轻度感染组(32例)与重度感染组(13例)。对比未感染组和感染组外周血中NEU%、CRP、IL-6水平;对比轻度感染组与重度感染组外周血中NEU%、CRP、IL-6水平;探讨NEU%、CRP、IL-6水平单独及联合检测对白血病合并感染的诊断效能。结果:对比两组外周血中NEU%、CRP、IL-6水平,感染组3个指标均高于未感染组(P<0.05)。轻度感染组中NEU%、CPR、IL-6指标水平均低于重度感染组(P<0.05)。NEU%特异度为50.31%,灵敏度为80.20%,准确度为69.83%,CRP特异度为50.00%,灵敏度为88.37%,准确度为75.69%,IL-6特异度为40.36%,灵敏度为92.32%,准确度为72.32%,三项联合特异度为67.32%,灵敏度为96.51%,准确度为86.62%(P<0.05)。结论:白血病合并肺部感染中联合NEU%、CRP及IL-6水平明显升高,且三者联合对白血病合并肺部感染诊断价值高。 展开更多
关键词 中性粒细胞百分比 C-反应蛋白 白介素-6 白血病 肺部感染
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轴向流作用下均布非线性弹簧支承二维壁板的复杂响应
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作者 董宇 郑辉 杨翊仁 《计算力学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期506-512,共7页
考虑刚性导流段和尾流段对流场的影响,建立轴向流作用下二维板的非线性流固耦合运动控制方程,用有限差分法对控制方程进行离散。为了克服差分网格较多时带来的计算规模较大的问题,对控制方程用主模态缩减法缩减自由度,然后对离散方程进... 考虑刚性导流段和尾流段对流场的影响,建立轴向流作用下二维板的非线性流固耦合运动控制方程,用有限差分法对控制方程进行离散。为了克服差分网格较多时带来的计算规模较大的问题,对控制方程用主模态缩减法缩减自由度,然后对离散方程进行数值积分,得到系统的复杂响应,分析其分岔和混沌特性。计算结果表明,以来流流速幅值和阻尼参数为可变参数时,系统具有极其复杂的动态响应,通过分岔图、相图和庞加莱截面图等方法判断了系统多种形式的周期、拟周期和混沌运动,在以来流流速幅值为可变参数时,系统一开始经由周期倍化分岔的方式进入混沌;在以阻尼系数为可变参数时,经由倒周期倍化分岔的方式从混沌运动退回到周期振动。 展开更多
关键词 二维壁板 周期倍化分岔 模态缩减
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大学英语写作课程立体评价模式构建研究
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作者 姜睿萍 郑辉 杨圣柱 《黑龙江教师发展学院学报》 2024年第6期90-93,共4页
在大学英语写作课程中,传统的评价方式是由教师来评价学生的作品,然而由于班额大,教师的评价压力非常大,因而存在评价不足、促学效果不好等问题。自动评阅系统、学生互评、学生自评以及师生共评等新兴评价方式可以缓解教师的评价压力。... 在大学英语写作课程中,传统的评价方式是由教师来评价学生的作品,然而由于班额大,教师的评价压力非常大,因而存在评价不足、促学效果不好等问题。自动评阅系统、学生互评、学生自评以及师生共评等新兴评价方式可以缓解教师的评价压力。通过分析上述评价方式的优缺点,结合班级实际,在多种评价方式中取长补短构建立体评价模式,既可以缓解教师评价压力,也可以改善学生学习效果。 展开更多
关键词 大学英语写作 写作评价 立体评价模式
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科技支撑对突发公共卫生事件处置水平的影响机制——基于fsQCA方法的组态分析
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作者 郑辉 范雨琪 《科技管理研究》 CSSCI 2024年第15期227-234,共8页
科技支撑是应对突发公共卫生事件的重要引擎,如何通过科技支撑体系的构建来提升应急管理能力是当下亟待解决的问题。从“技术-组织-环境”(TOE)框架出发,基于NCA和fsQCA分析法,探究科技支撑对中国突发公共卫生事件处置水平的影响机制。... 科技支撑是应对突发公共卫生事件的重要引擎,如何通过科技支撑体系的构建来提升应急管理能力是当下亟待解决的问题。从“技术-组织-环境”(TOE)框架出发,基于NCA和fsQCA分析法,探究科技支撑对中国突发公共卫生事件处置水平的影响机制。研究发现,生物医疗创新、数字技术创新、监测预警能力、成果转化产业环境,均为影响突发公共卫生事件处置水平的必要条件;此外,突发公共卫生事件高处置水平组态存在4类驱动路径,分别为科技-政策驱动、数字创新驱动、制度创新驱动和预警驱动型,这些路径对于突发公共卫生事件的应对大有裨益,能够保障公众健康,增进社会稳定,推动“健康中国”的全新发展。 展开更多
关键词 科技支撑 突发公共卫生事件 NCA fsQCA TOE
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世界田联可持续发展的践行和启示
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作者 宋玉梅 郑辉 《当代体育科技》 2024年第15期75-79,共5页
世界田联在2020年制定了未来10年的可持续发展战略,其愿景是成为可以提供最佳可持续赛事的国际体育单项联合会,并居于同类领先地位。首先,研究梳理了世界田联可持续发展战略的背景、内容和意义,并推介了世界田联践行可持续发展原则的两... 世界田联在2020年制定了未来10年的可持续发展战略,其愿景是成为可以提供最佳可持续赛事的国际体育单项联合会,并居于同类领先地位。首先,研究梳理了世界田联可持续发展战略的背景、内容和意义,并推介了世界田联践行可持续发展原则的两个工具,分别是可持续赛事管理系统、田径让世界更美好标准。其次,以2023年布达佩斯世界田径锦标赛为例,探索世界田联与当地组委会在促进可持续发展的实践中所取得的经验成果。最后,总结了世界田联的国际经验对我国田径可持续发展的影响和启示。 展开更多
关键词 田径 世界田联 可持续发展 世界田径锦标赛
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数字孪生技术在地铁场段列检车间智能管控平台中的研究与应用
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作者 王丹 郑辉 《机械设计与制造工程》 2024年第10期129-132,共4页
地铁场段列检车间智能化管控水平决定车辆基地高效运转的程度。以BIM+数字孪生技术为基础,建立了列检车间数字孪生体系,搭建了车间智能管控平台,分析了智能列检车间关键技术,构建了管控平台的硬件系统、静态模型和软件平台。某地铁场段... 地铁场段列检车间智能化管控水平决定车辆基地高效运转的程度。以BIM+数字孪生技术为基础,建立了列检车间数字孪生体系,搭建了车间智能管控平台,分析了智能列检车间关键技术,构建了管控平台的硬件系统、静态模型和软件平台。某地铁场段列检车间数字孪生典型应用实践证明,该平台能有效整合车间内所有生产要素,基于车间动态、安全预警、作业回溯、安全教育等为生产运维和安全管控快速提供决策。 展开更多
关键词 列检车间 BIM轻量化 数字孪生体 智能管控
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2021年~2022年我国猪盖塔病毒流行情况调查及其E2基因序列遗传变异分析 被引量:2
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作者 吴语晗 董雅琴 +10 位作者 崔进 张慧 顾丛丛 刘爽 房琳琳 沙洲 郑辉 尼博 魏荣 段纲 张锋 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期461-467,共7页
为了解2021年~2022年我国猪盖塔病毒(GETV)的流行现状和遗传变异情况,本研究对我国16个省份采集2512份临床样品,采用荧光定量RT-PCR方法进行GETV的检测,按照省份和地区进行GETV流行病学调查分析;采用RT-PCR方法对部分GETV阳性样品经PCR... 为了解2021年~2022年我国猪盖塔病毒(GETV)的流行现状和遗传变异情况,本研究对我国16个省份采集2512份临床样品,采用荧光定量RT-PCR方法进行GETV的检测,按照省份和地区进行GETV流行病学调查分析;采用RT-PCR方法对部分GETV阳性样品经PCR扩增E2基因并连接至p MD18-T载体并测序,利用DNAStar软件分析E2基因及其编码氨基酸序列与GETV参考株相应序列的同源性及其氨基酸变异情况;利用MEGA6.0软件构建E2基因的进化树,分析GETV的基因型及遗传进化关系。结果显示,7个省份猪群样品中均检测出GETV阳性样品,阳性率为3.34%(84/2512)。其中,陕西省和黑龙江省为首次在猪中检测到GETV。不同生长阶段猪中,仔猪GETV的检出率最高,达9.52%。同源性分析显示,获得的32个猪源GETV E2基因序列之间的同源性为98.3%~100%,与马来西亚GETV MM2021株相应基因序列的同源性为94.4%~94.9%。氨基酸序列变异分析显示,与参考株相比,本研究测序的E2蛋白有9个氨基酸位点只出现于猪源GETV。遗传演化分析显示,32个GETV株均属于III亚群,与III亚群内早期中国M1株、韩国QIAG9301株、日本Kochi等病毒株相比,本研究鉴定的GETV形成了新的进化分支。本研究揭示了我国当前猪群中GETV的感染现状及流行株的遗传变异情况,为该病毒的分子生物学研究和相关疫病防控策略的制定提供基础数据和参考依据。 展开更多
关键词 盖塔病毒 E2基因 流行病学调查 氨基酸变异 遗传进化分析
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甲磺酸瑞波西汀体外颉颃塞内卡病毒的研究 被引量:1
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作者 巩有权 周晓翠 +7 位作者 郑辉 陈峰 曹振山 沙洲 张慧 崔进 武瑞 尼博 《中国畜牧兽医》 CSCD 北大核心 2024年第1期268-277,共10页
【目的】从含有127种化合物的FDA批准上市药物库中筛选具有颉颃A型塞内卡病毒(SenecavirusA,SV A)活性的化合物并研究其作用途径。【方法】利用荧光素酶重组塞内卡病毒(rSVA-NLuc)结合荧光素酶高通量筛选技术,建立抗SVA化合物体外筛选... 【目的】从含有127种化合物的FDA批准上市药物库中筛选具有颉颃A型塞内卡病毒(SenecavirusA,SV A)活性的化合物并研究其作用途径。【方法】利用荧光素酶重组塞内卡病毒(rSVA-NLuc)结合荧光素酶高通量筛选技术,建立抗SVA化合物体外筛选平台。从FDA批准上市药物库中筛选浓度为10μmol/L时具有抑制荧光素酶活性效应的化合物,并进一步利用实时荧光定量RT-PCR验证其抑制活性,通过反映乳酸脱氢酶(LDH)释放水平的细胞毒性试验进而确定其最大无毒浓度。针对病毒感染周期的吸附、入胞、复制和组装释放等4个主要过程,采用不同的细胞处理方法和实时荧光定量RT-PCR、间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay,IFA)、蛋白免疫印迹(Western blotting)和病毒滴度测定(TCID_(50))等技术进行化合物分子额顽机制研究。【结果】从包含127种分子的FDA获批上市药物库中筛选出8种候选抗SVA活性分子,通过实时荧光定量RT-PCR及细胞毒性检测,鉴定出1种安全、有效的化合物——甲磺酸瑞波西汀。在病毒感染细胞36h内甲磺酸瑞波西汀可使SVA VP3蛋白表达量和病毒滴度均极显著下降(P<0.01)。甲磺酸瑞波西汀处理金黄仓鼠肾细胞(BSR-T7/5)可减少SVA的吸附和入胞;实时荧光定量RT-PCR也显示甲磺酸瑞波西汀能抑制SVA的组装阶段,但它对SVA的复制和释放阶段没有影响。【结论】本试验从FDA批准上市药物库中筛选出了1种细胞毒性较低且颉SVA效果优异的化合物一—甲磺酸瑞波西汀,该化合物通过抑制SVA的吸附、入胞和组装阶段来对抗SVA感染。本研究为抗SVA药物的进一步研发提供重要参考。 展开更多
关键词 A型塞内卡病毒(SVA) FDA药物库 高通量筛选
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超声血流参数与乳头状甲状腺癌临床病理及超声TI-RADS分级关系研究 被引量:1
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作者 郑卫 郑辉 陈露 《河北医学》 CAS 2024年第5期810-813,共4页
目的:分析超声血流参数与乳头状甲状腺癌临床病理及超声TI-RADS分级关系。方法:以2020年10月至2023年11月于本院确诊的乳头状甲状腺癌患者103例为研究对象,所有研究对象均进行超声检查获取血流参数,并进行B超TI-RADS分级。比较不同病理... 目的:分析超声血流参数与乳头状甲状腺癌临床病理及超声TI-RADS分级关系。方法:以2020年10月至2023年11月于本院确诊的乳头状甲状腺癌患者103例为研究对象,所有研究对象均进行超声检查获取血流参数,并进行B超TI-RADS分级。比较不同病理特征及TI-RADS分级患者的血流参数,分析超声血流参数与乳头状甲状腺癌病理及TI-RADS分级的相关性。结果:Ⅲ~Ⅳ期患者的搏动指数(PI)、阻力指数(RI)、收缩期峰值流速与舒张期峰值流速比值(S/D)高于Ⅰ~Ⅱ期患者(P<0.05);颈部淋巴结转移患者的PI、RI、S/D显著高于未转移患者(P<0.05);TI-RADS分级5~6级患者的PI、RI、S/D高于4a~4c级(P<0.05)。Spearman秩相关性分析结果显示,PI、RI、S/D与乳头状甲状腺癌患者的TNM分期及TI-RADS分级均呈正相关(rTNM分期=0.401,0.453,0.462;rTI-RADS分级=0.308,0.376,0.368,P<0.05)。结论:超声血流参数PI、RI、S/D与乳头状甲状腺癌患者的肿瘤分期及TI-RADS分级密切相关,早期测定超声血流定量参数可为乳头状甲状腺癌的临床诊断、预测提供一定的参考信息。 展开更多
关键词 乳头状甲状腺癌 超声血流参数 超声TI-RADS分级 病理特征 相关性
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mRNA疫苗递送系统研究进展
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作者 李紫薇 张磊 +10 位作者 陈峰 郑辉 崔进 曹振山 张慧 戈胜强 魏荣 刘拂晓 南福龙 沙洲 尼博 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期4932-4942,共11页
与传统疫苗相比,mRNA疫苗具有易于编译、免疫原性高、安全性强、生产成本低等优点,而将mRNA高效递送至细胞并成功表达,是mRNA疫苗发挥作用的关键环节,也是mRNA疫苗研发的主要瓶颈与痛点。因此筛选经济高效的核酸递送系统对于mRNA疫苗研... 与传统疫苗相比,mRNA疫苗具有易于编译、免疫原性高、安全性强、生产成本低等优点,而将mRNA高效递送至细胞并成功表达,是mRNA疫苗发挥作用的关键环节,也是mRNA疫苗研发的主要瓶颈与痛点。因此筛选经济高效的核酸递送系统对于mRNA疫苗研发至关重要。目前,关注较多的核酸递送系统主要包括物理递送、纳米脂质体递送、聚合物递送、外泌体递送和阳离子乳剂递送等。物理递送主要是通过物理方法使裸mRNA直接穿过细胞膜进入细胞,纳米脂质体、聚合物、外泌体和阳离子乳剂等是以自身作为递送载体保护mRNA,从而提高递送效率、减少免疫反应。笔者基于mRNA疫苗最新研究进展,总结概述了不同递送方法的应用前景和局限性,并对其研究前景进行展望,以期为新型递送系统研发提供理论基础,促进mRNA疗法的临床应用,为更多疾病的预防和治疗提供新的mRNA疫苗解决方案。 展开更多
关键词 mRNA疫苗 递送系统 物理递送 纳米脂质体 聚合物
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天然产物库中体外颉颃A型塞内卡病毒化合物的筛选及作用途径研究
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作者 王西彤 沙洲 +9 位作者 迟田英 崔进 郑辉 陈峰 曹振山 张慧 戈胜强 魏荣 尼博 黄保续 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期3155-3165,共11页
【目的】寻找对A型塞内卡病毒(SVA)具有抑制活性的天然产物,并深入研究其颉颃途径。【方法】将天然产物浓度统一稀释至10μmol/L,与荧光素酶重组塞内卡病毒(rSVA-NLuc)相结合,在天然产物小分子库中筛选出具有荧光素酶抑制活性的化合物,... 【目的】寻找对A型塞内卡病毒(SVA)具有抑制活性的天然产物,并深入研究其颉颃途径。【方法】将天然产物浓度统一稀释至10μmol/L,与荧光素酶重组塞内卡病毒(rSVA-NLuc)相结合,在天然产物小分子库中筛选出具有荧光素酶抑制活性的化合物,采用实时荧光定量RT-PCR方法验证其活性,通过乳酸脱氢酶(LDH)法进行细胞毒性试验确定最大无毒浓度,结合病毒滴度测定、实时荧光定量RT-PCR、Western blotting、间接免疫荧光试验(IFA)等技术,在病毒感染周期的不同阶段,对其颉颃SVA的效果及途径进行研究。【结果】通过初筛,从136种天然产物中筛选出莫能霉素钠盐、孕酮、叶下珠次素、4-羟基德里辛和2-甲基雌酮5种能体外颉颃SVA的化合物。进一步通过实时荧光定量RT-PCR复核验证和细胞毒性检测,筛选出一种能体外颉颃SVA的天然产物——孕酮。与空白对照组相比,其在体外可导致SVA mRNA表达水平极显著下降(P<0.01),最大无毒浓度达50μmol/L。进一步研究表明,孕酮能在感染后8、12、24、36 h持续抑制SVA增殖,与对照组相比,在感染后24和36 h病毒滴度显著下降(P<0.05)。与对照组相比,不同浓度(10、20和50μmol/L)孕酮在吸附阶段导致SVA吸附水平极显著下降(P<0.01);在复制阶段使SVA VP3水平显著下降且使病毒滴度极显著下降(P<0.01);在释放阶段使释放胞外的病毒比例极显著下降(P<0.01);但对其他途径无显著影响。说明孕酮能在体外抑制SVA吸附、复制和释放,但对其入胞、组装途径无明显作用。【结论】本研究从天然产物小分子库中筛选出一种具有低细胞毒性且对SVA具有较强颉颃作用的天然产物——孕酮。该产物对SVA吸附、复制和释放阶段具有抑制作用,从而颉颃SVA的感染。本研究为促进抗SVA药物的开发和研究SVA的感染偏好性提供了科学参考。 展开更多
关键词 孕酮 A型塞内卡病毒(SVA) 天然产物 颉颃途径
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山东地区1株牛病毒性腹泻病毒的分离鉴定及遗传进化分析
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作者 毕峻铭 董雅琴 +7 位作者 崔进 沙洲 顾丛丛 郑辉 魏荣 孙福亮 张锋 张志宏 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期4485-4499,共15页
【目的】了解并掌握山东地区牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)流行毒株的生物学特性和遗传变异情况,为BVDV防控提供理论依据和技术支持。【方法】采集养牛场疑似BVDV感染样品制备组织上清液,利用RT-PCR方法进行病原... 【目的】了解并掌握山东地区牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)流行毒株的生物学特性和遗传变异情况,为BVDV防控提供理论依据和技术支持。【方法】采集养牛场疑似BVDV感染样品制备组织上清液,利用RT-PCR方法进行病原鉴定,接种MDBK细胞进行病毒分离培养,采用间接免疫荧光试验(IFA)和电镜观察对分离毒株进行鉴定,对分离毒株全基因组进行分段扩增、克隆和测序,并采用Lasergene等软件分别对全基因组序列、N^(pro)和E2基因进行比对和遗传演化分析。【结果】病料样品BVDV特异性引物RT-PCR扩增得到大小约504 bp的目的条带,与预期大小一致。IFA结果显示特异性绿色荧光;电镜下可见直径约50 nm的病毒粒子,表明分离到1株非致细胞病变型BVDV毒株,命名为SDNF9株。分离株基因组全长为12232 nt,与BVDV参考毒株的全基因组核苷酸相似性为79.1%~93.8%,其中,与中国分离毒株22AH-1和澳大利亚毒株Bega-like的相似性最高,为93.8%;N^(pro)和E2蛋白氨基酸存在多个位点变异;SDNF9分离毒株与BVDV2型毒株和BVDV3型毒株处于遗传演化的不同分支,而与BVDV 1型毒株处于同一分支,属于BVDV 1c基因型。【结论】本研究成功分离到1株BVDV 1c流行毒株,并进行基因组和遗传演化分析,与中国分离毒株22AH-1亲缘关系最近,为山东地区牛病毒性腹泻的防控和疫苗研制提供数据和材料支持。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒(BVDV) 分离 鉴定 序列分析 遗传进化分析
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我国部分省份牛冠状病毒HE基因遗传变异分析
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作者 罗健丹 张欣怡 +5 位作者 房琳琳 刘爽 郑辉 魏荣 董雅琴 肖啸 《动物医学进展》 北大核心 2024年第9期81-87,共7页
2020-2023年收集我国14个省份78个临床发病牛群的肛拭子、粪便、组织等样品1819份,用实时荧光RT-PCR方法进行牛冠状病毒(BCoV)检测,并选取部分核酸阳性样品进行HE基因全长的扩增、测序与遗传变异分析。78个发病牛群中,BCoV阳性场占56.4... 2020-2023年收集我国14个省份78个临床发病牛群的肛拭子、粪便、组织等样品1819份,用实时荧光RT-PCR方法进行牛冠状病毒(BCoV)检测,并选取部分核酸阳性样品进行HE基因全长的扩增、测序与遗传变异分析。78个发病牛群中,BCoV阳性场占56.41%,共获得35条HE基因全长序列,与参考序列相比,核苷酸同源性为97.0%~100.0%,氨基酸同源性为97.0%~99.8%。系统进化分析表明,BCoV毒株HE基因在进化上呈现典型的地域性特点,亚洲毒株和美国毒株进化上较为接近,而欧洲毒株位于另一个分支,所测毒株与中国参考毒株处于亚-美型毒株分支中,位置相对较为集中。所测35个HE序列中,有34个没有发生插入或缺失突变,来自宁夏的BCoV/NX13/CHN/2023毒株其HE基因存在12个核苷酸的插入突变,证实了BCoV HE基因插入变异株在我国的存在。基因重组分析显示,该毒株与BCoV/HeB120/CHN/2021的HE基因可能发生了重组,预测重组值分别为0.797和0.759。说明了我国部分省份临床发病牛群BCoV感染及BCoV HE基因的遗传变异,为明晰我国BCoV流行毒株分子特征提供参考。 展开更多
关键词 牛冠状病毒 HE基因 系统进化分析 变异株 基因重组
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