探析热电厂中全硫测定的影响及控制措施

硫是煤中的一种有害物质,煤燃烧以后会产生大量的二氧化硫对空气造成很大的污染,危害环境和人体健康。因此,在电厂煤化验室中,对全硫含量的准确测定至关重要。为了保障测定结果的准确性和可靠性,必须实施严格的全硫测定控制。本文将从全硫测定的方法、影响因素以及相应的控制措施等多个维度进行深入探讨,以期为提高电厂煤化验室全硫测定水平提供有益参考。

Wnt2在乳腺癌组织及患者血清中的表达及意义

目的检测乳腺癌细胞株(MDA-MB-231、ZR-75-30、MCF-7)、乳腺癌患者组织中Wnt2的表达,同时检测乳腺癌患者血清中Wnt2及CA-153表达量,并对二者的相关性进行分析。方法采用实时荧光定量PCR及Western blot技术检测MDA-MB-231、ZR-75-30、MCF-7中Wnt2 mRNA及蛋白水平;采用免疫组织化学对5例配对的癌旁组织、9例乳腺原位癌及9例侵袭性乳腺癌进行检测;同时采用ELISA检测15例健康成年女性、30例乳腺癌患者血清中Wnt2蛋白水平;电化学发光技术检测CA-153水平,并收集完整的病理资料与血清中Wnt2蛋白水平比较分析。结果 Wnt2在乳腺癌细胞株MDA-MB-231、ZR-75-30、MCF-7中未见表达;在乳腺癌组织上皮及间质细胞中呈高表达,而在配对的癌旁组织呈不表达或弱表达状态;30例乳腺癌患者血清中Wnt2及CA-153平均表达量显著高于健康成年女性(P<0.05),且Wnt2表达水平与CA-153呈正相关。结论血清Wnt2可与CA-153同时作为乳腺癌筛查的血清学辅助指标,有助于提高乳腺癌检出的灵敏度。

特异性小干扰RNA沉默Annexin Ⅱ基因表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭迁移力的影响

目的:探讨RNA干扰技术沉默Annexin Ⅱ基因表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭迁移力的影响。方法:体外化学合成Annexin Ⅱ基因序列特异性双链小干扰RNA(Annexin Ⅱ-siRNA),转染高转移人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,用荧光显微镜观察转染效率,逆转录-聚合酶链反应和蛋白印迹检测Annexin Ⅱ mRNA和蛋白表达水平;通过生长曲线和体外侵袭迁移实验,观察乳腺癌细胞恶性生物学行为的改变。结果:Annexin Ⅱ-siRNA能有效抑制Annexin Ⅱ mRNA和蛋白表达(P<0.05);经siRNA处理的细胞,细胞生长速度明显降低(P<0.05),侵袭迁移力显著下降(P<0.05)。结论:沉默Annexin Ⅱ基因表达可抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的侵袭迁移力。

UW2000全自动尿液分析工作站性能评价

目的评价重庆市天海公司生产的UW2000全自动尿液工作站性能。方法采用UW2000全自动尿液工作站对尿液有形成分[红细胞(RBC)、白细胞(WBC)]的批内、批间精密度,线性,携带污染率,准确度进行评价;同时对尿液干化学成分的批内、批间精密度,准确度进行评价。结果尿液有形成分高、中、低值新鲜标本批内精密度RBC为15.6%、6.8%、20.3%,WBC为16.4%、10.5%、24.6%,中、低值质控批间精密度RBC为12.8%、13.2%,WBC为15.3%、22.8%;RBC线性范围为88~19 513个/μL,相关系数为0.991,WBC线性范围为7~8 254个/μL,相关系数为0.997;RBC及WBC携带污染率分别为0.00%、0.06%;RBC、WBC仪器检测与手工检测相关系数分别为0.992、0.995。尿液干化学成分高、低质控品批内、批间精密度符合率,准确度基本均在仪器要求范围内。结论 UW2000全自动尿液分析仪工作站大大节约了人力,降低了检测成本,提高了检测速度,经验证的项目结果可靠,能满足一般医院的工作需求,具有较高的临床应用价值。

血清人附睾蛋白4、糖类抗原153在监测术后乳腺癌复发转移的探讨

目的探讨人附睾蛋白4（HE4）及糖类抗原153（CA153）在乳腺癌患者术后与术后多年复发转移的含量,以及HE4与CA153的相关性。方法对该院2013年5~12月的健康对照者30例（健康对照组）、乳腺癌术后无转移患者29例（患者无转移组）、乳腺癌术后复发转移患者29例（患者转移组）进行血清HE4和CA153检测,并分析HE4和CA153的相关性。结果与健康对照组和患者无转移组比较,HE4、CA153含量在患者转移组中明显升高,HE4、CA153阳性率也明显提高,差异均有统计学意义（P〈0.05）。与健康对照组比较,HE4含量和阳性率在患者无转移组明显提高,CA153含量也明显增加,差异均有统计学意义（P〈0.05）,但阳性率差异无统计学意义（P〉0.05）。HE4和CA153具有良好的相关性（r=0.607,P〈0.05）。结论 HE4和CA153在乳腺癌术后复发转移的监测中起着重要的临床意义。

AnnexinⅡ在4株人乳腺癌细胞中的表达及意义

目的:研究人乳腺癌细胞中AnnexinⅡ基因的表达情况,阐明AnnexinⅡ基因与乳腺癌细胞侵袭力的关系.方法:采用SYBR实时荧光定量PCR,Western Blot技术分别检测MDA-MB-435S,MDA-MB-231,ZR-75-30和MCF-7共4株人乳腺癌细胞AnnexinⅡ mRNA和蛋白的表达情况;免疫细胞化学检测AnnexinⅡ蛋白在4株人乳腺癌细胞中的定位;Millicell小室测定4株人乳腺癌细胞体外侵袭能力.结果:MDA-MB-435S,MDA-MB-231,ZR-75-30和MCF-7的AnnexinⅡ mRNA表达量分别为0.67±0.21,0.38±0.03,0.05±0.03,(4.06±0.81)×10-5,任两组细胞间AnnexinⅡ mRNA的表达量差异均有统计学意义(P<0.05);MDA-MB-435S,MDA-MB-231,ZR-75-30和MCF-7的AnnexinⅡ蛋白表达量:WesternBlot结果分别为1.47±0.06,1.10±0.05,0.70±0.03,0.09±0.01;免疫细胞化学结果分别为3423±312,2767±147,2001±245,353±128;任两组细胞间AnnexinⅡ蛋白表达量差异均有统计学意义(P<0.05);MDA-MB-435S,MDA-MB-231,ZR-75-30和MCF-7的体外侵袭力分别为135.3±7.6,147.2±8.9,79.4±2.9,15.3±4.4,除MDA-MB-435S细胞与MDA-MB-231细胞无显著差异外,其余两组细胞侵袭力有显著性差异(P<0.05).结论:在所检测的4株人乳腺癌细胞中,AnnexinⅡ表达量与细胞体外侵袭力呈正相关.

siRNA沉默AnnexinⅡ基因对人乳腺癌细胞MDA-MB-435S的影响

目的探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默AnnexinⅡ基因表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-435S生物学特性的影响。方法体外化学合成AnnexinⅡ序列特异性双链小干扰RNA(siRNA),脂质体介导转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S,采用荧光显微镜观察转染效率。收集siRNA干扰的细胞,RT-PCR、蛋白印迹和免疫细胞化学法分别检测AnnexinⅡmRNA和蛋白的抑制水平,并采用MTT法、流式细胞术测定细胞增殖能力和细胞周期的变化,Millicell小室测定细胞侵袭、迁移能力的变化。结果AnnexinⅡ-siRNA能有效抑制AnnexinⅡmRNA和蛋白的表达(P<0.05);经siRNA干扰后的细胞,细胞增殖能力显著减低(P<0.05);G0/G1期细胞明显增加,S期细胞明显减少(P<0.05);细胞侵袭、迁移能力明显降低(P<0.05)。结论采用siRNA干扰AnnexinⅡmRNA和蛋白表达后,能有效逆转乳腺癌细胞的某些恶性生物学特点,表明AnnexinⅡ与乳腺癌的发生、发展及转移有一定的关系。

Wnt2在不同肿瘤患者血清中水平的探讨

目的检测多种肿瘤患者(乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、肺癌、肝癌)血清中Wnt2水平,评价Wnt2在肿瘤中的临床应用价值。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测多种肿瘤患者血清中Wnt2水平。结果与健康者比较,乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌患者血清中Wnt2水平均明显升高(均P<0.05),肝癌患者血清中Wnt2水平明显降低(P<0.05),肺癌患者血清中Wnt2水平无明显变化(P>0.05)。结论 Wnt2在不同类别的肿瘤中水平不一致,可能在不同类别的肿瘤中起不同的作用。

SYBR实时荧光定量PCR检测人乳腺癌细胞AnnexinⅡmRNA方法的建立及应用

目的建立检测人AnnexinⅡmRNA水平的SYBR Green实时荧光定量PCR方法,并用其测定人乳腺癌细胞MDAMB-231和MCF-7中AnnexinⅡmRNA水平。方法根据人AnnexinⅡmRNA的保守序列设计特异性引物,提取人乳腺癌细胞总RNA,并逆转录为cDNA,胶回收纯化PCR产物,并与pGM-T载体连接构建质粒标准品,进一步通过SYBR Green实时荧光定量PCR检测人乳腺癌细胞中AnnexinⅡmRNA水平。结果该方法标准曲线的r2为0.997,融解曲线分析显示单个峰,pGM-T AnnexinⅡ质粒标准品高、低拷贝数的批内、批间变异系数分别为6.2%、7.8%(高拷贝)和9.1%、12.3%(低拷贝)。进一步研究表明人乳腺癌细胞MDA-MB-231中AnnexinⅡmRNA水平显著高于MCF-7细胞(P<0.01)。结论建立的检测人AnnexinⅡmRNA水平的SYBR Green实时荧光定量PCR方法特异性、重复性好,可用于人乳腺癌细胞中AnnexinⅡmRNA的定量检测。

联氨基姜黄素抑制STAT3信号通路对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭迁移性的影响

目的探讨姜黄素衍生物——联氨基姜黄素(hydrazinocurcumin,HC)通过抑制STAT3(signal transduction and activators of transcription-3)信号通路对乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭迁移性的影响。方法以人乳腺癌细胞株MDA-MB-231为研究对象,分DMSO对照组和HC处理组。采用MTT法检测HC对MDA-MB-231乳腺癌细胞的生长抑制作用,刘氏染色检测细胞形态学改变,Transwell小室检测细胞侵袭能力,细胞划痕试验检测细胞迁移能力,Western blot检测STAT3、p-STAT3、MMP-9及MMP-2的蛋白表达水平。结果 MTT检测显示,HC处理的细胞生长受到抑制,其抑制率呈时间-剂量依赖关系;刘氏染色发现处理细胞形态发生改变,细胞变圆;Transwell小室检测显示对照组穿膜细胞数为(598.00±21.28)/视野,而10、20μmol/LHC处理后透膜细胞数分别为(94.00±6.56)/视野和(4.00±1.00)/视野,穿膜细胞数显著低于对照组(P<0.05);划痕试验表明对照组划痕闭合率约为54%,而10、20μmol/LHC处理组基本无闭合(P<0.05);Westernblot检测显示,不同浓度HC处理MDA-MB-231细胞后,p-STAT3明显降低,而总STAT3水平无明显差异,MMP-9、MMP-2的表达也有减少。结论 HC可以通过抑制STAT3的活化(即p-STAT3),降低MMP-9、MMP-2的蛋白表达水平,从而抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的侵袭迁移性。

液基细胞学与高危型HPV-DNA联合检测在宫颈病变筛查中的意义

目的探讨薄层液基细胞学(TCT)与高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)DNA检测在宫颈病变筛查中的临床意义。方法 2012年1月至2014年1月该院就诊的宫颈病变患者1 343例,其中临床已病理确诊的宫颈癌386例,宫颈炎555例,CINⅠ269例,CINⅡ/Ⅲ133例,对所有患者均采用TCT法检测细胞病变,同时使用第2代杂交捕获法(HC2)检测高危型HPV-DNA的阳性表达率,并比较2种方法的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。结果高危型HPV-DNA在宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ和宫颈癌中的阳性率分别为26.5%、48.7%、54.9%、72.0%,4组患者之间比较,差异有统计学意义(P<0.01);TCT与高危型HPV-DNA联合检测其敏感性为80.2%,特异性为88.5%,阳性预测值86.7%,阴性预测值81.3%,均比单独检测值有所增高。结论 TCT与高危型HPV-DNA联合检测可提高检出率,对宫颈癌的预防和治疗具有重要意义。

心肌损伤相关蛋白联合检测对急性冠状动脉综合征的诊断价值

目的探讨缺血修饰清蛋白（IMA）、N末端脑钠肽前体（NT-proBNP）及超敏肌钙蛋白I（TnI-Ultra）联合检测对急性冠状动脉综合征（ACS）的临床诊断价值。方法收集该院健康对照组30例、非缺血性胸痛组（NICP）46例、不稳定型心绞痛（UA）组57例、非ST段抬高心肌梗死（NSTEMI）组21例和ST段抬高心肌梗死（STEMI）组19例。检测所有研究对象的血清IMA、NT-proBNP和TnI-Ultra水平并进行比较;记录胸痛发作时间,分析ACS患者胸痛小于3h内与3-6h间各项指标的变化;计算3项指标单独检测及其联合应用对ACS诊断的敏感度、特异度、阳性预测价值（PPV）、阴性预测值（NPV）和准确性。结果NSTEMI组、STEMI组患者血清IMA、NT-proBNP、TnI-Ultra水平均高于NICP组和健康对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;ACS患者血清IMA和NT-proBNP均值水平在胸痛小于3h组和胸痛3-6h组均高于健康对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;3项指标联合应用诊断ACS的敏感度、NPV和准确性均高于任何一项单独检测。结论血清IMA可作为心肌缺血标志物,IMA、NT-proBNP、TnI-Ultra水平变化可反映ACS发病的不同阶段,通过联合检测3项指标可提高ACS诊断的敏感度和准确性,对ACS的早期诊断及预后评估有一定的临床价值。

血浆替代血清行常规生化检测缩短正流转时间的可行性探讨

目的探讨肝素锂抗凝血浆替代血清进行常规生化检测缩短正流转时间(TAT)的可行性。方法应用日立H7600-20全自动生化分析仪对抽取的110例患者肝素锂抗凝血浆和血清中的35项生化检测结果进行比对分析。结果在肝素锂抗凝血浆与血清的35项生化检测结果中,清蛋白(ALB)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、总胆汁酸(TBA)、总胆红素(TB)、氯(Cl)、钙(Ca)、镁(Mg)、肌酐(CRE)、尿素(BUN)、尿酸(UA)、胱抑素C(CysC)、β2-微球蛋白(β2-MG)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)共16项指标的检测结果比较差异无统计学意义(P>0.05);而钠离子(Na+)、钾离子(K+)、二氧化碳(CO2)、磷(P)、铁(Fe)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、前清蛋白(PreA)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TCH)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A1(ApoA1)、载脂蛋白B(ApoB)、脂蛋白a[Lp(a)]、血糖(GLU)、直接胆红素(DB)共19项指标的检测结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论肝素锂抗凝血浆与血清中常规生化检测结果不完全一致,肝素锂抗凝血浆可选择性地替代血清进行部分急诊生化检测以缩短TAT。

尿液对羟基苯丙氨酸检测在恶性肿瘤早期预测中的应用价值

目的探讨尿液对羟基苯丙氨酸检测在恶性肿瘤预测中的临床应用价值。方法采用比色法对重庆市肿瘤研究所395例尿液样本(其中90例健康者、92例良性肿瘤、213例病理确诊的恶性肿瘤)对羟基苯丙氨酸进行检测分析。结果健康对照组、良性肿瘤组、恶性肿瘤组的阳性检出率分别为8.89%、14.13%、68.54%;与健康对照组比较,良性肿瘤组的阳性率差异无统计学意义(P>0.05),恶性肿瘤组的阳性率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与良性肿瘤组比较,恶性肿瘤组的阳性率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);恶性肿瘤组中的消化道恶性肿瘤、鼻咽癌、淋巴瘤、乳腺癌、妇科恶性肿瘤、肺癌及其他恶性肿瘤的阳性检出率分别是78.82%、72.22%、71.42%、65.38%、62.50%、60.00%和72.22%,不同病种间的阳性率差异无统计学意义(P>0.05);尿液对羟基苯丙氨酸对恶性肿瘤的检测灵敏度68.54%,特异性88.46%,准确度77.72%,阳性预测值87.00%,阴性预测值71.00%。结论尿液对羟基苯丙氨酸作为一种新的肿瘤标志物,适用于恶性肿瘤的广谱筛查;对良、恶性肿瘤的鉴别诊断具有重要的临床意义。

血清胱抑素C和β2微球蛋白联合检测对慢性肾脏病早期的诊断价值

目的：探讨血清胱抑素 C（cystatin C,Cys C）、β2微球蛋白（β2-microglobulin,β2-MG）联合检测对慢性肾脏病早期的诊断价值。方法收集2013年1月至2014年10月在本院就诊的高血压患者228例和健康体检者（健康对照组）51例,测定血清中 Cys C、β2-MG 和血肌酐（SCr）3项指标的水平。根据简化肾脏疾病膳食改良试验公式计算的肾小球滤过率（glomerular filtration rate,GFR）将高血压患者分为 A 组（高血压肾病代偿期,80例）,B 组（高血压肾病早期,70例）,C 组（高血压肾病中期,52例）,D 组（高血压肾病晚期,26例）。分析3项指标在各组间的差异及其联合测定对慢性肾脏病早期的敏感性。结果A 组与健康对照组比较,3项指标均值水平均无统计学差异。与健康对照组比较,B、C、D 组血清 Cys C 与β2-MG 均值水平均增高,有统计学差异（P 〈0.01）,而 B 组 SCr 均值水平无明显变化,C、D 组 SCr 均值水平有统计学差异（P 〈0.01）。3项指标均值水平伴随高血压肾病严重程度均呈逐渐升高趋势。ROC 曲线分析 Cys C、β2-MG、SCr 对高血压肾病诊断的 AUC 值依次为0.879、0.881、0.967。各组指标阳性率分析显示,3项联合检测阳性率大于 Cys C 联合β2-MG,组合阳性率大于单项检测阳性率。相关性分析 Cys C、β2-MG、SCr 与 GFR 之间呈负相关,相关系数 r分别为-0.776,-0.742,-0.732（P 〈0.01）,3项指标之间有较好的相关性,Cys C 与β2-MG 相关性最好（r=0.912）。结论血清 Cys C 与β2-MG 均可作为高血压肾病早期诊断的重要指标,二者联合测定可以提高对高血压早期肾损伤诊断的敏感度,定期联合检测血清 Cys C、β2-MG 和 SCr 水平对高血压肾病的分期诊断及其治疗具有重要指导意义。

实时荧光定量PCR检测HULC lncRNA方法的建立及初步应用

目的:建立实时荧光定量PCR检测长链非编码RNAHULC的方法,探讨其在作为肝癌标志的应用价值。方法:根据Genebank中的HULC lncRNA(AY914050.1)全序列,设计HULC基因的特异引物,构建HULC基因的T克隆载体,命名为pMD18-T-HULC;以pMD18-T-HULC为实时荧光定量PCR检测HULC的标准品,建立实时荧光定量PCR检测HULC的方法并进行方法学评价。应用此方法检测8种肿瘤细胞株、肝癌组织、其它癌及癌旁组织中HULC lncRNA的表达。结果:HULC实时荧光定量PCR检测方法学的最低检测限为1.8×103拷贝/L,线性范围为1.8×103拷贝/L至4.6×109拷贝/L;该法的批内变异系数(CV)<2.0%,批间CV<8.0%。其在肝癌组织和肝癌细胞株起始表达量为(7.6±3.1)×105拷贝/L至(5.6±3.2)×106拷贝/L,明显高于其它癌和癌旁组织HULC lncRNA表达量(<1.8×103拷贝/L)。新发现膀胱癌细胞株T24中表达量高〔(6.7±2.4)×105拷贝/L〕,但在膀胱癌组织中表达低(<1.8×103拷贝/L)。结论:成功建立了实时荧光定量PCR检测HULC lncRNA的方法,HULC lncRNA可望作为肝癌的标志。

血清Ⅰ型前胶原在前列腺癌骨转移早期诊断中的应用

目的探讨血清Ⅰ型前胶原(procollagen typeⅠ,PCⅠ)含量检测在早期诊断前列腺癌骨转移中的临床价值。方法采用羊Ⅰ型前胶原放射免疫试剂联合Ⅰ型前胶原氨基端肽(procollagen typeⅠamino terminal peptide,PⅠNP)和Ⅰ型前胶原羧基端肽(procollagen typeⅠcarboxyl terminal peptide,PⅠCP)对262例样本(包括50例正常人、62例前列腺增生症、67例前列腺癌以及83例前列腺骨转移患者的血清)进行含量检测并统计分析。结果前列腺癌骨转移组PCⅠ、PⅠNP、PⅠCP含量均显著高于其余各组(P<0.001);前列腺癌组PCⅠ、PⅠNP含量均显著高于正常对照组和前列腺增生组(P<0.05),PⅠCP含量无统计学差异(P>0.05);前列腺增生组的PCⅠ、PⅠNP、PⅠCP含量与正常对照组比较无统计学差异(P>0.05);前列腺癌骨转移组PCⅠ、PⅠNP、PⅠCP含量升高的比例均显著高于前列腺增生组和前列腺癌组(P<0.01)。PCⅠ、PⅠNP、PⅠCP含量检测对前列腺癌骨转移的诊断灵敏度分别为90.4%、88.0%、84.3%,特异度分别为94.4%、96.1%、95.5%,Youden指数分别为84.8%、84.0%、79.9%,诊断正确率均在92%以上;PCⅠ与PⅠNP、PⅠCP间的灵敏度、特异度等指标比较均无统计学差异(P>0.05)。结论自主研制的羊PCⅠ放射免疫试剂有望替代进口PⅠNP、PⅠCP放射免疫试剂进行血清PCⅠ含量检测,应用于前列腺癌骨转移的早期诊断和病程监测。

人YB-1的高效原核表达及其标准蛋白与抗血清的制备

目的:构建YB1-GST表达系统,建立经济高效YB-1蛋白制备方法并制备其多抗。方法:将YB-1编码序列亚克隆至表达载体pGEX-6P-1;转化表达菌并确定可溶性表达最佳条件;采用GST亲和层析与层析柱上PSP酶切融合蛋白获取无标签蛋白的YB-1,经超滤浓缩及Western blot鉴定后,进一步真空冷冻干燥,制备YB-1标准蛋白;采用大剂量YB-1长程免疫方案免疫家兔以制备其抗体。结果:成功构建了表达载体pGEX-YB1;SDS-PAGE结果显示,YB1-GST融合蛋白以可溶性表达为主;Western blot结果证实,表达产物经GST亲和层析、PSP酶切以及真空冷冻干燥后获得了纯度较高的YB-1标准蛋白,将该蛋白免疫家兔获得了较高效价与特异性的抗体。结论:建立了YB-1-GST表达系统与经济高效的YB-1蛋白纯化方法;获得了质量较高的YB-1多抗,为进一步制备YB-1单抗、深入探讨其在肿瘤细胞中的生物学功能以及YB-1定量检测方法的建立奠定了基础。

卵巢癌相关抗原CA125串联重复序列的原核表达纯化及抗血清制备

目的:建立CA125串联重复序列(CA125R)原核表达系统,表达纯化重组CA125R蛋白并制备其抗血清。方法:全基因合成一段CA125串联重复序列,并将其克隆至pET-32a(+),构建CA125R蛋白原核表达载体pET-CA125R;将构建好的pET-CA125R载体转化至E.coli BL21(DE3),确定最佳可溶性表达条件,通过Ni-NTA亲和层析系统纯化重组CA125R蛋白;纯化重组蛋白经Western blot方法验证后,免疫家兔制备抗血清。结果:成功构建CA125串联重复序列原核表达载体,确定了最佳可溶性诱导表达条件(0.5 mmol/LIPTG,15℃诱导6 h);Western blot结果证实纯化的重组蛋白正确,纯度高;制备的抗血清能特异识别重组CA125R蛋白和天然CA125糖蛋白。结论:成功建立了CA125R高效原核表达系统,并制备了高纯度重组CA125R蛋白及其抗血清。

SRSF1在肿瘤中的研究进展

人类基因中约有94％发生选择性剪接，使同一前体 m R‐NA分子产生不同基因型，编码不同蛋白质，极大增加了基因表达复杂程度和蛋白质多样性［1］。不同组织出现疾病时显示特定模式剪接变异体，这些剪接模式依赖于剪接因子在细胞核中的相对表达，包括表达量或翻译后修饰［2］。富含丝氨酸／精氨酸剪接因子1（SRSF1），是1个典型富含丝氨酸／精氨酸SR蛋白家族成员，参与基因组成性剪接和选择性剪接［3］。SRSF1通过调节基因选择性剪接参与肿瘤形成发展。