采用miR-148a低表达人绒毛膜滋养细胞构建的子痫前期模型细胞活力、焦亡、炎性和氧化应激反应观察

目的观察采用微小RNA-148a(miR-148a)低表达人绒毛膜滋养细胞系HTR-8/SVneo构建的子痫前期(Preeclampsia,PE)模型细胞的细胞活力、焦亡、炎症和氧化应激反应。方法取对数生长期人绒毛膜滋养细胞系HTR-8/SVneo,分为甲、乙、丙、丁组:甲组细胞用抑制miR-148a表达的miR-148a inhibitor转染24 h,加入100 ng/L的LPS培养24 h(建立PE模型);乙组细胞用空白对照NC-inhibitor转染24 h,加入100 ng/L的LPS培养24 h;丙组加入100 ng/L的LPS培养24 h;丁组不做任何处理。培养48 h时,采用qRT-PCR法检测各组细胞miR-148a,采用CCK8法检测各组细胞活力,采用TUNEL法测算各组细胞焦亡率,采用Western Blotting法检测各组细胞焦亡相关蛋白Caspase-1、GSDMD,采用ELISA法检测各组上清液炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6]及氧化应激指标[谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)]。结果与丁组相比,丙组细胞miR-148a相对表达量高,培养24、48、72 h时OD值低,细胞焦亡率高,细胞Caspase-1、GSDMD蛋白相对表达量高(P均<0.05);与乙组相比,甲组细胞miR-148a相对表达量低,培养24、48、72 h时OD值高,细胞焦亡率低,细胞Caspase-1、GSDMD和NLRP3蛋白相对表达量低(P均<0.05)。与丁组相比,丙组细胞上清液TNF-α、IL-1β及IL-6水平高,细胞GSH和SOD表达降低、MDA表达升高(P均<0.05);与乙组相比,甲组细胞上清液TNF-α、IL-1β及IL-6水平低,细胞GSH和SOD表达升高、MDA表达降低(P均<0.05)。结论miR-148a低表达HTR-8/SVneo细胞构建的PE模型细胞活力高,细胞焦亡程度、炎性反应及氧化应激反应低。miR-148a可能是PE的治疗靶点之一。

山西省旅游休闲街区高质量发展的对策研究

以山西省旅游休闲街区为例,总结了山西省旅游休闲街区的建设与形成,并针对目前存在的主要问题从部门联动提升管理、挖掘特色创新业态、加强软硬件建设提升服务水平、多方营销扩大市场知名度等方面提出了改进建议,以期为促进旅游休闲街区的高质量发展提供有价值的参考。

实验室电源特性测量方法及案例分析

电源特性测量是CB实验室和CNAS实验室认可要求的重要内容,实验室电源特性对电子电气产品的电学和性能参数的检测结果影响较大。基于CNAS实验室认可在电气检测领域的应用说明文件CNASCL01-A003:2019和CB检测实验室的操作文件OD 5010,结合检测方法标准规定的试验条件,详细阐述了电源特性与要求、电源特性测量方法、测量步骤,并通过应用案例说明如何运用测量方法和测量步骤,对指定检测条件下的供电电源进行电源特性测量和结果评价。最后总结了电源特性测量的基本原则和满负载情况下不能满足电源特性要求的处理方法。实验室电源特性测量方法的研究对于提升实验室测量结果准确性、促进数据互认互信、提升实验室竞争力和国际合作等方面都具有重要的意义和影响。

基于可追溯性的家用电器检测方法研究

通过研究GB 4706.1—2005《家用和类似用途电器的安全第一部分:通用要求》、IEC 60335-1标准和相关CTL决议内容,并结合不同检测人员出具的关于家用电器检验检测原始记录的案例,通过案例从标准条款、试验前准备、操作步骤、注意事项和应用案例等方面对标准中部分检测项目的试验方法进行研究,旨在使标准条款的试验方法更具有可操作性,试验记录更具有检测过程可追溯性。以标志擦拭试验和电源软线拉力扭矩试验为例,从质量控制的角度深入分析了人、机、料、法、环等方面的影响因素和解决方法,并归纳出能应用到家用电器检测过程的追溯性控制方法。

基于粪便DNA宏条形码的人工草地放牧绵羊采食组分研究

准确获取食草动物食性数据有助于了解草地放牧家畜的营养状况,同时也对掌握草地植物群落的动态变化具有重要意义。本研究通过从滩羊粪便样本中提取DNA,利用ITS2条形码和粪便DNA宏条形码技术(fDNA metabarcoding),基于出现频率(Frequency of occurrence,FO)和相对序列丰度(Relative read abundance,RRA)两个指标快速分析获得粪便中的物种组成。分析获得的滩羊食物组成包含28个植物类群,主要有藜属(Chenopodium sp.)、苜蓿属(Medicago sp.)、蒿属(Artemisia sp.)等隶属于13科23属,其中27个鉴定到种水平,物种鉴定分辨率高达96%。藜属FO和RRA均最高,分别为100.0%和31.5%,其次为紫花苜蓿(Medicago sativa),分别为100.0%和26.9%。基于两种算法分析得到的食物比例具有差异性和一致性,其中紫花苜蓿是放牧滩羊的主要采食来源,但摄入比例需要校正。研究证明了基于ITS2片段的粪便DNA宏条形码技术在食草家畜快速准确食性分析中的可行性,为此类研究提供了有力借鉴。建议采用该技术时应完善潜在摄食植物DNA条形码数据库,准确分析目标家畜在特定区域内的采食种类。

不同添加剂对高粱青贮质量的影响

为探讨不同添加剂对不同高粱青贮饲料质量影响,以4个高粱品种的全株为青贮原料,设清水对照和分别添加乙酸(0.3%)、丙酸(0.3%)和尿素(0.5%)4个处理,袋装青贮60天后取样,测定其发酵品质与化学成分。结果表明:添加乙酸处理显著提高青贮饲料的乳酸含量(P<0.05);添加丙酸处理显著降低青贮饲料的pH值和氨态氮含量,却显著提高乳酸含量(P<0.05);添加尿素处理显著提高青贮饲料的粗蛋白质及乳酸含量(P<0.05)。不同品种高粱青贮饲料的发酵质量存在差异,添加剂和品种对青贮的发酵品质有交互作用。其中,品种大力士和乐食青贮饲料品质优于天农青饲1号和乙醇高粱;添加乙酸、丙酸和尿素可以改善高粱青贮饲料发酵品质。

玉米胚乳细胞原生质体的分离与流式纯化

玉米胚乳是籽粒淀粉形成的主要场所,胚乳细胞的发育对籽粒的器官建成具有重要意义。分离胚乳细胞原生质体,能为胚乳培养、转录组分析等后续研究提供均一实验材料。本文在借鉴前人研究的基础上,通过调整酶的搭配种类、浓度以及质膜稳定剂、渗透压稳定剂的使用,优化了一套有效的玉米籽粒胚乳原生质体分离方法,并进一步运用流式分选技术纯化原生质体。结果表明,以1%纤维素酶、0.5%离析酶、0.5%半纤维素酶,在渗透压调节剂0.7～0.8 mol L–1和质膜稳定剂0.8 mol L–1的MS培养液内,30℃消解4 h,能够获得大量完整的粗制原生质体,二乙酸荧光素(FDA)染色表明纯化的原生质体仍能保持90%以上的生活力。流式分选术可将有活力原生质体从粗制原生质体悬浮液中富集、纯化出来。对一些原生质体分离和流式分选时的技术参数和影响因素进行了讨论。

添加剂Siloguard对全株玉米青贮饲料品质及有氧稳定性的影响

以全株玉米为原料,分别添加0.05%、0.10%Siloguard,研究其对全株玉米青贮饲料品质的影响,并对有氧暴露0,1,3,5,7 d的全株玉米青贮饲料的有氧稳定性进行分析与测定。结果表明:与对照相比,添加Silo-guard对青贮饲料pH值无显著影响,显著降低中性洗涤纤维和氨态氮含量(P<0.05);与添加0.05%Siloguard相比,添加0.10%Siloguard显著提高青贮饲料的粗蛋白含量(P<0.05)。全株玉米青贮饲料有氧暴露7 d时青贮饲料pH值升高,乳酸、乙酸和丙酸含量下降。

成人脂肪间充质干细胞的定向成骨诱导

背景:脂肪分离可获得大量的间充质干细胞并成功向骨、软骨、脂肪、心肌等多个方向诱导分化。目的:建立成人脂肪间充质干细胞体外分离培养、成骨分化方法,并探讨脂肪间充质干细胞作为骨组织工程的种子细胞的前景。方法:通过胶原酶消化法从成人脂肪中分离间充质干细胞,进行体外培养,流式细胞仪检测细胞表面标记物,CCK8检测细胞活性,成骨诱导液诱导干细胞向骨细胞分化,BCIP/NBT比色法染色检测碱性磷酸酶,茜素红染色检测钙结节形成,RT-PCR检测碱性磷酸酶,骨桥蛋白表达变化。结果与结论:利用脂肪抽吸液成功培养出脂肪间充质干细胞,且能稳定传代,增殖能力旺盛;流式细胞仪检测证实有特定的间充质干细胞表面标记物表达;成骨诱导脂肪间充质干细胞后呈典型的成骨细胞形态;碱性磷酸酶染色阳性,茜素红染色后可见钙结节形成,成骨诱导培养0,3,7,14,21,28 d,RT-PCR定量检测结果证实碱性磷酸酶、骨桥蛋白阳性表达。说明用酶消化法可以从人脂肪中分离得到脂肪间充质干细胞;脂肪间充质干细胞可向骨细胞诱导分化,阳性表达骨桥蛋白,碱性磷酸酶,是一种优良的骨组织工程的种子细胞。

转化生长因子-β_1及VEGF在肝纤维化中的表达

目的:观察肝组织TGF-β1及VEGF在肝纤维化形成过程中的作用及意义。方法:采用免疫组织化学方法检测36例慢性病毒性肝炎、肝纤维化、肝硬化TGF-β1及VEGF的表达。结果:随着慢性病毒性肝炎、肝纤维化及肝硬化的形成,TGF-β1及VEGF表达逐渐增强(P<0.01)。结论:肝组织中TGF-β1及VEGF的表达与肝纤维化及肝硬化的形成密切相关,可作为诊断和治疗早期肝纤维化的重要指征。

乙烯对桃果实MA贮藏期和货架期品质及有关生理机制的影响

【目的】研究乙烯对自发气调贮藏（MA）期间和货架期桃果实品质的影响。【方法】以“大久保”桃为试验材料，测定了4种不同处理（未经外源乙烯处理聚乙烯袋（PE袋）贮藏，5～10μL／L外源乙烯处理，10～20μL／L外源乙烯处理，1-甲基环丙烯（1-MCP）处理）及对照（PE打孔塑料袋贮藏），对MA贮藏期间和出库后20℃下货架期3d桃果实腐烂指数、硬度、可溶性固形物（SSC）和Vc含量、电导率等品质指标，以及乙烯释放量、呼吸速率变化等的影响。【结果】与其他处理相比较，5～10μL／L外源乙烯处理可以维持桃果实贮藏前期和中期较好的品质，其呼吸正常且较低，乙烯释放量正常，果实可以正常后熟软化，可溶性固形物和Vc含量较高，电导率较高，硬度适中；10～20μL／L外源乙烯处理与5～10μL／L外源乙烯处理类似，但其腐烂指数高于5～10μL／L外源乙烯处理；1-MCP处理桃果实贮藏期和货架期3d乙烯高峰出现晚，且峰值较其他处理低，呼吸速率较低，可溶性固形物和Ve含量较高，电导率较低，贮藏后期出现不可逆硬化现象，即使回温后桃果实也无法正常后熟软化；PE袋密封处理效果比对照稍强，腐烂较轻，呼吸速率和乙烯释放量较低，Vc含量和SSC含量不高，贮藏后期品质变差；对照处理效果最差，腐烂最严重，呼吸速率很低，乙烯释放量较低，Vc和SSC含量不高，贮藏后期品质最差。【结论】5～10μL／L外源乙烯处理效果最佳，在贮藏前期和中期较好地保持了桃果实的品质。

不同处理对桃果实MA贮藏期和货架期挥发性芳香物质含量的影响

为了探明乙烯与桃果实冷害之间的关系,以‘八月脆’桃果实为试验材料,研究了乙烯吸收剂、1-MCP、外源乙烯对低温MA贮藏期间和货架期桃果实的主要风味物质含量的影响。结果表明:外源乙烯处理能使桃果实贮藏前期保持很好的风味,但后期风味最差。低温MA贮藏期间和货架期期间1-MCP处理与乙烯吸收剂处理类似,贮藏后期还能保持较好的桃风味,且1-MCP处理效果更好。低温MA贮藏期间,己醛、苯甲醛含量受低温抑制明显,未随乙烯存在与否而明显变化;反-2-己烯醛随外源乙烯有无而变化,芳樟醇、γ-癸内酯含量和脂氧合酶(LOX)活性因乙烯存在而降低或后期降低,这些物质变化可以作为评价桃果实冷害的指标。

DNA宏条形码技术在食草动物食性研究中的应用

随着测序技术的快速发展,整合DNA条形码和高通量测序的DNA宏条形码技术已经成为当前研究热点之一,在食草动物的食性鉴定中有很大潜力。放牧动物食性研究是动物营养学和草地生态学领域的重要研究内容。而与传统食性研究方法相比,宏条形码技术可通过对植物DNA条形码的高通量测序,获得样本中的物种组成进而分析动物食性。介绍了传统食性分析手段的局限,重点综述了DNA宏条形码技术的产生、操作原理以及在食草类动物食性鉴定领域中的应用,同时还简述了可能存在的挑战,并对该技术今后的发展方向进行了展望。

小麦粘类CMS育性恢复基因的SSR分子标记与定位

利用SSR技术,对小麦粘类CMS(细胞质雄性不育)的1对近等基因系(NILs)和回交群体(BC’1)进行分析,筛选与粘类CMS育性恢复基因相连锁的分子标记并进行恢复基因定位,以进一步探讨小麦粘类CMS育性恢复的遗传机理。结果表明:在18对位于1BS上的SSR引物中,有6对引物在近等基因系间扩增出了稳定的多态性差异;经分离群体验证表明,恢复基因与4对SSR引物的扩增位点Xwmc406、Xbarc8、Xwmc611和Xgwm273有连锁关系,遗传距离分别为2.7、2.8、21.4和26.2cM,这些标记可稳定应用于小麦粘类CMS育性恢复基因的辅助选择;研究还表明,小麦粘类雄性不育系的育性恢复主要受1BS上的1对主效恢复基因及一些微效基因共同控制;本研究标记出的恢复基因应为Rfv1;上述4个标记与该主效恢复基因Rfv1之间的位置顺序依次为Xwmc406、Rfv1、Xbarc8、Xwmc611、Xgwm273。

粘类小麦CMS育性基因分布区研究

为更有效地选育小麦不育系的高恢复系,以8个粘类小麦细胞质雄性不育系(Cytoplasmic malesterility,CMS)为测验种,对310份来自国内外不同地区的普通小麦品种及亲本材料对粘类小麦CMS系的育性恢保关系进行调查,并采用聚类分析法研究了粘类小麦CMS育性基因的地区分布。结果表明:(1)高恢复能力的品种在中国春麦区和南方冬麦区的分布比例均超过50%,具有保持性的品种在加拿大分布最多,我国北方冬麦区次之,春麦区分布最少。(2)不同地区品种恢复度存在差异。(3)将48个普通品种聚为3类:第1类品种对粘类CMS的平均恢复度均低于20%,属全不育和高不育类型;第2类品种的平均恢复度在20%～55%范围内,基本属于半不育类型;第3类品种的平均恢复度均大于55%,属高可育和全可育类型。(4)对不育系进行聚类:90-110核背景下,K型和V型聚为一类,Ven型和B型聚为一类;224核型下V型和B型聚为一类,再和K型聚为一类,与Ven型距离最远;相同细胞质背景下,90-110和224两种核型分别在一定水平上被分为2个类别。

基于PLC的工业机械手控制系统

根据机械手在工业取料系统中的特点,采用触摸屏做上位机,以PLC和脉冲输出模块FX2N-1PG构成控制单元,分别对驱动机械手运动的4台步进电机进行精确的定位控制,详细论述了控制系统的组成和软件实现方法。实践证明:脉冲输出模块的使用提高了机械手的可靠性和控制精度,触摸屏实现了控制过程的智能化和工艺参数的可视化。

1BL/1RS小麦的分子和细胞学鉴定及黏类CMS育性恢复区域分布的分析

【目的】揭示黏类小麦细胞质雄性不育系育性恢复基因的区域分布及恢复材料的1BL/1RS情况,为黏类细胞质雄性不育系优良恢复源筛选提供理论依据,以推动黏类小麦雄性不育"三系"强优势组合的选配能不断得到新的材料保障。【方法】以8个黏类不育系和国内外一批小麦品种(系)为试材,结合分子和细胞学技术,进行1BL/1RS易位系鉴定,并利用中国国内法对其育性恢复程度进行分类。【结果】在参试的256份材料中,初步鉴定约20%的小麦品种(系)属于1BL/1RS易位系;育性表现半不育、高可育和全可育的品种(系)分别有86.15%、91.67%和100%为非1BL/1RS易位系,表现全不育和高不育的品种(系)中均有40%左右属于1BL/1RS易位系;恢复能力在50%以上的品种(系)在中国春麦区、长江中下游冬麦区、西南冬麦区和华南冬麦区的比例依次为60%、65.85%、68.42%和71.43%。【结论】黏类不育系优良恢复源大都为非1BL/1RS易位系,主要集中在中国春麦区和南方冬麦区。

葡萄酵素天然发酵过程中抗氧化性能研究

采用分光光度法通过测定黑鸡心葡萄酵素天然发酵过程中不同阶段的总酚含量、还原能力及其对DPPH·、·OH、O_2^-·、ABTS自由基的清除率来评价天然酵素的抗氧化性能。结果显示:黑鸡心葡萄天然酵素在发酵过程中总酚含量上升,对DPPH自由基、O_2^-·、·OH和ABTS自由基清除能力均呈逐渐增加趋势,发酵前后分别提高了6.84%,19.82%、7.32%和14.81%增幅较大,同时显示出与酵素总酚含量的变化有明显的正相关性。

天龙山灌丛生态系统土壤呼吸对水热和植被因子的响应

以太原天龙山自然保护区的2个灌木群落(样地1和样地2)为研究对象,通过同步观测土壤呼吸(R_(s))及土壤温度(T_(10))、水分(W_(r))、植被指数(VI),分析R_(s)的季节变化及其与环境因子季节变化的关系。结果表明:2个灌木群落R_(s)的季节变化趋势一致,最高值出现在夏季,最低值绝大多数出现在冬季,偶尔也出现在W_(r)较低的夏季。在季节尺度上,R_(s)与单一环境因子的关系为:与T_(10)为极显著;剔除水分低于1/3田间持水量的数据后,R_(s)与T_(10)的相关性提高;R_(s)与W_(r)的关系仅在样地1显著;R_(s)与Ⅵ的关系均为极显著。R_(s)与T_(10)和W_(r)的复合模型能够提高土壤呼吸的解释能力。土壤呼吸温度模型的残差与W_(r)的关系表明,样地1和2受干旱胁迫的W_(r)下限阈值分别为田间持水量的0.35和0.42。在R_(s)与T_(10)和W_(r)的复合模型中增加Ⅵ后,拟合模型的决定系数增加,赤池信息准则(AIC)值降低,模型的拟合效果得到改善。从AIC值看,3个3因素模型中温度-水分-植被指数的指数-双幂模型相对较好;3个植被指数中,比值植被指数模型相对较好。该研究结果可以为利用水热和植被因子精确估算灌丛土壤碳通量提供参考。