2012年第22届亚太肝脏研究学会(The22nd Asian Pacific Association for the Study of the Liver,APASL 2012)已于2012年2月16至19日在台北国际会议中心(TICC)圆满召开。此次大会共有来自全球56个国家的4000多位医师和研究人员参与...2012年第22届亚太肝脏研究学会(The22nd Asian Pacific Association for the Study of the Liver,APASL 2012)已于2012年2月16至19日在台北国际会议中心(TICC)圆满召开。此次大会共有来自全球56个国家的4000多位医师和研究人员参与,大陆参会人员1500多位,约150位学者专家受邀演讲,投稿论文篇数高达1018篇,会议期间探讨多项肝病重大议题外,还同时发布了乙型、丙型肝炎最新治疗指南。展开更多
目的:探讨靶向结缔组织生长因子(CTGF)的锤头核酶抑制TGF-β1作用下人肝星状细胞(HSC)Ⅰ型胶原(Col I)合成及其细胞周期进程的作用.方法:构建含有人CTGF锤头核酶cDNA序列的重组质粒pTriCTGF-Rz.将空质粒pTriEx2和重组质粒pTriCTGF-Rz分...目的:探讨靶向结缔组织生长因子(CTGF)的锤头核酶抑制TGF-β1作用下人肝星状细胞(HSC)Ⅰ型胶原(Col I)合成及其细胞周期进程的作用.方法:构建含有人CTGF锤头核酶cDNA序列的重组质粒pTriCTGF-Rz.将空质粒pTriEx2和重组质粒pTriCTGF-Rz分别转染人肝星状细胞系(LX-2)细胞.细胞分为4组:pTriEx2转染组,pTriEx2转染加TGF-β1组,pTriCTGF-Rz转染加TGF-β1组和pTriCTGF-Rz转染组.采用半定量RT-PCR测定LX-2细胞CTGF mRNA和Col I mRNA转录水平,采用ELISA和流式细胞仪分别用于LX-2细胞Col I分泌功能和LX-2细胞周期进程的检测.结果:TGF-β1可明显提高LX-2细胞CTGFmRNA和Col I mRNA的转录水平及分泌ColI蛋白功能(t=11.14,14.36,7.17,均P<0.01);p Tr i C T G F-R z转染L X-2细胞既能降低基础CTGF mRNA和Col I mRNA水平及Col I蛋白水平(t=2.86,3.06,2.97,均P<0.05),又能部分拮抗TGF-β1诱导LX-2细胞CTGF mRNA和Col I mRNA转录和Col I蛋白分泌的增加(t=2.99,3.09,3.02,均P<0.05).TGF-β1对LX-2细胞周期进程无影响.结论:CTGF是TGF-β1作用下人肝星状细胞合成Col I的下游介导者,TGF-β1对HSC周期进程无影响,靶向CTGF有可能成为肝纤维化基因治疗的新靶点.展开更多
目的:检测中空纤维丝、热可逆凝胶和低吸附培养板3种三维培养体系中丙型肝炎病毒(HCV)增殖水平,寻找效率较高的HCV体外培养系统。方法:利用中空纤维丝、热可逆凝胶及低吸附培养板培养永生化人肝细胞HuS-E/2,通过XTT法检测细胞增殖情况...目的:检测中空纤维丝、热可逆凝胶和低吸附培养板3种三维培养体系中丙型肝炎病毒(HCV)增殖水平,寻找效率较高的HCV体外培养系统。方法:利用中空纤维丝、热可逆凝胶及低吸附培养板培养永生化人肝细胞HuS-E/2,通过XTT法检测细胞增殖情况。以基因型为2a型的HCV病毒株JFH1进行感染,在感染后不同时间点收集细胞标本,利用实时PCR法检测细胞中HCV的滴度。结果:在中空纤维丝和热可逆凝胶中培养的HuS-E/2细胞增殖曲线为持续递增,至培养结束时细胞数为初始培养数的2~3倍,JFH1感染后中空纤维丝方法培养的细胞中HCV滴度为2.00×103 copies/1μg total RNA,热可逆凝胶培养的细胞中HCV滴度为2.95×103 copies/1μg total RNA,低吸附培养板方法培养的细胞中HCV滴度为1.18×103 copies/1μg totalRNA。结论:与中空纤维丝及低吸附培养板比较,热可逆凝胶法为基础的JFH1体外培养系统细胞生长稳定,HCV复制效率较高。展开更多
文摘2012年第22届亚太肝脏研究学会(The22nd Asian Pacific Association for the Study of the Liver,APASL 2012)已于2012年2月16至19日在台北国际会议中心(TICC)圆满召开。此次大会共有来自全球56个国家的4000多位医师和研究人员参与,大陆参会人员1500多位,约150位学者专家受邀演讲,投稿论文篇数高达1018篇,会议期间探讨多项肝病重大议题外,还同时发布了乙型、丙型肝炎最新治疗指南。
文摘目的:探讨靶向结缔组织生长因子(CTGF)的锤头核酶抑制TGF-β1作用下人肝星状细胞(HSC)Ⅰ型胶原(Col I)合成及其细胞周期进程的作用.方法:构建含有人CTGF锤头核酶cDNA序列的重组质粒pTriCTGF-Rz.将空质粒pTriEx2和重组质粒pTriCTGF-Rz分别转染人肝星状细胞系(LX-2)细胞.细胞分为4组:pTriEx2转染组,pTriEx2转染加TGF-β1组,pTriCTGF-Rz转染加TGF-β1组和pTriCTGF-Rz转染组.采用半定量RT-PCR测定LX-2细胞CTGF mRNA和Col I mRNA转录水平,采用ELISA和流式细胞仪分别用于LX-2细胞Col I分泌功能和LX-2细胞周期进程的检测.结果:TGF-β1可明显提高LX-2细胞CTGFmRNA和Col I mRNA的转录水平及分泌ColI蛋白功能(t=11.14,14.36,7.17,均P<0.01);p Tr i C T G F-R z转染L X-2细胞既能降低基础CTGF mRNA和Col I mRNA水平及Col I蛋白水平(t=2.86,3.06,2.97,均P<0.05),又能部分拮抗TGF-β1诱导LX-2细胞CTGF mRNA和Col I mRNA转录和Col I蛋白分泌的增加(t=2.99,3.09,3.02,均P<0.05).TGF-β1对LX-2细胞周期进程无影响.结论:CTGF是TGF-β1作用下人肝星状细胞合成Col I的下游介导者,TGF-β1对HSC周期进程无影响,靶向CTGF有可能成为肝纤维化基因治疗的新靶点.
文摘目的:检测中空纤维丝、热可逆凝胶和低吸附培养板3种三维培养体系中丙型肝炎病毒(HCV)增殖水平,寻找效率较高的HCV体外培养系统。方法:利用中空纤维丝、热可逆凝胶及低吸附培养板培养永生化人肝细胞HuS-E/2,通过XTT法检测细胞增殖情况。以基因型为2a型的HCV病毒株JFH1进行感染,在感染后不同时间点收集细胞标本,利用实时PCR法检测细胞中HCV的滴度。结果:在中空纤维丝和热可逆凝胶中培养的HuS-E/2细胞增殖曲线为持续递增,至培养结束时细胞数为初始培养数的2~3倍,JFH1感染后中空纤维丝方法培养的细胞中HCV滴度为2.00×103 copies/1μg total RNA,热可逆凝胶培养的细胞中HCV滴度为2.95×103 copies/1μg total RNA,低吸附培养板方法培养的细胞中HCV滴度为1.18×103 copies/1μg totalRNA。结论:与中空纤维丝及低吸附培养板比较,热可逆凝胶法为基础的JFH1体外培养系统细胞生长稳定,HCV复制效率较高。