顺铂和阿霉素诱导肝细胞肝癌细胞凋亡阈值研究

目的 :了解抗癌药物顺铂 (CDDP)、阿霉素 (ADM)诱导肝细胞肝癌 (HCC)的细胞凋亡阈值。方法 :采用肿瘤细胞原代培养技术、活细胞萤光染色法和流式细胞仪定量分析。结果 :顺铂或阿霉素与细胞共同培养后 ,荧光显微镜下见正常细胞核呈弥散均匀荧光 ,凋亡细胞核内颗粒状荧光。随抗癌药物 (ADM、CDDP)剂量的增加 ,诱导人肝癌细胞的细胞凋亡率也增加 ,但以ADM 1.0 μg/mL和 2 0 μg/mL及CDDP 1 5 μg/mL和 3 0 μg/mL作用明显。ADM 2 0 μg/mL可导致HCC细胞凋亡 75 % ,CDDP 3 0 μg/mL可致HCC细胞凋亡 75 %。 2 5例未经治疗的HCC细胞和HepG - 2细胞的ADM、CDDP敏感性检测表明 ,ADM的凋亡阈值为 1 0 μg/mL ,CDDP的凋亡阈值为 1 5 μg/mL。临床凋亡敏感剂量分别为ADM 2 0mg/m2 ,CDDP 30mg/m2 。结论 :本文获得的ADM和CD

卵巢上皮癌bcl-2、p53基因与多药耐药的相关研究

目的 探讨卵巢上皮癌bcl—2、p53基因与肿瘤多药耐药的相关关系。方法 用免疫组化LSAB法检测70例卵巢上皮癌和15例交界瘤的bcl—2、p53基因水平的表达。结果 卵巢癌的bcl—2基因水平呈低表达,浆液性癌、粘液性癌的bcl—2基因表达率分别为11％(5/45)和20％(5/25),交界瘤呈阴性反应。p53抑制基因在浆液性癌、粘液性癌和交界瘤的表达率则分别为77％、72％和0％,P—gp基因在卵巢癌呈高表达,上述三类标本的阳性率分别为88％、80％及33％。结论 bcl—2与p53基因水平的表达与肿瘤细胞的多药耐药相关,bcl—2可作为预测肿瘤预后及药物敏感性的重要指标之一。

SC58125通过抑制IκBα的降解调节TNF-α诱导的人结肠癌HT29细胞的凋亡

目的:了解SC58125与TNF-α是否具有协同诱导HT29细胞凋亡的作用,同时探讨其可能的分子机制。方法:用MTT、Hoechst 33342染色及琼脂糖凝胶电泳,观察SC58125/TNF-α对HT29结肠癌细胞增殖与凋亡的作用;用EMSA及Western blotting检测转录因子NF-κB的结合活性、IκBα以及磷酸化IκBα的表达。结果:SC58125与TNF-α在抑制HT29细胞增殖及诱导其凋亡方面具有明显的协同作用;表现为细胞核浓缩、核碎裂及"DNA梯带"形成;凋亡过程中伴随caspase活性的激活。经TNF-α刺激后的HT29细胞,IκBα,磷酸化IκBα迅速降解,NF-κB的结合活性大大提高,而加入SC58125后,IκBα降解及NF-κB的结合活性明显受抑制。结论:SC58125与TNF-α在诱导HT29细胞凋亡方面具有明显的协同作用,这可能与激活caspase-3及抑制IκBα降解有关。

上皮生长因子受体与非小细胞肺癌肿瘤免疫及转移的相关关系

目的与方法：采用链霉菌抗生物素蛋白———过氧化物酶连结法（ＬＳＡＢ）免疫组化和图象定量分析技术检测５０例非小细胞型肺癌（其中伴有淋巴结转移者３２例，不伴转移者１８例）上皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的表达。结果：ＥＧＦＲ表达与肿瘤间质淋巴细胞浸润（ＴＩＬ）呈负相关（Ｐ＜０．０１），ＥＧＦＲ高表达时，ＴＩＬ浸润少，肺癌的转移率高（８３％）。ＥＧＦＲ的表达与肺癌的组织类型明显相关（Ｐ＜０．０５），但与肺癌的分化程度与转移无相关。结论：肿瘤细胞内ＥＧＦＲ的表达程度与体内肿瘤免疫机能密切相关，二者共同影响肺癌细胞的生长、分化和转移。

WHO肺部肿瘤组织学新分类

肺癌治疗策略的制定和终点疗效的评价有赖于准确的病理组织学分类。随着近年来的肺癌分子生物学研究进展 ,国际肺癌学会 (IASLC)多次讨论重新修订病理组织学分类的意见 ,对过去在组织学分类上存在差异的组织学类型重新进行了统一。1999年4月 ,世界卫生组织 (WHO)公布了第3版《肺和胸膜肿瘤的组织学分类》。新版肺部肿瘤分类比旧版更为详尽、明确和严格 ,与近年来肺癌分子生物学的研究成果更趋于一致 ,新分类解决了一直以来肺癌分类中存在的混乱状态 ,根据组织学来源更具体地划分出各种类型 ,对肺部肿瘤的诊断、治疗和预后判断将起到重要的指导作用。规范病理诊断标准 ,有利于促进国际间的学术交流 。

腹腔镜手术治疗输卵管妊娠的疗效观察

目的观察腹腔镜手术治疗输卵管妊娠的疗效。方法选取佛山中医院三水医院与佛山中医院自2010年1月～2012年12月收治的240例输卵管妊娠患者,按照随机数字表法分为观察组与对照组各120例,分别给予腹腔镜手术和开腹手术治疗,比较两组患者的各项手术指标及输卵管通畅情况。结果观察组手术时间、术中出血量、住院时间、术后排气时间及血β-HCG值转阴时间均明显少于对照组(P<0.01),具有统计学意义。随访观察6个月,观察组输卵管通畅93例,通畅率为77.5%;对照组输卵管通畅75例,通畅率为62.5%。观察组输卵管通畅率显著高于对照组(χ2=10.024,P<0.01),具有统计学意义。结论腹腔镜手术治疗输卵管妊娠具有损伤小、术后易康复、缩短血β-HCG值转阴时间等优势,是当前治疗输卵管妊娠的最佳方法。

胰岛素增敏剂治疗多囊卵巢综合征内分泌紊乱的效果观察

目的：观察胰岛素增敏剂治疗多囊卵巢综合征内分泌紊乱的效果。方法：选用2013年1月~2015年1月在我院妇科就诊的50例多囊卵巢综合征内分泌紊乱患者作为观察对象,随机分为治疗组和对照组。对照组采用去氧孕烯炔雌醇片、氯米芬、地塞米松治疗,治疗组在对照组治疗基础上添加胰岛素增敏剂治疗,对比观察两组治疗效果。结果：经过三个月的治疗,治疗组胰岛素抵抗、空腹胰岛素、血清空腹血糖、黄体生成素、睾酮水平明显低于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：胰岛素增敏剂治疗多囊卵巢综合征内分泌紊乱的疗效明显,降低患者的胰岛素抵抗,有助于患者恢复卵巢功能。

自体骨髓干细胞原位移植治疗急性心肌梗死的临床研究

目的 :用粒细胞集落刺激因子 (G -CSF)动员自体骨髓干细胞进入心肌梗死部位原位移植以修复梗死心肌组织 ,探讨其对急性心肌梗死患者心肌梗死面积及心功能的影响。方法 :2 5例初次急性心肌梗死患者在入院后随机分为干细胞原位移植组 (n =12 )和对照组 (n =13)。干细胞原位移植组于入院后在常规治疗基础上加用G -CSF动员自体骨髓干细胞进行心肌梗死原位移植 ;对照组按急性心肌梗死常规方法治疗。于入院第 ( 1、2 8d)描记常规 12导联心电图 ,采用Wagner的QRS波群记分法评价心功能 ,于入院 ( 7、2 8d)行核素心肌灌注断层显像 ,测量心肌梗死面积。结果 :G -CSF治疗 4周 ,干细胞原位移植组QRS记分值明显降低 ,显著低于对照组 (P <0 0 5 ) ;心肌梗死面积由 36 0 %± 8 3%下降至 18 0 %± 5 8%,显著小于对照组 (P <0 0 5 )。结论 :用G -CSF动员自体骨髓干细胞来修复坏死心肌组织的“干细胞原位移植”疗法 ,能减小心肌梗死的范围 ,改善心功能。

肿节风防治化疗后血小板减少症的研究

目的 :探讨肿节风对大剂量化疗后小鼠血小板减少的防治作用。方法 :本研究以Babl/c纯系清洁级小鼠为实验对象 ,通过大剂量 5 氟尿嘧啶腹腔注射复制血小板减少的动物模型 ,用肿节风稀释液从实验开始连续进行灌胃干预 ,分别在预处理前、化疗前、化疗后第 2、第 4及第 7天测定小鼠血常规 ;并在化疗后第 7天处死小鼠 ,行骨髓病理活检 ,观察骨髓造血情况。结果 :经过肿节风预处理后 ,化疗前单药干预组及联合干预组小鼠外周血小板数量显著高于同期对照组 (P <0 0 5 ) ,化疗后两个实验组小鼠的血小板数量与对照组相比无显著下降 (P <0 0 5 ) ,而两实验组间无显著性差异 (P >0 0 5 )。骨髓病理检查结果提示 ,两实验组小鼠骨髓增生活跃 ,骨髓腔内可见巨核细胞 ,对照组小鼠骨髓增生低下 ,未发现巨核细胞。结论 :肿节风具有对抗大剂量 5 FU所造成的血小板减少的作用 ,从而预防并治疗化疗后血小板减少症的发生。

参芪扶正注射液对血液恶性肿瘤化疗患者造血功能和免疫功能的影响

目的研究参芪扶正注射液对血液系统恶性肿瘤化疗患者造血功能和免疫功能的影响。方法80例均处于初治诱导缓解治疗阶段的血液肿瘤患者,分为治疗组和对照组,治疗组在化疗的同时给予参芪扶正注射液250mL/(g.d),共14天,对照组单用化疗,两组其他支持治疗相同。观察两组化疗后缓解率,化疗前后血常规、T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+)和B淋巴细胞(CD3-CD1+9)的水平。结果化疗后缓解率治疗组[90.0%(36/40)]与对照组[82.5%(33/40)]比较,差异无统计学意义(P>0.05);化疗后治疗组外周血白细胞计数和血红蛋白均高于对照组(P<0.05);CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平均明显高于对照组(P<0.05),CD3-CD1+9两组比较差异无统计学意义。结论参芪扶正注射液能减轻化疗对血液肿瘤患者骨髓造血功能的抑制,并能促进化疗患者骨髓造血功能的恢复;提高化疗患者的细胞免疫功能;改善血液肿瘤化疗患者的生活质量。

参芪扶正注射液对化疗后小鼠免疫功能的保护作用研究

目的:探讨参芪扶正注射液对化疗后小鼠免疫功能的保护作用。方法:用5-氟尿嘧啶(5-FU)50mg/(kg·d)×3天腹腔注射BALB/c小鼠,检测小鼠免疫功能。治疗组给予参芪扶正注射液40、80ml/(kg·d)分别腹腔注射给药,连续7天;对照组予生理盐水40ml/(kg·d)。于治疗第7天和第15天予免疫器官重量法检测胸腺、脾脏指数,用流式细胞仪(FACS)测定脾淋巴细胞中T细胞亚群、B淋巴细胞及脾淋巴细胞膜IL-2R(即活化T淋巴细胞CD3+CD25+)百分率;MTT法测ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力。结果:用5-FU化疗后小鼠免疫功能低下;应用参芪扶正注射液治疗后小鼠脾CD3+、CD3+CD4+CD8-、CD3+CD4+CD8-/CD3+CD4-CD8+(即CD4+/CD8+)、CD3+CD25+百分率及ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力均明显高于对照组(P<0·05),且能持续1周以上。结论:参芪扶正注射液可提高化疗后免疫功能低下小鼠的细胞免疫功能,且疗效较长。临床上可试用参芪扶正注射液对化疗患者的免疫功能进行保护,或对化疗后免疫功能低下患者进行治疗。

粒细胞集落刺激因子干预性治疗大鼠心肌梗塞的实验研究

目的 :探讨用粒细胞集落刺激因子 (G -CSF)干预性治疗心肌梗塞动物模型的作用。方法 :健康大鼠随机分为心肌梗塞干预性治疗组和心肌梗塞对照组。干预性治疗组予G -CSF 10 μg·kg-1·d-1皮下注射 5d ,并于第 3d用盐酸异丙肾上腺素 (ISO) 5mg/kg腹腔注射复制大鼠心肌梗塞模型。对照组皮下注射等量生理盐水 5d ,也于第 3d用ISO复制心肌梗塞模型。两组均于注射ISO后 2周、4周将动物处死 ,取出心脏 ,病理检查大鼠心肌梗塞的病理变化情况。结果 :注射ISO后 2周、4周 ,干预性治疗组心室肌疤痕组织面积显著小于对照组 (P <0 .0 5 ) ,并可见到心肌细胞、平滑肌细胞、血管内皮细胞的再生。结论 :G -CSF能促进梗死后心肌组织再生 ,明显减少心肌梗塞后疤痕组织范围 ,可用于急性心肌梗塞的干预性治疗。

应用组织芯片检测食管鳞状细胞癌中APC、β-catenin、E-cadherin与cyclin D1的表达及其意义

背景与目的:食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)的发生是个多因素多阶段的演进过程。Wnt信号转导通路在肿瘤发生发展中起重要作用。本研究探讨4种Wnt通路上的蛋白在食管鳞癌发生中的作用及在早期诊断中的意义。方法:制作由199例食管鳞癌组织与其癌旁164例正常粘膜、34例基底细胞增生和30例不典型增生上皮组成的组织芯片,应用免疫组化方法检测APC、β-catenin、E-cadherin、cyclin D1的表达情况。结果:APC和E-cadherin在ESCC阳性率分别是69.6%、19.6%,均低于各自正常组(98.0%、96.3%,均为P<0.01),β-catenin和cyclinD1在ESCC的异常表达率分别是65.5%和70.9%,均高于各自正常组(1.2%,0.8%,均为P<0.01)。按正常粘膜→基底细胞增生→不典型增生→ESCC的顺序,APC低表达发生在ESCC,β-catenin和E-cadherin表达异常始于不典型增生,cyclin D1过表达始于基底细胞增生。随着ESCC分化程度由高到低的改变,APC、E-cadherin和cyclin D1阳性率逐渐减少,β-catenin逐渐增加。β-catenin的表达与APC无相关(r=-0.10,P>0.05),与E-cadherin呈负相关(r=-0.31,P<0.01),与cyclin D1呈正相关(r=0.49,P<0.01)。结论:APC、E-cadherin、β-catenin和cyclin D1可能在ESCC发生过程中起重要作用。β-catenin、E-cadherin和cyclin D1的表达检测有助于ESCC的早期诊断。

粒细胞集落刺激因子动员骨髓干细胞治疗大鼠急性心肌梗塞

目的 :探讨G -CSF动员的骨髓来源干细胞对急性心肌梗塞动物模型的治疗作用与对缺血濒死心肌的保护作用。方法 :用异丙肾上腺素 (ISO)复制急性心肌梗塞大鼠动物模型 ,于 3h后用G -CSF动员骨髓干细胞释放和迁移至心肌梗塞部位 ,并分别于 2 4h、48h和 2周后杀死大鼠 ,取出心脏 ,检测心肌的病理变化情况。结果 :用ISO后 2 4h对照组可见散在心肌梗塞灶 ,坏死区周围有多量以中性粒细胞为主的炎症细胞浸润 ,而治疗组大鼠心肌坏死程度较对照组轻 ,浸润的细胞以单个核细胞为主 ;48h后对照组心肌梗塞灶进一步扩大 ,呈散在片状分布 ,而治疗组心肌梗塞灶扩大不明显 ,呈散在灶性分布 ,并可见成堆或散在分布的淋巴细胞样细胞 ;2周后 ,治疗组未见明显心肌梗塞后疤痕组织 ,可见新生的心肌细胞生长。结论 :G -CSF对缺血濒死心肌有保护作用 ,用G -CSF动员骨髓来源的干细胞进行“自我移植” ,可用于急性心肌梗塞的治疗。

肿瘤耐药相关蛋白及β-catenin在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

背景与目的:随着化疗药物在肿瘤临床治疗中的广泛应用,肿瘤对化疗药物产生多药耐药性的问题越来越突出,已成为肿瘤联合化疗失败的主要原因之一。本研究检测β-catenin以及肿瘤耐药相关蛋白MRP2、P-gp、Bcl-2在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cellcar cinoma,ESCC)中的表达,探讨它们在ESCC的多药耐药发生发展中的作用和相互关系。方法:运用组织芯片技术、免疫组织化学方法以及图像分析技术检测582例ESCC及其癌旁294例正常黏膜、92例单纯细胞增生和87例不典型增生上皮组成的组织芯片中MRP2、P-gp、β-catenin及Bcl-2的表达情况,并分析其与各临床病理参数之间的关系。结果:MRP2、Bcl-2在ESCC中的累积光密度(integral optical density,IOD)值[分别为(195.7±175.9)×103和(90.5±112.5)×103]显著高于其在癌旁正常组织中的IOD值[分别为(104.8±86.1)×103和(25.2±46.6)×103],差异有统计学意义(P<0.01);P-gp、β-catenin在ESCC中的IOD值[分别为(57.7±75.5)×103和(32.0±47.0)×103]显著低于其在癌旁正常组织中的IOD值[分别为(114.8±106.6)×103和(46.1±35.7)×103],差异有统计学意义(P<0.01);随着ESCC的分化程度按高分化-中分化-低分化顺序依次改变,MRP2的IOD值依次递增,β-catenin在低分化ESCC中的IOD值大于其在中、高分化ESCC中的IOD值,Bcl-2在高分化ESCC中的IOD值低于其在中、低分化ESCC中的IOD值,差异有统计学意义(P<0.01);β-catenin、Bcl-2在ESCC浸润至黏膜层的病例的癌组织标本中的IOD值大于其在ESCC浸润至肌层或浆膜层的病例的癌组织标本中的IOD值,差异有统计学意义(P<0.01);有淋巴结转移的Bcl-2的IOD值显著高于无淋巴结转移(P<0.01);ESCC中P-gp的表达分别与MRP2、Bcl-2的表达呈明显正相关(r=0.288和r=0.253,P<0.01)。结论:P-gp与MRP2及Bcl-2可作为ESCC多药耐药的预测因子。β-catenin可能在ESCC的发生发展中起着重要作用。