脐血CD 34^+造血干细胞体外扩增的研究

目的：探讨在体外液体培养中，多种细胞因子联合应用对脐血 Ｃ Ｄ３４＋ 造血细胞的扩增作用。方法：用 Ｉｓｏｌｅｘ ５０ 免疫磁珠法分离纯化脐血 Ｃ Ｄ３４＋ 细胞，在液体培养中，经不同细胞因子组合的诱导，检测有核细胞和集落形成细胞（ Ｃ Ｆ Ｃ）的增殖倍数。结果：干细胞生长因子、白细胞介素 Ｉ Ｌ３、 Ｉ Ｌ６、粒细胞集落刺激因子和红细胞生成素５ 种细胞因子联合对脐血 Ｃ Ｄ３４＋ 细胞扩增效果最好，其增殖高峰在第３～４ 周，单个核细胞数和 Ｃ Ｆ Ｕ Ｇ Ｅ Ｍ Ｍ 增殖倍数最高分别达３２６８±１０２４ 倍和８５±３１ 倍。结论：以干细胞生长因子、 Ｉ Ｌ３、 Ｉ Ｌ６ 为主的不同细胞因子组合，能维持脐血 Ｃ Ｄ３４＋ 细胞在体外长期造血达６ 周，使 Ｃ Ｆ Ｃｓ 大量扩增。

定量实时RT-PCR检测非霍奇金淋巴瘤端粒结合因子2 mRNA的表达

目的 :建立定量实时 RT- PCR,研究非霍奇金淋巴瘤 (NHL)患者肿瘤组织端粒结合因子 2 (TRF2 )m RNA表达。方法 :用 RT- PCR扩增目标基因 c DNA,电泳后切胶、纯化作为标准品 ,建立待测基因标准曲线 ;用实时 RT- PCR测定 32例 NHL和 8例反应性淋巴结炎患者淋巴组织 TRF2的表达。结果 :实时 RT- PCR标准曲线中 ,模板 c DNA含量和扩增时产生的荧光信号相关系数为 0 .996。实时 RT- PCR终点产物凝胶电泳的基因条带灰度值和模板 c DNA含量的相关系数为 0 .779(P<0 .0 5 )。在 NHL患者中 ,滤泡型淋巴瘤、套细胞淋巴瘤和弥漫性大 B细胞淋巴瘤 TRF2 m RNA表达量分别为 (2 2 .94 3± 9.4 2 4 ) amol、(2 3.181± 5 .983) amol和 (18.339± 7.910 ) amol,与良性反应性淋巴结炎组织 [(2 1.796± 4 .80 0 ) amol]相比无显著性差异 (P>0 .0 5 )。但 Burkitt淋巴瘤 TRF2 m RNA表达量为 (33.170± 12 .84 1) amol,显著高于良性反应性淋巴结炎组织和其他类型恶性淋巴瘤 (P<0 .0 5 )。结论 :定量实时 RT- PCR能精确测定目标基因 m RNA表达。在 NHL中 ,Burkitt淋巴瘤 TRF2 m RNA表达量明显高于滤泡型淋巴瘤、套细胞性淋巴瘤、弥漫性大 B细胞淋巴瘤。

高白细胞白血病患者白细胞去除术的临床研究

目的 探讨白细胞去除术治疗高白细胞白血病患者的意义。方法 应用连续流动血细胞分离机对９ 例高白细胞白血病患者进行 １１ 次白细胞去除术。结果 行白细胞去除术后，患者外周血白细胞数由（３８８．３７±３５５．２０）×１０９ ／ Ｌ降至（２９０．０９±２５９．８０）×１０９／ Ｌ（ Ｐ＜ ０．０５），精神神经症状和呼吸急促有明显改善。而血小板数和血红蛋白无显著改变（ Ｐ＞ ０．０５）。分离过程中，３６％ 病人有口唇麻木和胸闷等轻度枸橼酸盐中毒症状，经处理后消失。结论 白细胞去除术对高白细胞综合征有效，其分离过程是安全的。

脐血造血干细胞冻存和纯化的研究

为观察脐血造血干细胞—80℃保存以及脐血CD34^+细胞的纯化效果,采用-80℃深低温冰箱冻存脐血干细胞,结果表明保存1个月脐血单个核细胞(MNC)数量、锥虫蓝拒染率、粒一单祖细胞集落(CFU—GM)数回收率分别为85.17％±5.38％、91.67％±3.22％、60.50％±4.42％。保存1、3、6个月动态观察3项指标除锥虫蓝拒染率1个月与6个月外均无显著性差异{均P>0.05)。用Isolex50免疫磁珠分离系统,可从脐血中获得高纯度CD34^+细胞。上述研究为脐血造血干细胞移植的临床应用提供了实验依据。

小分子靶向药物治疗急性髓系白血病的研究现状和展望

急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)是一组具有高度异质性的血液系统恶性肿瘤。联合化疗即使是高剂量联合化疗和造血干细胞移植也不能显著改善AML的预后,特别是高危患者。近年来,随着对AML细胞和分子遗传学、白血病干细胞(LSC)和细胞信号途径等方面的深入研究,新的小分子靶向药物不断涌现。一些小分子靶向药物治疗难治、复发或老年AML已取得令人鼓舞的效果,但是单用小分子靶向药物治疗其完全缓解(CR)率不高。因此,应重视开展小分子靶向药物治疗AML的临床研究。

头孢哌酮/舒巴坦联合阿米卡星与亚胺培南/西司他丁经验性治疗中性粒细胞缺乏发热患者的对照研究

目的研究血液肿瘤患者粒细胞缺乏出现发热时,头孢哌酮/舒巴坦联合阿米卡星与亚胺培南/西司他丁治疗的临床疗效和安全性。方法一项随机、单盲、对照的多中心研究,共纳入216例确诊为血液系统肿瘤伴中性粒细胞缺乏发热的住院患者,随机分组接受头孢哌酮/舒巴坦联合阿米卡星与亚胺培南/西司他丁治疗,对比其临床疗效、细菌学疗效与不良反应。结果两组临床有效率分别为69.05%和74.44%,经统计学处理,两组间差异无统计学意义;治疗后体温明显降低,与基线相比具差异有统计学意义(P<0.01);每日体温的变化,头孢哌酮/舒巴坦联合阿米卡星组比亚胺培南/西司他丁组更明显,平均退热时间分别为(3.09±1.81)d和(3.67±1.99)d;头孢哌酮/舒巴坦联合阿米卡星组的细菌学疗效明显优于亚胺培南/西司他丁组,头孢哌酮/舒巴坦联合阿米卡星组不良反应的发生率更低(3.97%vs10.00%),两组病例均未观察到有明显的肝、肾功能损害,亦无严重不良反应发生。结论头孢哌酮/舒巴坦联合阿米卡星可作为经验性治疗中性粒细胞缺乏伴发热的血液系统肿瘤患者的理想治疗,不良反应轻,耐受性好。

实验室管理平台的建设与实践

基于物联网技术的智慧管理平台已成为高校实验室管理的重要工具。为了提升实验室运行效率与管理水平,结合煤矿灾害动力学与控制国家重点实验室的运行情况,阐述了管理平台的建设内容与应用成效。该平台集大型仪器预约、智能门禁监控、实验室管理等功能于一体,实现了资源统筹管理,提高了科研仪器的共享效率,促进了实验室对外开放程度,强化了实验室安全监管体系。管理平台的构建为高校实验室建设提供了可借鉴的实践途径。

高三尖杉酯碱对人急性髓系白血病干细胞的杀伤作用

目的:观察高三尖杉酯碱(HHT)对人急性髓系白血病(AML)干细胞的杀伤作用,探讨其分子学机制。方法:用流式细胞仪(FACS)分析AML细胞株白细胞干细胞(LSC)的表型特征,用MTT法检测HHT对具有LSC特征的KG-1细胞的生长抑制作用,用FACS观察HHT对CD34+CD38-CD96+的KG-1细胞数量的影响,Western blot法检测药物处理后Caspase途径和凋亡相关蛋白的改变。结果:KG-1和Kasumi-1细胞CD34+CD38-CD96+分别为69%和26.7%,U937细胞不表达CD96。HHT能显著抑制KG-1细胞的生长,并呈剂量依赖性(r2=0.9971,P<0.05)。48 h的半数抑制浓度为16.9 ng/ml。HHT作用KG-1细胞后,CD34+CD38-CD96+细胞的比例从63.6%下降到17.1%。HHT能显著激活Caspase-3、Caspase-9和PARP,抑制磷酸化Akt和Bcl-2的表达。结论:HHT能显著抑制人AML细胞KG-1的增殖,减少CD34+CD38-CD96+白血病干细胞数量;对Akt活性和Bcl-2的调控可能是其重要的作用机制。

乌苯美司对人白血病细胞生长抑制及其机制探讨

目的 :研究国产氨肽酶 N抑制剂乌苯美司 ( U benim ex)对人白血病细胞的作用及其机理。方法 :应用MTT比色法观察 U benim ex对细胞的生长抑制作用 ,光学显微镜观察细胞形态结构的改变 ,DN A凝胶电泳、DNA片段原位末端标记及流式细胞仪 ( FCM)检测 ,分析细胞凋亡。结果 :1U benim ex明显抑制 H L6 0细胞的生长 ,半数抑制浓度 ( IC5 0 )为 13.0 3μg/m l;而 K 56 2细胞的敏感性较差。其抑制作用均呈剂量效应关系。 2典型的细胞形态改变 ,DN A片段化 ,DNA末端原位标记的检出及流式细胞仪结果 ,均证实 U benim ex能诱导白血病细胞的凋亡。 310μg/m l U benimex作用 12 h即可明显诱导 H L6 0细胞 DNA断裂 ,K56 2细胞的凋亡敏感性显著低于 H L6 0细胞 ;两者凋亡率均呈剂量和时间依赖性 ,经 U benim ex处理后 ,HL6 0细胞出现 G1期阻滞。结论 :U benim ex能抑制 K56 2 ,HL6 0细胞生长 ,诱导细胞凋亡是其机制之一。

3D打印技术在修复骨缺损中的应用研究

1引言 创伤、肿瘤、囊肿、结核等疾病是导致组织缺损的重要原因,特别是硬组织外科领域,选择一种合适的植入物替代组织缺损重塑结构的完整性是手术治疗的关键.组织缺损的不规则性,往往造成植入物与缺损区的不匹配,就要求手术者在术中对传统植入物的塑形与反复的匹配,对手术者提出了更高的要求,同时延长了手术时间、增加了术中的出血量,最终影响手术的效果,临床上需要一种患者个体化的植入物快速的完成缺损的修复过程.基于现代影像技术及计算机辅助设计技术对缺损区进行三维重建,利用3D打印制备患者个体化的植入物进行组织缺损的修复或制备仿生模型进行术前的手术模拟,可以大大提高了外科手术的精确性与安全性.

慢性髓系白血病来源的树突状细胞生物学特性的研究

目的:体外诱导慢性髓系白血病(CML)原代细胞分化生成树突状细胞(DendriticcellsDCs),并研究其生物学特性和功能。方法:分离初诊13例CML患者的骨髓单个核细胞和5例正常人外周血的单个核细胞,用rhGM-CSF1000U/ml、rhIL-4500U/ml和TNF-α50U/ml联合培养10d;形态学(Wright染色、倒置显微镜、透射电镜),免疫学(CD80、CD86、CD83、CD1a、HLA-DR)鉴定,荧光原位杂交(FISH)进行细胞遗传学分析,ELISA检测分泌IL-12的能力和混合淋巴细胞反应(MLR)检测抗原递呈功能。结果:慢性白血病细胞体外诱导后,大部分细胞呈现树突状细胞的典型形态,而且有免疫标记的明显上调(CD8624.49±25.87vs61.73±28.54;CD1a10.41±9.52vs47.26±35.60,P<0.05);FISH证实这类DC还携带有白血病克隆,并且具有分泌IL-12和刺激T淋巴细胞增殖的能力。结论:在体外可成功地将CML细胞诱导分化成树突状细胞,这类DC与正常DC无论在形态学和免疫学表达方面均相似,但是功能较弱。

野生型p53基因蛋白在氨肽酶抑制剂诱导人白血病细胞株K562细胞凋亡的实验研究

目的研究野生型p53基因蛋白对国产氨肽酶抑制剂乌苯美司(ubenimex)诱导人白血病细胞凋亡的影响及其作用机制。方法真核转导试剂FuGEMNETM6转导入K562细胞,免疫组化法检测细胞p53蛋白的表达,DNA片段原位末端标记及流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡,Rhodamin(Rh)123染色后,FCM检测细胞线粒体跨膜电位。结果p53基因cDNA转导的细胞p53蛋白表达增加;p53基因转导能促进ubenimex诱导K562细胞凋亡并增加ubenimex诱导的K562细胞线粒体跨膜电位(ΔΨm)的下降。结论野生型p53基因转导能促进ubenimex诱导K562细胞凋亡,并可能参与线粒体信号传导通路的调控。

成人急性非淋巴细胞白血病初治缓解情况观察

目的 总结我院近 9年来初发急性非淋巴细胞白血病 (ANL L )的治疗方案、疗效及影响因素。方法 对我院 1992～ 2 0 0 1年 391例 ANL L住院患者进行了回顾性总结和分析。结果 ANL L住院患者以 M2 最多 ,占33.2 %。 ANL L一疗程完全缓解率 (CR)为 5 3.7%。缓解率以 M3 最高 ,占 87.3%。老年人和高白细胞患者缓解率较低 ,分别为 2 5 .6 %和 37.5 %。诱导缓解方案与 CR率有关 ,维甲酸对 M3 的疗效最高 ,其他化疗方案对 CR率无明显差异。结论 一疗程治疗后 ,ANL L中 M3 缓解率较高。年龄大与白细胞高是影响一疗程 CR率的因素。

基于MQ的气象数据采集与监控系统设计

针对气象业务和公共服务对气象数据统一管理与监控的需求,基于MQ(Message Queuing)消息中间件技术,设计并实现了一种气象数据采集与监控系统,由于多种气象探测设备数据源分散、难以统一管理,本文从数据采集端入手,对不同种类,格式各异的气象采集数据进行资料种类划分、数据消息规整、采集路由配置等方式实现了多种气象探测数据采集流程的统一,气象数据采集入库灵活及时,在数据流程环节中进行监控码的规范与定义,通过输出日志信息和监控信息,完成了客户端程序、气象数据更新状态、队列服务器等内容的监控,在装备运维的过程中,能够有效辅助于日常的故障发现与定位。

淋巴瘤的早期发现和正确治疗

人们常说的“淋巴癌”严格的说应该叫“淋巴瘤”，它是一种恶性肿瘤。淋巴瘤分为两大类：霍奇金和非霍奇金淋巴瘤。

海南沿海二种海藻抗细菌生物活性物质的提取及抑菌活性的研究

采用圆形纸片法以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureaus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、大肠埃希菌(Escherichia coli)、藤黄微球菌(Micrococcus luteus)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilis)5种细菌作为受试菌进行抗菌实验,对采自海南沿海的2种海藻的乙醚提取粗脂及乙醇提取物的脂溶性和水溶性物质进行抗细菌活性的研究。结果表明,江蓠藻乙醚提取的粗脂只对金黄色葡萄球菌有抑制,然而层析(柱层析法和薄层层析法对两种提取物进行层析分离)的所有组分对5种细菌具有较好的抗性。比之下马尾藻的三种粗提物都有抑制作用,其层析组分也能有很好的抑制作用,其中95%乙醇提取出的水溶性物质也有一定的抗菌作用。具体的活性物质还有待于进一步研究。

阿克拉霉素影响骨髓增生异常综合征细胞株细胞增殖及其机制的初步研究

目的 探讨阿克拉霉素 ( aclacinomycin,ACM)对骨髓增生异常综合征 ( myelodysplastic syndrome,MDS)细胞株 ( MUTZ- 1)细胞的体外作用及其机制 ,以期为进展期 MDS的治疗提供理论基础。方法 采用 MTT比色法、流式细胞术、DNA凝胶电泳法研究 ACM对 MU TZ- 1细胞生长的影响。结果 ( 1) ACM对 MUTZ- 1细胞的生长具有抑制作用 ,其 4 8小时 IC50 为 0 .4 6μmol。( 2 ) ACM对 MUTZ- 1细胞的作用主要为诱导凋亡。( 3 ) ACM诱导 MUTZ- 1细胞凋亡 ,阻滞细胞于细胞周期的 G2 / M期。结论 ACM可诱导 MDS细胞株细胞凋亡 ,作用靶点位于 G2 / M期。提示诱导细胞凋亡疗法治疗进展期

毛细管电泳法检测婴幼儿奶粉中乳铁蛋白的质量分数

建立了准确简便的测定婴幼儿奶粉中乳铁蛋白质量分数的方法,样品经脱脂、酸法去除酪蛋白和硫酸铵沉淀富集、纤维素滤膜过滤净化等方法进行预处理,选择直径为50μm,有效长度为57 cm的未涂层毛细管柱进行检测,缓冲溶液为浓度40 mmol/L的硼酸盐/磷酸盐(pH值为9.5),浓度为50 mmol/L的SDS,浓度为20 mmol/L的Brij35,体积分数4%异丙醇,浓度为30 mmol/L硫酸钠,工作电压为18 kV,检测波长为200 nm。结果显示标准曲线相关系数为0.9992;平均回收率为92.8%,6次样品测定RSD为2.4%。

μ子寿命测量与高能物理实验创造性人才的培养

μ子寿命是高能物理领域一个可以精确推算，并能通过实验观测的物理量。在一个完整的μ子寿命测量实验中，涵盖了高能物理理论基础、高能粒子探测器、相关电子学和数据处理方法等方面的知识和一整套高能物理实验方法与工程技术。该文介绍了一套宇宙线仙子寿命测量实验装置的组建，并对该实验装置设置了开放性实验课程，对进行高能物理实验创造性人才培养的可行性和具体实施方法进行了探讨。