骨髓基质干细胞的分离纯化及培养

目的 建立骨髓基质干细胞(MSCs)良好的分离纯化和培养方法。方法 将小鼠骨髓基质干细胞自股骨中分离,应用贴壁选择法结合细胞克隆挑选法进行分离纯化,应用细胞生长因子(EGF和PDGF-BB)刺激法进行MSCs的体外培养和传代,倒置显微镜下观察分离培养的细胞并照像记录。结果,培养获得了纯化的呈梭形成纤维样细胞的骨髓基质干细胞。在生长因子EGF和PDGF-BB的共同作用下,传代MSCs生长旺盛,形态均一。结论 该方法是简便高效的骨髓基质干细胞的分离纯化和培养方法。

不同剂量的He—Ne激光对Raji细胞膜脂流动性的影响

本文采用荧光偏振法检测了不同剂量的Ｈｅ—Ｎｅ激光照射对Ｒａｊｉ细胞膜脂流动性的影响，发现０．０１Ｊ／ｃｍ２和０．５１Ｊ／ｃｍ２两剂量可使膜脂微粘度降低（Ｐ＜０．０５），即其膜脂流动性升高；１．０Ｊ／ｃｍ２和２．０Ｊ／ｃｍ２的剂量对膜脂微粘度无明显影响，即其膜流动性无明显化（Ｐ＞０．０５）；而６．０２Ｊ／ｃｍ２的剂量可使膜脂微粘度明显上升（Ｐ＜０．０５）。

生长因子(EGF和PDGF-BB)对小鼠骨髓基质干细胞增殖的作用及其意义(英文)

目的探讨表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)和血小板源生长因子(platelet-derivedgrowthfactor,PDGF-BB)对体外培养的小鼠骨髓基质干细胞(murinebonemarrowstromalstemcells,mMSCs)增殖的作用,探索小鼠骨髓基质干细胞体外快速增殖的条件和方法。方法将小鼠骨髓基质干细胞进行分离和纯化培养后,加入EGF和PDGF-BB,利用3H胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入反映细胞增殖效果,倒置显微镜下观察细胞增殖及分化状态。结果EGF和PDGF-BB干预后,3H-TdR掺入(11456.14±968.86)dpm较对照组(3271.88±420.91)dpm明显增高,说明EGF和PDGF-BB可促进小鼠骨髓基质干细胞的增殖;倒置显微镜下观察可见EGF和PDGF-BB处理组mMSCs具有增殖优势,分化相对延迟,而对照组提前显示出自然分化现象。结论生长因子(EGF和PDGF-BB)可促进小鼠骨髓基质干细胞的增殖,是小鼠骨髓基质干细胞体外大量培养和快速增殖的有效刺激因子。

不同剂量的He—Ne激光对Raji细胞表面电荷的影响

本文以离体培养的Ｒａｊｉ细胞为材料，采用细胞电泳技术检测了不同剂量的Ｈｅ—Ｎｅ激光对Ｒａｊｉ细胞表面电荷的影响。发现低于或者等于０．５Ｊ／ｃｍ２的Ｈｅ—Ｎｅ激光能量对膜表面电荷无明显影响（Ｐ＞０．０５）；大于此剂量的Ｈｅ—Ｎｅ激光可使膜表面电荷（绝对值）下降，即负电荷数减小，ＥＰＭ下降（Ｐ＜０．０５）。

浅谈列表比较法在细胞生物学教学中的应用

细胞生物学是医学院校的重要基础课，它的主要任务是阐明组成生命的基本单位——细胞的各组成部分的结构及其功能的相互关系．研究细胞总体的和动态的功能活动以及细胞生命活动的相互关系及功能活动的分子基础。学好这门课程．从而达到从细胞及分子水平了解人体的生命活动及规律。但由于它属于微观领域．抽象的理论知识较多．所以在教学过程中有一定的难度。我们在细胞生物学的教学实践中，经常采用列表比较法，获得了比较好的效果。

细胞生物学多媒体课件制作及教学体会

本文简要介绍了自制"细胞生物学多媒体课件"的内容体系和特点,分析了多媒体教学过程中教师需注意的几个方面:(1)课件的版面设计简洁与内容讲授丰富相结合;(2)课件内容的生动性与授课的技巧相结合;(3)知识的科学性与讲授的灵活性相结合;(4)课件良好的交互性与教师一定的电脑知识相结合.

地方医学院校科研管理问题及对策分析

地方医学院校担负着为地方培养合格医生和发展地方生物医药技术的重大任务,科研对于提升其人才培养质量和服务地方能力起着重要作用。目前,由于存在体制机制、观念定位、人才队伍和科研环境等问题影响着其科研工作的发展。因此,地方医学院校应采取措施,即明确科研定位,服务地方需要,走特色发展之路;整合附院优势,共建共享共赢,走协同创新之路;改革科研评价,优化科研环境,走交流合作之路;实施人才工程,灵活引智聘才,走筑巢引凤之路,从而实现地方医学院校科研工作的快速发展。

小鼠骨髓基质干细胞体外成骨的实验研究

目的 建立一种良好的分离和培养小鼠骨髓基质干细胞 (moasebonemarrow derivedmesenchymalstemcells ,mMSCs)的方法 ,观察小鼠骨髓基质干细胞体外成骨潜能。方法 应用贴壁选择法结合细胞克隆收集法进行mMSCs的分离纯化 ,应用细胞生长因子 (EGF和PDGF BB)刺激法进行MSCs的体外培养和传代 ,并在低糖DMEM (DMEM LG)培养液中培养。为促进mMSCs体外成骨性分化 ,传代培养到一定时期时加入成骨性添加剂和 1 0 %胎牛血清。培养第 2 0天分别用Gomori钙钴法显示碱性磷酸酶和VonKossa改良法显示钙化结节。结果 mMSCs呈克隆化增殖并贴壁生长形成形态均一的梭形细胞群。成骨性添加剂可有效作用于传代培养的mMSCs,表现为细胞之间相互连接形成结节状聚合体 ,碱性磷酸酶阳性细胞数量增多 ,VonKossa染色可见钙化结节的形成。结论 建立的mMSCs的分离、培养和成骨条件有效 。

新形势下医学院校产学研合作思考

随着教育改革事业的不断深入,国家创新驱动发展战略的实施,新形势下的医学院校需要加强产学研合作,以适应国家要求及社会需要。本研究探讨了医学院校科技成果产业化的主要模式及制约产学研发展的因素,分析了国外发达国家产学研合作经验,思考新时代背景下的医学院校产学研合作。医学院校需要在政府的引导下,在社会的推动下,在自身的主动下,创新思路,搞好校企联合、产学结合,走好产学研合作的道路,实现新形势下的华丽转身。

树脂纯化武当道茶多糖的研究

为探讨树脂在武当道茶多糖脱色和脱蛋白过程中的效果及DEAE-纤维素-52层析柱分离武当道茶多糖的效应,以单因素实验为基础,对样品上样流速、温度和料液比进行L9(34)正交实验,采用蒽酮-硫酸法测定多糖含量、考马斯亮蓝法测定蛋白含量。树脂201x7在料液比11:1、上样流速1.0 m L/min、50℃条件下,武当道茶多糖脱色率为87.49%,脱蛋白率为43.27%,多糖保留率为89.12%。树脂201x7纯化后的武当道茶多糖经DEAE-纤维素-52层析柱分离得到5个不同组分。上述方案稳定性好效果明显,可用于武当道茶茶多糖的开发和利用。

从分子水平理解基因的显性和隐性

1显、隐性基因的提出 早在基因的本质认识之前,就提出了基因的显性和隐性概念,孟德尔在其豌豆杂交实验中提出遗传因子有显性因子和隐性因子,当二者共存于一个植株时,表现出显性性状,当两个因子均为显性因子时,也表现出显性性状,只有两个因子都为隐性因子时,才表现出隐性性状。

FAM92A1-289在不同增殖能力组织及不同周期时相细胞中的表达和意义

目的探讨基因FAM92A1-289在不同增殖能力的组织及不同周期时相细胞中的表达和意义。方法采用血清饥饿法同步化G1期He La细胞,采用胸腺嘧啶核苷双阻断法同步化S期和G2期He La细胞,采用秋水仙素阻断法同步化M期He La细胞;TRIzol一步法提取组织及细胞总RNA;实时荧光定量RT-PCR方法分别检测肝癌组织、癌旁组织、正常脑组织及He La细胞G1期、S期、G2期、M期中新基因FAM92A1-289的mRNA水平,以GAPDH为内参照。结果 FAM92A1-289基因在肝癌组织中有高表达,且肝癌组织比其癌旁组织表达升高,脑组织中表达最低;在He La细胞各周期时相中以S期表达最高,其他各期表达较低。结论 FAM92A1-289基因在增殖旺盛的肝癌组织中表达最高,且主要在细胞周期的DNA复制期表达,表明FAM92A1-289基因的表达水平与细胞增殖有关,此结果为分析FAM92A1-289功能提供了重要线索。

湖北医药学院科技成果转化新举措及对策研究

针对医药科技成果转化特点及制约因素,围绕地方生物医药产业需求,湖北医药学院联合4家企业和省内2家高校共建协同创新中心。以协同创新中心为试点,大胆进行机制创新与体制改革,在提高科技成果实用性与转变科研人员创新意识等方面进行多项变革,制订切实可行的科技政策,缩短科技成果的转化进程。在成果转化、社会服务、推动地方产业发展等诸方面取得良好成果,其经验具有借鉴与推广价值。

hFAM92A1在人宫颈癌细胞不同周期时相的表达

目的:探讨h FAM92A1在人宫颈癌He La细胞不同周期时相的表达差异。方法:常规培养Hela细胞,应用血清饥饿法将He La细胞同步化于G1期,胸腺嘧啶核苷双阻断法同步化于S、G2期,秋水仙素阻断法同步化于M期,应用流式细胞术检测同步化效率,应用RT-PCR方法检测h FAM92A1在人宫颈癌He La细胞不同周期时相的表达水平。结果:流式细胞仪检测细胞同步化效率G1期为77.5%、S期为85.5%、G2期为61.9%、M期为44%;FAM92A1基因在各期均有表达,但存在差异,以S期表达最高。结论:FAM92A1基因在He La细胞不同周期时相的表达有较大差异。

小鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为神经元样细胞的实验研究

目的:探讨体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞(mouse marrow mesenchymal stem cells,mMSCs)分化为神经元样细胞的条件。方法:密度梯度离心结合差异贴壁法分离、纯化mMSCs,胰蛋白酶消化传代扩增mMSCs。用最适浓度的β-疏基乙醇(BME)+神经生长因子(NGF)、NGF+全反式维甲酸(ATRA)、NGF+BME+ATRA作为诱导剂,观察诱导期间细胞的形态变化,并用免疫细胞化学法鉴定神经元烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)的表达,行甲苯胺蓝染色显示尼氏小体。结果:(1)免疫细胞化学显示NGF+BME+ATRA诱导组诱导效率最高,78%细胞表达NSE,80%细胞表达NF;(2)各诱导组尼氏染色均出现尼氏小体。结论:NGF、BME、ATRA能诱导mMSCs分化为神经元样细胞,其中以NGF(10μg/L)+BME(2.5mM/L)+ATRA(2.5M/L)组效率最高。

siRNA-FAM92A1-289对HeLa细胞增殖的影响

目的:研究RNA干扰(RNAi)沉默基因FAM92A1-289对HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法:化学合成法合成小干扰RNA(siRNA),阳离子脂质体转染FAM92A1-289 HeLa细胞;实时定量RT-PCR检测其mRNA表达,MTT法和流式细胞仪检测转染后HeLa细胞增殖、细胞周期和凋亡变化。结果:转染合成FAM92A1-289 siRNA后,HeLa细胞中FAM92A1-289 mRNA表达下降(P<0.01),细胞增殖均明显增强(P<0.01);细胞周期分布改变,S期细胞明显增多,而G2/M期细胞减少,凋亡率无变化。结论:FAM92A1-289基因调节细胞增殖活动。

地方医学院校产学研合作模式探索——以湖北医药学院为例

产学研合作是企业、高校、科研院所三方协同合作、优势互补、共赢发展的一种模式,能有效解决科研与生产脱节问题,高校深化产学研合作,也是国家创新驱动发展战略的必然要求。本文通过分析湖北医药学院产学研合作的现状、经验及存在问题,提出了促进地方医科院校产学研合作发展的对策。