用筐架式填充床生物反应器高密度培养工程细胞

用圆盘型聚酯载体筐架式填充床内作为细胞生长分裂的支持物，通过笼状唧筒生物反应器连续培养能合成和分泌ｒｔＰＡ的工程细胞，经２８ｄ连续灌注培养，细胞密度达４７×１０７／ｍｌ，ｒｔＰＡ浓度最高达９９μｇ／ｍｌ，ｒｔＰＡ活性最高达４０６８ＩＵ／ｍｌ。

丁酸钠对杂交瘤细胞增殖及抗体分泌的影响

用含不同浓度丁酸钠完全培养液和无血清培养液培养分泌抗组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)单克隆抗体的杂交瘤细胞。当丁酸钠浓度为0.25～0.5 mmol/L时,对杂交瘤细胞分泌抗体能力具有刺激作用,提高抗体效价2～4倍,对细胞生长无抑制作用。表明丁酸钠可作为一种添加剂用以提高杂交瘤细胞分泌抗体的能力。

Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂cDNA表达质粒的构建及其在哺乳动物细胞中的表达

建立Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂（ＰＡⅠ－１）ｃＤＮＡ哺乳动物细胞表达体系。用人工合成的６个寡核苷酸连接成编码ＰＡⅠ－１Ｎ－端１０个氨基酸和２３个氨基酸的信号肽顺序；将构成的完整ＰＡⅠ－１ｃＤＮＡ插入真核表达质粒ｐＳＶ２ｄｈｆｒ中，获得真核表达质粒ｐＺＹＳ－１；将ｐＭＡ２１２中的ｈＭＴ－ⅡＡ的起动子再插入ｐＺＹＳ－１，使ＰＡⅠ－１ｃＤＮＡ受ＳＶ４０和ｈＭＴ－ⅡＡ双启动子控制，得ｐＺＹＳ－２。２个表达质粒分别在ＣＯＳ－７细胞中进行表达。结果：获得两个真核表达质粒，在ＣＯＳ－７细胞中得到表达，在培养液中的ＰＡⅠ－１活性和抗原含量分别为２３４．７ＩＵ／ｍｌ和３０μｇ／Ｌ。结论：ｐＺＹＳ－１和ｐＺＹＳ－２两株ＰＡⅠ－１ｃＤＮＡ真核表达质粒在ＣＯＳ－７细胞中能有效表达和分泌。

t－PA cDNA基因在CHO细胞中的稳定表达

建立稳定表达人组织型纤溶酶原激活剂（ｔｉｓｓｕｅ－ｔｙｐｅｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒ，ｔ－ＰＡ）的细胞株。将ｔ－ｐＡｃＤＮＡ连接在真核表达载体ｐｃＤＮＡ３的ＨｉｎｄⅢ位点，构建成重组质粒ｐｃＤＮＡ３ｔＰＡ，用磷酸钙介导的贴壁细胞转染法导入哺乳动物中国仓鼠卵巢（ＣＨＯ）细胞中，Ｇ４１８筛选培养后形成阳性克隆。结果：培养液中重组ｔ－ｐＡ（Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｔ－ｐＡ，ｒｔ－ｐＡ）活性＞６０００ＩＵ／１０６细胞ｄ－１．Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交证实ｔ－ＰＡｃＤＮＡ基因的转录。高表达细胞连续传代１０次后，培液中ｒｔ－ｐＡ活性未见明显变化。结论：转染ｔ－ＰＡｃＤＮＡ基因的ＣＨＯ细胞已形成稳定的工程细胞。

胰岛素、地塞米松、甲基异丁基黄嘌呤对脂肪细胞分化过程及PAI-1基因表达的影响

目的 通过体外培养的 3T3 L1细胞分化模型 ,研究胰岛素 (Ins)、地塞米松 (Dex)和甲基异丁基黄嘌呤(Mix)对脂肪细胞分化过程及纤溶酶原激活剂抑制剂 1(PAI 1)基因表达的影响。方法 观察Ins与Dex及Mix加入前后脂肪细胞形态的变化 ,并应用RT PCR方法 ,在不同浓度的Ins、Dex和Mix及其不同组合的条件下 ,对3T3 L1细胞分化为脂肪细胞过程中PAI 1mRNA表达水平进行相对定量分析。结果 Ins与Dex及Mix显著促进了 3T3 L1细胞向脂肪细胞分化 ,Ins、Dex及其组合Ins加Dex对PAI 1基因的表达有促进作用 ,其中尤以0 .15 μmol/LIns加 0 .1μmol/LDex的作用最为显著 ,且有叠加效应。 结论 Ins与Dex加Mix对 3T3 L1细胞分化为脂肪细胞起重要作用 ,同时Ins、Dex对PAI 1基因表达也有显著影响 。

rt－PA工程细胞在小型填充床反应器中的培养

研究ｒｔ－ＰＡ工程细胞在小型填充床反应器中连续高密度培养的过程，以及在连续灌注培养条件下ｒｔ－ＰＡ表达水平、葡萄糖的消耗率、乳酸和氨与ｒｔ－ＰＡ表达水平之间的关系以探索该工程细胞培养的最佳条件。在不中断培养的情况取样作细胞计数、ｒｔ－ＰＡ和代谢物的检测。结果：ｒｔ－ＰＡ工程细胞在小型填充床反应器中最高细胞数可达３．８×１０９细胞，最高ｒｔ－ＰＡ浓度达１２ｍｇ／Ｌ结论：这种新型的小型填充床反应器是操作方便、利用价值高的研究设备。

t－PA指形区、上皮生长因子样区缺失突变体cDNA克隆的构建及其在哺乳动物细胞中的表达

研究ｔ－ＰＡＦ区和ＥＧＦ区在ｔ－ＰＡ廓清中的作用。利用本室构建的ｔ－ＰＡｃＤＮＡ克隆，采用片段重组技术缺失突变指形区（Ｆ）、上皮生长因子样区（ＥＧＦ）和部分三角区（Ｋ１）（包括２－１０６氨基酸），组装了由逆转录病毒长末端重复顺序（ＬＴＲ）启动和终止的ｐＭＤＢ△ＦＥ表达质粒。该质粒转染ＣＨＯ－ｄｈｆｒ－细胞，阳性克隆的培液中测得纤溶活性，大量培养阳性克隆细胞，从培液中初步纯化了表达产物。结果：以小白鼠为动物模型，测定突变体的血浆半衰期。与天然ｔ－ＰＡ相比，△ＦＥｔ－ＰＡ的半衰期延长６倍。结果表明ｔ－ＰＡＦ区和ＥＧＦ区在体内ｔ－ＰＡ廓清中有显著作用。

聚氨基甲酸酯泡沫培养rt－PA工程细胞

聚氨基甲酸酯泡沫培养ｒｔ－ＰＡ工程细胞朱慧，陈幼妹，宋后燕（上海医科大学基础医学院分子遗传学研究室２０００３２）大多数动物细胞体外培养时均有贴壁生长等特性，大规模培养时需要一个很大的依附表面，目前多采用大比表面积的微载体来提供细胞贴壁的需要。微载体多...

胰岛素泵短期强化治疗围绝经期妇女糖尿病对糖代谢指标的影响

目的探讨胰岛素泵短期强化治疗围绝经期妇女糖尿病的疗效,分析对糖代谢指标的影响。方法选取该院2017年1月—2019年1月收治的50例围绝经期糖尿病患者,随机分为观察组和对照组,各25例,对照组采用皮下注射胰岛素治疗,观察组采用胰岛素泵短期强化治疗,对比两组糖代谢指标、胰岛素总量、血糖达标时间和低血糖发生率。结果治疗后,观察组空腹血糖为(5.32±0.30)mmol/L、餐后2 h血糖(8.45±1.34)mmol/L、糖化血红蛋白(4.82±0.99)%,低于对照组(6.61±0.89)、(9.77±1.50)mmol/L、(5.62±0.79)%,差异有统计学意义(t=9.314、9.465、5.116;P=0.048、0.001、0.002)。观察组胰岛素总量为(583.66±25.45)U/d、血糖达标时间(5.96±1.68)mmol/L、低血糖发生率为4.00%低于对照组,(696.78±38.08)U/d、(7.59±1.98)mmol/L、16.00%,差异有统计学意义(t=4.692、4.375,χ^(2)=9.547,P<0.05)。结论胰岛素泵短期强化治疗围绝经期妇女糖尿病的疗效显著,取得了安全可靠的治疗效果,改善了患者血糖指标,能够调节患者的心理状态,加速患者身体恢复。

重要水源地三明市东牙溪水库水污染综合整治措施与成效

三明市重要水源地东牙溪水库水质污染严重,库区环境恶化,该市应用行政的和技术的措施对水污染库区环境进行综合整治,取得明显效益,为其他水源地治理提供了可借鉴的方法。

宁化江溪小流域紫色土水土流失综合治理

紫色土水土流失严重的三明市宁化江溪小流域,致力用好国债资金,以小流域为单元,采取植物、工程与耕作措施相结合,山、水、田、林、路综合整治,并强化预防保护,依法监督管理,有效改善和保护生态环境,减少水土流失,促进经济发展,达到治理一片,成效一片。

三明市水土保持生态环境建设成效与思路

三明市水土保持生态环境建设起步于1981年,20多年来,该市认真贯彻落实水土保持法,扎实开展水土流失综合治理,水土流失得到有效控制,保护和改善了生态环境,促进了经济社会的持续健康发展。阐述了三明市水土保持生态环境建设成效,提出了水土保持生态建设的思路。

三明市水土流失现状及防治对策

通过对三明市水土流失现状和发展趋势的调查,分析了存在的问题,提出了防治对策。

妊娠期糖尿病规范化治疗对妊娠结局的影响分析

目的 观察妊娠期糖尿病接受妊娠期糖尿病规范化治疗的疗效。方法 选取2019年6月—2022年6月漳州市第三医院诊治的妊娠期糖尿病患者100例,按照随机数字表法将其分成对比组和研讨组,各50例。对比组开展常规化治疗,研讨组实施妊娠期糖尿病规范化治疗。比较两组治疗前后的脂联素、瘦素、血糖水平,并发症及妊娠结局。结果 研讨组治疗后脂联素高于对比组,瘦素低于对比组,差异有统计学意义(t=8.288,8.617,P<0.001);研讨组治疗后空腹血糖、餐后2 h血糖值较对比组低,差异有统计学意义(t=18.675,5.659,P<0.001);研讨组的产后感染率、羊水过多、妊高症、早产率、剖宫产率均低于对比组,差异有统计学意义(χ^(2)=4.891、4.000、5.005、4.332、5.740,P<0.05)。结论 妊娠期糖尿病规范化治疗能显著降低妊娠期糖尿病不良妊娠结局发生率,与常规化治疗相比,在改善患者脂联素及瘦素指标、降低血糖方面的应用效果更优,值得借鉴。

正常子宫颈储备细胞组织化学和电子显微镜下的观察

本文报道30例子宫颈储备细胞的组织化学和10例超微结构的观察结果.这种细胞胞浆内含有较多的RNA和少量糖原,不含AKP,胞核内含大量DNA;在电镜下可见胞浆不丰富,核周仅有少量细胞器,主要为线粒体和内质网.该细胞具有分化潜能,可向粘液柱状上皮细胞、纤毛细胞和鳞状上皮细胞分化.

扫描电镜观察子宫内膜初步报道

作者对10例全子宫截除标本的内膜作扫描电镜观察,见子宫内膜主要由分泌细胞和纤维细胞组成.在增生期和分泌期的形态不同.其中2例宫腔内有节育器及1例内膜腺癌。