人EPO基因重组腺病毒载体的构建及表达

目的:制备表达人促红细胞生成素基因(hEPO)的重组腺病毒。方法:将hEPO基因亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV上,采用细菌内同源重组"两步转化法"构建携带hEPO基因的重组腺病毒载体。获得的重组腺病毒载体线性化后转染HEK293细胞,包装、扩增出重组腺病毒,氯化铯梯度离心法进行纯化,PCR和电镜负染鉴定重组腺病毒,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达并检测重组腺病毒的滴度。继而用纯化的重组腺病毒感染HeLa细胞,测定转染效率,以Western blot检测hEPO蛋白的表达。结果:成功构建了携带hEPO基因的重组腺病毒载体pAd-hEPO,PCR、透射电镜和绿色荧光鉴定证实病毒包装成功,并且具有感染力,病毒的滴度可达1.8×1010pfu/mL。Western blot检测表明RAd-hEPO感染的HeLa细胞中hEPO基因能够有效表达。结论:制备的RAd-hEPO可成功表达hEPO基因,为后续开展RAd-hEPO治疗缺血性心脏病的研究奠定基础。

草原兔尾鼠卵透明带3基因重组腺病毒载体的构建及表达

目的:探索制备免疫不育疫苗的新途径,获得草原兔尾鼠卵透明带3(LZP3)重组腺病毒减毒活疫苗。方法:将LZP3基因亚克隆到穿梭质粒pShuttle-CMV上,采用细菌内同源重组"两步转化法"构建携带LZP3基因的重组腺病毒载体。获得的重组腺病毒载体线性化后转染HEK293细胞,包装成病毒颗粒。PCR鉴定重组腺病毒,继而用鉴定正确的重组腺病毒感染HeLa细胞,并以RT-PCR、Western blot检测LZP3的转录和表达。结果:成功构建了携带LZP3基因的重组腺病毒pAd-LZP3载体,其转染293细胞后包装出重组病毒,PCR证实LZP3基因已整合至腺病毒基因组中,病毒的滴度可达1.2×1010pfu/L。RT-PCR和Western blot检测表明RAd-LZP3感染的HeLa细胞中LZP3基因能够有效转录和表达。结论:制备的RAd-LZP3可成功表达LZP3基因,为后续开展RAd-LZP3免疫动物的研究奠定了基础。

细菌内同源重组法快速制备重组腺病毒

目的:探讨细菌内同源重组两步转化法快速构建重组腺病毒质粒和制备重组腺病毒的方法。方法:将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1转化BJ5183高效感受态,制备pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态,将线性化的腺病毒穿梭质粒pAdtrack-CMV转化至含pAdEasy-1的BJ5183感受态,筛选获得重组腺病毒载体pAdEazy-CMV。获得的重组腺病毒载体线性化后转染HEK293细胞,包装、扩增出重组腺病毒RAd-CMV,氯化铯梯度离心法进行纯化,采用电镜负染鉴定重组腺病毒,用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白GFP的表达并检测重组腺病毒的滴度。继而用纯化的重组腺病毒感染HeLa细胞,测定转染效率。结果:成功构建了重组腺病毒载体pAdEazy-CMV,透射电镜和绿色荧光鉴定证实病毒包装成功,并且具有感染力,病毒的滴度可达2.0×1010pfu/ml。结论:细菌内同源重组两步转化法可以快速构建重组腺病毒质粒,为后续构建携带不同目的基因的重组腺病毒奠定基础。

血小板源性生长因子B基因转染抑制缺血缺氧诱导心肌细胞凋亡

背景:血小板源性生长因子B(platelet-derived growth factor-B,PDGF-B)是一种有效的促血管生长因子,9型腺相关病毒(adeno-associated virus serotype,rAAV9)对心肌细胞具有良好的靶向亲和力,是目前缺血性心脏疾病基因治疗的理想载体。目的:探索rAAV9介导PDGF-B基因(rAAV9-PDGF-B)体外转染乳鼠心肌细胞,抵抗缺血缺氧诱导心肌细胞凋亡的作用。方法:分离培养原代乳鼠心肌细胞,分别将感染复数为1×105,1×106及1×107 MOI携带rAAV9-PDGF-B基因的重组9型腺相关病毒及空病毒(rAAV9-eGFP)转染乳鼠心肌细胞,逐日在荧光显微镜下观察eGFP的阳性表达,采用流式细胞仪测定rAAV9载体的转染效率,Western blot和免疫荧光鉴定PDGF-B蛋白表达情况;并于rAAV9-eGFP及rAAV9-PDGF-B(107感染复数)转染第5天时,建立体外心肌细胞缺血缺氧损伤模型,通过TUNEL法检测心肌细胞凋亡数目,Western Blot检测Bax及Caspase-3凋亡相关蛋白的表达,研究PDGF-B基因过表达抗心肌细胞凋亡的作用及可能机制。结果与结论:rAAV9载体可有效转染乳鼠心肌细胞,eGFP和PDGF-B蛋白可在心肌细胞中高效正确表达,其表达强度随着转染时间和转染复数的增加而逐渐增强,第5天趋于稳定,此时各组转染率相比差异均有显著性意义(P<0.01)。rAAV9-PDGF-B组心肌细胞凋亡率低于rAAV9-eGFP组(P<0.05),且rAAV9-PDGF-B组凋亡相关蛋白Bax和Caspase-3的表达与rAAV9-eGFP组比均显著下调(P<0.05)。结果表明,PDGF-B基因过表达可有效减轻缺血缺氧诱导的心肌细胞凋亡,其机制通过抑制Bax和Caspase-3蛋白表达而发挥作用,为rAAV9-PDGF-B载体用于缺血性心脏疾病的基因治疗提供依据。

新疆3种藜科盐生植物NHX基因的克隆与序列分析比较

从新疆野生植物盐角草(Salicorniaeuropaea)、盐爪爪(Kalidiumfoliatum)和盐穗木(Halostachyscaspica)中分别克隆了约1.7kb的NHX基因cDNA片段,此片段均包含了NHX完整基因,三者之间有较高的同源性,盐角草NHX基因与盐爪爪NHX基因同源性达92.81%,盐角草与盐穗木同源性达92.19%,盐爪爪与盐穗木同源性达97.66%。它们与其它几种藜科盐生植物如滨藜、碱蓬、灰绿藜的NHX基因同源性也很高,达到80%以上,与拟南芥同源性也达到86%。此基因在植物尤其是藜科盐生植物中高度保守,其编码的功能性蛋白可能在影响植物耐盐中起作用。

ST段抬高型心肌梗死患者血小板计数/淋巴细胞比值与冠状动脉病变程度及短期预后的相关性

目的：探讨ST段抬高型心肌梗死（STEMI）患者血小板计数/淋巴细胞比值（PLR）与冠状动脉病变程度及短期预后的相关性。方法：选择2008-01至2013—12在我院行急诊经皮冠状动脉介入治疗的649例STEMI患者，进行冠状动脉病变的SYNTAX积分评价，将患者分为严重冠状动脉病变组（SYNTAX积分〉22）231例，非严重冠状动脉病变组（SYNTAX积分≤22）418例。另外按照PLR三分位又将649例患者分为高PLR组（PLR≥207）216例，中PLR组（207〉PLR〉94）215例，低PLR组（PLR≤94）218例。分析PLR水平与SYNTAX积分的相关性，及30天全因死亡与PLR的相关性。结果：严重冠状动脉病变组PLR高于非严重冠状动脉病变组（P〈0．001）；SYNTAX积分与PLR存在正相关性（r=0．34，P〈0．001）；PLR是严重冠状动脉病变的独立危险因素（比值比=1．338，95％可信区间：1．028～2．026，P〈0．001]；多因素Cox回归分析显示PLR是STEMI患者发生30天全因死亡的独立预测因素（风险比=1．245，9.5％可信区间：1．153～1．825，P〈0．001）；Kaplan～Meier生仔曲线显示随着PLR水平升高，患者的累积生存率明显降低（P=0．019）。结论：STEMI患者PLR与冠状动脉病变程度相关，并且对患者预后有一定预测价值。

人脐静脉内皮细胞分离培养和鉴定

目的建立简便、可靠、高效的体外分离培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的方法。方法利用2型胶原蛋白酶消化处理脐带分离HUVEC,采用内皮细胞培养基(ECM)进行培养。相差倒置显微镜观察细胞形态,免疫荧光技术检测冯·维勒布兰德因子(v WF)的表达,流式细胞术检测细胞表面CD31的水平鉴定细胞的纯度,体外成管实验检测冻存后内皮细胞的功能。结果成功分离培养出纯度高、活性好的HUVEC。原代HUVEC分离1周即可汇合成单层,细胞呈典型的鹅卵石状排列,免疫荧光技术证明细胞广泛表达v WF、CD31阳性细胞频数达93.1%。冻存后的细胞依然能形成管腔结构,证明标准化的冻存方法能很好地维持细胞的功能。结论建立了简便、可靠、高效的体外分离培养HUVEC的方法。

三酰甘油与高密度脂蛋白胆固醇比值与绝经后女性代谢综合征的相关性研究

目的探讨三酰甘油与高密度脂蛋白胆固醇比值(TG/HDL-C)与绝经后女性代谢综合征(MS)的相关性。方法选取2013年8—12月在新疆医科大学第一附属医院体检中心进行健康体检的绝经后女性(≥50岁)408例为研究对象,按照2005年国际糖尿病联盟(IDF)标准将绝经后女性分为MS组和非MS组。检测两组血脂水平,计算TG/HDL-C,数据分析采用SPSS 17.0统计软件完成。结果 MS组与非MS组TG/HDL-C〔(1.70±0.77)比(0.74±0.46)〕比较,差异有统计学意义(P<0.05)。根据TG/HDL-C水平的四分位数分组,随着TG/HDL-C水平的增高,各组间体质指数(BMI)、收缩压、空腹血糖、TG逐渐升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05)。人工受试者工作特征(ROC)曲线分析当TG/HDL-C切值取0.903时,对MS的诊断效率最高,曲线下面积为0.882〔P=0.000,95%CI(0.844,0.920)〕,灵敏度为87.40%、特异度为74.40%。结论 TG/HDL-C可能是绝经后女性MS良好的诊断指标。

9型重组腺相关病毒转染体外培养大鼠心肌细胞的影响

目的:研究含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的9型重组腺相关病毒(rAAV9)对大鼠心肌H9C2细胞的转染及对细胞生长的影响。方法:rAAV9-EGFP按转染复数(MOI)1×105、1×106、1×107转染H9C2细胞,转染后在倒置荧光显微镜下观察H9C2细胞中EGFP阳性表达情况,采用流式细胞仪检测rAAV9-EGFP对H9C2细胞的转染效率。观察转染后细胞生长形态,并用AlamarBlue法检测rAAV9-EGFP对H9C2细胞增殖影响。结果:转染后第1天,MOI=1×106、1×107组中EGFP开始表达;第2天,MOI=1×105组开始表达,各组EGFP表达强度随MOI值的增高而增强,同时EGFP的表达强度随着时间延长而逐渐增强;转染后第4天达到高峰,此时流式细胞术检测rAAV9-EGFP对H9C2细胞的转染率分别为MOI=1×105组:(14.1±0.2)%、MOI=1×106组:(35.1±4.8)%、MOI=1×107组:(56.8±0.1)%。rAAV9-EGFP转染H9C2细胞后,细胞生长及形态正常,AlamarBlue法进一步检测表明转染组对H9C2细胞增殖无影响。结论:rAAV9-EGFP能够有效地转染H9C2细胞,且rAAV9-EGFP对H9C2细胞增殖无明显抑制。

乳鼠心肌细胞和心肌成纤维细胞体外分离培养方法的优化

目的优化SD乳鼠心肌细胞和心肌成纤维细胞的体外分离培养的条件和方法。方法分别用胰酶、Ⅱ型胶原酶依次消化分离心肌组织,再通过两次差速贴壁分离法分别收集、培养乳鼠心肌细胞和心肌成纤维细胞。光学显微镜下分别观察心肌细胞和心肌成纤维细胞的基本形态特征的变化,原代心肌细胞行心肌肌钙蛋白免疫荧光鉴定,而心肌成纤维细胞则用第2代行波形蛋白免疫荧光鉴定。结果心肌细胞在2~4 h开始贴壁生长,12~24 h贴壁速率大幅增加,并出现自发性搏动,48~72 h心肌细胞粘合成簇,细胞成活率,纯度均达95%以上;心肌成纤维细胞第2~4代细胞生长良好,纯度高达98%以上。结论此种方法可得到产量大,纯度高,活力好的心肌细胞和心肌成纤维细胞,为心血管疾病的基础与临床研究提供了理想的实验模型。

氧化型低密度脂蛋白对NF-κB信号通路的作用

目的探讨氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)P65、P50、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)表达的影响。方法设立空白对照组(15、30、60、120)μg/mL ox-LDL分别刺激12、24、48 h的ox-LDL诱导组及NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氢基甲酸盐(PDTC)干预联合ox-LDL诱导组。提取核蛋白,Western blot法检测NF-κB信号通路P65和P50的蛋白表达;ELISA检测细胞上清液中TNF-α、IL-6的浓度变化。结果 Western blot法结果显示ox-LDL诱导HUVEC后P65和P50随ox-LDL诱导时间延长及诱导浓度增加而表达增加,各诱导组之间均存在统计学差异(P<0.05)。而给予PDTC干预后,P65和P50蛋白表达较ox-LDL诱导组明显降低(P<0.05)。ELISA结果显示经ox-LDL诱导24 h后,细胞上清液中的TNF-α和IL-6显著高于正常对照组,而用PDTC干预联合ox-LDL诱导后TNF-α和IL-6浓度明显降低。各组间比较有显著统计学差异(P<0.05)。结论 ox-LDL激活NF-κB信号通路存在时间和浓度效应关系,可增强TNF-α、IL-6表达。

平均血小板体积在中青年急性心肌梗死早期诊断及冠状动脉病变严重程度的预测价值

目的探讨平均血小板体积(mean platelet volume,MPV)在诊断中青年急性心肌梗死及预测冠状动脉病变严重程度中的作用。方法选择2013年8月-2013年12月在新疆医科大学第一附属医院住院的中青年急性心肌梗死患者(年龄<60岁)131例为病例组,根据冠状动脉造影结果对病例组进行冠状动脉狭窄程度积分(Gensini积分)评价,其中高于Gensini积分中位数(P50=40分)有67例,低于P50(<40分)有64例。选择152例同时期本院健康体检者为对照组。比较病例组与对照组、病例组中Gensini积分高于P50的患者与Gensini积分低于P50患者的MPV,多元线性回归分析MPV与Gensini积分的相关性。结果病例组MPV水平为(10.27±1.27)fL,高于对照组的(9.60±1.50)fL(P<0.05)。病例组中Gensini积分高于P50患者的MPV水平为(10.51±1.32)fL,高于Gensini积分低于P50患者的(10.02±1.17)fL,(P<0.05)。多元线性回归显示,MPV与Gensini具有相关性(P<0.05)。结论 MPV在诊断中青年急性心肌梗死及预测冠状动脉病变严重程度方面具有一定的价值。

金属基质蛋白酶9预测早发急性冠脉综合征患者冠状动脉病变程度的临床研究

目的研究早发急性冠脉综合征（PACS）患者金属基质蛋白酶9（MMP-9）与能够反映冠脉病变严重程度Gensini积分的相关性。方法选择2013年1—12月在该院入院治疗的PACS患者（男性≤55岁，女性≤65岁）131例，计算病例组Gensini积分，以中位数（40分）为界值分为高Gensini组（≥40分）67例，低Gensini组（〈40分）64例。选择152例健康志愿者为对照组。用酶联免疫吸附试验（ELISA）~,4量血浆MMP-9水平，比较各组MMP一9是否具有差异。结果病例组MMP一9水平显著高于对照组『（1．46±0．37）vs（1．07±0．48）mg／L，P〈0．001]；高Gensini组MMP-9浓度高于低Gensini组[（1．63±0．30）vs（1．29±0．37）mg／L，P〈0．0011；ROC曲线计算MMP-9判断高Gensini组的最佳切点值为1．47，其敏感度、特异度分别为76％和64％；吸烟、BMI和MMP-9（〉1．47mg／L）是PACS患者发生高Gensini的独立危险因素（o良=3．123，95％CI：1．215~6．798。P〈0．001）。结论金属基质蛋白酶9与PACS患者冠脉病变严重程度具有相关性，对其早期危险分层有一定的参考价值。

9型腺相关病毒转染乳鼠心肌细胞的可行性及安全性

背景：9型腺相关病毒对心肌细胞具有更好的靶向转染,是目前研究基因治疗心脏疾病的理想载体。目的：探索9型腺相关病毒体外转染乳鼠心肌细胞的可行性及对乳鼠心肌细胞的毒性评估。方法：分离培养原代乳鼠心肌细胞,以携带荧光蛋白基因的9型腺相关病毒为载体,将分离纯化的乳鼠心肌细胞分为正常培养组、无病毒转染组、病毒转染组。结果与结论：第1周细胞搏动频率及百分率正常培养组和病毒转染组与无病毒转染组比较,差异无显著性意义（P〉0.05）,但正常培养组高于病毒转染组（P〈0.05）;3周后各组比较,差异无显著性意义（P〉0.05）。经9型腺相关病毒转染的心肌细胞24h开始有表达,4~6d荧光最强,3组细胞72h内不同时间点还原比率均接近于1.0。说明9型腺相关病毒能成功有效地转染乳鼠心肌细胞,对乳鼠心肌细胞无明显毒性作用。

核因子-κB抑制剂对老龄小鼠急性心肌梗死后心脏破裂和心室重构的影响及机制研究

目的:探讨核因子(NF)-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)对老龄小鼠急性心肌梗死(AMI)后心脏破裂、心室重构的影响及机制研究。方法:18个月龄雄性C57/BL小鼠212只结扎左冠状动脉建立AMI模型,分为两组(每组106只):AMI+PDTC组术后每日腹腔注射PDTC 120 mg/(kg.d),AMI组每日注射同等剂量生理盐水。观察1周内心脏破裂率及心脏超声改变。再将AMI后3天、7天、14天不同时间行p65、肿瘤坏死因子-αmRNA表达,基质金属蛋白酶-9、2活性及心肌间质胶原含量测定。结果:与AMI组相比,AMI+PDTC组心脏破裂率降低(35.3%比15.6%),差异有统计学意义(P<0.05)。与AMI组相比AMI+PDTC组舒张末期内径、左心室舒张末期外径降低,舒张期前壁厚度、收缩期前壁厚度、左心室重量增加,左心室短轴缩短率升高,差异均有统计学意义(P均<0.05),AMI后3天及7天AMI+PDTC组基质金属蛋白酶-9表达较AMI组同时间点降低(P均=0.000),AMI后3天及14天时AMI+PDTC组基质金属蛋白酶-2表达较AMI组同时间点降低(P均=0.000)。AMI后7天和14天肿瘤坏死因子-αmRNA表达在AMI+PDTC组较AMI组同时间点降低(P=0.000),差异均有统计学意义。AMI后3天和7天AMI+PDTC组较AMI组心肌间质胶原容积分数降低(P值均为0.000),差异有统计学意义。结论:NF-κB抑制剂PDTC可降低老龄小鼠AMI后心脏破裂率,改善心室重构,可能是通过抑制肿瘤坏死因子-α及基质金属蛋白酶-9表达,降低胶原降解并抑制胶原合成的结果。

大鼠脂肪干细胞的分离培养及基本生物学性状研究

目的：探讨体外分离培养大鼠脂肪干细胞（ADSC）的方法,并研究其基本生物学特性,为可注射的组织工程化心肌治疗心肌梗死提供种子细胞来源。方法：体外分离培养大鼠脂肪来源的干细胞并进行传代培养,流式细胞术鉴定CD90、CD29、CD34及CD45的表达及检测细胞周期;绘制ADSC的生长曲线;通过细胞形态观察、特异性染色来检测脂肪干细胞向成骨、成脂肪细胞分化的能力。结果：大鼠ADSC表型特征为CD90、CD29阳性,CD34、CD45阴性;ADSC能连续传代达15代以上,且在第7代仍保持较强的增殖能力。流式细胞术显示各代次的ADSC约80%左右处于细胞周期的G0-G1期。ADSC具有向成骨、成脂肪细胞分化的潜能。结论：大鼠脂肪干细胞增殖能力强,具有向成骨、成脂肪细胞分化的潜能,第7代之前的细胞可作为组织工程的种子细胞来源。

中国新疆维吾尔族人群基质金属蛋白酶9基因R279Q多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病的关联

背景:基质金属蛋白酶9与动脉粥样硬化的发生发展密切相关,基质金属蛋白酶9基因多态性可能与冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)遗传易感性相关。目的:探讨新疆维吾尔族人群基质金属蛋白酶9基因6号外显子上R279Q(rs17576)多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病发病的相关性。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法对362例维吾尔族冠心病患者和413例冠脉造影阴性者基质金属蛋白酶9基因R279Q多态性进行分析,比较两组间基质金属蛋白酶9基因多态性频率分布的差异。结果与结论:冠状动脉粥样硬化性心脏病组和对照组RR,RQ和QQ基因型频率分别为34.3%,42.8%,22.9%和37.8%,43.3%,18.9%。冠状动脉粥样硬化性心脏病组RQ+QQ基因型和Q等位基因频率(65.7%,44.3%)与对照组(62.2%,40.6%)频率近似(χ2=1.04,P=0.31;χ2=2.26,P=0.13)。R279Q多态性分布在冠状动脉粥样硬化性心脏病组不同冠脉病变支数亚组中也无显著性差异(χ2=0.61,P=0.74)。提示基质金属蛋白酶9基因R279Q多态性与新疆维吾尔族人群冠状动脉粥样硬化性心脏病的发生、发展无明显相关性。

不同年龄小鼠缺血性心力衰竭后心室重塑程度的比较

目的:研究不同年龄小鼠缺血性心衰后心室重塑程度的变化。方法:选择3月龄和18月龄的雄性C57BL/6J小鼠共100只,每个月龄组50只,在2组中分别随机选取40只,结扎左冠状动脉定量控制心梗面积,建立稳定缺血性心衰模型,每组其余10只作为假手术组,于术后8周行心脏超声评价各组心功能变化;称量全心脏及左心室重量并计算左心室质量指数(LVMI);免疫组化检测心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原表达,Masson染色检测心肌纤维化的程度并计算心肌间质胶原分数(CVF)。结果:与低龄组相比,老龄组心脏破裂率(18%vs 10%)和心力衰竭死亡率(22%vs 10%)均高于低龄组(P<0.05);老龄组心室腔明显增大,心率较快,左室短轴收缩功能障碍更明显(P<0.05);老龄组LVMI明显增加(P<0.05);老龄组CVF、Ⅰ型胶原的表达以及Ⅰ/Ⅲ型胶原的比值显著高于低龄组(P<0.05)。结论:老龄小鼠缺血性心衰后心肌胶原分布异常,心室重塑程度更重,心功能降低更明显。

巨噬细胞移动抑制因子基因rs1007888位点单核苷酸多态性与哈萨克族冠状动脉粥样硬化性心脏病发病的相关性

背景:有研究表明巨噬细胞移动抑制因子是具有多种生物活性的细胞因子,在机体的炎症和免疫反应中起重要作用。巨噬细胞移动抑制因子rs1007888已被报道与多种炎症性疾病相关,但其与哈萨克族冠状动脉粥样硬化性心脏(冠心病)病易感性是否具有关联性少见报道。目的:探讨巨噬细胞移动抑制因子rs1007888位点基因多态性与新疆哈萨克族人群冠心病之间的相关性。方法:选择2012年6月至2014年4月于新疆医科大学附属第一医院心脏中心入院,经皮冠状动脉造影检查确诊的哈萨克族冠心病患者230例为冠心病组,以同期冠脉造影阴性、排除冠心病诊断的478例哈萨克族为健康对照组。采用实时荧光定量PCR法对所有纳入对象巨噬细胞移动抑制因子rs1007888位点基因多态性进行检测,比较两组间巨噬细胞移动抑制因子基因多态性频率分布的差异。结果与结论:冠心病组与对照组基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),两组的巨噬细胞移动抑制因子rs1007888位点基因型、等位基因频率均差异无显著性意义(P>0.05)。结果证实,rs1007888位点基因多态性与新疆维吾尔自治区哈萨克族冠心病发病无显著相关性,该位点突变可能不是哈萨克族人群冠心病的易感因素。

后适应缺血时间窗的选择对小鼠心肌再灌注损伤的影响

目的探讨后适应对小鼠心肌再灌注损伤的影响以及不同缺血时间窗的后适应心脏保护作用的差异。方法96只成年C57/BL小鼠随机分为缺血时间30、45min和60min的三组,每组又分为后适应和缺血再灌注两种处理。通过开胸结扎左冠状动脉造成急性心肌梗死,在完全再灌注早期给予反复短暂再通/闭塞的缺血后适应。采用Evansblue和TTC染色的方法确定缺血心肌和梗死心肌面积,并测定血清的心肌酶含量、心肌超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)水平以及血流动力学指标。结果缺血30min后适应组、缺血45min后适应组心肌梗死面积分别比相同缺血时间的再灌注对照组减少53.1%和31.2%,差异均具有统计学意义(P<0.01),缺血后适应可明显降低血清心肌酶、提高心肌SOD的活性以及改善血流动力学的恶化;缺血60min后适应组梗死心肌面积无明显降低,差异无统计学意义(P>0.05)。结论小鼠心肌处于轻中度水平的缺血损伤,在恢复冠脉血流的早期施行缺血后适应可以有效地减少心肌再灌注损伤,但随着缺血时间的延长,心肌保护作用就明显减弱或消失。