McAb-ELISA检测丝虫特异IgG_4的应用研究

目的 探讨McAb -ELISA检测丝虫特异IgG4在丝虫感染监测中的应用价值。方法 利用生化免疫技术 ,经细胞融合 ,建立起 7株对IgG4表现为单一反应性的单克隆抗体 (McAb)。以此为探针 ,采用ELISA方法检测丝虫特异IgG4。结果 检测班氏微丝蚴血症者血清的敏感性为 96 3% (10 4 / 10 8) ,测得IgG4的最低限量为 0 0 1ul/ml;检测丝虫病非流行区健康者、肠道线虫感染者、华支睾吸虫感染者和囊虫病患者等血清均呈阴性 ,未出现交叉反应 ,特异性为 10 0 %。经现场应用研究 ,同样获得良好的实用性 ,有效地反映出当地丝虫病流行与感染状况。结论 该技术是监测丝虫感染的理想方法。

大劣按蚊人工感染恶性疟原虫的实验研究

作者采用改进的人胎盘膜饲血法，以3例恶性疟患者离体肝素防凝血感染4批大劣按蚊，结果均感染成功，子孢子感染率1.7～64.0%，子孢子进腺时间为10～12天，高峰期在15～16天。

寡核苷酸SD_(92)探针用于蚊体内马来丝虫幼虫的检测

寡核苷酸ＳＤ９２探针用于蚊体内马来丝虫幼虫的检测山东省寄生虫病防治研究所＊（济宁２７２１３３）陈锡欣黄炳成刘克义杨宝金韩广东蚊媒体内丝虫幼虫的检测是丝虫病监测的重要内容。传统的蚊虫解剖查幼丝虫费时费力，不适应当前形势的需要。我们以合成寡核苷酸ＳＤ９２...

山东省赫坎按蚊复合体成员种的分子鉴别研究

目的 进一步确认山东省赫坎按蚊复合体成员种。方法 采用鉴别PCR方法,对采自山东省8个地点经形态学初步鉴定的645只蚊虫进行检测,并对已检测的标本随机抽取数个样本,进行rDNA-ITS2序列测定。结果 645份样本中,中华按蚊占90.85％(586/645)、雷氏按蚊占5.27％(34/645),无扩增条带的标本占3.88％(25/645)。测定已鉴别的山东省中华按蚊、雷氏按蚊的ITS2序列长度分别为469bp和451hp,经Blast比对分析,显示与已公布的序列完全相同;3份无扩增条带标本的序列经核对为库蚊。结论 山东省分布的赫坎按蚊复合体成员种主要为中华按蚊、雷氏按蚊,其它成员种有待进一步证实。

应用DNA探针检测蚊体内丝虫幼虫的研究

本文用人工合成的寡核苷酸探针，经斑点杂交法检测蚊体内马来丝虫幼虫。可测到丝虫和微丝蚴２ｎｇ的ＤＮＡ量，不与其它动物丝虫标本发生交叉反应。将单个蚊直接压于硝酸纤维素膜上进行检测，感染蚊中含有１条感染期幼虫就可出现阳性反应。将一组蚊虫在裂解液中研磨集体检测时，在２０只蚊虫中有１只感染蚊即可检出。显示该探针可用于马来丝虫地区的蚊媒监测。

山东省猪囊尾蚴感染血清流行病学调查

目的 探讨山东省居民猪囊尾蚴感染流行状况。 方法 采用现场调查 ,以McAb -ELISA方法检测人群血清囊尾蚴IgG4特异抗体。 结果 在本次调查的 17县 (市、区 ) 10 2自然村 (点 ) 6114人中 ,囊尾蚴IgG4抗体阳性117例 ,总阳性率为 1.91%。人群性别之间及城乡之间囊尾蚴抗体阳性率无显著性差异 ;囊尾蚴抗体阳性率以 10～ 2 9岁年龄组明显高于其他各年龄组 ;职工的抗体阳性率亦高于农民和学生。 结论 初步摸清了山东省囊尾蚴感染流行程度和分布现状 ,为制订防治规划和策略提供了重要参考。

蓝氏贾第鞭毛虫保护性抗原的实验研究

目的筛选蓝氏贾第鞭毛虫的保护性抗原,为免疫疫苗的研制奠定基础。方法利用已建立的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体体外培养系统,获取滋养体抗原,并进一步分离、纯化、活性鉴定;然后分组免疫小鼠,检测相关免疫指标;再行攻击感染试验,视其抗感染能力,筛选出保护性强的抗原组分。结果成功获取5个组分的抗原蛋白(P76/66、P54/50、P34/32、P30/29和P21/19),P76/66抗原活性最强,其诱发BALB/C小鼠产生的抗体含量最高。各组分抗原免疫小鼠,产生的白细胞介素-2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)及CD4+、CD8+T淋巴细胞的数量均随免疫次数的增多而逐渐增加。攻击试验结果显示,P76/66抗原的免疫保护率最高为100%,其次是P21/19为65%。结论P76/66抗原具有良好的免疫保护力,为蓝氏贾第鞭毛虫免疫疫苗的研制提供了物质基础。

^32P与光敏生物素标记DNA探针在疟疾监测中的应用研究

本文报告了应用￣３２Ｐ和光敏生物素标记克隆的ｐＢＦ４ＤＮＡ，作为探针，以斑点杂交试验，检测海南、云南和山东省的血样。两种标记探检测结果与镜检的符合率分别为恶性疟９８．６％和９６．２％；间日疟９１．６％和８６．７％；正常人血９５．２％和１００％；并可从多种疟原虫标本中，特异地检出恶性疟原虫，显示探针具有恶生疟原虫的种特异性。检测的敏感度为８４个原虫／μｌ血，检测原虫ＤＮＡ可达１０ｐｇ水平。表明探针具有良好的实用性。

免疫酶染色试验检测丝虫病患者血清IgG抗体

本文报告应用马来丝虫成虫冰冻切片抗原进行免疫酶染色试验,检测115例淋巴丝虫病微丝蚴血症患者血清IgC抗体,阳性率为93.9%;99例健康人血清假阳性率为2.02%;45例其它寄生虫病患者未出现交叉反应。同时观察到丝虫病患者抗体水平与微丝蚴密度无相关性。

马来微丝蚴人工感染中华按蚊的实验观察

马来微丝蚴人工感染中华按蚊的实验观察山东省寄生虫病防治研究所（济宁２７２１３３）陈锡欣，黄炳成，刘克义，李承邰程义亮（指导）中华按蚊是我国马来丝虫病的主要传播媒介之一。为进一步观察蚊体内丝虫幼虫的发育情况，本文采用人工感染的方法，使马来丝虫微丝蚴在中...

两种含苦参中成药中主要黄酮类成分定性鉴别方法研究

目的:首次探索建立含苦参中成药(当归苦参丸和四味土木香散)中黄酮类成分的定性鉴别方法。方法:采用薄层GF254硅胶板,鉴别三叶豆紫檀苷成分:以石油醚-乙酸乙酯-甲醇(5∶7∶1)溶液为展开剂,喷以10%的硫酸乙醇溶液,挥干,再喷以10%的磷钼酸溶液,加热至斑点显色清晰,置日光下检视各样品与三叶豆紫檀苷标准品比较结果;鉴别苦参酮成分:以石油醚-乙酸乙酯-甲醇(5∶5∶1)溶液为展开剂,挥干,置紫外光(365nm)下检视各样品与苦参酮标准品比较结果。结果:建立苦参中黄酮类成分三叶豆紫檀苷和苦参酮的薄层鉴别方法,在与对照品斑点相对应的位置上,供试品色谱显示相同颜色的斑点,且阴性无干扰。结论:该研究所建立的方法重复性高,操作简便,可用于薄层鉴别当归苦参丸和四味土木香散,可为其他含苦参中成药的定性鉴别方法提供参考。

应用光敏生物素标记DNA探针监测疟疾的研究

用光敏生物素标记含恶性疟原虫DNA片段的质粒pBF4探针，通过核酸分子杂交试验，探针的敏感性为20pg靶DNA和0．001％原虫血症；并可从多种疟原虫DNA标本中特异地检出恶性疟原虫DNA．显示该探针具有良好的特异性和敏感性。检测恶性疟病人血样，与镜检的符合率为95．4％（123／129），表明本探针有良好的应用价值。

蚊体内马来丝虫幼虫的基因检测

目的 :探索蚊体内马来丝虫幼虫基因检测的新方法 ,并用于丝虫病监测。方法 :利用基因工程技术合成马来丝虫寡核苷酸片段 ,经32 P标记后作为探针 ,以斑点杂交法检测蚊体内马来丝虫幼虫。结果 :该探针可从多种标本中特异地检出马来幼丝虫DNA ,敏感性为 2ng靶DNA量 ,蚊体内含 1条幼虫即可出现阳性杂交。结论 :该技术具有良好的实用性 。

IEST和IFAT检测丝虫病人血清抗体的比较研究

应用马来丝虫成虫冰冻切片抗原作免疫酶染色试验(IEST)和间接荧光抗体试验(IFAT),检测班氏微丝蚴血症者79例和马来微丝蚴血症者35例,结果IEST的阳性率分别为93.7％和94.3％;IFAT的阳性率分别为89.9％和97.1％;用IEST与IFAT检测健康人98名的假阳性率分别为2.0％和5.1％。IEST与肠道线虫感染者和脑囊虫病人均无交叉反应;IFAT与肠道线虫感染者血清有6.8％的交叉反应,与脑囊虫病人无交叉反应。表明两法检测丝虫抗体均具有较高的敏感性和特异性,但IEST简便、快速,不需要特殊仪器,适合于现场应用。

东北虎体内的华枝睾吸虫

1986年10月,天津塘沽动物园饲养的一只东北虎(雌性)病死,我们对其进行尸检,从其胆管中发现一种吸虫,经鉴定,认为是后睾科,支睾属中的中华分支睾吸虫Clonorchissinensis(Cobbolb,1875)。本虫于1874年首次在加尔各答一华侨的胆管发现(Mcconnel,1875),至1908年始在国内证实(Heanley,1908)。1975年在我国湖北省江陵西汉古尸的粪便中发现本虫虫卵,证明本虫在我国至少已有2,100余年的历史(魏德祥,1980)。在对本虫有正式记载的100余年内,中外学者作了大量的研究工作,发现本虫除寄生在人体外,还广泛地在家畜及野生的哺乳类动物中寄生。

恶性疟原虫质粒DNA探针在蚊媒监测中的应用研究

利用克隆的质粒型ＤＮＡ片段用光敏生物素标记后作探针．以核酸分子杂交手段．检验蚊体内的恶性疟原虫．结果表明可从多种模拟感染蚊虫标本中特异地测出恶性疟原虫感染蚊。将一组蚊研磨后集体检测时，可测出２５只蚊虫中有１只感染者或含１００个子孢子的蚊虫，这极利于大样本的快速处理．而单个蚊虫直接任于硝酸纤维素膜上检测，更适于子孢子的精确估计。既能测新鲜蚊，又能测干燥蚊标本．

山东省人体肠道寄生虫感染现状及特点

目的掌握山东省人体重要寄生虫病流行现状。方法卫生部统一抽取本省10个县,30个调查点15000人,按照《全国人体重要寄生虫病现状调查》实施细则规定方法和要求进行调查。结果共调查15152人,寄生虫感染2767人,感染率18.26%。检出肠道寄生虫12种,其中蛔虫、鞭虫、蛲虫感染率分别为6.37%、9.89%和16.06%;原虫以蓝氏贾第鞭毛虫感染最高为1.42%。结论本次调查显示,人群总感染率、感染度、多虫种感染及虫种数量,均比10年前第一次调查有大幅度下降,有必要调整、制定新时期寄生虫病防治方案与规划。

山东省猪带绦虫病和囊尾蚴病流行病学调查

目的 调查山东省猪带绦虫病和囊尾蚴病流行现状。 方法 采用现场访问、粪便检查及血清学检测等方法对猪带绦虫病和囊尾蚴病人群的感染流行状况、猪囊尾蚴感染情况及有关流行因素进行调查分析。 结果 全省人群猪带绦虫病和囊尾蚴病平均患病率分别为 0 .0 4 8%和 0 .0 5 7% ,抗囊尾蚴特异性 Ig G4 抗体阳性率平均为 1.91%。各地区流行程度不同 ,性别及城乡人群患病率均无显著性差异。流行因素调查结果表明 ,居民普遍存在不卫生习惯 ,如 :切菜刀、板生熟不分 ,饭前便后不洗手等。“连茅圈”养猪占 92 .3% ,粪便管理及生活环境卫生均较差。囊尾蚴病猪检出率平均为 0 .0 6 % ,囊尾蚴抗体阳性率平均为 1.99%。 结论 山东省绦虫病和囊尾蚴病患病率呈下降趋势 ,但流行范围扩大 ,各地区流行程度不同 。

山东省疟疾高发地区发病率与气象因子的多元逐步回归分析

目的建立气象因子与疟疾发病率之间的回归方程,探索山东省疟疾高发地区气象因子与疟疾流行之间的关系,为控制山东高疟区疫情,实现消除疟疾目标,提供科学依据。方法收集2006-2009年山东高疟区菏泽市月疟疾发病率资料和月平均气温、月降水量、月雨日数和月平均相对湿度气象资料,应用Spearman等级相关分析气象因子与疟疾发病率之间的相关关系,用多元逐步回归建立气象因子与发病率回归方程。结果月雨日数、月降雨量和月平均气温与疟疾发病率有较高的正相关。应用多元逐步回归分析得到的回归方程为:Y'=1.252 6+0.284 4D01+0.018 75P01,R2=0.614 6(D01,P01分别表示当前月及之前1月的平均雨日数和平均降雨量)。结论气象因素能够影响疟疾的流行,尤其雨日数和降雨量,可以依据拟合方程预测山东高疟区疟疾流行趋势。