USP22在神经母细胞瘤中的表达及意义的初步研究

目的观察肿瘤干细胞标记物泛素特异性肽酶22（USP22）蛋白在神经母细胞瘤中的表达，探讨其在神经母细胞瘤发生发展过程中的作用。方法用免疫组化法检测USP22蛋白在68例神经母细胞瘤组织和瘤旁组织细胞中的表达，结合临床资料分析其与临床病理学特征的关系。结果免疫组织化学染色结果显示USP22主要在肿瘤细胞核中呈阳性表达，而瘤旁组织中呈阴性表达。进一步统计分析，USP22在Ⅲ-Ⅳ期肿瘤中的表达水平高于Ⅰ～Ⅱ肿瘤（P〈0．05）；USP22在有淋巴结转移组的表达水平明显高于无淋巴结转移组（P〈0．05）；而USP22在神经母细胞瘤中的表达水平与性别、年龄、大小、肿瘤部位、病理分型等参数无相关性（P〉0．05）。结论USP22在神经母细胞瘤细胞中有表达，其表达水平与肿瘤的临床分期及是否淋巴结转移有相关性，与性别、年龄等参数无明显相关性。

影响急性肠套叠X线下空气灌肠复位相关因素的对比研究

目的总结分析小儿急性肠套叠病例,提高小儿急性肠套叠的X线下空气灌肠复位成功率和减少并发症。方法选取2013年以来近3年资料完整、诊断明确急性肠套叠600例,进行相关因素的统计学分析,从而找出小儿急性肠套叠X线下空气灌肠复位的影响因素。结果本组600例,实施空气灌肠586例,成功544例,失败42例,手术53例,无死亡病例,X线下空气灌肠治疗肠套叠总体成功率为92.83%。术中发现继发性肠套叠10例;患儿的年龄、血便的量、腹胀、X线下包块的形状、发病时间以及病理类型是影响肠套叠空气灌肠复位成功与否的重要因素,肥胖、发热对肠套叠复位无明显影响。结论小儿急性肠套叠年龄小、发病时间长、血便量大、腹胀、套叠位置深在等复位率低;回回结型肠套、形态呈分叶状不宜强行复位;全身状况差的患儿复位时需谨慎,低压力试行复位失败后尽早行手术治疗,从而达到提高复位成功率、减少并发症的目的。

急性肠套叠继发坏死性肠炎致短肠综合征1例

患儿，女，4个月，体重61 kg。因精神萎靡伴呕吐24 h、血便6h来本院就诊，腹部超声检查显示同心圆征及小肠扩张。诊断为急性肠套叠合并感染中毒性休克。入院后未行空气灌肠复位，在积极抢休克的同时予手术治疗。术中见腹腔淡黄色透明渗液，肠套叠类型为回回结型，予手法复位后肠管淤血较重、色泽发暗，经温生理盐水纱布包裹5 min后肠管淤血减轻、色泽变红润，确定无肠坏死。因休克未纠正、呼吸衰竭转入ICU病房。

小儿腹膜后淋巴管瘤破裂出血1例

小儿腹膜后淋巴管瘤是一种罕见的腹膜后良性肿瘤。通常无特异性表现，往往有感染、出血等并发症时才就诊，误诊率较高。我们收治1例腹膜后淋巴管瘤伴破裂出血患儿，现报道如下：

Ⅲa型食管闭锁上段盲端延长方法的对比研究

Ⅲ型食管闭锁在食管闭锁中占85%,Ⅲa型食管闭锁在食管闭锁中为30%~40%的比例,研究Ⅲa型食管闭锁的治疗方法有重要意义。近10年来我院手术治疗Ⅲa型食管闭锁44例,近5年来开展近端食管剪裁延长法,取得良好效果。报告如下。1资料与方法1.1一般资料：近10年来我院Ⅲa型食管闭锁手术44例,5年前闭锁两端进行一般性松解后直接吻合20例（对照组）,成功8例.

先天性食道闭锁临床诊治分析

先天性食道闭锁（CEA）是胚胎时期在食道发育过程中空泡期发生障碍引起的畸形,常因食管气管间的分隔不全而形成食管气管瘘（TEF）。出生早期,常以发绀、气促和口吐白沫为首要症状,以肺炎诊断收住内科。一旦确诊为CEA，又因严重肺炎影响手术时机和预后，造成较高的死亡率。因此，及早诊断和术后并发症的防治是提高成活率的关键。本院自1998--2009年收治的食道闭锁25例，通过治疗，取得良好疗效，现将结果报告如下。

小儿小肠脂肪瘤致不全肠梗阻1例

小儿小肠脂肪瘤是一种临床少见的小肠良性肿瘤，通常无特异性临床表现，是源自小肠黏膜下或浆膜下脂肪组织的良性肿瘤，多发生于回肠，呈息肉样、结节状或浸润性生长。我们近期收治1例小肠脂肪瘤致不全肠梗阻，现报道如下。

三氧化二砷对小儿恶性畸胎瘤作用机制的实验研究

目的观察不同浓度的三氧化二砷作用不同时间对小儿恶性畸胎瘤细胞的影响,分析其作用机制。方法体外原代培养小儿恶性畸胎瘤细胞,应用不同浓度的三氧化二砷作用后,用噻唑蓝〔3-(4,5-dimethyl-thia zol-2-y1)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide MTT〕比色法观察其对恶性畸胎瘤细胞增殖的影响,应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)及流式细胞仪检测三氧化二砷对恶性畸胎瘤细胞凋亡的诱导作用。结果不同浓度的三氧化二砷作用于小儿恶性畸胎瘤细胞有明显的时间和剂量依赖性,三氧化二砷作用后细胞生长明显受抑制,并出现明显的凋亡特征性改变,经TUNEL法可检测到细胞凋亡现象,经流式细胞仪可检测到小儿恶性畸胎瘤细胞在G1峰前出现明显的凋亡峰。结论三氧化二砷可明显抑制小儿恶性畸胎瘤细胞的生长,其机制主要可能是诱导恶性畸胎瘤细胞凋亡。

普外科手术后期并发脑梗死患者的相关危险因素病例对照研究

目的：探讨普外科手术后期患者并发脑梗死与其相关危险因素的关系,以指导普外科医生在术前和术中有效评估病人发生手术后期脑梗死的风险,并做到积极预防。方法：回顾性分析我院2009年~2014年普外科手术后期发生脑梗死的患者,采用病例对照研究的方法,将手术后发生脑梗死的患者36例作为病例组,按手术方式进行1：2配比,从相同手术方式且未发生脑梗死的的患者中随机抽取72例作为对照,采用SPSS13.0软件进行单因素和多因素条件Logistic回归分析。结果：单、多因素条件Logistic回归分析表明,高血压、糖尿病、血脂异常,术中低灌注均可能是普外科手术后期发生脑梗死的危险因素,多因素Logistic回归分析显示,在调整年龄和性别后,术中低灌注仍最容易发生脑梗死,其次为糖尿病和高血压病史。结论：普外科术中应注意血压的监测和控制,尽量避免或减少低灌注;术前良好控制血压、血脂、血糖有助于降低普外科手术后患者发生脑梗死的风险;普外科医生应根据手术患者危险因素的多少及严重程度,尤其对于高龄患者,选择合理的手术时机及手术方式可能归避手术后期脑梗死的发生。

血浆纤维蛋白原在小儿阑尾炎患者中的变化及临床意义

目的探讨血浆纤维蛋白原(Fib)在小儿阑尾炎患者中的变化及临床意义。方法回顾性分析我院进行阑尾炎手术病例,病理证实为阑尾炎的患者852例,按其病理分型分单纯组386例,化脓组381例,坏疽组85例,全部采用自动血凝仪检测血浆中Fib含量。结果化脓组、坏疽组的Fib、WBC显著高于单纯组,差异有统计学意义(P<0.01),而坏疽组的Fib、WBC又较化脓组高,差异有统计学意义(P<0.01),Fib与WBC相关性呈正相关(r=0.261,P<0.01)。结论在小儿阑尾炎中Fib、WBC随着病理分型而变化,病理越重Fib、WBC越高,Fib、WBC对判断阑尾炎的轻重以及预分型有一定帮助,可以为临床决策提供更多依据。

LC3蛋白在神经母细胞瘤中的表达及其临床意义

目的 观察自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)在神经母细胞瘤(neuroblastoma, NB)中的表达,探讨其在NB发生、发展过程中所起的作用。方法 收集经哈尔滨医科大学附属哈尔滨市儿童医院病理证实为NB的手术标本68例,通过免疫组化法检验LC3在NB组织与瘤旁组织内的表达,同时以NB患者的临床资料为基础,研究LC3的表达与NB临床病理学特征以及患者预后的关系。结果 免疫组织化学染色结果显示LC3蛋白在NB细胞浆中呈阳性表达,而瘤旁组织中LC3表达为阴性;LC3蛋白在NB高分期(Ⅲ~Ⅳ期)肿瘤组织内的表达水平明显高于NB低分期(Ⅰ~Ⅱ期)肿瘤组织(P<0.05);同时在有淋巴结转移组的表达水平明显高于无淋巴结转移组(P<0.05);而LC3蛋白在NB组织中的表达水平与性别、年龄、大小、肿瘤部位、病理分型等参数无显著相关性(P>0.05);LC3蛋白的高表达将导致NB患者预后较差。结论 LC3蛋白于NB组织内表达水平显著,其表达水平和NB的肿瘤临床分期、是否有淋巴结转移存在相关性,同时和NB患者的预后密切相关。

幼儿原发性卵巢扭转一例

患儿，女，2个月16d，因“腹胀、哭闹3d”来我院就诊，在外院可疑腹腔肿物建议住院治疗。食体：营养发育良好，神志清楚，精神萎靡，

siRNA沉默USP22表达对神经母细胞瘤细胞增殖作用的影响

目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默泛素特异性肽酶22(ubiquitin specific protease 22,USP22)对人神经母细胞瘤细胞增殖的影响和作用机制。方法合成USP22 siRNA及阴性对照siRNA(control siRNA),用脂质体Lipofectamine 2000转染至人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞和SK-NSH细胞,且设立阴性对照组和实验组。通过Western blot法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组神经母细胞瘤细胞的USP22的蛋白表达和mRNA表达水平的变化。采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测USP22siRNA对两组神经母细胞瘤细胞的增殖抑制率。通过原位凋亡TUNEL法检测USP22 siRNA对两组神经母细胞瘤细胞凋亡情况。流式细胞仪定量检测USP22 siRNA对神经母细胞瘤细胞凋亡及细胞周期分布的影响。结果与设立的阴性对照组相比较,实验组中神经母细胞瘤细胞中USP22蛋白和mRNA表达显著下降(P <0. 05),神经母细胞瘤细胞增殖明显受到抑制(P <0. 05),凋亡率随时间延长明显上升(P <0. 05),细胞周期中G2/M期的细胞比例明显增高。结论 USP22基因在神经母细胞瘤细胞的增殖中发挥重要的作用,采用siRNA技术能够有效地沉默USP22基因的表达,并显著抑制人神经母细胞瘤细胞的增殖,其机制可能与调节细胞周期及细胞凋亡相关。

改良单孔疝针经皮腹膜外结扎术治疗小儿腹股沟疝

目的探讨单孔腹腔镜下改良单孔疝针经皮腹膜外结扎术治疗小儿腹股沟斜疝的手术效果。方法回顾性分析我科2013年6月至2015年6月，在单孔腹腔镜辅助下，应用改良单孔疝针内环腹壁投影处经皮穿刺腹膜外结扎关闭内环手术治疗腹股沟疝病例312例（459侧）的临床资料。经脐部5mm Trocar置入30°观察镜，内环投影处以带双股闭合2-0慕丝线疝针先沿内环口内侧紧贴腹膜外分离潜行，于贴近精索血管处穿透腹膜进入腹腔，牵拉体外双股线，闭合端双线自疝针孔退出，将疝针缓慢回撤至针孔露出皮肤平面时停止，以一根单股1-0慕丝线穿过疝针针孔，再将疝针沿内环口外侧腹膜外潜行，从同一腹膜穿刺点进入腹腔，将带单线疝针穿过预置于腹腔内的圈套内，牵拉1—0慕丝线使其与疝针分离，牵拉双股2-0慕丝线，将后置入的单股1-0慕丝线线尾牵拉出体外，挤压排出阴囊内气体，收紧1-0慕丝线，体外打结埋置于腹膜外。结果298例442侧通过此法完成手术；所有病例无手术中并发症发生，术后穿刺点无明显疼痛，术后3d出院。术后随访5～29个月，尚未见疝复发或鞘膜积液病例，无穿刺点缝线反应及异物感。结论单孔腹腔镜下改良单孔疝针经皮腹膜外结扎术经腹壁穿刺导入和牵出结扎线可保持在同一穿刺隧道，避免了因两次穿刺造成的较多结扎组织引起的术后疼痛和线结变松的情况发生。

小儿消化道多磁铁异物二例

例1男,5岁11个月,因"阵发性腹痛伴呕吐无便1 d"入院。入院查体:腹部平坦,未见胃肠型及胃蠕动波,全腹软,右下腹部偏中有压痛;腹部X线立位平片提示"不完全性肠梗阻,消化道异物"。经与家长共同反复追问病史,患儿承认约在10 d前有磁铁吞入史,吞入的为可粘附临时车牌的强力磁铁,吞入个数说不清,将腹部X线正侧位片与实物仔细对照,确定为3枚磁铁吸附一体(图1)。一天后复查X线片,异物位置无变化,遂行剖腹探查术,术中发现于右下腹空肠、中位小肠及乙状结肠末端聚集并粘连,可触及金属异物位于此聚集肠管中,各肠管间炎性粘连,分离粘连肠管,见紧密吸附的磁铁已将夹在其间的肠壁及系膜压迫成坏死、菲薄、透明的薄膜样结构,其边缘已与正常组织大部分分离,造成肠壁圆形缺损(图2)。

腹腔镜与开腹胆总管探查术治疗胆总管结石的临床效果对比研究

此次主要针对胆总管结石应用腹腔镜和开腹胆总管探查术治疗效果进行分析。方法:随机选取我院接收共84例胆总管结石患者展开研究,将其中42例进行传统开腹取石术患者纳入参照组,将42例行腹腔镜胆总管探查术患者纳入研究组,对比两组疗效。结果:研究组手术各项指标均优于参照组,且术后并发症发生率与结石残留率低于参照组,P<0.05。结论:腹腔镜胆总管探查术治疗胆总管结石可以有效降低术后并发症发生。