MAFA-PDX1过表达慢病毒感染人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞的分化

背景:干细胞来源胰岛β细胞移植被认为是治疗1型糖尿病的有效手段。人脐带间充质干细胞是理想的细胞来源,但其向胰岛β细胞分化的效率不高。目的:研究MAFA、PDX1修饰促进人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化的潜能。方法:构建MAFA-PDX1过表达慢病毒载体,用细胞形态学、RT-qPCR法、双硫腙染色比较3种方案[方案A:单纯慢病毒组;方案B:先药物(尼克酰胺、β-巯基乙醇)诱导再加慢病毒组;方案C:慢病毒和药物诱导同时进行组]诱导人脐带间充质干细胞分化为胰岛素分泌细胞的效率和潜能。结果与结论:(1)细胞形态学改变:经3种方案诱导后细胞形态均发生了改变,方案B在诱导第11天细胞聚集生长最为明显,出现聚集生长的胰岛样细胞团;(2)RT-qPCR检测胰岛相关基因的表达差异:同一诱导时间点3种方案横向比较,在诱导第5天,方案C的MAFA和PDX1基因表达量最高,方案B的GCG基因表达量最高;在诱导第11天,方案B的MAFA、PDX1基因表达量以及INS和GLUT2基因表达量最高;(3)双硫腙染色鉴定锌离子:3种方案诱导第11天部分细胞被双硫腙染成棕红色,其中方案B中部分小岛状细胞被染成棕红色,颜色较深(阳性表达);(4)结果表明,MAFA和PDX1共过表达可促进人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化;MAFA-PDX1基因修饰联合药物诱导方案优于单纯基因修饰方案。

丹参诱导人脐血间充质干细胞分化为神经样细胞

目的探讨丹参注射液对人脐血单个核细胞来源的间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化的诱导作用。方法利用FACScan流式细胞仪检测MSCs表面抗原CD29、CD44、CD59、CD33,用丹参注射液诱导人脐血原代细胞和脐血来源的间充质干细胞向神经细胞方向分化,并与神经生长因子(NGF)和神经常苷脂(GM1)的诱导作用比较,用免疫细胞化学方法对分化和未分化细胞进行鉴定。结果人脐血原代细胞中MSCs的表耐标记CD29、CD44、CD59阳性率分别为10.7%、37.27%和66.67%,而造血细胞的表面标记CD33阳性率仅为0.33%。人脐血传代细胞(第5代)MSCs的表面标记CD29、CD44、CD59的阳性率分别为40.2%、70.5%和95.4%。原代培养的贴壁细胞形态呈大小不等圆形和条形,用丹参诱导可表达神经细胞的标记。传代培养的间充质干细胞,可维持在未分化状态稳定增殖。用丹参可诱导这种细胞向神经样细胞分化,表达神经干细胞标记nestin,神经元的标记β-Ⅲ类神经微管(β-TubulinⅢ)、神经微丝(NF)和神经胶质细胞的标记胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。与NGF和GMI的诱导作用比较,细胞形态类似,表达相同的神经细胞标记,丹参的诱导速度较快,诱导后细胞表达神经元标记的比例较高。结论人脐血是MSCs的来源之一,丹参可诱导人脐血干细胞分化为神经样细胞,丹参可作为神经诱导剂,人脐血干细胞可作为神经干细胞的来源。

小儿白血病强化疗期间医院感染的预防

目的 探讨小儿白血病行强化疗期间医院感染的预防方法。方法白血病患儿给予４０疗程强化疗（门急诊和病房住院各２０疗程），实施预防感染措施，统计感染发生率及治疗成本。结果两组病例在白细胞降低时使用ＧＭ－ＣＳＦ，白细胞很快升高，同时输注ＩＶＩＧ提供抗体，两组感染率无明显差别，门急诊治疗能节省费用２０． ３％。结论联合使用 ＧＭ－ＣＳＦ、 ＩＶＩＧ、抗生素及严格的消毒隔离措施，能预防强化疗期间的医院感染，在门急诊使用本治疗方案，是经济、安全的治疗途径。

小儿白血病成分输血的合理应用

目的 了解白血病输血的合理应用、输血的临床效果及副作用 ,指导合理输血。方法 以《献血法》实施前后分阶段总结近年经输血治疗的 5 2例白血病 ,了解其输血的理由 ,判断其输血的合理性 ,比较不同血液成分的疗效及副作用。结果 1995～ 1997年 33例白血病共输血 36 6例次 ,不必要输血 16例次 (4 4% ) ,输血成分不适当的达 189例次(5 1 6 % ) ,主要为全血的使用不当 ;《献血法》实施后 1998～ 1999年 19例白血病输血 2 2 0例次 ,全血仅 4例次 (1 8% ) ,无不必要输血。成分输血的疗效明显优于全血输注 ,输血副反应主要见于全血输注。结论 小儿白血病确需大量、多次输血 ,但应该强调合理应用成分输血 ,通过更新输血理论及加强输血管理能合理调控成分输血 ,节省血液资源 ,避免血液浪费 ,减轻患者的经济负担 ,提高输血疗效 。

小儿白血病强化疗期间医院感染预防的成本-效益分析

目的 探讨小儿白血病强化疗期间医院感染预防的成本-效益比。方法10例白血病患儿在80个疗程化疗中,给予IVIG、G（M）-CSF、抗生素等药物,房间消毒隔离,口腔、肛门、皮肤的清洁等措施预防感染,统计感染发生率,分析预防感染的成本-效益。结果 联合使用IVIG、G（M）-CSF,抗生素及消毒隔离措施,观察组感染率18.75％,对照组感染率48.6％,两组病例感染率有明显差别,观察组感染病例症状较轻,发热时间较短,使用G（M）-CSF和IVIG等药物预防感染,可取得1.98的成本-效益比。结论 使用药物及严格的消毒隔离措施,能有效预防强化疗期间的医院感染,并可取得1.98的成本-效益比。

特发性血小板减少性紫癜的诊断和治疗

目的特发性血小板减少性紫癜(ITP)是一种因免疫异常导致的疾病。它的诊断目前主要依靠病史、临床表现、实验室检查。但目前对其诊断、治疗仍然存在争议。本文对近年来有关ITP的诊断、临床分级、鉴别诊断、治疗情况作一介绍。实用儿科临床杂志,2006,21(3)

静注免疫球蛋白与丙型肝炎病毒传播的安全性研究

笔者就输注国产ＩＶＩＧ后传播ＨＣＶ的危险性作了研究。２９名有ＩＶＩＧ应用指针的病儿，输注经加热法灭活病毒的ＩＶＩＧ后１周、２周、１月，抗－ＨＣＶ阳性率分别为８３．３％、４５．５％、４．６％，３个月后全部转阴，显示抗－ＨＣＶ随输注ＩＶＩＧ后时间延长而转阴。随机抽取１１名输注ＩＶＩＧ后抗－ＨＣＶ阳性病儿的２４份系列血标本，用ｎｅｓｔ－ＰＣＲ检测ＨＣＶ－ＲＮＡ，无阳性发现。检则１０份ＩＶＩＧ中抗－ＨＣＶ均阳性，抗－ＨＣＶ滴度１∶１６，抽取６份ＩＶＩＧ，ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性。经３个月～１年观察，所有病例无肝炎的临床症状和体征，结果支持：用于本研究的国产ＩＶＩＧ输注可被动输入抗－ＨＣＶ，但不传播ＨＣＶ。

静脉注射免疫球蛋白的副作用

IVIG现在临床得到广泛的应用,并已取得显著的疗效,但也可能有致过敏反应、溶血、病毒传播、血液凝固性增高、肾功能损害及无菌性脑膜炎等副作用。

儿童溶血性贫血的诊断与治疗

溶血性贫血可分为先天性(遗传性)和后天性(获得性),红细胞内在缺陷常为遗传性溶血性贫血,包括细胞膜、酶及血红蛋白等缺陷。而常见获得性溶血性贫血有自身免疫性贫血、感染引起的贫血及阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)。溶血性贫血确诊在很在程度上常取决于有关的实验室检查,但病史和体格检查能提供重要线索及其可能病因。溶血性贫血是一大类性质不同的疾病,其诊断与治疗不能一概而论,应因病而异。

静注免疫球蛋白治疗传染性单核细胞增多症

静注免疫球蛋白治疗传染性单核细胞增多症５１５０４１汕头大学医学院附一院马廉郭光华华西医科大学小儿血液肿瘤研究室罗春华刘亚峰张雅欧为探讨静注丙种球蛋白（ＩＶＩＧ）治疗传染性单核细胞增多症（ＩＭ）的疗效，笔者将３０例ＩＭ分为两组，分别给予ＩＶＩＧ治疗和病...

国产恩丹西酮和枢复宁预防白血病化疗呕吐的疗效比较

目的 比较国产恩丹西酮和枢复宁预防白血病化疗消化道反应的疗效。方法 10例能坚持化疗的小儿白血病 ,接受 80个疗程的化疗及 10 0次鞘注 ,各使用国产恩丹西酮和枢复宁预防消化道反应 130例次 ,比较两者的疗效及副作用。结果 国产恩丹西酮和枢复宁预防白血病化疗呕吐的有效率分别是 94.6 2 %和 96 .15 % ,预防恶心的有效率分别是 85 .4%和 86 .9% ,两者有效率无显著性差异 ,两者均无延迟呕吐现象 ,无明显副作用。结论 国产恩丹西酮能有效预防白血病化疗的消化道反应 。

小儿白血病成分输血分析

目的 通过分析小儿白血病成分输血的实际情况及疗效来指导临床合理输血。方法 以《献血法》颁布实施前后分阶段统计 5 9例白血病患儿的输血理由、输血的合理性、疗效及副作用。结果 1995年～ 1997年组成分输血 5 3 8% ,不必要输血 4 4 % ,输血成分不适当占 5 1 6 % ;成分输血的疗效明显好于全血输注 ,输血副反应主要见于全血输注。 1998～ 2 0 0 0年组 ,输全血仅 4例次 ,无不必要输血 ,成分输血率 98 7% ,输血疗效明显提高。结论 对小儿白血病积极开展成分输血 ,不仅节约血源 ,而且疗效明显 ,副作用少。

脾切除治疗血液病的进展

本文就脾切除在溶血性贫血、特发性血小板减少性紫癜、WAS综合征、白血病、淋巴瘤及艾滋病的手术指征、适应证、临床疗效等的研究进展作一简介,并着重讨论了脾切除对免疫功能的影响及预防措施。

静脉注射丙种球蛋白与丙型肝炎病毒传播的研究进展

本文就静脉注射丙种球蛋白(IVIG)生产过程中Cohn氏低温乙醇法、巴氏消毒法、低pH等方法对病毒的清除、灭活效果,IVIG中丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)存在的原因及其临床意义,临床和动物实验对IVIG安全性所作的论证报道,以及近年因输注IVIG所致的HCV感染等作一简介,提出应选择安全可靠的IVIG制品,用于适当的病例。