灵芝孢子粉破壁技术、质量分析与深加工相关研究进展

破壁灵芝孢子粉为一种灵芝深加工产品,具有多种药理学活性,更易被人体吸收。灵芝孢子的破壁方法包括生物化学法、物理法和机械法等,工业生产多综合利用多种方法。破壁灵芝孢子粉的质量分析还没有统一的国家标准,灵芝孢子粉质量可以参考地方标准进行综合评价,还可以参考近期发表的一些分析方法。灵芝孢子粉提取物产品以孢子油为主,其它产品也有研发并推出市场。药理学研究表明,灵芝孢子油、灵芝孢子粉水提物和醇提物均具有抗癌活性,有良好的应用前景。

丹参根部RNA的提取与全长均一化cDNA的制备

目的:制备高质量的丹参根部RNA与均一化的丹参根部全长cDNA。方法:利用改良的TRIzol方法,从丹参根部提取得到高质量的总RNA,利用SMART技术合成丹参根部全长cDNA,并应用DSN酶处理的方法对丹参根部全长cDNA进行均一化。结果:电泳检测结果表明,利用改良的TRIzol方法提取的总RNA具有较好的完整性,所获得的丹参根部全长cDNA均一化效果良好。结论:本研究表明,改良的TRIzol方法适用于丹参根部组织的RNA提取。本研究中制备的丹参根部全长cDNA,为后续丹参功能基因的克隆及丹参RNA干涉突变体库的构建提供了材料。

不同地区赤芝药效成分及真菌污染初步评价

针对当前赤芝市场混乱、质量参差不齐等问题,本研究对来自北京、福建、安徽等9个地区的16份赤芝样品的药效成分和真菌污染情况进行测试。结果表明,不同地区赤芝的药效成分差异较大,北京市通州区的一份赤芝样品的药效成分优于其他样品。真菌污染检测结果显示,所检测的16份赤芝药材中12份检出有真菌污染(75%),真菌污染情况普遍,主要污染真菌为曲霉属、青霉属和蓝状菌属。免疫亲和柱净化-高效液相色谱-柱后光化学衍生-荧光检测法(IAC-HPLC-PCD-FLD)检测结果显示,3份赤芝样品检测出黄曲霉毒素B1峰,但未达到2020年版《中国药典》规定的检出限0.5μg/kg。说明赤芝药材外源黄曲霉毒素污染水平较低,但具有一定的安全隐患。研究结果对于赤芝栽培育种与质量安全评价具有重要参考价值。

药用植物种植模式的变迁

药用植物种植模式对提升中药材质量和数量,推动药用植物资源保护和可持续利用,促进中医药产业传承和创新发展具有决定性的作用。本文综述了部分药用植物种植的传统模式和现代模式,重点介绍了“拟境栽培”、“立体栽培”、“有机种植”和“精准调控”的种植模式,并对如何选择合适的药用植物种植模式进行了分析,以期为药用植物种植研究提供理论参考,同时也为中医药现代化发展提供依据。

利用三引物PCR和同尾酶连接的策略实现多基因片段的重组

在构建质外体CaM结合小肽中间载体的过程中,采用了三引物PCR和同尾酶连接法进 行DNA重组,构建了SLR1 BPs信号肽 CaN Cmyc的融合基因的一连体和CaN二连体。结果表 明,三引物PCR方法对多个小基因片段的重组操作方便快速,比酶切、连接方法更具优越性。 而同尾酶连接方法是连接多拷贝基因的有效方法。

转录因子对药用植物次生代谢的调控作用

药用植物次生代谢产物的合成和积累受到外界环境因素的调控,转录因子是介导外界环境因素信号转导与次生代谢产物生成的重要调控因子。介绍了近年来几种重要的转录因子对药用植物次生代谢的调控作用,综述了MYB转录因子,bHLH转录因子以及WRKY转录因子在调控药用植物次生代谢方面的国内外相关研究进展,以期为今后药用植物次生代谢的调控机制研究提供参考。

薄荷化学成分药理作用与产品研发进展

薄荷始载于《唐本草》,为我国传统中药。薄荷化学成分主要包括薄荷醇和薄荷酮等挥发性成分与甾体、黄酮、三萜等非挥发性成分。具有抗炎、抗真菌、抗肿瘤、抗氧化、抗辐射等多种药理作用。薄荷作为一种药食两用植物,在日常生活中已被广泛应用于制药、食品、化妆品以及香料香精等多个领域。本文对唇形科植物薄荷的化学成分、药理作用与产品研发工作进行了综述,为今后进一步分析、探讨薄荷的药效物质基础和作用机制提供理论基础,并为相关新产品的研发提供参考。

川栝楼瓤中次生代谢物组成及相对含量分析研究

目的:栝楼生产基地将栝楼瓤作为废弃物丢弃,既浪费药用植物资源,又污染当地环境。本文通过研究栝楼瓤次生代谢产物,以为综合利用栝楼资源及栝楼瓤的开发利用提供参考。方法:用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)测定指标性成分3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇的含量,采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)测定次生代谢产物,得到的样品数据导入Waters Masslynx 4.1软件中编辑,然后用Simca-P软件(13.0版本)进行主成分分析,并找出不同部位间差异代谢物,并采用峰面积比确定其相对含量。结果:栝楼瓤中的主成分3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇平均质量分数最高为0.39%,栝楼全果的平均质量分数为0.30%,栝楼皮和栝楼仁的平均质量分数分别接近0.29%和0.28%,即栝楼瓤>栝楼>栝楼皮>栝楼仁;栝楼瓤中含有丰富的次生代谢产物,并初步鉴定了部分代谢产物。结论:栝楼瓤与皮和仁中的次生代谢物相似,峰容量较丰富,只是相对含量高低不同,特别明显的是在高极性部分,色谱峰较多,显示栝楼瓤具有较好的开发利用前景,特别是作为化妆品开发的首选。

新塔花实时定量PCR内参基因的筛选和验证

目的:筛选出新塔花在不同组织(根、茎、叶、花)及脱落酸(ABA)处理不同时间的叶片中表达相对稳定的内参基因。方法:从新塔花转录组数据中搜索到5个看家基因ZbIF3G1、ZbGAPDH1、ZbEF1γ、ZbUBC9、ZbTUBα,将其作为新塔花相对实时定量PCR候选内参基因,并设计内参引物。利用实时荧光定量PCR获得5个候选内参基因的Ct值,通过3种基于不同算法的软件(GeNorm、NormFinder和BestKeeper)对内参基因稳定性进行分析。结果:ZbGAPDH1、ZbEF1γ的表达相对更为稳定,适合作为新塔花不同组织及ABA处理的基因表达研究的内参基因,并用新塔花ZbFLS、ZbCHI基因的表达分析实验进一步验证了上述预测。结论:确定ZbGAPDH1与ZbEF1γ为适合用于新塔花定量分析的内参基因,该研究为新塔花后续相关基因表达研究奠定了基础。

2个丹参鲨烯合酶基因的克隆和鉴定

目的克隆与鉴定丹参Salvia miltiorrhiza鲨烯合酶基因。方法基于丹参基因组的基因预测结果设计引物,通过RT-PCR方法,克隆丹参鲨烯合酶基因。利用生物信息软件对基因序列进行了结构分析,对基因编码多肽进行了序列同源性比较和保守结构域分析,利用实时定量RT-PCR方法对基因进行表达模式研究。结果通过RT-PCR方法扩增得到2个丹参鲨烯合酶基因(SmSQS1和SmSQS2),它们编码的多肽具有鲨烯合酶相关结构域和保守基序。这2个基因具有不同的外显子/内含子结构特征,具有不同的组织特异性表达模式和时间表达模式。结论丹参基因组中存在2个鲨烯合酶基因,它们具有不同的基因结构特征和表达模式,可能在丹参甾体类和三萜类化合物生物合成中起不同作用。

基于转录组测序挖掘新塔花黄酮类物质生物合成相关基因

新塔花为唇形科植物,新疆地产药材,其主要药效成分为蒙花苷等黄酮类成分。该研究利用二代高通量测序技术对新塔花的花序部位进行转录组高通量测序,获得77 366条单一序列。通过搜索数据库和聚类分析对56 375条unigene进行了功能注释,继续对代谢通路分析,发现新塔花转录组中有60条unigene可能编码黄酮合成途径一些酶类。后对其不同组织的蒙花苷的含量及4条黄酮合成关键基因进行了测定、分析及验证,为进一步分析其他参与新塔花中黄酮类成分生物合成相关酶基因奠定了研究基础。