云南香格里拉地区带绦虫分子鉴定分析

目的:对云南香格里拉地区带绦虫进行分子鉴定。方法:选取成虫样本株成虫节片,抽提DNA,PCR扩增mtCOXⅠ区段,并做序列测定;结合GenBank中已知的猪带绦虫、牛带绦虫、亚洲带绦虫mtCOXⅠ序列,经DNA MAN软件处理后计算遗传距离并构建系统发育树状图。结果:XG1-3与BZ3的同源性最近,分别为98.5%,98.8%,98.0%,XG1-3与BZ2的同源性较近,而与BZ1的同源性较远,低于87%。亚洲带绦虫与牛带绦虫较接近,远离猪带绦虫。结论:云南香格里拉地区带绦虫株与亚洲带绦虫标准株相似,同属于亚洲带绦虫。mtCOXⅠ片段可用于带绦虫分类鉴定。

金纳米粒子在食源性病原体检测中的应用研究进展

近年来,由食源性病原体污染食物导致中毒或死亡事件在全球频发,食源性病原体引起的疾病已成为危害人类健康的头号杀手,亟需开发快速、准确且灵敏的食源性病原体检测方法用于日常的食源疫情监测和预防食源性疾病暴发。金纳米粒子凭借其小尺寸、表面积大、高反应活性及易于与其他传统检测方法相结合等优势成为食品安全检测领域的研究热点。本文在总结了金纳米粒子的理化性质、制备的基础上,重点综述了基于金纳米粒子的免疫标记技术在食源性病原体检测方面的应用,主要涉及免疫层析技术、比色法、生物传感器的制备和探针技术等的最新研究进展,并对未来研究方向进行了展望,以期为临床样本或食物中的食源性病原体检测快速化、准确化提供理论依据。

血液细胞分析检测结果互认方案的设计和实施

应用云南省血细胞二级比对实验室定值的新鲜血液为标准物质进行结果准确性和可比性调查,为云南省检验结果互认提供可靠的质量保证依据。同时,利用互联网对各级临床实验室的室内质量控制进行实时监控,发现失控时可及时提供指导帮助,与传统管理方式相比,效率和质量明显提高[1]。

杂交瘤细胞(10株)染色体形态、数目与抗体分泌的关系

目的:探讨杂交瘤细胞染色体形态、数目与抗体分泌能力及稳定性的关系。方法:对我室融合成功的10株杂交瘤细胞,采用秋水仙素法制备染色体,分别计数100个完整的中期分裂相细胞,并观察其形态。制备腹水和收集细胞培养上清液,间接ELISA法检测抗体效价。结果:经染色体计数与分析,10株杂交瘤细胞中,7株瘤株细胞间染色体形态一致,分散好,既有端着丝点染色体,也见中间着丝点染色体,染色体数目的标准差小于5.0,腹水和细胞培养上清抗体效价高,分泌稳定性好;3株染色体数差异大、标准差大的瘤株中,2株抗体效价低,分泌不稳定。结论:杂交瘤细胞染色体形态、数目与其分泌单克隆抗体的能力和稳定性有关,进行染色体分析有利于了解瘤株特性,可作为筛选高效、稳定瘤株的参考依据。

一起通过性传播的布病疫情调查

目的报道一起通过夫妻间性生活而感染布病疫情,提示临床医生不能忽视非布病职业人群也有感染布病的可能性,以便避免布病病例的误诊,早期发现和处置布病疫情。方法描述发生在祥云县一起通过夫妻间性生活而感染布病及其治疗过程,比较此起布病疫情与普通布病疫情在处置方法的不同之处。结果 2012年5月19日大理州医院报告1例疑似布鲁氏菌病病例,患者Y某,女,职业为会计,经云南省地方病防治所核实为1例急性布病;追踪调查:患者Y某与羊、牛等动物无接触史,但其夫H某某于2010年7月至2011年12月间有购买、养殖、宰杀、贩卖、接生山羊史,其中有2只是从云南省布病重疫区曲靖市陆良县购入的种公羊,养殖中与种公羊同群的其他母羊有流产现象,虽然其夫否认有睾丸肿大、疼痛、关节肿、关节痛等典型的布病表现,但有高热、出汗等症状和体征,布鲁氏菌抗体高达1:800+++,H某某为症状不典型的布病患者;H某某在购买、养殖、宰杀、贩卖山羊过程中,先感染布病,因表现不典型,未引起注意,Y某与H某结婚后,通过夫妻生活,使Y某也相继感染布鲁氏杆菌并发病;Y某和H某某夫妻双方均接受全程足量规范的抗布病治疗,一年后,经随访Y某与H某某夫妇身体均健康,病情无反复。结论布病一般是畜传播给人,人传人现象少见,但也存在夫妻间通过性生活传播,导致非职业人群感染布病,应引起注意,夫妻均感染布病,在治疗过程中,夫妻双方均要接受全程足量规范的抗布病治疗甚为重要,以免造成交替传播,导致迁延为慢性布病;夫妻双方中有一方感染布病,在治愈前,最好暂停性生活,以免通过性生活传播给对方。

2010～2015年云南大理州布鲁氏菌病疫情分析

目的分析大理州目前布病疫情愈演愈烈的流行态势的原因,为制订行之有效的防控措施提供科学依据。方法搜集、整理大理州2010~2015年布病疫情调查和处置资料,分析布病疫情愈演愈烈的原因。结果 1964~2009年大理州均无人感染布病,2010年再次报告,至2015年共报告89例,96.62%的病例是由羊传播给人。近年,山羊价格不断上涨刺激了山羊养殖业,导致布病疫区病羊输入大理州,继而引起羊间布病疫情不断蔓延,并波及人群。另外,外地引进家畜检疫工作难度大、病畜及同群牲畜扑杀工作不够彻底、人群对布病陌生、少数民族聚居地群众有吃凉拌生羊血和生羊肉(羊生皮)的生活陋习等因素,导致大理州布病疫情呈现愈演愈烈。结论多种因素引起大理州布病疫情呈现愈演愈烈之势,目前布病防控的重点是动物疫病预防控制机构要切实做好动物布病监测和病畜的扑杀工作,物价部门要重新调整扑杀动物补偿标准,确保病畜工作的顺利进行和扑杀彻底。

云南6地域带绦虫mtCOXⅠ片段序列测定分析

目的利用mtCOXⅠ片段的PCR和序列测定鉴定云南6地域(怒江、大理、迪庆、西双版纳、临沧、楚雄)带绦虫的虫种,并构建系统发育树。方法从6地域采集带绦虫成虫,抽提DNA,PCR扩增mtCOXⅠ片段,并做序列测定;结合GenBank中已知的猪带绦虫、牛带绦虫、亚洲带绦虫mtCOXⅠ序列,经DNA MAN软件处理后计算遗传距离并构建系统发育树状图。结果遗传距离矩阵表显示:NJ4、NJ1和DQ2的遗传距离为99.8%,DL4和NJ3的遗传距离为99.5%,NJ2和DQ3的遗传距离为98.8%,DL3与BZ3的遗传距离为98.3%,而与BZ2的遗传距离为96.0%;系统发育树显示:NJ1～4、DL2～3及DQ1～3共10个标本株与BZ3聚为一支.BN1、CX1、LC1与BZ2聚为一支,两支交汇后再与由DL1和BZ1聚合的一支汇合。结论怒江和迪庆各株为亚洲带绦虫,西双版纳、临沧和楚雄株为牛带绦虫,大理株为亚洲带绦虫和猪带绦虫。同虫种不存在地理区域的差异。mtCOXⅠ片段的序列测定可用于带绦虫分类鉴定。

应用二级标准检测系统建立云南省血细胞分析溯源体系

目的以云南省血细胞分析二级参考实验室定值的具有溯源性的定值新鲜血建立省、地州、县级血细胞分析溯源体系。方法用二级标准检测系统定值的新鲜血,选择具有较好实验室管理和规范化操作技术水平的地区级实验室的检测系统作为第三级溯源体系进行溯源,通过用该检测系统定值的新鲜血对县级医院的检测系统进行校准。结果第三级溯源体系溯源链完整,该溯源体系有较高的精密度和准确度。各项结果的偏差分布范围是:白细胞(WBC)1.21%~1.52%;红细胞(RBC)1.02%~1.08%;血红蛋白(Hb)-0.68%~0.78%;血细胞比容(HCT)-2.03%~0.62%;血小板(PLT)-2.96%~2.85%;通过第三级溯源系统定值的新鲜血对县级医院实验室血细胞分析系统进行校准。各项结果的偏差分布范围是:WBC 1.32%~1.88%;RBC 0.93%~1.10%;Hb-0.97%~1.16%;HCT-0.19%~2.06%;PLT-3.00%^-2.19%。结论利用定值新鲜血建立用配套校准物以外的血细胞分析溯源体系,解决当前云南省州、县级实验室血细胞分析溯源存在的实际问题,为各区域内医院血细胞分析检测结果的准确和检验结果互认提供了质量保障。

有偿献血者长期献血机体细胞免疫功能代偿状况

探讨有偿献血者长期献血后细胞免疫功能状况。选择 1998年 1月～ 1999年 12月到我站献血的无偿献血者、初次有偿献血者、长期有偿献血者为研究对象 ,整群随机抽样 ,调查献血者的一般状况 ,监测献血者体质指数、血清铁 ,检测献血者 T淋巴亚群 ,结合献血者外周全血细胞分析 ,评定有偿献血者长期献血细胞免疫功能。结果初次有偿献血者的体质指数、血清铁、血红蛋白、T淋巴亚群计数百分率比无偿献血者偏低 ,差异无显著性 ,长期献血各项观察指标明显下降 ,和无偿献血者比有高度显著性差异 ;外周全血细胞计数分析单核幼稚中间细胞增多、红细胞体积小、数量多、T淋巴亚群检测 CD8细胞数量降低明显 ,CD4/ CD8比值增高 ,和初次有偿献血者比有显著差异 ,说明有偿献血者长期献血体质下降 ,有铁营养不足状况 ,机体细胞免疫功能代偿结果减少了 CD8细胞的数量相对增加了 CD4细胞数量 ,骨髓也代偿性增生旺盛 ,及时补充献血丢失的各种全血细胞 ,包括 T淋巴细胞 ,以保证机体正常细胞免疫功能。

1988例丙型肝炎病毒抗体检测结果分析

目的探讨不同年龄丙型肝炎病毒(HCV)感染情况,为预防和治疗丙型肝炎提供依据。方法采用ELISA和胶体金法对2009年1～10月大理州医院住院和门诊患者进行HCV抗体(抗-HCV)检测,分析各年龄段阳性率。结果 1988例研究对象中,不同年龄段阳性率分布差异显著,以21～40岁阳性率最高(8.65%);男性抗-HCV阳性率(5.20%)比女性(2.86%)高。结果经统计学分析有差异。结论目前大理州HCV感染以青壮年为主;男性感染率比女性高。

细胞免疫表型检测在急性淋巴细胞白血病诊断中的应用价值

目的:对26例初诊或化疗未缓解的急性淋巴细胞白血病(ALL)患者进行免疫表型检测分析。方法:采集白血病患者EDTA-K2抗凝外周血或骨髓液,用流式细胞术检测髓系、T系、B系、红系、巨系分化抗原及非特异性抗原。结果:ALL患者均表达淋巴系抗原,但有部分病例同时表达髓系抗原(CD13或CD33)。3例髓系淋系双表型杂合性白血病同时表达2个以上淋系和髓系抗原标志,1例T系、B系双克隆杂合性白血病细胞分别表达两种以上T系和B系抗原。结论:细胞免疫表型检测可弥补形态学的不足,提高分型正确性,结合细胞形态学检验能为急性淋巴细胞白血病的诊断、治疗、预后判定及基础研究提供可靠的依据。

简便快速实用的杜氏利什曼原虫前鞭毛体培养方法

目的介绍一种简便快速实用的杜氏利什曼原虫前鞭毛体乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)离心管培养方法。方法对1例经形态学和血清学检查确诊的黑热病患者,采集其骨髓液用EDTA-K2离心管培养。结果经本法快速检出杜氏利什曼原虫的前鞭毛体,并经过再次重复试验也获得相同的结果。结论 EDTA-K2离心管培养法是一种简便快速实用的杜氏利什曼原虫前鞭毛体培养方法。

大理白族29例系统性红斑狼疮患者自身抗体检测结果分析

目的:通过对大理白族系统性红斑狼疮(SLE)患者中各种自身抗体的综合分析评价,为SLE患者早期诊断和治疗提供实验室依据。方法:采用间接免疫荧光法检测29例大理白族系统性红斑狼疮患者血清中抗核抗体(ANA),抗双链DNA抗体(抗ds-DNA);免疫印迹法检测抗核抗体谱(ANA16项),以51例抗核抗体谱结果阳性的其它病例作为对照。结果:抗ds-DNA和抗sm仅出现于SLE患者血清中;抗nRNP抗体在SLE中的阳性率明显高于其他自身免疫病患者;有三例治疗后复检的SLE患者抗核抗体谱结果阴性。结论:SLE患者女性为主;SLE患者血清中可出现多种自身抗体,但抗ds-DNA和抗sm是SLE的特征性抗体;间接免疫荧光法检测抗ds-DNA抗体敏感性比免疫印迹法高;SLE患者治疗缓解期自身抗体可转为阴性。

云南大理白族老年糖尿病前期和糖尿病流行病学调查以及危险因素分析

目的探讨云南大理白族老年糖尿病前期及糖尿病的流行现状,并分析相关危险因素。方法采用多阶段、随机整群抽样方法,于2014年1~12月对1845例包括城镇、农村、城乡结合部居住>5年的年龄≥60岁的大理白族人群进行横断面调查,男性939例,女性906例。结果 1845例入选者中,糖尿病前期患病率38.45%,男性44.70%,女性33.00%,男性患病率高于女性(P<0.01);糖尿病患病率17.02%,男性20.48%,女性13.46%,男女性患病率比较无统计学差异(P>0.05);农村、城镇和城乡结合部居民的糖尿病前期患病率(男性36.34%vs43.09%vs 51.87%,女性26.41%vs 32.00%vs 40.83%)、糖尿病患病率(男性11.50%vs 20.52%vs 22.97%,女性为6.01%vs 14.78%vs 19.81%)比较,差异有统计学意义(P<0.05);空腹血糖受损(IFG)、单纯糖耐量受损(IGT)、IFG+IGT患病率分别为9.95%、51.88%、38.17%,其中男性分别为10.98%、50.23%、38.79%,女性分别为8.54%、54.11%、37.34%。尿酸、高盐饮食、主食摄入量、糖尿病家族史糖尿病和糖尿病前期独立危险因素,牛奶摄入量、HDL-C为糖尿病和糖尿病前期保护因素。结论云南大理老年白族糖尿病前期及糖尿病流行状况严峻,加强糖尿病教育是防治2型糖尿病发生的重要措施,强调血压、血糖、血脂、尿酸、体质量的综合控制。

血清蛋白电泳和免疫固定电泳在多发性骨髓瘤中的应用分析

目的探讨血清蛋白电泳和免疫固定电泳技术在多发性骨髓瘤(MM)诊断中的价值。方法对49例MM的血清蛋白电泳和免疫固定电泳结果进行分析。结果 49例MM在免疫固定电泳中47例均可见与对应抗血清形成单克隆条带;而在血清蛋白电泳中31例检出M带,其余的18例血清蛋白电泳出现不明显条带或不出现条带的标本经免疫固定电泳分析,8例为重链型,2例为轻链型,1例IgA型,其余为未分泌型。结论血清蛋白电泳和免疫固定电泳是MM的诊断和鉴别诊断的重要检查方法,后者有较高的敏感性和特异性。

甲状旁腺素与超敏C-反应蛋白在维持性血液透析中的应用分析

目的通过对维持性血液透析(MHD)患者甲状旁腺素(PTH)与超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、血清碱性磷酸酶(ALP),血清总钙(Ca)、血清磷(P)及血红蛋白(Hb)的水平进行检测,探讨PTH与hs-CRP对MHD患者的微炎症状态及肾性骨病和肾性贫血的影响。方法采用电化学发光法,散射比浊法,酶法,偶氮砷法,直接紫外分光法,SLS法分别对本院肾病科血液透析中心MHD患者91例的PTH与hsCRP、ALP,Ca、P及Hb进行检测,与健康对照组比较,并进行统计学分析。结果 91例MHD患者与60例健康对照组比较,MHD患者的PTH,hs-CRP,ALP,P,HB差异有统计学意义(P<0.01);PTH>300pg/mL组51例与PTH<300pg/mL组40例比较,PTH>300pg/mL组的hs-CRP和ALP均高于PTH<300pg/mL组,差异有统计学意义(P<0.05);而Ca、Hb和P差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MHD患者PTH与hs-CRP升高严重影响着骨代谢并加重微炎症状态,也是导致红细胞生成素抵抗所致肾性贫血加重的原因之一。