原发于淋巴结外恶性淋巴瘤44例临床分析

淋巴组织遍布全身的器官组织，故淋巴结外恶性淋巴瘤可发生于任何器官组织。本病的发病率较低，其临床表现无特征性，常被误诊为受侵部位的常见病。现将我们所见的44例淋巴结外恶性淋巴瘤分析报告如下。II＄床资料1．l一般资料1986年1月一1998年5月在我院住院的经病理确诊...

环孢素A体外诱导HL-60细胞凋亡的研究

目的：观察环孢素Ａ是否有诱导白血病细胞凋亡的作用。方法：应用细胞形态学检查、二苯胺法ＤＮＡ片段化定量，ＤＮＡ凝胶电泳及流式细胞术等方法观察细胞凋亡。结果：ＣｓＡ５０ｍｇ／Ｌ作用ＨＬ－６０细胞４ｈ，ＤＮＡ片段率显著增高，达（２８．２±５．８）％，而对照组仅为（１２．５±１．７）％（Ｐ＜０．０１，ｎ＝１０）。光镜及电镜检查见细胞核固缩，碎裂，有凋亡小体形成。ＤＮＡ电泳显示典型的ＤＮＡｌａｄｄｅｒ。流式细胞术检测发现ＣｓＡ５０ｍｇ／Ｌ作用ＨＬ－６０细胞６ｈ凋亡细胞率为４９．７％，而空白组仅为９．１％。ＣｓＡ诱导ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ片段化呈剂量和时间依赖性。结论：ＣｓＡ在体外能诱导ＨＬ－６０细胞凋亡。

蛋白激酶C在红细胞生成素介导的早期信号转导中的作用

利用pfosluc 2质粒转染对Epo刺激有反应的ELM-I-1细胞系细胞,测定c-fos表达活性的研究方法观察蛋白激酶C在Epo介导的早期信号转导过程中的作用,c-fos表达活性以光子量表示。pfosluc 2质粒转染的细胞加PMA 50 nmol/L刺激,光子量由2 501±126/1×10~5细胞升高到4272±242/1×10~5细胞(n=3,P【0.001);PMA刺激诱导的c-fos活性表达呈剂量依赖性。以Epo 2 U/ml刺激细胞同时以 PMA 50 nmol/L刺激时,光子增加量明显比单独用Epo和PMA刺激时的光子增加量之和增多,结果提示PMA不仅本身能诱导c-fos表达活性,同时能增强Epo刺激诱导的c-fos表达活性。另一方面蛋白激酶C抑制剂H7明显抑制Epo和PMA诱导的c-fos表达活性,Epo诱导的c-fos表达活性下降57.8％。本研究结果提示蛋白激酶C在Epo介导的早期信号转导过程中具有重要的正性调节作用。

红细胞生成素介导的早期信号传递的研究

把c-fos启动子连接于Photinus Pyralis荧光素酶基因的上游,以荧光素酶基因作为报道基因,构成pfosluc2质粒,然后把此质粒导入对红细胞生成素(EPO)刺激有反应的小鼠红白血病细胞系ELM-I-1细胞内,检测EPO介导的早期信号传递过程。以Lipofectin为介质把pfosluc2质粒DNA导入ELM-I-1细胞,测定报道基因荧光素酶活性,观察转导细胞c-fos基因的表达。导入pfosluc2的细胞,可检测出光子量(3202±80/1.5×10~5细胞),光子量与检测的转导细胞数呈线性关系。经EPO刺激后,光子量明显增高(5869±321/1.5×10~5细胞)。EPO刺激后光子量的增加,存在剂量依赖性和时间相关性。本实验观察说明,EPO在刺激靶细胞时的信号传递,可能通过细胞核内c-fos基因的表达而起作用。此外,本实验介绍的方法敏感、简便,能用于快速地检测EPO或其它细胞因子的早期信号传递过程。

急性白血病患者WT1基因表达及其临床意义

目的观察WT1基因在白血病细胞的表达及其临床意义,探讨WT1基因表达与白血病疗效关系。方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测初治及复发急性白血病患者73例治疗前WT1基因的表达,结合临床观察WT1表达阳性与急性白血病治疗疗效关系,并观察缓解后患者WT1基因表达的变化。结果73例急性白血病患者WT1阳性53例(72.6%),其中46例急性髓细胞白血病阳性32例(69.6%),23例急性淋巴细胞白血病阳性17例(73.9%)。3例急性混合细胞白血病及1例急性浆细胞白血病均表达阳性。在急性淋巴细胞白血病和非M3型急性髓细胞白血病中,WT1表达阳性对治疗缓解率无明显影响。对21例患者治疗后动态观察,当完全缓解时,WT1表达转阴性;复发时WT1表达又转阳性。结论WT1在急性白血病阳性率较高,但阳性与否对临床疗效无明显影响。WT1基因作为白血病标志用于急性白血病微小残留病的检测有重要价值。

抗原致敏树突状细胞诱导CTLs杀伤HL-60细胞作用研究

目的 探讨树突状细胞 (DC)在体外诱导针对白血病细胞的CTLs杀伤活性。方法 用IL 4和GM CSF培养正常人外周血DC ,以HL 6 0细胞裂解液致敏DC ,再与淋巴细胞共孵育 ,激活T淋巴细胞 ,用LDH释放法测定致敏DC诱导杀伤性细胞对HL 6 0细胞的杀伤活性。结果 外周血单个核细胞经体外扩增培养出可见树突状形状的DC ,流式细胞仪检测细胞表面CD1α及CD86表达阳性 ,CD14表达阴性。混合淋巴细胞反应 (MLR)观察DC刺激的异体淋巴细胞增殖明显较对照组高 ,两者比较有显著性差异 (n =15 ,P <0 .0 1)。在效靶比为 2 0∶1时 ,抗原致敏的DC诱导的杀伤性T细胞对HL 6 0细胞的杀伤率是 39.9%± 2 1.5 % ,直接以抗原刺激的T细胞的杀伤率是 2 6 .3%± 15 .6 %。两组比较差异有非常显著性 (n =16 ,P <0 .0 0 1)。效靶比为 2∶1时 ,抗原致敏的DC诱导的杀伤性T细胞对靶细胞就有明显的杀伤作用 ,随着效靶比增加 ,杀伤作用增强。实验组和对照组不同效靶比杀伤率比较 ,差异有非常显著性 (n =16 ,P <0 .0 0 1)。结论 DC在体外经HL 6 0细胞裂解液抗原致敏后 ,可诱导产生对HL 6 0细胞有特异性杀伤作用的效应细胞 ,杀伤HL 6 0细胞 ,且随效靶比的增加 。

转染p53抑癌基因体外抑制K562细胞克隆的形成

目的：构建ｐ５３表达质粒，研究ｐ５３基因对白血病细胞Ｋ５６２细胞生长的抑制作用。方法：以Ｔ４连接酶把２１６０ｂｐ的ｐ５３ｃＤＮＡ片段插入ｐＲｃ／ＣＭＶ质粒，重组构建ｐＲｃ／ｐ５３表达质粒，以Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导ｐＲｃ／ｐ５３质粒转染Ｋ５６２细胞，以甲基纤维素半固体培养方法作Ｋ５６２细胞体外克隆培养，观察转染ｐ５３基因后Ｋ５６２细胞克隆形成改变。结果：ｐ５３ｃＤＮＡ质粒转染的Ｋ５６２细胞，体外培养克隆形成能力明显减低。在接种１×１０４细胞时，未转染的空白对照组及空质粒对照组白血病细胞集落数分别是２７９７±２６４和２７２５±２６１；而ｐ５３质粒转染组细胞集落数是１０６１±１６０；与空质粒转染组及未转染的Ｋ５６２细胞组比较有非常显著性差异（Ｐ＜０００１，ｎ＝１０）。结论：转染ｐ５３基因能抑制Ｋ５６２细胞的生长。

白血病细胞相关抑制物对红细胞系造血影响的初步探讨

白血病细胞相关抑制物(LAI)对正常粒-巨噬系祖细胞(CFU-GM)生长有抑制作用,国内外近年已有较多报道。在体外CFU-GM培养中加入白血病细胞条件培养液,正常CFU-GM的生长受明显抑制,而LAI对正常红系造血的影响报道不多。

集落刺激因子的生物学特性及在治疗上应用的研究进展

集落刺激因子(CSF)是一组糖蛋白物质,有刺激红系以外造血细胞增殖和分化的作用。目前已在广泛研究将CSF应用于治疗,主要作用有提高周围血细胞,降低细胞毒药物对骨髓的抑制,加速自体骨髓移植后的恢复,治疗艾滋病,诱导白血病细胞分化等。其副作用不多且较轻微。

单克隆抗体检测急性白血病细胞免疫表型45例分析

目的：研究急性白血病细胞表面抗原表达，进行免疫分型，并探讨细胞表型与治疗反应的关系。方法：以单克隆抗体桥联免疫法检测４５例急性白血病细胞表面抗原表达。结果：出现四种表型特征：单系列特异性表达有２９例（６４％），其中淋巴系１４例，髓系１５例；混合表达中，髓淋抗原９例（２０％），Ｂ－Ｔ淋巴细胞抗原３例；仅有人类白细胞相关抗原（ＨＬＡ－ＤＲ）１例；无表达有３例。Ｍ３病人表现为ＣＤ１３及ＣＤ３３阳性，而ＨＬＡ－ＤＲ阴性。本组病人细胞表型与高外周血白细胞无明显相关，而与治疗反应有一定关系。结论：检测白血病细胞表面标记可用于急性白血病免疫分型诊断。

集落刺激因子促进豚鼠体内造血的研究

给11只Harty豚鼠腹腔内注射胎盘条件培养液(HPCM)0.5ml/d,共10天,周围血白细胞总数明显升高,以中性粒细胞升高为主.6只BALB/C小鼠腹腔内注射HPCMOo.3ml/d,共7天,粒-巨噬祖细胞(granulocy-macrophage colng-formung unit,CFU-GM)产率明显升高,是对照组给的2.l倍.结果提示,胎盘条件培养液来源的集落刺激因子,在体内能促进CFU-GM增殖,担升周围血白细胞和中性粒细胞.

非霍奇金氏淋巴瘤患者血清β_2-微球蛋白检测对预后的价值

目的：探讨血清β_2-微球蛋白 (β_2- microglobulin,β_2- MG)水平对非霍奇金氏淋巴瘤（ non- Hodgkin s lymphoma,NHL）预后估计的意义，以及与 Ann Arbor分期、组织学分型的关系。方法：采用放射免疫分析法对在我科就诊的 75例初治 NHL患者外周血血清中的β_2- MG水平进行测定。结果： 75例初治 NHL患者的β_2- MG值高于正常者达 52％。在确诊时β_2- MG水平的高低与 Ann Arbor分期相一致，各组间有显著的差异（ P< 0.01）。根据 IPI(international prognostic index,IPI)指数所区分的 NHL恶性度高低与β_2- MG血浆中的水平有明确的相关关系，确诊时β_2- MG的水平与化疗效果有明确的相关关系，β_2- MG正常组化疗有效率达 87.2％，其中 CR率为 61.5％， PR率为 25.6％；β_2- MG升高组有效率为 75.0％，其中 CR仅为 50.0％； PR 25.0％，两者比较有显著的统计学差异（ P< 0.05），两组的 5年总生存率有明显的统计学差异（ 63 0％ vs 27.8％ ,P< 0.05）。结论：β_2- MG可做为初诊时一独立的血清学预后指标来预测 NHL患者对化疗的反应和生存情况，β_2- MG升高者对化疗的有效率低且预后差。

冬凌草甲素对白血病NB4细胞的诱导凋亡作用及其机制(英文)

目的探讨冬凌草甲素对白血病NB 4细胞的诱导凋亡作用及其机制。方法以不同质量浓度(8、16、24和32μm o l/L)的冬凌草甲素作用于体外培养的NB 4细胞。应用四氮唑蓝(M TT)比色法检测细胞生长抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率;采用Hoechst 33258荧光染色法和琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡;采用蛋白印迹(W estern b lot)和比色法测定细胞凋亡前后caspase-3表达水平及其活性的变化。结果冬凌草甲素(16μm o l/L以上浓度)对白血病NB 4细胞具有显著的增殖抑制及诱导凋亡作用,并且呈现出一定的时间-效应和剂量-效应关系。Hoechst 33258荧光染色观察到典型的核浓缩、核碎裂等细胞凋亡的形态学变化,琼脂糖凝胶电泳观察到细胞凋亡时的DNA“梯形”条带;W estern b lot检测结果表明32 kD a的caspase-3酶原被激活,出现20 kD a的亚单位活化片段,同时在细胞凋亡过程中,caspase-3活性显著增高。结论冬凌草甲素能够通过激活caspase-3的表达而诱导NB 4细胞发生凋亡,可为冬凌草甲素进一步应用于临床治疗急性白血病提供实验依据。

青蒿素对K562细胞的增殖抑制作用及其作用机制

目的:探讨青蒿素对急性白血病K562细胞的增殖抑制作用及其作用机制。方法:以不同浓度的青蒿素作用于体外培养的K562细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪及Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡,TRAP-PCR-ELISA法检测细胞凋亡前后的端粒酶活性。结果:青蒿素可显著降低K562细胞端粒酶活性,抑制细胞生长,诱导细胞发生凋亡,并呈现出明显的量-效与时-效关系。结论:青蒿素能抑制K562细胞的生长并诱导细胞发生调亡,降低细胞端粒酶活性可能是其重要作用机制之一。

冬凌草甲素对Raji细胞的增殖抑制作用及其机制

目的 探讨冬凌草甲素对 B淋巴细胞白血病细胞株 Raji细胞的增殖抑制作用及其机制。方法 以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的 Raji细胞 ,MTT法检测细胞生长抑制率 ,应用流式细胞仪、Hoechst 332 5 8荧光染色法观察细胞凋亡 ,TRAP- PCR- EL ISA法检测细胞凋亡前后的端粒酶活性。结果 冬凌草甲素可显著降低Raji细胞的端粒酶活性 ,抑制细胞的生长 ,诱导细胞发生凋亡 ,并呈现出明显的剂量 -效应与时间 -效应关系。结论 冬凌草甲素对 B淋巴细胞白血病具有明显的体外抗白血病作用 ,降低细胞端粒酶活性 ,诱导细胞发生凋亡 ,可能是其重要作用机制。

非M3型急性白血病患者中MUC1基因和MDR1基因表达及其与临床疗效的关系

背景与目的:MUC1基因在胃癌、卵巢癌、多发性骨髓瘤、恶性淋巴瘤等肿瘤中有表达,在急性白血病患者中有较高的表达。但MUC1基因和多药耐药基因(MDR1)相互关系以及两者的表达与急性白血病治疗效果的关系尚有待探讨。本研究拟探讨MUC1基因与MDR1基因表达及其与非M3型急性白血病患者治疗效果的关系。方法:应用逆转录鄄聚合酶链反应(RT鄄PCR)法检测34例初治非M3型急性白血病患者MUC1和MDR1的表达,并观察两种基因表达及其与临床疗效的关系。结果:34例初治非M3型急性白血病患者中MUC1基因阳性率为50%,MDR1基因阳性率为29.4%。MUC1基因阳性患者的MDR1阳性率为52.9%,明显高于MUC1阴性者的5.9%(P=0.003)。MUC1基因阴性者完全缓解(CR)率达94.1%,阳性患者CR率52.9%,两组有显著性差异(P<0.05);MDR1基因阴性者CR率为91.7%,明显高于阳性患者的50.0%(P<0.05)。MUC1基因和MDR1基因均阳性者CR率为55.6%,MUC1基因和MDR1基因均阴性者16例,全部获得CR。结论:非M3型急性白血病MUC1基因阳性者MDR1基因表达率较高,MUC1基因及MDR1基因均为阴性者治疗缓解率高。提示联合检测MUC1基因和MDR1基因对判断初治非M3型急性白血病的疗效有良好的预测作用,可作为临床判断疗效的一项有意义的指标。

红细胞生成素预防血液肿瘤化疗贫血的初步观察

目的 前瞻性研究短疗程大剂量红细胞生成素 (Epo)预防血液肿瘤化疗贫血的效果。方法 随机将 35例患者分为观察组 17例和对照组 18例 ,在化疗的 - 1d、+2d、+4d、+7d及 +10d用益比奥 1万单位皮下注射 ,同时加用速力菲 0 1g ,2次 /d ;对照组用速力菲 0 1g,2次 /d。结果 观察组治疗前血红蛋白值为 (75± 17)g/L ,用Epo 2周后血红蛋白值为 (71± 16 )g/L ,血红蛋白减少与治疗前比较差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,对照组治疗前血红蛋白值为 (79± 2 0 )g/L ,治疗后 2周血红蛋白值为 (72± 16 )g/L ,血红蛋白减少与治疗前比较差异有显著性(P <0 0 5 )。观察组治疗后 2周、3周血红蛋白下降值分别为 (- 3± 13)g/L和 (- 1± 16 )g/L ;对照组治疗后 2周、3周血红蛋白下降值分别为 (- 7± 14 )g/L和 (- 5± 11)g/L。两组血红蛋白下降值比较差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 短期大剂量Epo在血液肿瘤化疗时应用 ,可减少患者血红蛋白下降 ,减轻贫血。