目的为探讨原发性干燥综合征的发病机制,应用cDNA基因芯片技术分析原发性干燥综合征患者外周血单个核细胞的免疫细胞及信号相关差异表达基因。方法Ficoll密度梯度离心法分离3例初发原发性干燥综合征患者及同年龄正常对照者外周血单个核...目的为探讨原发性干燥综合征的发病机制,应用cDNA基因芯片技术分析原发性干燥综合征患者外周血单个核细胞的免疫细胞及信号相关差异表达基因。方法Ficoll密度梯度离心法分离3例初发原发性干燥综合征患者及同年龄正常对照者外周血单个核细胞,Trizol一步法提取mRNA,反转录至cDNA,分别用Cy5及Cy3荧光标记cDNA,与寡核苷酸片段进行杂交,采用GenePix Pro 3.0图像分析软件把图像信号转化为数字信号,计算Cy5和Cy3两种荧光信号比率(ratio)。将有3个以上重复ratio的基因输入SAM系统,分析有统计学意义的免疫细胞及信号相关差异表达基因及其疾病通路(pathway)。结果原发性干燥综合征患者与正常对照者外周血单个核细胞以自然杀伤细胞介导的细胞毒通路(CD244、FASLG、CD247、GZMB、KLRD1、ICAM1)、B细胞受体信号通路(CD79A、CD19、BLNK、CD72)、细胞凋亡通路(FASLG、PRKAR2B、FADD)中的免疫细胞相关通路及基因差异最为显著(P<0.05),以上通路中有5个表达基因上调,7个表达基因下调。结论原发性干燥综合征患者的免疫细胞及信号相关通路有较多的差异表达基因,这些基因的筛选和进一步验证将为该病的发病机制及诊治提供新的思路。展开更多
目的比较环磷酰胺、来氟米特和甲泼尼龙对博来霉素诱导的肺间质纤维化小鼠模型的疗效。方法将75只C57BL/6小鼠随机分成空白组、模型组、环磷酰胺组、来氟米特组及甲泼尼龙组(n=15)。空白组气管内注入0.9%氯化钠注射溶液0.2 m L,其余5组...目的比较环磷酰胺、来氟米特和甲泼尼龙对博来霉素诱导的肺间质纤维化小鼠模型的疗效。方法将75只C57BL/6小鼠随机分成空白组、模型组、环磷酰胺组、来氟米特组及甲泼尼龙组(n=15)。空白组气管内注入0.9%氯化钠注射溶液0.2 m L,其余5组气管内注入博来霉素(5 mg/kg)建立肺纤维化模型,24 h后分别对空白组、模型组每日用0.2 m L 0.9%氯化钠注射溶液灌胃,药物组每日分别用环磷酰胺(50 mg/kg)、来氟米特(4 mg/kg)和甲泼尼龙灌胃(10 mg/kg)。并于造模后第7、14、28天分批处死小鼠,取小鼠肺脏评估肺泡炎程度及纤维化的程度。结果 (1)博来霉素诱导组小鼠体质量较对照组减轻(P<0.05),环磷酰胺、来氟米特组和甲泼尼龙组小鼠在第7、14、28天小鼠体质量较模型组均明显增加(P<0.05)。(2)与模型组相比,环磷酰胺组与甲泼尼龙组小鼠7天、14天时肺泡炎评分降低(P<0.05);第7天、14天、28天时纤维化评分明显降低(P<0.05)。而来氟米特组小鼠肺泡炎及纤维化评分较模型组差异无统计学意义。结论环磷酰胺和甲泼尼龙能显著降低博来霉素诱导的小鼠肺间质纤维化,减轻肺组织肺泡炎及肺纤维化程度,但来氟米特没有类似作用。展开更多
文摘目的为探讨原发性干燥综合征的发病机制,应用cDNA基因芯片技术分析原发性干燥综合征患者外周血单个核细胞的免疫细胞及信号相关差异表达基因。方法Ficoll密度梯度离心法分离3例初发原发性干燥综合征患者及同年龄正常对照者外周血单个核细胞,Trizol一步法提取mRNA,反转录至cDNA,分别用Cy5及Cy3荧光标记cDNA,与寡核苷酸片段进行杂交,采用GenePix Pro 3.0图像分析软件把图像信号转化为数字信号,计算Cy5和Cy3两种荧光信号比率(ratio)。将有3个以上重复ratio的基因输入SAM系统,分析有统计学意义的免疫细胞及信号相关差异表达基因及其疾病通路(pathway)。结果原发性干燥综合征患者与正常对照者外周血单个核细胞以自然杀伤细胞介导的细胞毒通路(CD244、FASLG、CD247、GZMB、KLRD1、ICAM1)、B细胞受体信号通路(CD79A、CD19、BLNK、CD72)、细胞凋亡通路(FASLG、PRKAR2B、FADD)中的免疫细胞相关通路及基因差异最为显著(P<0.05),以上通路中有5个表达基因上调,7个表达基因下调。结论原发性干燥综合征患者的免疫细胞及信号相关通路有较多的差异表达基因,这些基因的筛选和进一步验证将为该病的发病机制及诊治提供新的思路。
文摘目的比较环磷酰胺、来氟米特和甲泼尼龙对博来霉素诱导的肺间质纤维化小鼠模型的疗效。方法将75只C57BL/6小鼠随机分成空白组、模型组、环磷酰胺组、来氟米特组及甲泼尼龙组(n=15)。空白组气管内注入0.9%氯化钠注射溶液0.2 m L,其余5组气管内注入博来霉素(5 mg/kg)建立肺纤维化模型,24 h后分别对空白组、模型组每日用0.2 m L 0.9%氯化钠注射溶液灌胃,药物组每日分别用环磷酰胺(50 mg/kg)、来氟米特(4 mg/kg)和甲泼尼龙灌胃(10 mg/kg)。并于造模后第7、14、28天分批处死小鼠,取小鼠肺脏评估肺泡炎程度及纤维化的程度。结果 (1)博来霉素诱导组小鼠体质量较对照组减轻(P<0.05),环磷酰胺、来氟米特组和甲泼尼龙组小鼠在第7、14、28天小鼠体质量较模型组均明显增加(P<0.05)。(2)与模型组相比,环磷酰胺组与甲泼尼龙组小鼠7天、14天时肺泡炎评分降低(P<0.05);第7天、14天、28天时纤维化评分明显降低(P<0.05)。而来氟米特组小鼠肺泡炎及纤维化评分较模型组差异无统计学意义。结论环磷酰胺和甲泼尼龙能显著降低博来霉素诱导的小鼠肺间质纤维化,减轻肺组织肺泡炎及肺纤维化程度,但来氟米特没有类似作用。
