目的探讨热休克蛋白60(heat shock protein 60,HSP60)对小鼠移植皮片成活的影响及其机制。方法选用60只C57BL/6(H-2b)小鼠为受体,45只BALB/C(H-2d)小鼠、15只CBA/N(H-2k)为供体,均为8~12周龄近交系雌性小鼠。受体小鼠剪下1cm×1cm...目的探讨热休克蛋白60(heat shock protein 60,HSP60)对小鼠移植皮片成活的影响及其机制。方法选用60只C57BL/6(H-2b)小鼠为受体,45只BALB/C(H-2d)小鼠、15只CBA/N(H-2k)为供体,均为8~12周龄近交系雌性小鼠。受体小鼠剪下1cm×1cm全层皮肤,干纱布清创,即为植床;随机分为4组,每组15只。A组:无菌取供体BALB/C(H-2d)小鼠背部1cm×1cm全层皮片,刮去皮下组织后移植至受体小鼠背部;B组:受体小鼠背部皮下注射0.1mL不完全弗氏佐剂(imcompleted Freund’s adjuvant,IFA),2周后行BALB/C(H-2d)小鼠皮肤移植;C组:受体小鼠背部皮下注射经0.1mLIFA乳化后的50μgHSP60,2周后行BALB/C(H-2d)小鼠皮肤移植;D组:受体小鼠背部皮下注射经0.1mLIFA乳化后的50μgHSP60,2周后行CBA/N(H-2k)小鼠皮肤移植。B、C、D组供体皮肤移植方法同A组。术后观察移植皮片成活时间;移植术后7、25d行单向混合淋巴细胞反应及混合淋巴细胞培养上清液细胞因子检测;术后7d行迟发型超敏反应测定。结果A、B、C、D组移植皮片成活时间分别为(12.4±0.5)、(11.6±0.8)、(29.3±2.6)及(27.6±2.1)d;A、B组与C、D组比较,差异有统计学意义(P<0.05),A、B组间及C、D组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。皮肤移植术后7d,A、B、C、D组混合淋巴细胞反应每分钟放射脉冲数(counts of perminute impulse,cmp)值分别为12836±1357、11876±1265、6581±573及6843±612;A、B组与C、D组比较,差异有统计学意义(P<0.05);A、B组间及C、D组间比较差异无统计学意义(P>0.05);术后25d,各组cpm值分别为13286±1498、12960±1376、11936±1265及12374±1269,各组间差异无统计学意义(P>0.05)。皮肤移植术后7d,C、D组混合淋巴细胞培养上清液IL-10高于A、B组,IL-2、干扰素γ(interferon γ,IFN-γ)低于A、B组(P<0.05),A、B组间及C、D组间差异均无统计学意义(P>0.05);术后25d,各组IL-2、IL-10及IFN-γ差异无统计学意义(P>0.05)。皮肤移植术后7d,A、B、C、D组受体小鼠对供体小鼠脾细胞的迟发型超敏反应为(0.84±0.09)、(0.81±0.07)、(0.43±0.05)及(0.46±0.03)mm;A、B组与C、D组比较,差异有统计学意义(P<0.05),A、B组间及C、D组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论HSP60对免疫耐受的诱导和维持有一定作用。展开更多
文摘目的探讨热休克蛋白60(heat shock protein 60,HSP60)对小鼠移植皮片成活的影响及其机制。方法选用60只C57BL/6(H-2b)小鼠为受体,45只BALB/C(H-2d)小鼠、15只CBA/N(H-2k)为供体,均为8~12周龄近交系雌性小鼠。受体小鼠剪下1cm×1cm全层皮肤,干纱布清创,即为植床;随机分为4组,每组15只。A组:无菌取供体BALB/C(H-2d)小鼠背部1cm×1cm全层皮片,刮去皮下组织后移植至受体小鼠背部;B组:受体小鼠背部皮下注射0.1mL不完全弗氏佐剂(imcompleted Freund’s adjuvant,IFA),2周后行BALB/C(H-2d)小鼠皮肤移植;C组:受体小鼠背部皮下注射经0.1mLIFA乳化后的50μgHSP60,2周后行BALB/C(H-2d)小鼠皮肤移植;D组:受体小鼠背部皮下注射经0.1mLIFA乳化后的50μgHSP60,2周后行CBA/N(H-2k)小鼠皮肤移植。B、C、D组供体皮肤移植方法同A组。术后观察移植皮片成活时间;移植术后7、25d行单向混合淋巴细胞反应及混合淋巴细胞培养上清液细胞因子检测;术后7d行迟发型超敏反应测定。结果A、B、C、D组移植皮片成活时间分别为(12.4±0.5)、(11.6±0.8)、(29.3±2.6)及(27.6±2.1)d;A、B组与C、D组比较,差异有统计学意义(P<0.05),A、B组间及C、D组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。皮肤移植术后7d,A、B、C、D组混合淋巴细胞反应每分钟放射脉冲数(counts of perminute impulse,cmp)值分别为12836±1357、11876±1265、6581±573及6843±612;A、B组与C、D组比较,差异有统计学意义(P<0.05);A、B组间及C、D组间比较差异无统计学意义(P>0.05);术后25d,各组cpm值分别为13286±1498、12960±1376、11936±1265及12374±1269,各组间差异无统计学意义(P>0.05)。皮肤移植术后7d,C、D组混合淋巴细胞培养上清液IL-10高于A、B组,IL-2、干扰素γ(interferon γ,IFN-γ)低于A、B组(P<0.05),A、B组间及C、D组间差异均无统计学意义(P>0.05);术后25d,各组IL-2、IL-10及IFN-γ差异无统计学意义(P>0.05)。皮肤移植术后7d,A、B、C、D组受体小鼠对供体小鼠脾细胞的迟发型超敏反应为(0.84±0.09)、(0.81±0.07)、(0.43±0.05)及(0.46±0.03)mm;A、B组与C、D组比较,差异有统计学意义(P<0.05),A、B组间及C、D组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论HSP60对免疫耐受的诱导和维持有一定作用。