清扫淋巴结数对pT1~3N0M0期胸段食管鳞癌根治术后生存的影响

目的 探讨胸段食管鳞癌单纯胸腹两野根治(R0)术后pT1~3N0M0期患者术中清扫淋巴结数对术后生存的影响。方法 收集胸段食管鳞癌单纯胸腹两野R0术后pT1-3N0M0期、术后生存≥3个月、随访资料完整患者488例。分别研究清扫淋结数量、纵隔淋巴结情况和病理分期与患者总生存率(OS)、无疾病生存率(DFS)的关系。结果 至随访期结束,全组术后3、5年OS为72.7%和62.2%,DFS为64.1%和57.4%。COX单因素及多因素分析提示清扫淋巴结数影响OS和DFS;亚组分析清扫淋巴结数以12~15枚者OS和DFS最高(P<0.05),清扫淋巴结数<12枚或>15枚OS和DFS均有降低趋势。结论 清扫淋巴结数影响pT1~3N0M0期胸段食管鳞癌术后生存,清扫淋巴结数以12~15枚者生存率最高,过少或过多均可能不利于生存,但需要进一步研究。

海藻糖对低温保存的气管组织细胞活力的影响

目的探讨海藻糖对低温保存的气管组织细胞活力的影响。方法新鲜配制两组保存液,其中:Ⅰ组LPD+DMSO,Ⅱ组LPD+DMSO+海藻糖(0.10mol·L-1)。切取SD大鼠气管后立即分别放入含上述两种溶液的冻存管,在程序降温仪降至-80℃后投入液氮中保存,分别在1,15,30,60,120d后对气管组织体外培养,并加入3HTdR做标记,检测细胞掺入率。结果采用3HTdR体外组织培养,低温保存后Ⅰ组气管3HTdR掺入率(88.72%～78.21%)明显高于Ⅱ组(80.99%～70.75%),这种趋势可长时间持续(共120d)。结论含有海藻糖的LPD溶液在低温下对气管组织细胞有明显的保护作用;3HTdR体外组织培养的方法可以比较客观地反映了器官保存后的活力。

RKIP蛋白表达在非小细胞肺癌中的临床意义

目的探讨Raf激酶抑制蛋白(RKIP)表达与非小细胞肺癌(NSCLC)临床病理参数及预后的关系。方法应用免疫组化SP法检测83例NSCLC患者癌组织和65例正常肺组织中RKIP蛋白的表达。结果 NSCLC癌组织中RKIP蛋白表达的阳性率20.5%(17/83),正常肺组织RKIP蛋白表达的阳性率64.6%(42/65)。RKIP蛋白阳性与肿瘤组织分化程度、临床分期、生存时间以及有无淋巴结和远处转移相关(P<0.05)。结论 RKIP蛋白表达与NSCLC发展有关,RKIP可能成为治疗肺癌侵袭转移的新靶点。

深低温保存对气管组织细胞活力的影响

目的探讨深低温保存对气管组织细胞活力的影响程度。方法切取SD大鼠气管后立即放入含有新鲜配置的低钾右旋糖酐(LPD)溶液的冻存管,在程序降温仪降至-80℃后投入液氮中保存,分别保存24 h、15 d、30 d、60 d、120 d。然后对气管组织体外培养,加入3H-TdR以做标记,最后使用β液体闪烁计数器检测组织细胞吸收情况。结果与冷冻前比较,低温保存后气管组织细胞3H-TdR掺入率降至75.3%～81%。冷冻15 d以后3H-TdR掺入率差异无统计学意义(P>0.05)。结论深低温保存后气管组织细胞保留了70%～80%的活力,损伤主要发生在冷冻早期。采用3H-TdR体外组织培养是检测气管组织细胞活力的有效方法。

Raf激酶抑制蛋白和磷酸化细胞外信号调节激酶K在肺癌中的表达及意义

目的:利用组织芯片技术探讨肺癌组织中Raf激酶抑制蛋白(raf kinase inhibitor protein,RKIP)和磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylation of extracelluar signal-regulated kinase,p-ERK)的表达及其与临床病理特征的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测96例肺癌及相应癌旁正常肺组织中RKIP与p-ERK蛋白的表达情况,并分析其与肺癌临床病理学特征的关系。结果:肺癌组织中RKIP的表达低于癌旁正常肺组织,而p-ERK的表达高于癌旁正常肺组织,差异有统计学意义。其表达水平与肺癌的分化程度、TNM分期、淋巴结转移及术后生存时间有明显关系;RKIP蛋白的表达水平与p-ERK呈负相关(P<0.05)。结论:RKIP低表达与肺癌的侵袭、转移密切相关,RKIP可能是肺癌的一个转移抑制蛋白,RKIP表达下调导致p-ERK的过表达从而促进肺癌细胞的侵袭和转移。

肺癌组织中RKIP基因启动子区甲基化状态观察

目的观察肺癌组织中Raf激酶抑制蛋白(RKIP)基因启动子区甲基化状态变化,探讨其与肺癌临床病理特征的关系。方法采用RT-PCR和甲基化特异性PCR法(MSP)分析肺癌及相应癌旁肺组织中RKIP基因表达情况及其启动子区甲基化状态。结果肺癌组织中RKIP基因启动子区甲基化率为45.8%(27/56),明显高于癌旁肺组织的13.3%(2/56),P<0.05。所有甲基化的肺癌组织中RKIP基因均无表达。有淋巴结转移的43例肺癌组织中,27例RKIP基因启动子甲基化;无淋巴结转移的40例中,11例RKIP基因启动子甲基化(P<0.05)。结论肺癌组织中RKIP基因失表达与其启动子区甲基化有关,这可能是肺癌发生发展以及转移的原因之一。

同种异体大鼠嵌合体动物模型的建立及意义

目的:探讨建立同种异体大鼠嵌合体动物模型的方法,初步研究嵌合体与耐受的关系。方法:采用两种诱导方法处理受体Wistar大鼠(♀) :Ⅰ组大鼠亚致死TBI(11Gy) ;Ⅱ组大鼠TBI(7Gy) ,两组均在4小时内输入SD大鼠(♂)BMC(8×10 7) ,Ⅱ组于2天后腹腔注射CTX(5 0mg kg)。分别于BMT后2 0、4 0天通过PCR方法检测SD大鼠源性BMC在Wistar大鼠体内植活情况,并通过皮肤移植、DTH和MLR检查,判断其耐受情况。结果:经上述处理两组大鼠外周血均可测出SD大鼠源性嵌合体,皮肤移植、DTH和MLR检查显示对SD大鼠产生特异性耐受,但Ⅰ组大鼠生存情况明显不如Ⅱ组。结论:应用7GyTBI +腹腔注射CTX(5 0mg kg) +供体BMT可成功建立同种异体大鼠嵌合体模型,诱导特异性免疫耐受。

海藻糖浓度与气管低温保存疗效分析

目的探讨在气管低温保存液中海藻糖的最佳浓度。方法新鲜配制4组保存液,均含10%DMSO,分别加入不同剂量海藻糖:Ⅰ组0.05mol/L,Ⅱ组0.10mol/L,Ⅲ组0.20mol/L,Ⅳ组0.30mol/L。切取SD大鼠气管后立即分别放入含上述4种溶液的冻存管,在程序降温仪降至-80℃后投入液氮中保存,分别在24h、20d、60d、120d后对气管组织进行HE染色和Bcl-2、Bax蛋白检测(免疫组化)。结果在气管保存后不同时点,4组细胞Bcl-2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);在不同时点,Ⅰ组软骨细胞Bax蛋白表达均较Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05或<0.01)。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组间软骨细胞Bax蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论在气管低温保存中,海藻糖的保护作用主要是通过对软骨细胞的保护实现的,抑制软骨细胞Bax基因的表达是其中的保护机制之一。海藻糖在0.10～0.2mol/L范围内对气管的低温保存效果最佳。

Snail和Raf激酶抑制蛋白与非小细胞肺癌侵袭转移的关系

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织中Snail和Raf激酶抑制蛋白(RKIP)的表达情况。方法采用免疫组织化学方法检测124例NSCLC及67例癌旁正常肺组织中Snail和RKIP的表达情况,比较临床病理特征与Snail和RKIP阳性表达率的关系,分析Snail和RKIP的相关关系。结果 Snail蛋白在肺癌中表达率为79.03%,高于正常肺组织的19.40%(χ2=63.538,P<0.01);RKIP在肺癌中的表达率为36.29%,低于正常肺组织的77.61%(χ2=29.716,P<0.01)。两者的表达水平均与肺癌的分化程度、TNM分期、淋巴结转移及术后生存时间有关;Snail与RKIP的蛋白表达水平呈负相关(P<0.05)。结论 Snail高表达与RKIP低表达可能是NSCLC侵袭转移的重要生物学标志,可作为NSCLC的预后指标。

术前单疗程化疗治疗Ⅲ_A期非小细胞肺癌的疗效观察

目的探讨术前单疗程化疗加外科手术治疗ⅢA期非小细胞肺癌的可行性和毒性反应,同时评价其对切除率和生存率的影响。方法对166例ⅢA期非小细胞肺癌进行前瞻性随机对照试验,试验组和对照组各83例,试验组进行术前化疗1个疗程,化疗结束10～14 d后接受手术;对照组直接行手术治疗。两组均在术后行4～6次化疗。结果试验组化疗的有效率为56.7%,试验组和对照组的手术切除率分别为92.8%和85.5%。试验组术后1,2,3,5年生存率为91.6%,79.9%,48.2%,28.9%;对照组分别为84.3%,62.7%,38.6%,19.3%,两组生存率比较有显著性差异。两组手术并发症和手术死亡率比较均无显著性差异。结论术前单疗程化疗安全、有效,能提高手术切除率及术后生存率,同时并不增加并发症发生率和死亡率。

老年非小细胞肺癌中Raf激酶抑制蛋白与p-AKT的表达及意义

目的探讨Raf激酶抑制蛋白(RKIP)及p-AKT在老年非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义。方法对RKIP和p-AKT的蛋白进行间接免疫荧光标记,采用流式细胞仪对78例NSCLC及相应癌旁正常肺组织进行定量检测。结果 RKIP在NSCLC组织中的表达量明显低于癌旁正常肺组织(P<0.05);p-AKT在NSCLC组织中的表达量明显高于癌旁正常肺组织(P<0.05);RKIP、p-AKT的表达量均与肺癌分化程度、TNM分期、淋巴结转移及术后生存期有关(P<0.05)。结论在肺癌发生中RKIP表达减少,p-AKT表达上调,可能是导致NSCLC发生、发展的原因,可作为NSCLC恶性程度及预后判断的指标。

pT3N0M0期胸段食管鳞癌根治术后的预后因素

目的探讨p T3N0M0期胸段食管鳞癌两野根治术后的预后及其影响因素。方法胸段食管鳞癌行胸腹两野食管癌根治术后、分期为p T3N0M0者249例,中位年龄60岁（33～78岁）;胸上段39例、胸中段166例、胸下段44例,病变中位长度5 cm（2～12 cm）;术中无粘连者35例、轻度粘连者90例、重度粘连者124例;术中清扫淋巴结中位数9枚（1～27枚）;98例单纯手术、151例行术后辅助治疗。结果 249例中1、3、5年总生存率（overall Survival,OS）和无进展生存率（progression-free survival,PFS）分别为90.0%、6 8.7%、5 5.2%和8 2.1%、6 1.7%、5 3.9%。单因素分析结果显示：性别、肿瘤位置、病理分化程度和术前血红蛋白水平与O S有关（P〈0.05）;年龄、肿瘤位置和术中粘连程度与PFS有关（P〈0.05）;多因素分析结果显示：肿瘤位置、术前血红蛋白水平、术前CT有纵隔小淋巴结（〈1 cm）和清扫淋巴结数目是OS独立影响因素,肿瘤位置是影响PFS独立危险因素。术后辅助治疗对OS和PFS均无明显影响;但术前CT纵隔有小淋巴结（〈1 cm）者,术后辅助治疗可以提高OS和PFS（P〈0.05）。结论 p T3N0M0期胸段食管鳞癌胸腹两野根治术后,肿瘤位置影响OS和PFS,胸下段癌预后最好,胸上段癌预后最差;术中清扫淋巴结数多、术前CT纵隔无淋巴结者预后较好,反之预后较差;术前血红蛋白高者生存率低;而术后辅助治疗的价值有待证实。

肺癌患者围术期免疫细胞和细胞因子的水平变化分析

目的探究肺癌患者围术期免疫细胞及细胞因子水平的变化。方法 50例肺癌患者分别于术前及术后采集患者的外周血,采用流式细胞仪检测两组患者外周血中免疫细胞(Th1/Th2、Th17细胞、NK细胞)和细胞因子(IFN-γ、IL-17、TNF-α)的表达水平。结果肺癌患者行病灶切除术后机体的免疫细胞分布出现明显的异常,术后外周血CD+3、CD+4、Th17、Th1/Th2等T细胞亚群的表达水平均出现明显的下降,差异有显著性;术后外周血NK细胞的表达水平较术前也发生显著的下降,差异有显著性;肺癌患者病灶切除术后外周血IFN-γ、IL-17、TNF-α等细胞因子的表达水平较术前明显下降,差异有显著性。结论肺癌患者围术期外周血免疫细胞及细胞因子的表达情况是反映患者机体免疫功能变化的有效指标,行肺癌病灶切除术会一定程度地损伤患者的免疫功能。

经支气管壁针吸活检对肺癌诊断的临床意义

目的探讨经支气管针吸活检(TBNA)对可疑肺癌的诊断价值。方法选择2003年3月至2009年8月应用TBNA技术检查的79例可疑为支气管肺癌患者,并与刷检及术后病理组织学结果进行比较。结果 79例患者中TBNA及刷检的确诊率分别为88.6%(70/79)和54.4%(43/29);61例肺癌及肺转移瘤中,TBNA及刷检的确诊率分别为85.2%(52/61)和41.0%(25/61)。TBNA检查准确率优于刷检(P<0.01)。结论 TBNA是一项简单、安全、经济、有效的新技术,尤其适用于可疑肺癌而纤维支气管镜下无可视肿瘤的患者,具有重要临床意义。

肺癌患者术后并发心律失常的危险因素分析

目的分析与肺癌患者术后并发心律失常相关的危险因素,为防治肺癌术后心律失常提供参考。方法对接受手术治疗的220例肺癌患者的临床资料进行回顾性分析,其中共有70例患者术后出现心律失常,分析年龄、性别、吸烟史、糖尿病史、第一秒用力呼气量(FEV_1)、术前心电图情况、术中心包损伤、术中出血量、术后发生电解质紊乱、FEV_1/用力肺活量(FVC)等因素与术后心律失常的相关性。结果肺癌术后心律失常总发生率为31.82%,术后并发心律失常的主要时间为术后2天以内,心律失常类型以房颤为主。单因素分析发现两组患者在手术前后心电图异常、术中心包损失、术中出血量、术后电解质紊乱及FEV_1/FVC方面存在显著差异。多因素分析发现肺癌术后并发心律失常与术前心电图异常、FEV_1/FVC、术中心包损伤及术后电解质紊乱存在密切关系。结论术中心包损伤和肺损伤以及术后电解质紊乱均与术后心律失常发生存在密切关系,围术期对于以上因素进行积极干预,有望降低术后心律失常的发生率。