柯萨奇B_(3m)病毒感染Balb/c鼠接种浓度的研究

通过柯萨奇Ｂ３ｍ病毒（ＣＶＢ３ｍ）接种Ｂａｌｂ／ｃ鼠浓度的研究，探索其与ＣＶＢ３ｍ的ＬＤ５０、血清抗体、病毒分离和脏器病理变化之间的关系，以获得产生明确病毒标志的最合适病毒接种浓度来筛选抗病毒性心肌炎药物。结果表明：有规律的病毒标志为小鼠的死亡率、中和抗体水平和病毒血症，腹腔接种１ＬＤ５０可使小鼠于第５天血清中和抗体效价≥１∶１６０～１∶３２０，并有病毒血症，第９天病毒血症消失，小鼠开始死亡。表明此接种浓度可出现有利于药物筛选的病毒标志。

聚合酶链反应—微孔板杂交技术检测人乳头瘤病毒

目的 建立HPV诊断及分型技术。方法 用HPV通用型引物和型特异性探针作PCR 微孔板杂交检测法(PCR ELISA)。结果 特异性探针只与HPV阳性标本显色 ,A值为 0 32 7± 0 0 2 9;阴性标本均不显色 ,A值为 0 0 0 3± 0 0 0 1,与性传播性疾病相关的病原微生物 (淋球菌、解脲支原体、沙眼衣原体、人巨细胞病毒、单纯疱疹病毒 )均不显色。该法能检出 3 6个HeLa细胞含HPV 18型 144个拷贝 ,A值 0 2 37～ 0 2 0 6 ;空白对照A值为 0 0 0 5～ 0 0 15。结论 PCR ELISA方法快速、敏感、特异且可用自动化酶标仪多量标本检测 ,适合临床实验使用。

心肌尔康对柯萨奇B_（3m）株的抑制作用

用细胞病变抑制试验研究心肌尔康抗柯萨奇Ｂ３ｍ的体外作用。发现心肌尔康作１０倍系列稀释试验时，对１和１０ＴＣＩＤ５０病毒的５０％抑制（ＩＣ５０）剂量分别为１．３４×１０－２ｇ·Ｌ－１和１．５４ｇ·Ｌ－１，对１００和１０００ＴＣＩＤ５０病毒不能测出ＩＣ５０；该药在２倍系列稀释时，对１０和１００ＴＣＩＤ５０病毒的ＩＣ５０分别为１．８１ｇ·Ｌ－１和２．５８·Ｌ－１，对１０００ＴＣＩＤ５０病毒仍无抑制，试验表明，心肌尔康在体外对柯萨奇Ｂ３ｍ病毒有一定的抑制作用。

心肌尔康颗粒抗病毒性心肌炎的实验研究

目的 :观察心肌尔康颗粒对病毒性心肌炎的防治作用。方法 :采用小鼠病毒性心肌炎模型及体外抗柯萨奇B3m病毒实验 ,阿霉素致小鼠中毒性心肌炎模型 ,氯化钡、氯仿致心律失常模型 ,蛋清、琼脂致炎模型及心脏血流动力学等试验。结果 :心肌尔康颗粒在体内、外均有抗柯萨奇病毒B3m作用 ,对小鼠病毒性心肌炎和中毒性心肌炎均有防治作用 ,能降低小鼠死亡率及血清LDH ,AST和CK水平 ,改善心电图及心肌的病理性损害 ,以及降低病毒性心肌炎小鼠血清中和抗体和心脏病毒滴度。还有抗心律失常、增强心肌收缩力、抗心肌缺氧、抗炎作用 ,以及能升高大鼠血清IgG水平。结论 :心肌尔康颗粒有抗病毒性及中毒性心肌炎的作用。

病毒性心肌炎小鼠体内γ-IFN与NO相关性研究

为探讨γ -IFN、NO在实验性病毒性心肌炎小鼠中的变化及其在病毒性心肌炎中的作用 ,以柯萨奇病毒B3亲心肌株(CVB3m)诱导的BALB/C心肌炎小鼠为研究对象 ,每隔7天观察小鼠血清中γ -IFN、心肌匀浆中NO在病程中的动态变化 ,并计算感染小鼠心肌组织光镜下病理积分。结果显示 ,BALB/C鼠感染病毒后体内γ -IFN、NO均有不同程度升高 ,急性期(第7天)最高 ,且NO的升高与γ -IFN相关(r=0.95,r2=0.9,P<0.05) ,而感染后心肌病理积分又与NO相关(r=0.66,r2=0.43,P<0.05)。结果表明 ,γ -IFN在病毒性心肌炎发病中起重要作用 ,介导NO产生以发挥抗病毒作用 ,而过分表达则可造成自身损伤 。

ITP患儿血清可溶性IL-2受体水平和T淋巴细胞亚群变化

探讨特发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）患儿免疫功能变化。方法采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法对ＩＴＰ患儿进行了血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）测定和ＡＰＡＡＰ法检测Ｔ淋巴细胞亚群。结果ＩＴＰ患儿血清ｓＩＬ－２Ｒ、ＣＤ８显著升高，ＣＤ４／ＣＤ８显著下降（Ｐ＜０．０１），且ｓＩＬ－２Ｒ和ＣＤ４／ＣＤ８呈负相关（ｒ＝－０．５８１，Ｐ＜０．０１）；缓解期ｓＩＬ－２Ｒ明显下降，基本接近正常水平，而ＣＤ８、ＣＤ４／ＣＤ８比值较急性期变化不明显。

柴芩感冒药对呼吸道合胞病毒的抑制作用

目的 研究柴芩感冒药对呼吸道合胞病毒 (RSV)的体外抑制作用。方法 微量细胞病变抑制法。从药物的最大无毒量 (TD0 )开始 ,作连续 2倍系列稀释 6个浓度 ,每一浓度均做 4孔 ,分别加入已感染RSV的单层HeLa细胞中 ,整个实验重复 3次。按Reed Muench法计算产生 5 0 %病变抑制的药物浓度 ,即药物的半数有效量 (IC50 ) ,并计算治疗指数 (TI)。结果 柴芩感冒药的IC50 为 (31± 7 0 7)mg·L-1,TI值为 2 8 88± 4 0 5 ;中药对照金莲清热颗粒和西药对照利巴韦林注射液的IC50 和TI值分别为 (36± 5 6 6 )mg·L-1、18± 2 8和 (2 3 43± 5 0 9)mg·L-1、93± 10 7。结论 柴芩感冒药的抗RSV效果略好于金莲 ,但较利巴韦林的药效差。

心肌尔康冲剂抗柯萨奇B_3m病毒作用的初步研究

心肌尔康冲剂抗柯萨奇Ｂ３ｍ病毒作用的初步研究☆陈光亮王钦茂龚蕴贞胡涛林维芬黄升海（安徽中医学院药理教研室合肥２３００３８）关键词：心肌尔康冲剂；柯萨奇Ｂ３ｍ病毒心肌炎、心肌病为临床常见病、多发病，目前尚无特效疗法，寻找研制治疗心肌炎的药物已引...

柴芩感冒药对甲型流感病毒与腺病毒的体外抑制作用

目的 研究柴芩感冒药对甲型流感病毒 (6 8 1,H3 N2 )与腺病毒 (AdV7)的体外抑制作用。方法 用微量细胞病变抑制法。按Reed Muench法计算 5 0 %病变抑制的药物浓度(IC50 ) ,实验重复 3次 ,并计算治疗指数 (TI)。结果 柴芩感冒药对甲型流感病毒 (6 8 1,H3 N2 )和AdV7的IC50 分别是(4 0 5± 3 5 3)、(33 11± 3 2 2 )mg/L。TI值分别是 2 1和2 6 5 ;对照西药利巴韦林注射液对甲型流感病毒 (6 8 1,H3 N2 )和AdV7的IC50 分别是 (2 6 7± 1 48)mg/L和 (18 17± 0 35 )mg/L。TI值分别是 79和 12 0 ;对照中药金莲清热颗粒对流感病毒 (6 8 1,H3 N2 )IC50 为 35 4。TI值为 18;对腺病毒AdV7的IC50 未测到 (无效 )。结论 柴芩感冒药既可抗甲型流感病毒 (6 8 1,H3 N2 ) ,又可抗腺病毒 (AdV7)。

实验性病毒性心肌炎小鼠模型中γ-干扰素、一氧化氮的表达及意义

目的 探讨γ 干扰素 (γ IFN)、一氧化氮 (NO)的表达在实验性病毒性心肌炎中的作用。方法 BALB/C鼠 6 0只 ,随机选 15只作正常对照 (A组 ) ,另 45只腹腔注射柯萨奇病毒B3 亲心肌株 (CVB3 m)后分 3组 ,病毒对照组 (B组 )、小剂量用药组 (C组 )、大剂量用药组 (D组 ) ,C、D组均在感染病毒后d4腹腔注射甲基强的松龙 (30mg/kg ,6 0mg/kg) ,连用 3d。均在接种病毒后 7、14、2 1d留取血液、心肌标本 ,分别进行血清γ IFN、心肌匀浆NO及心肌病理检查。结果 1.γ IFN、NO过分表达可致心肌病理损伤。 2 .C组小鼠γ IFN、NO水平较B组略有下降 ,而D组γ IFN、NO远远低于B、C组水平 ,动物死亡率大大增加。结论 γ IFN、NO在病毒性心肌炎发病中起重要作用 ,过高或过低水平均不利于动物抗病毒损伤 ,适当运用激素可以限制过高细胞因子表达 。

食管癌患者手术前后血清可溶性白细胞介素-2受体动态观察

为探讨食管癌患者手术前后细胞免疫功能的变化，采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测了５４例食管癌患者手术前后血清ｓＩＬ－２Ｒ水平，结果表明：ｓＩＬ－２Ｒ显著高于正常人，且随肿瘤分期增加而增高。手术治疗１个月、３个月后，ｓＩＬ－２Ｒ均有明显下降，但有转移的患者降低不明显。术后１周ｓＩＬ－２Ｒ变化不明显，可能与机体的应激反应有关。提示血清ｓＩＬ－２Ｒ可作为食管癌患者免疫功能的监测指标之一。对疾病的临床分期、疗效和预后的判断也有一定的帮助。

新生Balb/c鼠脑神经元和星形胶质细胞纯培养的实验研究

目的 探讨纯培养神经元和星形胶质细胞的合适方法。方法 采用Balb/c鼠尾胶原、大鼠尾胶原、阿糖胞苷、贴壁处理及传代培养等方法纯培养Balb/c鼠神经元和星形胶质细胞。结果 纯培养Balb/c鼠神经元的纯度为 90 % ,纯培养星形胶质细胞的纯度为 97%。结论 纯培养神经元宜选择Balb/c鼠尾胶原为生长基质并经 3mg·L-1阿糖胞苷处理。纯培养星形胶质细胞宜用大鼠尾胶原为生长基质和培养

Bell麻痹患者血清中疱疹类病毒及柯萨奇B组病毒IgM、IgG抗体检测分析

目的探讨Ｂｅｌ麻痹与疱疹类病毒及柯萨奇Ｂ组病毒感染的关系。方法采用间接ＥＬＩＳＡ法检测Ｂｅｌ麻痹患者血清中水痘带状疱疹病毒（ＶＺＶ）和单纯疱疹病毒Ⅰ型、Ⅱ型（ＨＳＶ１，２）及柯萨奇Ｂ组病毒１～６型（ＣＢ１～６）特异性ＩｇＭ、ＩｇＧ抗体的阳性率。结果患者组血清抗体阳性率与对照组相比：ＶＺＶＩｇＭ、ＩｇＧ阳性率差异有显著性（Ｐ＜００１，Ｐ＜００５），ＨＳＶ１ＩｇＭ、ＩｇＧ阳性率差异有显著（Ｐ＜００５，Ｐ＜００１），ＨＳＶ２ＩｇＭ阳性率差异有显著性（Ｐ＜００５），但ＨＳＶ２ＩｇＧ阳性率差异无显著性（Ｐ＞００５），在ＣＢ１～６ＩｇＭ、ＩｇＧ阳性率检测中，除ＣＢ５ＩｇＭ差异有显著性（Ｐ＜００５）外，其余型别两组差异均无显著性（Ｐ＞００５）。结论Ｂｅｌ麻痹与ＶＺＶ、ＨＳＶ１感染有一定关系。

脑脊液中单纯疱疹病毒抗原检测和临床评价

本文采用ELISA双单克隆抗体夹心法检测14份拟诊为中枢神经系统病毒感染患者脑脊液(CSF)标本中单纯疱疹病毒(HSV)抗原。结果表明:有8份标本出现阳性,即约57％可测出HSV抗原。其中7份标本结果与间接ELISA检测CSF和血清HSV-Ⅰ～Ⅱ型抗体结果比较,两者有较好的一致性。提示ELISA双单克隆抗体夹心法检测临床标本中HSV抗原,具有简便、特异、敏感等优点,4h内即能获得检测结果,适用于HSV性脑炎(HSE)的早期诊断。

51例病毒性心肌炎患儿血清柯萨奇 B 组病毒特异性 IgM 检测分析

用间接ＥＬＩＳＡ法检测５１例病毒性心肌炎患儿血清中柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＶＢ）ＩｇＧ、ＩｇＭ，结果ＣＶＢ－ＩｇＭ≥１∶１００（＋）２１例，占４１．２％。３５例非心肌炎组患儿ＣＶＢ－ＩｇＭ≥１∶１００（＋）２例，占５．７％。经统计学处理，两者有非常显著差异（Ｐ＜０．０１）。说明ＣＶＢ是合肥地区病毒性心肌炎的主要病原；ＣＶＢ－ＩｇＭ检测，方法简便，准确可靠，具有早期诊断价值。ＩｇＭ阳性组病程均在两个月以内，９０．５％有明确的上呼吸道或肠道感染史，ＳＴ－Ｔ改变占２８．６％，与ＩｇＭ阴性组比较差异显著（Ｐ＜０．０５）；ＩｇＭ阳性组心脏扩大、心功能不全均较阴性组多，但经χ２检验没有差异（Ｐ＞０．０５）；ＩｇＭ阳性组与阴性组在心律紊乱、酶学异常上没有差异。

分离病鸡3株大肠埃希菌的鉴定及毒力和细胞毒测定

目的 分离病鸡中 3株大肠埃希菌和鉴定其对小鼠的致病力及对Vero细胞毒性作用。方法 将按常规细菌的分离并鉴定的 3株大肠埃希菌 ,接种至昆明系小鼠体内做毒力试验 ,计算死亡率和LD50 (5 0 %致死量 )。采用微量单层细胞培养法测定细菌上清液的细胞毒性作用。结果 分离的 3株细菌生物学性状均符合大肠埃希菌。分离的 3株细菌对小鼠致病率为 10 0 % ;菌量达 6× 10 11CFU/L时死亡率为 10 0 % ;LD50 为 1 5× 10 10 CFU/L。分离的 3株细菌对 2株细胞均无细胞毒性作用。结论 分离的 3株致病性大肠埃希菌与O157∶H7株对小鼠致病力相似 ,可能是潜在的人类的传染源。

病毒性肺炎患儿血清可溶性白细胞介素2受体测定及意义

采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测了４８例病毒性肺炎患儿血清ｓＩＬ－２Ｒ水平。结果表明：病毒感染急性期，ｓＩＬ－２Ｒ水平显著升高（Ｐ＜０．０１），恢复期则显著降低（Ｐ＜０．０１），但仍高于正常水平（Ｐ＜０．０５）。患儿ｓＩＬ－２Ｒ水平的高低与感染的病毒类型无关。提示对病毒性肺炎患儿血清ｓＩＬ－２Ｒ水平的动态观察对监测患儿的病情、疗效及转归有一定的积极意义。

Balb/C鼠尾胶原与大鼠尾胶原对新生Balb/C鼠脑细胞培养的影响

目的 确定鼠脑细胞体外培养的适宜生长基质。方法 以Balb/C鼠尾胶原与大鼠尾胶原作为生长基质 ,培养新生Balb/C鼠脑细胞。结果 Balb/C鼠尾胶原有利于神经元的生存、生长与分化 ,而大鼠尾胶原则利于星形胶质细胞的生存、生长、分化与增殖。结论 2种鼠尾胶原均为培养鼠脑细胞适宜的生长基质 ,培养

用ELISA夹心法检测尿标本中的巨细胞病毒抗原

用聚乙二醇浓缩的巨细胞病毒(CMV)的无细胞培养上清液免疫山羊,获得高效价多克隆免疫血清。经细胞干粉吸收和过QAE-Sephadex A50柱,提取其IgG,用作ELISA夹心法捕捉CMV抗原的捕捉抗体,并以CMV-IgG抗体阳性的人血清作检测抗体,可检测10_(1·)TCID50/ml培养液中的CMV抗原。用此法检测105例临床尿标本中的CMV抗原,敏感性达92.31％,特异性为87.34％,与分离病毒结果的符合率为88.57％。结合血清学试验和特异性阻断试验证明,本法特异、敏感、快速、简便。

130对母婴巨细胞病毒感染的观察

巨细胞病毒(CMV)为人类常见病毒感染病原体,为胎内感染重要病原体之一。成人感染大多无症状,而胎内或生后早期感染患儿可出现症状。