DNA提纯方法对9种菊属植物RAPD的影响

菊属植物组织中所含的多酚类、单宁、色素及多糖类物质是干扰RAPD扩增反应的主要成份。通过比较试验,使用十二烷基硫酸钠(SDS)法提取,DNA,并补加非水溶性聚乙烯吡咯烷酮(insoluble PVP),有效地去除了上述杂质,经纯化的DNA能很好地用于RAPD分析。试验还发现,4月上旬至5月中旬植物材料处于旺盛的营养生长状态时取材提取DNA较为适宜。

用氨基修饰的载玻片制作cDNA微阵列

cDNA微阵列已在基因差异表达、寻找新基因等研究方面获得广泛应用 ,但有关cDNA微阵列的制作 ,目前多采用多聚赖氨酸修饰的载玻片为探针固定载体 ,固定效果较差 .用氨基硅烷处理的载玻片为载体制作cDNA微阵列 ,然后考察其固定效率、检测灵敏度、稳定性、实用性等指标 .结果表明 ,用氨基硅烷处理的载玻片具有比多聚赖氨酸更令人满意的核酸固定效率、检测灵敏度 ,且稳定实用 .因此 ,用氨基硅烷修饰的载玻片为探针固定载体制作cDNA微阵列较为理想 .

一种简易的昆虫基因组DNA提取方法

报道了一种改进的昆虫基因组DNA 的提取方法.结果表明,该方法可在常温条件下,对多种昆虫及人体组织进行酚/氯仿抽提,DNA 得率较高,OD260/280 的值在1.6～1.9 之间.

DNA条形码技术的应用与分析

DNA条形码技术(DNA Barcoding)是一种通过使用短的标准DNA片段来快速、准确的识别与鉴定物种的技术.这几年一直是物种分类和生物多样方面研究的热点,遗传多样性作为生物多样性研究的核心问题,目前DNA条形码也开始广泛应用于生物的遗传多样性研究.本文简单概述了DNA条形码技术的发展状况、原理、标准基因片段,着重阐述了其在生物分类学和遗传多样性等中的应用,以及其所存在的局限性,并展望了其应用前景和意义.

中性红作为DNA作用方式光谱探针的研究

以溴乙锭（ＥＢ）为探针在研究吩噻嗪药物与ＤＮＡ间相互作用的基础上，用中性红（ＮｅｕｔｒａｌＲｅｄ，ＮＲ）代替ＥＢ为ＤＮＡ作用方式对光谱探针的可行性进行了研究．结果表明，ＮＲ作为ＤＮＡ作用方式光谱探针与ＥＢ具有可比性。

DNA断裂检测方法──单细胞凝胶电泳法

单细胞凝胶电泳（ｓｉｎｇｌｅｃｅｌｌｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓａｓｓａｙ，ＳＣＧＥ）也叫彗星试验（ｃｏｍｅｔａｓｓａｙ），是一种快速、敏感、简便、廉价的检测单个哺乳动物细胞ＤＮＡ断裂的技术，目前已用于检测氧化、紫外线和电离辐射引起的损伤，以及三氯乙烷、丙烯酰胺等化学物及老化、吸烟所致损害的研究．文章介绍ＳＣＧＥ的发展、检测分析方法、原理及其在ＤＮＡ损伤与修复、生物监测、遗传毒理研究、肿瘤治疗方案优化和疗效研究方面的应用前景．

乙基紫标记分光光度法测定脱氧核糖核酸

研究了阳离子染料乙基紫与脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）的结合反应。在ｐＨ＝６．４～７．４的条件下，乙基紫在５９５ｎｍ处有最大吸收峰，当加入ＤＮＡ后，乙基紫的吸收峰显著下降，而在５０７ｎｍ处出现新的吸收峰。以乙基紫为标记物，根据其５９５ ｎｍ吸收峰下降的程度，可用于ＤＮＡ的定量测定。ＤＮＡ的线性响应范围为０～１．０８ × １０－５ ｍｏｌ／Ｌ；表观摩尔吸光系数ε５９５＝７．２４ ×１０４ Ｌ·ｍｏｌ－１·ｃｍ－１。方法具有较高的灵敏度和选择性。用于合成试样分析，结果满意。

核酸-某些碱性三苯甲烷染料体系的RRS及其分析应用

在Tris缓冲溶液中 ,核酸能与某些碱性三苯甲烷染料如乙基紫 (EthylViolet,EV)、结晶紫 (CrystalViolet,CV)和甲基紫 (MethylViolet,MV)结合而使共振瑞利散射 (RRS)急剧增强并产生新的RRS光谱 .以鲱鱼精DNA (HerringSpermDNA ,hsDNA)为例考察了其相应的光谱特征、影响因素和适宜的反应条件 ,体系均在hsDNA浓度为 0～ 2 0μg/mL时与散射强度呈直线关系 ,方法具有较高的灵敏度 ,其检出限 (3σ)分别为 4 7ng/mL(EV hsDNA体系 ) ,13 0ng/mL (CV hsDNA体系 )和 12 2ng/mL (MV hsDNA体系 ) .考察了某些共存物质的影响 ,并用于合成样品中核酸的测定 。

改善大分子质粒DNA重组效率的新方法

采用两次连接法对一个质粒载体为 7 65kb ,插入子为 1 4 7kb的片段进行重组连接 ,使连接效率大大提高 .此方法对于大分子的质粒DNA重组是非常有效的 .

毛细管电泳的原理和应用(第六讲)CE在DNA、糖和离子分析中的应用

简要介绍了ＣＥ在ＤＮＡ、糖和离子分析中的应用。ＤＮＡ分析包括分离原理、方法及检测手段，碱基、核苷和核苷酸分析，纯度检测和微量制备，ｓｓＤＮＡ和ｄｓＤＮＡ分析，基因突变检测及ＤＮＡ序列分析等。糖分析包括衍生化技术、检测方法、所用模式及糖复合物的分析等。离子分析包括阴离子分析原理、检测方法、影响因素、应用及阳离子分析等。

核酸分子“光开关”的研究进展

综述了核酸分子“光开关”的发展及最新动态 ,阐述了它在核酸分子识别分析中的应用 ,并提出了研究核酸分子“光开关”

羟乙基纤维素及蔗糖无胶筛分毛细管电泳分离DNA片段

提出以羟乙基纤维素、蔗和硼酸形成"互穿网络"无胶筛分介质，显著地提高了分离效率．分离了ΦX174／HaeⅢDNA的所有11个DNA片段．探讨了"互穿网络"无胶筛分机理．将该方法应用于决定鳝鱼性别基因PCR扩增产物的分离与鉴定，结果较好．

DNA分子结构的多态性研究(Ⅲ)——生物大分子探针吖啶橙诱导λ┐DNA由线型向环型的转变

病毒和细胞体内的ＤＮＡ是以高度紧密的凝聚态存在的．自从在体外发现亚精胺、精胺可诱导无规卷曲的ＤＮＡ形成有序、独特的凝聚结构形态以来，许多学者深入研究了多价阳离子的诱导特性，以期阐明ＤＮＡ在病毒内的组装和染色体中凝聚作用的机制［１，２］．由于多价阳离子...

亲和素-生物素间接偶联的压电DNA传感器研究

采用 33′ 二巯基硫代丙酸的金电极自组装技术 ,用乙基 3 (3 二甲氨基 )碳二亚胺盐酸盐 (EDC)和N 羟基磺基琥珀酰亚胺 (NHS)偶联剂将亲和素固定于金电极上 ,联于生物素标记的探针 ,制备成压电DNA传感器的检测电极 ,和杂交液中的待检葡萄球菌肠毒素B的ssDNA进行杂交 ,通过频率信号检测DNA杂交的量 ,达到检测的目的 .采用不同长度的基因片段进行了研究 ,制作的传感器一致性、特异性都较好 ;杂交后的电极 ,电极再生后 。

新型近红外试剂的合成及其现场二聚体与DNA作用的研究

合成了一种新型近红外阴离子染料，并对其水溶液及阳离子表面活性剂ＣＴＡＢ存在下的吸收及荧光光谱进行了研究．结果表明，低浓度的ＣＴＡＢ与该近红外阴离子染料形成离子缔合物而使阴离子染料的荧光强度降低，当ＣＴＡＢ的浓度进一步加大时，其胶束前预聚集促使该染料形成非荧光二聚体，导致荧光急剧猝灭．当ＣＴＡＢ浓度大于临界浓度时，染料二聚体解离，染料单体增溶于胶团中形成高量子产率荧光体且最大发射波长从７９５ｎｍ红移至８１２ｎｍ．对该近红外阴离子染料在ＣＴＡＢ的分子胶束前预聚集过程中现场形成的弱荧光二聚体作为一种双螺旋ＤＮＡ的荧光测定探针的可行性做了初步的研究。

结晶紫共振光散射法测定脱氧核糖核酸

研究了三苯甲烷类碱性染料结晶紫与 DNA作用的共振光散射光谱 ,在p H 9.2～ 1 0 .5的范围内 ,加入 DNA导致结晶紫共振光散射增强 ,在 51 2 nm处 ,存在一共振光散射增强峰 ,其强度与 DNA的浓度呈线性关系 ,据此建立了一种测定 DNA的共振光散射法。方法的线性范围为 0～ 90 0 ng/m L,检出限为5.0 2 ng/m L。已用于混合样品中 DNA的测定。

核酸-8-羟基喹啉-钪(Ⅲ)体系的荧光特性及其分析应用

在ＰＨ ６．８～８．８的酸度范围内，小牛胸腺脱氧核糖核酸（ｃｔＤＮＡ），鱼精子脱氧核糖 核酸（ｆｓＤＮＡ）以及酵母核糖核酸（ｙＲＮＡ）分别与８－羟基喹啉（８－ＨＱＬ）和Ｓｃ（Ⅲ）形成的三元 体系受 ２６４～２７０ ｎｍ紫外光激发将发出 ４９０～４９６ ｎｍ的荧光。与 Ｓｃ（Ⅲ）和 ８－ＨＱＬ 二元络合 物相比，三元体系的荧光量子产率增大，荧光寿命增长，最大发射波长紫移约 １０ ｎｍ。６个合 成样品的分析结果表明，利用 Ｓｃ（Ⅲ）／８－ＨＱＬ能十分灵敏的测定脱氧核糖核酸。

一种改进的动物线粒体DNA提取方法

线粒体DNA(mtDNA)已被广泛用于动物群体遗传学和进化生物学的研究,并取得了许多有意义的结果。有效的mtDNA提取方法无疑是开展这方面研究的前提。关于动物mtDNA的提取方法,国内外已有不少报导。概括起来,可分为:1)氯化铯超速离心法,2)柱层析法,3)DNase法,4)碱变性法。本文报道了一种改进的碱变性提取法,与其它方法相比,具有应用范围广、简便、经济等优点。

阳离子表面活性剂存在下孔雀石绿与脱氧核糖核酸的作用及分析应用

在酸性条件和阳离子表面活性剂CTMAB存在下 ,染料孔雀石绿与DNA发生作用 ,在 30 0 0nm ,337 6nm以及 4 5 0 0～ 5 0 0 0nm范围内产生强烈的共振散射峰 .根据 337 6nm处的共振散射信号 ,可以测定 0～ 2 0 μg/mL的小牛胸腺DNA和鱼精子DNA .检测限分别达 6 4 3ng/mL和 4 4 7ng/mL 。

随机扩增多态DNA影响因素的研究

随机扩增多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析受诸多因素的影响，我们发现不同厂家制造的ＰＣＲ扩增仪，不同厂家出品的ＴａｑＤＮＡ聚合酶和ＰＣＲ缓冲液，ＲＡＰＤ反应体系中的引物浓度，Ｍｇ２＋浓度，ｄＮＴＰ浓度，ＢＳＡ（牛血清白蛋白）和明胶，以及模板ＤＮＡ的量等均可能对ＲＡＰＤ结果有不同程度的影响。为了使ＲＡＰＤ结果在不同实验室间具有重复性和可比性，提高ＲＡＰＤ数据的科学价值，我们建议在ＲＡＰＤ分析过程和文章写作中应规范化。方法部分，除一般写明的引物浓度、ＴａｑＤＮＡ聚合酶单位数、ｄＮＴＰ浓度、每一次ＰＣＲ反应的循环条件和循环数等外，还应注明ＰＣＲ仪的制造厂家及型号、ＴａｑＤＮＡ聚合酶生产厂家、ＰＣＲ缓冲液的成分、Ｍｇ２＋浓度。