CT Pulmo3D处理技术制作肺叶模型在指导胸腔镜肺叶切除术方面的应用研究

目的 探究CT Pulmo3D处理技术制作肺叶模型在胸腔镜肺叶切除术方面的临床应用。方法选取我院在2023年10月到2024年6月收治的需行胸腔镜肺叶切除手术的肺癌患者60例,采用数字随机表法将其分为对照组和观察组,每组患者30例。对照组患者在术前进行普通胸部增强CT检查,观察组在术前应用CT Pulmo3D后处理技术制作肺叶模型,制定术前计划并模拟手术过程,比较两组患者的手术时间、术中出血量、术后引流管留置时间、术后住院时间以及并发症情况。结果 观察组患者的手术时间和术中出血量均少于对照组患者的手术时间和术中出血量,差异具有统计学意义(P<0.05);两组患者的术后引流管留置时间以及术后住院时间进行比较,存在差异(P>0.05);观察组患者的并发症发生率低于对照组患者的并发症发生率,存在差异(P>0.05)。结论 在患者进行胸腔镜肺叶切除术前采用CT Pulmo3D处理技术制作肺叶模型并模拟手术过程,具有良好的效果,能够保证手术安全并快速完成。

阻塞性睡眠呼吸暂停对胸主动脉和主肺动脉影响的CT评估研究

目的 探究CT评估阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)对胸主动脉和肺主动脉影响。方法 回顾60名OSA患者CT扫描前后一年内的AA、DTA和MPA,进行单变量和多变量分析,并对22名无合并症的参与者进行分析,后者根据睡眠参数分为亚组,并在亚组间进行比较。结果 所有OSA患者中,氧饱和度低于90%的时间的对数(CT90)显著预测了AA和MPA的大小(P<0.05)。在无合并症的患者中,氧饱和度下降指数和最低氧饱和度与AA和DTA的大小有中等程度的相关性(P<0.01)。在这一组中,氧饱和度下降指数大于30或最低氧饱和度小于81%的个体具有更大的AA和DTA尺寸(P<0.05)。结论在OSA患者中,氧饱和度低于90%的时间影响AA和MPA的大小。在无合并症的患者中,氧饱和度下降指数和最低氧饱和度与AA和DTA的大小有中等程度的相关性。无合并症的参与者中,氧饱和度下降指数大于30或最低氧饱和度小于81%的个体具有更大的AA和DTA。

CFTR氯离子通道在Ⅱ型肺泡上皮细胞高氧损伤机制的研究

目的 研究囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)氯离子通道在Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)高氧损伤中的作用。方法 AECⅡ于密封舱中通入95%O_(2)+5%CO_(2),持续24h或48h,构建高氧损伤AECⅡ模型。将实验组AECⅡ随机分为高氧24h组、高氧24h+激动剂(Gen)组、高氧24h+抑制剂(AA)、高氧48h组、高氧48h+Gen组和高氧48h+AA组;对照组通入空气,未干预。以膜片钳系统记录CFTR氯离子电流强度。细胞外液中分别加入GEN50μM或AA10μM,记录GEN激活或AA抑制后氯离子电流强度。采用Clampfit 10.6行数据分析,应用R4.4.1统计软件对不同组别行Spearman相关性分析。结果 1.高氧24h、48h明显抑制AECⅡ氯离子电流(P<0.01),以24h较明显;2. Gen明显增加高氧24h、48hAECⅡ氯离子电流;AA明显抑制氯离子电流(P<0.01),均以48h较明显。结论 高氧可能通过影响AECⅡCFTR氯离子外流而发挥作用。

胎儿肺动脉吊带并多发心血管畸形1例

孕妇,29岁,孕22+5周,孕2产1。超声见:胎儿左肺动脉从右肺动脉中下段发出,绕行至气管后方,呈“c”形,于降主动脉前方,向左侧走行进入左肺门,左肺动脉纤细,内径约0.15 cm,右肺动脉内径约0.21 cm,动脉导管内径约0.24 cm。心底三血管-气管切面从左向右分别可见:左上腔静脉、肺动脉、主动脉、右上腔静脉。左上腔静脉内径约0.10 cm,右上腔静脉内径约0.10 cm,下腔静脉内径约0.24 cm。可见迷走右锁骨下动脉起源于降主动脉。左侧上腔静脉汇入冠状静脉窦,冠状静脉窦内径约0.12 cm。右侧脐动脉未显示。超声诊断:肺动脉吊带(迷走左肺动脉)、双上腔静脉、迷走右侧锁骨下动脉、单脐动脉(图1)。产妇及家属要求引产。经襄阳市妇幼保健院伦理委员会批准及产妇知情同意后,对引产胎儿进行心血管铸型。铸型证实:迷走左肺动脉、迷走右锁骨下动脉、双上腔静脉、双侧右心耳形态、左右颈总动脉共干、右椎动脉异常起源于右颈总动脉(图2)。

右美托咪定对急性肺损伤机械通气患者生命体征、炎性反应的影响

目的探讨右美托咪定对急性肺损伤机械通气患者生命体征、炎性反应的影响。方法回顾性分析本院2020年1月~2023年1月收治的急性肺损伤机械通气患者资料,从中选取常规机械通气麻醉方案的47例患者纳入对照组,另选取在常规麻醉方案基础上应用右美托咪定的47例患者纳入观察组。对比两组患者机械通气5min、15min、30min、1h、2h各时间点的生命体征指标:呼吸末二氧化碳(ETCO_(2))、血压、心率、血乳酸、动脉血氧分压(PaO_(2))水平的变化情况,机械通气1d后,观察两组患者血气分析指标:肺泡-动脉氧分压差(AaDO_(2))、呼吸指数(RI)、氧合指数(OI)及氧化炎性反应指标:丙二醛(MDA)、白细胞介素-8(IL-8)、C反应蛋白(CRP)的变化情况。结果通气5min时两组患者各项生命体征指标对比均未见统计学差异(P>0.05);通气后15min、30min、1h时观察组患者ETCO_(2)水平均低于对照组(P<0.05),通过后2h两组患者ETCO_(2)水平未见统计学差异(P>0.05);通气后15min、30min、1h、2h时观察组患者SBP、DBP、心率、血乳酸水平均低于对照组(P<0.05);通气后15min、30min、1h时观察组患者PaO_(2)水平均高于对照组(P<0.05),通过后2h两组患者ETCO_(2)水平未见统计学差异(P>0.05)。通气前两组患者AaDO_(2)、RI、OI对比均未见统计学差异(P>0.05);通气后1d,两组患者AaDO_(2)与RI均低于本组通气前、OI均高于本组通气前,观察组患者AaDO_(2)与RI均低于对照组,OI均高于对照组(P<0.05)。通气前两组患者各项炎性与氧化反应指标对比均无统计学差异(P>0.05);通气后,两组患者血清MDA、IL-8、CRP水平均低于本组通气前、SOD水平高于本组通气前,观察组患者血清MDA、IL-8、CRP水平均低于对照组、SOD水平高于对照组(P<0.05)。结论应用右美托咪定能够进一步维持急性肺损伤机械通气患者生命体征平稳,改善患者血气水平,控制炎性反应与氧化应激反应程度。

COPD细胞微环境体外模型建立的思路与方法

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)是危害公众健康的重大慢性疾病。COPD病理机制复杂,细胞微环境改变是其病理生理的重要组成部分。细胞培养技术是研究COPD病理机制及药效药理评价的重要工具。该文介绍了肺内细胞微环境的基本构成,COPD病理进程中细胞微环境变化,总结了细胞微环境体外模型在COPD机制研究中的应用,提出COPD细胞微环境体外模型建立的思路与方法。

胸腔镜下肺结节切除术患者术后恐动症发生的危险因素及护理对策分析

目的分析胸腔镜下肺结节切除术患者术后恐动症发生的危险因素,并制定护理对策。方法选取2022年12月至2023年12月期间在新乡市第一人民医院行胸腔镜下肺结节切除术的99例患者,采用自拟一般资料调查问卷收集其基本信息,统计术后恐动症发生情况,并进行单因素与多因素Logistic回归分析,明确术后恐动症发生的危险因素。结果99例患者中共有38例(38.38%)患者发生术后恐动症;恐动症组年龄较非恐动症组更大,高中及以下文化程度比例、个人月收入≤3000元比例、无外科手术史比例、疼痛程度、疼痛灾难化评分更高,差异有统计学意义(P<0.05),社会支持度评分更低,差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,高中及以下文化程度(OR=3.294)、疼痛程度(OR=3.458)、疼痛灾难化程度(OR=3.912)是胸腔镜下肺结节切除术患者术后恐动症发生的独立危险因素,差异有统计学意义(P<0.05),社会支持度(OR=0.676)是保护性因素,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胸腔镜下肺结节切除术患者术后恐动症与文化程度、社会支持度、疼痛程度、疼痛灾难化存在密切关系,临床应制定针对性护理对策,以降低恐动症发生率。

基于网络药理学与实验验证研究荜茇抗肺纤维化的作用机制

目的:通过网络药理学及分子对接技术初步预测荜茇抗肺纤维化的活性成分、作用靶点及信号通路,并通过体外实验进行初步验证荜茇抗肺纤维化的作用机制。方法:从TCMSP、Swiss Target Prediction和Pub Chem等数据库中获取药物的有效成分及对应靶点。使用Gene Cards和OMIM数据库收集疾病的相关靶点。利用jvenn在线工具筛选出药物与疾病的交集靶点,通过String数据库及Cytoscape3.9.1软件构建“药物-成分-靶点”与PPI网络图。使用微生信平台对交集靶点进行GO及KEGG富集分析,将富集KEGG前20条通路、核心靶点、药物成分,构建“成分-靶点-通路”网络并进行可视化。利用分子对接技术将药物成分与靶点进行对接,并对其部分对接结果可视化。培养HFL-1细胞,采用MTT法检测各浓度对细胞活力的影响,计算抑制率,从而筛选出最佳的药物浓度。将体外培养的HFL-1细胞分为4组,即对照组、TGF-β1组、TGF-β1+LD组(联合LD组)、TGF-β1+HD组(联合HD组)。采用CCK-8试剂检测24、48、72 h的细胞增殖活性。采用平板克隆形成实验来观察药物对HFL-1细胞克隆形成能力的影响。采用RT-qPCR和Western blot实验观察各组细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(COI-Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(COI-Ⅲ)的m RNA和PI3K-Akt信号通路蛋白表达水平。结果:共获得荜茇与抗肺纤维化交集靶点为197个。经拓扑学分析获得核心PPI网络,包含29个节点与199条边;GO功能分析显示,荜茇治疗肺纤维化(PF)生物学过程包括:凋亡过程负调控、信号转导、蛋白质磷酸化等。细胞成分包括:细胞质、核浆、等离子体膜。分子功能包括相同的蛋白结合、丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸激酶活性、蛋白结合等。KEGG信号通路被155条富集,而其中已被证实,与PF密切相关为PI3K-Akt信号通路,富集排名第四“。成分-靶点-通路”网络中PIK3CA、MAPK3、MAPK1、MTOR、SRC、CCND1、EGFR、PRKCA、BCL2、GSK3B链接度最高。荜茇宁、N-(2,5-二甲氧基苯基)-4-甲氧基苯甲酰胺、四氢丹参酮、豌豆素和胡椒碱是关键化合物。分子对接结果显示,除N-(2,5-二甲氧基苯基)-4-甲氧基苯甲酰胺外,其余化合物与10个链接度高的蛋白质结合活性较好。体外实验显示,48、72 h联合LD组增殖能力明显低于TGF-β1组(P<0.05),24、48、72 h联合HD组又显著低于联合LD组。各药物组克隆数量显著减少(P<0.05)。联合LD和联合HD组α-SMA、COl-I、COl-Ⅲm RNA和蛋白表达水平明显低于TGF-β1组。与TGF-β1组相比,两个剂量组中p-PI3K/PI3K、pAKT/AKT蛋白表达显著减少(P<0.01)。结论:荜茇抗PF作用,其机制可能通过调控PI3K-Akt信号通路而发挥治疗PF作用。

超短回波时间序列在肺部磁共振成像中的研究进展

磁共振成像具有无辐射、软组织分辨力高等特点,但不适用于质子密度低、T2信号衰减迅速的组织器官,因此临床上其在肺部中的应用较为局限。随着超短回波时间(UTE)序列在肺部MRI检查中的应用,MRI对肺部疾病的评估得以拓宽。本文就UTE序列成像技术原理、分类以及其在肺部的临床应用进行综述。

比较培美曲塞与多西他赛分别联合顺铂治疗非小细胞肺癌的疗效及安全性分析

目的本项研究旨在探究培美曲塞联合顺铂与多西他赛联合顺铂在治疗非小细胞肺癌方面的疗效及安全性。方法本研究纳入了2020年2月至2022年3月期间在我院接受治疗的80名非小细胞肺癌患者。通过随机数字表法,这些患者被平均分配到两个治疗组,每组40人。其中一组患者接受了以顺铂和多西他赛为基础的化疗方案作为对照组,而另一组则接受了顺铂和培美曲塞的联合治疗作为观察组。研究中,我们对比了两组患者在治疗结束后的疗效,并监测了他们在治疗开始和结束时血液中癌胚抗原(CEA)及糖类抗原125(CA125)的浓度变化。统计患者治疗过程中不良反应发生率。比较患者1年生存率与无病生存时间的差异。结果观察组显效患者为有效治疗率显著高于对照组患者(P=0.025)。观察组患者治疗后CEA与CA-125水平下降程度要高于对照组患者(P<0.0001)。对照组患者皮肤反应和消化道反应与观察组患者相比无差异(P>0.05)。但是对照组患者骨髓抑制发生率显著高于观察组患者,存在统计学差异(P=0.045)。两组患者1年生存率与无病生存时间均无差异(P>0.05)。结论对于晚期NSCLC患者,培美曲塞和顺铂的联合治疗在改善预后上优于多西他赛和顺铂的联合治疗,并且还可以减少患者不良反应的发生。

张红基于气机升降理论论治原发性支气管肺癌经验撷要

原发性支气管肺癌(简称肺癌)是目前严重威胁人类生命的恶性肿瘤之一,在中国乃至世界范围都有高发病率、高病死率的特点。目前临床肺癌的病因和发病机制尚未明确,可能与空气污染、吸烟、遗传等因素相关。根据本病发病的临床特点,中医学将肺癌归属于“息贲”“肺积”范畴。张红教授基于气机升降理论,认为中焦为脏腑气机升降之枢纽;肝肺为全身气机调畅的主要环节;肺肾为全身气机升降出入的原动力,并结合患者临床表现,指出肺积病位主要在肺,与肝、脾、肾等脏腑气机密切相关,其基本病机为中焦聚湿生痰、肝肺升降失司、肾阳气化虚衰,探其本源为脏腑气机升降失调,升降出入无序、协调关系被破坏的气机紊乱状态,最终导致邪气聚集无消散之路,结于肺脏久成癌毒。张红教授在临床上通过治疗上遵循脏腑气机升降的规律,调畅肺、脾、肝之气机,补脾、肾先后天之元气,重视调畅各脏之间的气机,使之升降平衡才能分清泌浊,维持各脏腑正常的生理功能。因此调理气机升降使气滞得行、津停得运、血瘀得散,以达到恢复机体气机升降,延缓癌症进展、延长患者生存期的目的。

基于“虚气留滞”探析宫晓燕教授辨治肺结节经验

随着胸部高分辨率CT的普及,肺结节检出率大幅提高。患者面临早期肺癌或癌前病变的潜在风险。西医诊疗肺结节以定期随访观察或手术切除为主,对肺结节缺乏有针对性的治疗药物,在定期随访过程中存在治疗空窗期。中医药治疗肺结节具有多靶点、多层次、多途径的显著优势。宫晓燕教授从长期的临床实践中总结出肺结节的诊疗经验,能够有效缓解肺结节患者的临床症状、延缓结节进展、促进结节吸收、缩小结节体积,降低结节恶变风险,缓解患者的焦虑、恐慌情绪。宫晓燕教授认为,“虚气留滞”理论符合肺结节本虚标实、虚实夹杂的特点,为肺结节的核心病机,“虚气”为发病之本,肺脾亏虚,虚气“留滞”为发病之标,始于气郁,渐于痰瘀,损于毒聚,“虚气”和“留滞”互为因果,虚而留滞,滞而更虚,形成恶性循环。“培元通滞”为肺结节的核心治法,培补正气、补肺健脾以“培元”,开郁、化痰、祛瘀、解毒以“通滞”。文章基于“虚气留滞”理论探析宫晓燕教授辨治肺结节的经验,并附病案1例,以期为临床辨治肺结节提供一定思路,提高临床疗效。

基于网络药理学与分子对接探讨喜炎平注射液防治急性肺损伤的机制

目的探讨喜炎平注射液对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的防治作用及机制。方法在LPS诱导的ALI小鼠模型中,通过观察肺组织病理学指标评价喜炎平注射液的防治作用;网络药理学和分子对接方法探讨其作用机制;Western blot方法验证预测的靶蛋白。结果喜炎平注射液能改善ALI小鼠肺组织病理损伤,减轻炎症反应。喜炎平注射液主要活性成分4个:14-deoxy-11-oxo-andrographolide、14-deoxyandrographolide、14-deoxy-12-methoxyandrographolide、andrographolide-19-β-D-glucoside,获得药物靶点288个,ALI相关靶点4960个,交集基因192个。喜炎平的10个核心靶点为STAT3、EGFR、PIK3R1、MAPK1、PIK3CA、NFKB1、ESR1、MAPK8、JAK2、FYN。GO富集获得BP 310个、CC 65个、MF 80个。KEGG通路富集发现ALI相关通路141条,排名前20的有MAPK、TNF-α、VEGF、cAMP、mTOR、AMPK、NOD、JAK-STAT、IL-17、NF-κB等。分子对接发现MAPK1、MAPK8、NFKB1与活性成分14-deoxy-12-methoxyandrographolide、14-deoxyandrographolide结合作用较强。Western blot发现喜炎平注射液可明显下调ALI小鼠肺部p38、JNK、ERKl/2、NF-κB p65蛋白表达。结论喜炎平注射液对ALI有一定防治作用,机制与调节MAPK和NF-κB信号通路有关。

β-catenin、MMP-2在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的分析β-连环蛋白(β-catenin)、基质金属蛋白酶2(MMP2)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义。方法抽取平顶山市第二人民医院收治的112例NSCLC患者,应用免疫组化(SP)法检测肺癌组织标本与正常肺组织标本的阳性表达情况,分为肺癌组与癌旁组。结果肺癌组β-catenin、MMP-2阳性表达率高于癌旁组(P<0.05);肺癌组中,肿瘤直径≥5cm者的MMP-2阳性表达率高于肿瘤直径<5cm者(P<0.05),腺癌患者β-catenin、MMP-2阳性表达率高于鳞癌患者(P<0.05),Ⅲ+Ⅳ期患者β-catenin、MMP-2阳性表达率高于Ⅰ+Ⅱ期患者,低分化患者β-catenin、MMP-2阳性表达率高于中+高分化患者(P<0.05),淋巴结转移患者β-catenin、MMP-2阳性表达率高于无淋巴结转移患者(P<0.05)。结论β-catenin、MMP-2参与NSCLC的发生、发展、浸润和转移,可作为NSCLC患者早期诊断的重要指标。

羟乙基淀粉130/0.4对大鼠内毒素性急性肺损伤ICAM-1表达的影响及MAPK信号通路在其中的作用

目的探讨不同剂量羟乙基淀粉溶液(hydroxyethylstarch,HES)130.04对大鼠内毒素性急性肺损伤(acute lunginjury,ALI)肺组织细胞间粘附分子1(intercellular adhesionmolecule1,ICAM-1)表达的影响及丝裂原活化蛋白激酶(mi-togen activated protein kinase,MAPK)通路在其中的作用。方法36只♂SD大鼠,随机分为6组,每组6只,N组(对照组)不给予脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),H1、H2、H3、H4组给予LPS后分别按照3.75,7.5,15,30ml.kg-1的剂量持续输入HES130/0.4,L组给予LPS后持续输入生理盐水。于LPS注射4h后处死大鼠,测定肺组织中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)活性、肺湿干重比(W/D)、ICAM-1蛋白和mRNA表达、MAPK激酶活性以及支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白和白细胞数。结果与N组比较,L组肺组织MPO活性、W/D比、ICAM-1蛋白和mRNA、p-ERK、p-p38、p-JNK表达以及BALF中总蛋白和白细胞数升高;与L组比较,H1和H2组肺组织和BALF中上述指标降低,其中以7.5ml.kg-1剂量最为明显。结论中小剂量使用HES130/0.4可改善内毒素性急性肺损伤炎症反应,这种作用可能与通过MAPK通路抑制ICAM-1蛋白和mRNA的表达有关。

多层螺旋CT低剂量扫描肺容积和肺密度定量分析的可行性研究

目的研究16层螺旋CT低剂量扫描对肺容积、肺密度定量分析的影响。方法本研究共选择100例患者,根据CT扫描方法的不同分为3组。A组20例,一次屏气常规剂量(220mA×0.8s)和60mAs低剂量MSCT部分肺段扫描,纵向扫描范围3cm;B组60例,深吸气末及深呼气末60mAs低剂量MSCT全肺扫描。C组20例,一次屏气40mAs和80mAs低剂量MSCT部分肺段扫描,纵向扫描范围3cm。结果常规剂量和60mAs以上低剂量扫描图像质量均为优秀,能够满足肺容积和肺密度定量分析的需要。低剂量扫描测得的部分肺容积较常规剂量小,在标准重建下有非常显著性差异(P<0.01),在骨重建下具有显著差异(P<0.05);低剂量扫描测得的平均肺密度略高于常规剂量测量结果,但差异无显著性(P>0.05)。结论16层螺旋CT肺容积和肺密度检测中,60mAs低剂量扫描能够满足图像定量分析的需要。

肺段的冠状断层解剖:断层标本与多层螺旋CT图像对照研究

目的:研究肺段在冠状断面上的划分及分布。方法:利用20例胸部连续冠状断层标本、2例多层螺旋CT图像、5侧游离肺剥离标本和7侧肺管道铸型,追踪观察了肺叶和肺段的支气管、肺动脉和肺静脉,并据此在冠状断面上划分了肺段。结果:肺段主要分布于从胸骨角至脊柱的10个断面里,气管杈层面是在冠状断面上划分肺段的最佳开始层面。在冠状断面上有6个划分肺段的关键层面:①升主动脉层面,划分肺段的标志性结构尖段静脉、外侧段静脉、尖后段静脉、左前段静脉和上舌段静脉均出现;②肺动脉杈层面,于肺动脉权下方可见到左、右上肺静脉,在11例(55％)标本中出现尖后段静脉、前段静脉和舌静脉干同时汇入左上肺静脉的情形;③气管杈层面,左、右肺上叶支气管及其分支显示清晰,于气管杈下方可见到左、右下肺静脉汇入左心房;④中间支气管层面,可见到两肺下叶肺段支气管、肺动脉和肺静脉的起源;⑤胸主动脉层面,主要为两肺上段和外后底段的支气管和血管;⑥脊柱层面,两肺下叶主要表现为上段、外侧底段和后底段的支气管和血管。结论:通过仔细辨认肺段支气管、肺动脉和肺静脉,可在冠状断面上精确划分肺段。

乌司他丁通过Nrf2/HO-1抗氧化途径在OVA诱导的支气管哮喘小鼠中发挥治疗作用

目的课题组之前的研究已证实在OVA诱导的哮喘小鼠模型中,乌司他丁通过抑制ROS的产生、诱导抗氧化酶的表达,起到治疗哮喘的作用,但具体机制尚不清晰;此研究将以Nrf2/HO-1这一氧化应激的关键通路为切入点,深入探讨乌司他丁抗氧化作用的潜在机制。方法建立OVA诱导的小鼠哮喘模型,腹腔注射乌司他丁(100 k U·kg-1·d-1)进行治疗,对照组用PBS(p H 7.4)代替;检测气道高反应性;ELISA法检测小鼠BALF中IL-4、IFN-γ、总Ig E及特异性Ig E的表达水平;双氢罗丹明(DHR)-123方法检测小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞中ROS含量;检测小鼠肺组织中蛋白羰基含量(protein carbonyl)和丙二醛(MDA)水平;抗氧化酶试剂盒检测小鼠BALF中的抗氧化酶;Western blot及Real-time PCR检测小鼠肺组织中HO-1在蛋白和基因的表达水平;Western blot、IF及EMSA检测Nrf2核转移及结合活性。结果乌司他丁治疗组明显降低气道高反应;降低BALF中IL-4、特异性Ig E及ROS的表达水平,降低小鼠肺组织Protein carbonyl含量和MDA水平,提高IFN-γ、SOD、GSH和TAOC等抗氧化酶的表达水平,其治疗作用可被HO-1抑制剂Znpp逆转;乌司他丁诱导小鼠肺组织中的HO-1在蛋白水平的表达呈明显剂量和时间依赖性;乌司他丁诱导Nrf2的核转移,增强Nrf2的结合活性并提高HO-1基因水平表达。结论乌司他丁在OVA诱导的哮喘小鼠模型发挥抗氧化治疗作用,其作用机制可能是通过Nrf2/ARE途径诱导HO-1的表达实现。

锌指蛋白A20突变体转基因小鼠脓毒症肺损伤的研究

目的了解锌指蛋白A20突变体(A20△)转基因小鼠脓毒症肺损伤的特点,探讨A20△对小鼠脓毒症肺损伤的影响。方法以A20△转基因脓毒症小鼠为动物模型(A20△转基因组),采用流式细胞仪测定肺组织单核巨噬细胞浸润,ELISA测定肺组织A20△、TNF-α、IL-1β水平,结合肺体指数和病理检查对炎症及其损伤程度进行鉴定。实验同时设LPS对照组(LPS组)和生理盐水对照组(对照组)。结果给予LPS后6、12、24h,A20△转基因组小鼠肺体指数较LPS组明显下降(P<0.01,P<0.05);A20△转基因组小鼠肺组织浸润单核/巨噬细胞数较LPS组明显下降(P<0.01)。给予LPS后3、6h,A20△转基因组小鼠肺组织炎症细胞因子TNF-α水平较LPS组明显下降(P<0.01);IL-1β水平也较LPS组明显下降(P<0.05,P<0.01);给予LPS后12、24h,TNF-α和IL-1β水平差异无统计学意义(P>0.05)。病理学观察表明A20△转基因组小鼠肺组织充血程度、肺泡积液及肺间质增厚程度均较LPS组轻。结论A20△转基因小鼠在一定程度上具有抵御LPS诱导性肺损伤的能力,其机制可能是通过抑制单核细胞向肺组织浸润和降低肺内炎症细胞因子水平实现的。

TGF-β1诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转变

目的检测转化生长因子(TGF-β1)能否在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞-间质细胞转变(epithelial-mes-enchymal transition,EMT)及其相应的信号转导机制。方法在体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型细胞(RLE-6TN)中加入TGF-β1后,于不同时间段收取细胞,分别采用Real-time PCR及Western blot检测上皮及间质细胞标志物表达的改变;Western blot检测TGF-β1对RLE-6TN细胞p-Smad2/3表达的影响;TGF-β1诱导的RLE-6TN细胞形态学的改变采用倒置相差显微镜观察,超微结构的改变采用透射电子显微镜观察。结果加入TGF-β1到RLE-6TN细胞后,其间质细胞标志物表达上调,上皮细胞标志物的表达下调;加入TGF-β1到RLE-6TN细胞后,其p-Smad2/3的表达明显上调;形态学上,TGF-β1诱导RLE-6TN细胞向成肌纤维细胞样细胞转变;超微结构上,TGF-β1诱导RLE-6TN细胞特有的嗜锇性板层小体发生变性、肿胀并随TGF-β1作用时间延长最终完全消失。结论TGF-β1能在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转变,其机制部分与Smad信号转导途径相关。