黄芪总黄酮对缺血再灌注损伤模型中一氧化氮的作用及其影响

目的：研究黄芪总黄酮（ｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｏｆａｓｔｒａｇａｌｕｓ，ＴＦＡ）对缺血再灌注损伤的防护作用。方法：应用家兔失血性休克／再灌注模型（ｓｈｏｃｋ／ｒｅｐｅｒｃｕｓｉｏｎ，Ｓ／Ｒ），观察损伤后血浆中一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）代谢终产物亚硝酸盐（ＮＯ２）的变化及ＴＦＡ和磷脂酶Ａ２阻断剂氯喹（Ｃｈｌｑ）治疗对其的影响。结果：数据表明Ｓ／Ｒ后２４ｈ内血浆中ＮＯ２含量，与血ｐＨ值及二氧化碳总量（ＴＣＯ２）下降呈正相关；ＴＦＡ和Ｃｈｌｑ可在一定程度上阻断ＮＯ的减少，且对维持体内酸碱平衡有一定作用。结论：ＴＦＡ对缺血再灌注损伤具有防护作用。

川芎嗪对实验性心肌缺血再灌注损伤中一氧化氮和内皮素的干预

目的 :探讨一氧化氮 (NO)和内皮素 (ET)在心肌缺血再灌注损伤 (MIRI)中的作用及川芎嗪对其的影响。方法 :实验兔分为假手术对照组 (n =10 )、心肌缺血再灌注组 (n =10 )及心肌缺血再灌注 +川芎嗪组 (n =10 ) ;分别检测缺血前、缺血 40min和再灌注 2 0min 3个时点的指标变化。检测血浆及心肌组织一氧化氮代谢产物 (NOP)含量、测定ET水平、乳酸脱氢酶 (LDH)活性 ,并行心肌电镜观察。结果 :心肌缺血 40min、再灌注 2 0min血浆NOP明显低于、ET及LDH显著高于假手术对照组 ,尤以再灌注 2 0min变化显著 (均P <0 0 1) ;心肌组织NOP和LDH明显低于、ET显著高于假手术对照组 (P <0 .0 5和P <0 .0 1) ;心肌超微结构发生异常改变。川芎嗪可逆转上述指标的异常变化。结论 :缺血再灌注导致血管内皮功能紊乱 (即NO水平下降和ET水平升高 ) ,在MIRI发生发展中起介导作用 ;川芎嗪通过保护冠脉内皮 ,提高机体内NO水平和降低机体内ET水平 。

醒脑静注射液抗脑缺血再灌注损伤作用的实验研究

目的 探讨醒脑静注射液(XNJI)对脑缺血灌注损伤(CIRI)的防治作用及其机理。方法 制备家兔CIRI模型,随机分为对照组和XNJI组,动态观察血浆及脑组织一氧化氮(NO)水平、内皮素(ET)含量、丙二醛(MDA)浓度、超氧化物歧化酶(SOD)活性及脑超微结构的变化。结果 脑缺血再灌注期间,血浆和脑组织NO水平及SOD活性明显下降(P<005和P<001),ET及MDA含量显著升高(P<005和P<001),超微结构发生异常改变;使用XNJI后,上述各指标的异常变化明显减轻,与对照组相比有显著性差异(P<005和P<001)。结论 XNJI对CIRI具有良好的防护作用,其机制与提高机体NO水平、降低ET及氧自由基水平有关。

复方丹参滴丸对大鼠心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

为了探讨复方丹参滴丸对大鼠心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响。采用左冠状动脉穿线结扎法制备心肌缺血再灌注模型，分别以缺口末端标记法（ＴＵＮＥＬ）及Ｓ－Ｐ免疫组化法检测心肌凋亡细胞、心肌细胞Ｆａｓ、Ｂｃｌ－２基因的蛋白表达的变化。结果表明，与假手术组比较，缺血再灌注组心肌细胞凋亡指数（ＡＩ）及Ｆａｓ与Ｂｃｌ－２蛋白的阳性表达指数（ＰＥＩ）明显增加（ＡＩ（％）：１９．８２±８．６７比０．３６±０．０５；ＦａｓＰＥＩ（％）：１７．４４±６．０８比０．２１±０．０３；Ｂｃｌ－２ＰＥＩ（％）：６．７９±１．８４比０．２４±０．０３，（Ｐ均＜０．０１）；与缺血再灌注组比较，复方丹参滴丸干预后ＡＩ与Ｆａｓ蛋白的ＰＥＩ下降，且随复方丹参滴丸剂量加大而进一步降低（Ｐ＜０．０５；Ｐ＜０．０１），大剂量复方丹参滴丸干预可轻度上调Ｂｃｌ－２基因的蛋白表达（Ｐ＜０．０５）。结论为复方丹参滴丸可通过抑制缺血再灌注后心肌细胞凋亡、下调Ｆａｓ基因的蛋白表达与上调Ｂｃｌ－２基因的蛋白表达以保护缺血再灌注心肌损伤。

肠缺血-再灌流对早期肠内营养肠耐受性的影响

目的 研究低灌流对早期肠内营养肠道耐受性的影响。方法 2 0只家犬随机分为实验组和对照组。复制肠缺血 再灌注模型,夹闭肠系膜上动脉60min后复流4h行肠内营养,观测呕吐、腹泻等肠道症状并检测血浆二胺氧化酶(DAO)含量和肠粘膜PCO2 (PrCO2 )、测定肠内压、进行D 木糖吸收实验,对PrCO2 与DAO、D 木糖、肠内压进行相关性分析。结果 低灌流时早期肠内营养肠道并发症明显增加(P <0 0 1) ;血浆DAO、肠内压明显升高,D 木糖吸收明显下降(P <0 0 5 ,P <0 0 1) ;PrCO2 与DAO的升高D 木糖吸收减少和肠内压高度相关(P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论 低灌流状态下,早期肠内营养肠耐受性降低。

氧自由基在肝缺血再灌注损伤中的作用及川芎嗪的影响

目的：探讨氧自由基在肝缺血再灌注损伤（ＨＩＲＩ）中的作用及川芎嗪的防护作用。方法：应用ＨＩＲＩ家兔及肝癌手术患者，观察超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ），黄嘌呤氧化酶（ＸＯ）、谷丙转氨酶（ＡＬＴ）活性、丙二醛（ＭＤＡ）含量、肝细胞形态学变化及川芎嗪对上述指标的影响。结果：ＨＩＲＩ时ＳＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ活性显著下降（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１），ＸＯ、ＡＬＴ活性及ＭＤＡ含量明显升高（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１），肝细胞形态学发生异常变化；使用川芎嗪后，上述指标的异常变化均明显减轻，其差异有显著和非常显著（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１）。结论：氧自由基是ＨＩＲＩ的重要发病学因素，而川芎嗪通过清除氧自由基可减轻ＨＩＲＩ。

姜黄素对缺血再灌注大鼠脑组织SOD,MDA和亚硝酸盐含量的影响

目的：通过观察姜黄素对脑缺血再灌注时脑组织中丙二醛（ＭＤＡ）、亚硝酸盐、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量的影响，探讨其对再灌注损伤保护作用的机制。方法：选用大鼠４血管结扎缺血再灌注模型（缺血３０ｍｉｎ，再灌注１５ｍｉｎ），用化学发光法测定大鼠脑组织中ＳＯＤ的活性，用比色法测定ＭＤＡ和亚硝酸盐的含量。姜黄素（２０和４０ｍｇ／ｋｇ）于缺血前３０ｍｉｎ腹腔注射给予。结果：缺血３０ｍｉｎ再灌注１５ｍｉｎ后，模型组的动物脑组织中ＭＤＡ和亚硝酸盐的含量明显升高。姜黄素可抑制这种升高，且呈一定的剂量依赖关系。姜黄素还可使缺血再灌注时脑组织的ＳＯＤ活性提高。

大鼠全脑缺血再灌注后海马区细胞凋亡及bcl-2和Bax的检测

目的：证实缺血性脑损伤主要是以细胞凋亡的方式发生。方法：用ＴＵＮＥＬ法标记检测损伤的神经细胞，用原位杂交组织化学法检测ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ，用免疫组织化学法检测Ｂａｘ蛋白。结果：手术组检测到ＴＵＮＥＬ标记的阳性神经细胞主要位于海马ＣＡ１区，渐进性增多，第３天达到高峰，可检测到凋亡小体和正在形成凋亡小体的神经细胞。ｂｃｌ－２主要在海马ＣＡ３区表达，Ｂａｘ则主要在ＣＡ１区表达，两者均于再灌注８ｈ出现，２４ｈ阳性信号达到高峰，７２ｈ明显下降。结论：细胞凋亡是大鼠全脑缺血后海马区神经元丢失的重要原因，大鼠全脑缺血再灌注后海马区ｂｃｌ－２和Ｂａｘ的区域性表达可能参与海马不同区域缺血耐受性差异的形成。

缺血再灌注诱导bcl2基因表达及其对肠道细胞凋亡的影响

目的：观察缺血再灌注肠道组织原癌基因ｂｃｌ２表达的特征、规律以及与肠道细胞凋亡发生的关系。方法：将１６只Ｗｉｓｔａｒ大鼠分成正常对照、肠系膜上动脉夹闭缺血４５分钟、肠系膜上动脉夹闭４５分钟与再灌注６小时和再灌注２４小时４组。用免疫组化法和末端脱氧核糖转移酶介导的生物素化脱氧尿嘧啶缺刻标记技术（ＴＵＮＥＬ技术）分别观察以上各组肠道组织细胞ｂｃｌ２基因表达与凋亡发生的关系。结果：肠系膜上动脉夹闭可以导致肠粘膜细胞凋亡发生增加与激活ｂｃｌ２基因表达。在正常肠道ｂｃｌ２表达为阴性，缺血可诱导ｂｃｌ２表达，并且在ｂｃｌ２表达增加的同时凋亡细胞逐渐减少。与再灌注６小时组相比，再灌注２４小时肠道组织ｂｃｌ２表达不仅强度明显增加，而且还有分布广泛与涉及多种组织的特点。结论：缺血再灌注激活ｂｃｌ２基因表达是体内最重要的抗凋亡机制之一。

肠缺血-再灌流大鼠不同组织TNFα和IL-6 mRNA表达的规律及意义

观察大鼠肠缺血－再灌流过程中小肠、肝、肺组织ＴＮＦα和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达的规律，发现肠缺血１ｈ，小肠ＴＮＦα和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达开始增加，再灌流后０．５～１ｈ表达至峰值，并且与组织及血浆中蛋白水平变化趋势一致；与小肠相比，肝、肺组织ＴＮＦα和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达升高的时相晚，且与血浆ＴＮＦα浓度变化不一致。结果表明，小肠是肠缺血－再灌流后较早产生ＴＮＦα和ＩＬ－６的部位。提示小肠在肠缺血－再灌流后在全身性炎症反应综合征的启动中可能起重要作用；血中ＴＮＦα浓度不能完全反映不同组织ＴＮＦα的含量，组织局部ＴＮＦα的增加可能是介导组织损伤的机制之一。

大鼠肠道缺血再灌注损伤后肠源性细菌内毒素移位的初步研究

目的 观察肠道I R损伤对肠源性细菌 内毒素移位的影响。方法 采用夹闭肠系膜前动脉(时间 6 0min)技术复制肠道I R损伤大鼠模型 :①检测血浆内毒素水平 (鲎试剂定量试验法 )和肿瘤坏死因子(TNFα) ,②肠系膜淋巴结、肝、肺、肾组织匀浆进行细菌培养。结果 研究成功地复制了肠道I R损伤大鼠模型 ,并观察到大鼠肠道I R损伤可引起 :①门、腔静脉血中内毒素水平明显升高 (P均 <0 .0 1) ,门脉血浆内毒素显著高于腔静脉血 (P <0 .0 1) ;②血浆TNFα在再灌注后 3h达峰值 ,明显高于缺血前水平 (P 均 <0 .0 1) ;③肠系膜各组淋巴结及肺、肝、肾组织匀浆均培养出细菌 ,且各组织中的细菌与回、盲肠腔内的优势菌分布相一致。结论 肠道I R损伤可引起小肠、盲结肠的细菌

连二亚硫酸钠致PC12和NG108-15细胞拟缺血损伤研究

目的利用稳定的细胞模型进行药物机制研究，对探讨药物等对缺血的影响十分重要。方法结合形态学和受体功能研究方法，利用连二亚硫酸钠消除培养基中的氧合并培养基质缺糖导致拟缺血细胞，并对其细胞功能和缺血机制进行了探讨。结果这种拟缺血模型造成了体外培养细胞上类似与体内细胞缺血的变化，细胞肿胀变性甚至坏死，细胞膜上兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）的Ｎ甲基Ｄ天冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体活性增强，伴随其他功能性受体如胆碱能（Ｍ、Ｎ）受体活性降低。经ＮＭＤＡ受体特异性拮抗剂———２氨基膦酸基戊酸（ＡＰＶ）作用后，ＮＭＤＡ受体激活明显被抑制，细胞所受缺血损伤也有减轻。同时将ＮＧ细胞与ＰＣ细胞的胆碱能受体活性变化进行了比较，发现ＮＧ活性变化与连二亚硫酸钠剂量变化关系更为稳定。结论提示利用连二亚硫酸钠可模拟体内缺血机制。

细胞色素p450对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响

目的：通过观察细胞色素ｐ４５０抑制剂对大鼠在体心肌缺血／再灌注损伤的影响，了解细胞色素ｐ４５０与心肌缺血／再灌注损伤的关系，并初步分析作用机制。方法：观察给予细胞色素ｐ４５０抑制剂或１１，１２－ＥＥＴ后，大鼠在体心肌缺血／再灌注室性心律失常、心肌梗塞范围及超微结构的变化，及ＴＥＡ与ｇｌｉｂｅｎｃｌａｍｉｄｅ对ＥＥＴｓ作用的影响。结果：细胞色素ｐ４５０抑制剂ｃｌｏｔｒｉｍａｚｏｌｅ（０．９ｍｍｏｌ／Ｌ）和ＳＫＦ５２５Ａ（０．５４ｍｍｏｌ／Ｌ）减轻、而外源性１１，１２－ＥＥＴ加重缺血／再灌注心律失常、心肌梗塞范围及心肌超微结构病变；ＴＥＡ与ｇｌｉｂｅｎｃｌａｍｉｄｅ可拮抗１１，１２－ＥＥＴ的作用。结论：细胞色素ｐ４５０参与了心肌缺血／再灌注损伤；其作用与ＥＥＴｓ释放并开通钙敏感性及ＡＴＰ敏感性钾通道有关。

脊髓缺血再灌流对其血流量变化及其病理改变关系的研究

目的：研究缺血再灌流损伤脊髓血流量的变化及其与脊髓病理改变间的关系。方法：20只成年日本大耳白家兔随机分为对照组、缺血30min组、缺血60min组和缺血90min组，用氢清除法测定脊髓血流量（SCBF），尼氏染色观察受损脊髓病理变化。结果：完全缺血时SCBF为0ml·100g-1·min-1，再灌流过程中各组SCBF较缺血时有不同程度的恢复，但较伤前仍有不同程度的下降，并以缺血60min、90min组下降明显；脊髓病理改变以灰质受损最明显，病变严重程度为缺血90min组＞缺血60min组＞缺血30min组＞对照组。结论；缺血时间越长，再灌流后SCBF下降越明显，病理损害也越重。

9602方对脑缺血再灌小鼠脑能量代谢的影响

目的 :观察 96 0 2方对脑缺血再灌小鼠脑能量代谢的影响。方法 :复制小鼠脑缺血再灌损伤模型 ,应用核磁共振 (NMR)技术和高效液相色谱 (HPLC)仪 ,检测小鼠脑能量代谢的变化。结果 :①NMR波谱显示 ,对照组和“96 0 2”组缺血 10min时 ,磷酸肌酸 (PCr)峰显著性下降的同时无机磷 (Pi)峰显著性上升 ,两组的PCr和Pi改变基本一致。不同之处在于 :再灌后对照组小鼠PCr继续缓慢下降 ,至再灌 10min时维持在低水平(5 5 5 0± 14 94) ;而“96 0 2”组再灌后 ,缺血时下降的PCr峰则开始回升 ,至再灌 10min时为 76 72± 13 37,两组相比有显著性差异 (P <0 0 5 )。再灌后对照组Pi峰则持续上升 ,至再灌 10min时为 10 9 76± 5 5 41;而“96 0 2”组在缺血时已升高的Pi峰则回降 ,至再灌 10min时为 79 99± 30 2 8,但两组相比无统计学意义。在整个低血压缺血再灌全过程中 ,ATP的 3个峰 (α、β、γ)均无明显变化。②HPLC仪检测显示 ,“96 0 2”组脑细胞能荷值 (0 2 884±0 0 5 5 2 )明显高于对照组 (0 110 4± 0 0 34 3) ,P <0 0 1。结论 :96 0 2方能改善脑缺血再灌所诱导的细胞和组织能量代谢的障碍。

大鼠局灶脑缺血再灌注模型的研究

对尼龙线栓塞大鼠大脑中动脉的局部脑缺血再灌注模型进行研究。观察了大鼠脑缺血不同时间再灌注的成功率、脑水肿、神经病学评分及血流量（ｒＣＢＦ）的动态变化。结果如下：（１）改进实验方法后，使大鼠脑缺血不同时间再灌注的成功率明显提高；（２）脑缺血后早期再灌注，可显著降低脑水肿，改善神经损伤症状；（３）大鼠脑缺血期ｒＣＢＦ降至正常值的１５．７％～１９．１％。再灌后，ｒＣＢＦ恢复至正常值的５９．４％～８４．９％。

内皮素抗体在大鼠肾缺血/再灌注损伤中的作用

目的和方法：为探讨内皮素在肾缺血／再灌注损伤中的发病学意义，本实验在大鼠肾缺血／再灌注损伤模型上，观察了内皮素抗体对肾缺血／再灌注损伤的作用。结果：肾缺血／再灌注损伤大鼠，血清尿素氮（ＳＵＮ）、肌酐（ＳＣｒ）含量及血浆内皮素（ＰＥＴ）水平显著升高；脂质过氧化物丙二醛（ＭＤＡ）产生增多；肾小管上皮细胞明显损伤。应用内皮素单克隆抗体能显著降低ＰＥＴ水平和ＭＤＡ含量，减轻肾小管上皮细胞损伤，改善肾功能。结论：内皮素是参与肾缺血／再灌注损伤发病的重要因素之一，阻断ＥＴ的生物学作用是防治肾缺血／再灌注损伤的有效途径。

缺血性脑卒中康复结局ADL能力及其影响因素的Logistic回归分析

目的分析缺血性脑卒中患者康复结局ADL能力的影响因素,为临床康复和预后判断提供一些客观指标及最佳治疗方案,指导康复治疗工作。方法选取2012年10月-2014年10月治疗和康复出院的缺血性脑卒中患者178例,采用回顾性分析方法,将研究对象的康复结局影响因素分为Ⅰ类不可干预影响因素(性别、年龄、偏瘫侧、类型、病变部位、医疗费用来源、文化程度),Ⅱ类可干预影响因素(康复治疗开始时间、疗程、患者对脑卒中认识、康复的愿望或主动性、康复治疗方法是否规范),Ⅲ类并发症影响因素(肩手综合征、肩痛、肩关节半脱位、心理障碍、言语障碍、认知障碍、下肢深静脉血栓)和Ⅳ类基础疾病的控制质量影响因素(卒中史、高血压、高血脂、高血糖、肥胖)四个类别,使用改良的Barthel指数评分(MBI≥60,MBI<60),判断患者ADL独立程度,并逐项分类统计后,采用二分类的Logistic多因素回归分析。结果缺血性脑卒中患者康复结局的ADL能力MBI评分与病变的类型、部位、康复治疗开展持续时间、患者对康复的愿望或主动性等有关,并受患者的年龄、医保费用来源、并发症、基础疾病控制质量等因素影响。结论早期重视缺血性脑卒中康复结局影响的关键因素,可有效预防不良因素影响,并为患者提供最佳康复治疗方案,提高日常生活活动自理能力。

大鼠局灶性脑缺血后─氧化氮合酶活性与细胞凋亡关系

目的：了解局灶性脑缺血再灌注过程中一氧化氮合酶（ＮＯＳ ）变化与脑细胞凋亡的关系，探索阻断脑细胞凋亡的时间窗。方法：用线栓 法建立局灶性脑缺血模型，大脑中动脉阻塞（ＭＣＡＯ）的时间分别为１５、３０、６０、９０、１２０ ｍｉｎ ，再灌注２４ ｈ。用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶（ＮＡＤＰＨ－ｄ）组化法，检测局灶性脑 缺血再灌注后缺血中心区（顶叶皮层和尾壳核）ＮＯＳ活性变化。用苏木精－伊红和ＴＵＮＥＬ染色法 检测缺血中心区脑细胞凋亡情况。结果：ＮＯＳ阳性神经元数于３０ ｍｉｎ时增多 最显著，９０～１２０ ｍｉｎ时急剧减少。各组凋亡细胞数随缺血时间延长而增多。结 论：局灶性脑缺血再灌注过程中神经型ＮＯＳ（ｎＮＯＳ）对缺血早期的脑损伤尤其是细胞 凋亡起主要作用。

石决牡蛎汤通过p38MAPK通路改善自发性高血压大鼠血管重构的机制研究

【目的】探讨石决牡蛎汤通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路改善自发性高血压大鼠(SHR)血管重构的作用。【方法】将40只16周龄自发性高血压大鼠随机分为模型对照组,石决牡蛎汤高、中、低剂量组,卡托普利组,每组8只;将8只Wistar-Kyoto大鼠设为正常对照组。治疗8周后,采用苏木精—伊红(HE)染色法观察胸主动脉形态,光镜下采用计算机图像分析系统测量血管内膜中层厚度(IMT)、管腔直径(LD),酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中内皮素-1(ET-1)水平,硝酸还原酶法测定血清中一氧化氮(NO)水平,免疫组织化学法检测磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)在胸主动脉组织中的表达水平。【结果】与模型对照组比较,石决牡蛎汤中、高剂量组及卡托普利组收缩压和舒张压、ET-1水平均显著降低,NO水平增高,中药高剂量组及卡托普利组IMT、IMT/LD值显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,石决牡蛎汤中、高剂量组及卡托普利组能较显著抑制p-p38MAPK在胸主动脉的表达。【结论】石决牡蛎汤可能通过抑制p38MAPK信号通路、调节ET/NO系统改善自发性高血压大鼠血管重构。