肉芽肿性乳腺炎样本中检出克罗彭施特棒状杆菌1例报道

棒状杆菌属有81个菌种和亚种,除白喉棒状杆菌外,多为人类皮肤的正常菌群。肉芽肿性乳腺炎是一种少见的乳腺良性肉芽肿性病变,常发现于经产育龄期女性[1]。有研究结果显示,棒状杆菌感染可能与肉芽肿性乳腺炎的发病机制密切相关[2]。本研究报道1例由克罗彭施特棒状杆菌引起的肉芽肿性乳腺炎病例,以提高临床和微生物实验室对棒状杆菌引起的此类感染的认识。

山东省一起皮肤炭疽疫情来源炭疽芽胞杆菌的分子分型及基因溯源分析

目的对一起皮肤炭疽暴发疫情来源炭疽芽胞杆菌开展分子分型及基因溯源分析,为炭疽的有效防控提供重要的基础性数据。方法本研究对2021年山东省曹县一起炭疽疫情样本中分离的8株炭疽芽胞杆菌进行药物敏感性实验、MLVA-15和canSNP分型、全基因组测序(WGS)和SNPs分析。结果药敏结果显示,所有分离株耐药性一致。8株菌MLVA-15分型为同一基因型,该基因型在国内首次发现,命名为MLVA15-CHN77型;canSNP分型均为A.Br.001/002型。WGS结果分析显示,8株菌具有相同的耐药基因和毒力基因谱。SNPs分析显示,8株暴发菌株聚成一簇。结论基于全基因组序列的分型和溯源策略,是炭疽芽胞杆菌传统分型方法的必要补充。

不同佐剂对重组鲍曼不动杆菌PKF的免疫效果研究

目的比较不同免疫方式、不同佐剂对重组鲍曼不动杆菌PKF的免疫效果。方法构建重组质粒,经诱导表达纯化获得重组PKF,分别联合氢氧化铝、AS03肌注(intramuscular,im)免疫以及LTK63、LP1-34滴鼻(intranasally,in)免疫小鼠,共分为7组:PBS组;肌注免疫组:PKF(im)组、PKF+Al(im)组、PKF+AS03(im)组;滴鼻免疫组:PKF(in)组、PKF+LTK63(in)组、PKF+LP1-34(in)组。ELISA检测免疫后小鼠血清中特异性IgG以及黏膜部位sIgA的水平;构建鲍曼不动杆菌肺部感染亚致死模型,测定攻毒后小鼠血液和肺部细菌定植量,评价疫苗保护作用。结果肌注免疫组中,AS03辅助PKF诱导最高的特异性IgG抗体水平(P<0.01);滴鼻免疫组中,LTK63显著提升肺泡灌洗液中特异性sIgA水平(P<0.01);攻毒后细菌定植量检测结果显示,PKF+AS03肌注组细菌定植量与单用PKF组相当,而滴鼻组中LTK63可以显著降低细菌定植量(P<0.01)。结论LTK63可以辅助PKF更好地发挥对鲍曼不动杆菌肺部感染的保护作用,表明疫苗介导的黏膜免疫应答对保护感染可能更加重要。

陕西省一起炭疽暴发疫情的调查处置及病原学分析

目的分析陕西省甘泉县炭疽暴发流行病学特征,提出控制措施。方法对甘泉县炭疽暴发开展流行病学调查,收集暴发地区历史疫情资料,采集病例标本及环境样本开展实验室检测,对炭疽病例个案资料进行统计学分析,描述病例三间分布,分析影响暴发流行的自然因素与社会因素。结果甘泉县炭疽疫情暴发系一次同源感染的多点暴发,共计19例病例,以青壮年为主,分子分型为MLVA15-31基因型。结论及时发现疫情,采取扑杀病畜、隔离治疗病人、环境消毒等综合措施是快速扑灭炭疽疫情的关键。

畜舍环境中魏氏梭菌分离及基因型鉴定

目的从山东省泰安、青岛等地6个市的2个牛舍、4个猪舍、5个兔舍空气及畜舍动物粪便中分离魏氏梭菌,从空气中分离到66株,从畜舍粪便中分离到70株,通过多重聚合酶链反应(multi-PCR)对分离到的魏氏梭菌进行型别的鉴定,结果发现:分离到的魏氏梭菌均为A型。

应用Taq Man荧光PCR定性定量检测炭疽芽孢杆菌

目的 发展一种快速、敏感、特异的检测炭疽芽孢杆菌的方法。方法 应用基于TaqMan荧光探针的实时(real time)PCR技术,针对致病炭疽毒株的两个质粒pXO1、pXO2上的pagA ,cap基因和染色体上的ropB基因设计引物和探针定性、定量检测炭疽芽孢杆菌。构造并应用上述探针的外标对照及pagA的内标对照,采用多重荧光定量PCR技术建立荧光定量方法并发现假阴性;采用UDG抗污染和ROX矫正背景噪音,提高检验能力;用该方法检测炭疽芽孢杆菌疫苗株感染的动物脾脏标本,盲法评价该方法在实际工作的应用。结论 该方法能特异、灵敏、高效地检测炭疽芽孢杆菌,该方法的推广和应用对有效防范炭疽生物恐怖袭击、提高突发事件应对能力、快速诊断具有重要意义。

荧光定量PCR快速检测炭疽芽孢杆菌的实验研究

目的利用LightCycler建立一种简便、特异的实时荧光定量PCR检测方法,用于炭疽芽孢杆菌的快速检测。方法采用SYBR GreenⅠ随机掺入法,利用本实验室建立的实时荧光定量PCR反应体系,根据炭疽芽孢杆菌荚膜和水肿因子设计引物,同时检测两个毒力相关质粒的存在,检测其灵敏度和特异性,并以盲测试验进行验证;在此基础上鉴定14株炭疽芽孢杆菌,并测试该法检测土壤模拟污染标本的灵敏度,实验中设置内对照以排除假阴性结果的存在。结果炭疽杆菌基因组DNA的检测灵敏度可达每反应体系0.53pg,两个克隆株提取质粒的检测限分别为每反应体系12拷贝、140拷贝;检测14株炭疽芽孢杆菌及29株非炭疽芽孢杆菌的PCR扩增结果表明,炭疽芽孢菌DNA均出现特异的扩增结果,29株对照菌的DNA均为阴性;土壤模拟污染标本检测灵敏度可达每反应体系36个芽孢;20次重复实验结果表明其平均值与标准差为14.602±0.640。结论该方法检测炭疽芽孢杆菌具有简便、快捷、灵敏度高和特异性好的特点,为临床诊断、环境监测、卫生防疫等方面,快速检出炭疽芽孢杆菌提供了有利的手段。

应用荧光PCR检测土壤、脏器中的炭疽芽孢杆菌

目的用荧光定量PCR方法检测土壤、动物脏器和血液中炭疽芽孢杆菌,评价并优选目标核酸纯化方法。方法采用TaqMan荧光定量PCR技术,以炭疽芽孢杆菌pagA、rpoB2引物探针和相应外标、内标为手段,比较4种从土壤中检测炭疽菌及3种从感染脏器及血液中检测炭疽菌的方法,探讨环境和组织样品中抑制因素对荧光定量PCR检测的影响,优选并确定纯化检验手段。结果应用NaI裂解glassmilk纯化炭疽菌核酸并用荧光定量PCR检验,检出底限为2·5万拷贝/g土壤(pagA),从血液样本的检出限为1000拷贝/ml。结论荧光定量PCR技术和NaI裂解glassmilk纯化制备模板的联合应用可灵敏、特异地从土壤、血液中检测炭疽芽孢杆菌。

凝结芽胞杆菌(TBC169)片治疗便秘的实验研究和临床疗效

目的观察凝结芽胞杆菌片（BC1）对便秘的药理作用和I临床疗效。方法昆明种雄性小鼠随机分为6组（每组10只）。BC1片（3个剂量）和BCz片治疗组小鼠口服BC。片和BC2片，空白对照组小鼠和模型对照组小鼠口服自来水，每天1次，共7d。之后，两治疗组和模型对照组小鼠在禁食12h后．均口服复方地芬诺酯（CDX）片，引发便秘。成人慢性便秘38例患者随机分为治疗组（20例）和对照组（18例），分别口服BC1片和金双歧片（BG），每天3次，共14～21d。结果BC1片能明显地减少便秘小鼠的首次排便时间（P〈0．05）和显著地增加大便粒数及重量（P〈0．05）。在临床试验中，治疗成人慢性便秘，BC1片的治愈率为45％，总有效率为70％，而相对的BG片分别为44％和72％，两药均未见不良反应或副作用。结论BC1片对小鼠实验性便秘和成人慢性便秘均有明显的治疗作用，在临床试验中未见不良反应或副作用。

一起皮肤炭疽疫情病原的实验室检测及毒力基因鉴定

目的对2012年江苏省连云港市赣榆县一起皮肤炭疽疫情的病人临床标本及病牛肉标本进行快速分子诊断及毒力基因的鉴定。方法用Real-time PCR方法对病人的血、焦痂标本及病牛肉标本进行炭疽杆菌染色体编码的rpoB基因及质粒PXO1、PXO2上pag、capA基因的检测,并对质粒上4种毒力基因(cya,pag,lef,cap)进行扩增并测序。结果病人焦痂标本和病牛肉标本中均检测出rpoB基因和质粒PXO1、PXO2基因,4种毒力基因的测序结果证实扩增序列为炭疽杆菌质粒基因片段,病人标本与病牛肉标本的基因序列完全一致。结论实验室检测结果证实此次皮肤炭疽疫情是由当地村民宰杀携带炭疽杆菌强毒株的病牛引起。

芽孢杆菌的系统进化及其属分类学特征

传统的芽孢杆菌鉴定主要是根据表型特征,在《芽孢杆菌文献研究》列出了芽孢杆菌属的244个种。随着分类研究方法的发展,尤其是多相分类法的应用,芽孢杆菌属的分类发生了很大的变化,有很多种从芽孢杆菌属中分化出来另建新属。本文主要以《伯杰氏系统细菌学手册》第2版为依据,阐述产芽孢的芽孢杆菌的分化、确立依据及其模式菌株的主要特征。根据产芽孢与否、16S rRNA等的特征,芽孢杆菌分化出22个属,其中位于芽孢杆菌科的属有15个,位于非芽孢杆菌科的属有7个。此外还有13个只是在命名书写上和芽孢杆菌Bacillus相似。

纳豆芽胞杆菌16S rRNA基因的克隆及其系统进化分析

纳豆芽胞杆菌是从豆豉中分离出的一种具有益生功能的芽胞杆菌。该研究从纳豆芽胞杆菌提取基因组DNA,以芽胞杆菌16S rRNA基因的通用引物,用PCR方法成功扩增出纳豆芽胞杆菌的部分16S rRNA基因,所克隆序列长1 435 bp,G+C含量为55%,该序列已被G eneB ank收录,其编号为AY 864812。BLA ST分析结果显示,AY 864812与G eneB ank中收录的枯草芽胞杆菌16S rRNA基因同源性最高,其中与AY 601722的同源性为100%。用C lusta lx 1.8对相关序列进行系统进化分析,结果显示纳豆芽胞杆菌与枯草芽胞杆菌在进化关系上的地位最近,从分子水平上证实了纳豆芽胞杆菌是枯草杆菌的1个亚种。

2012-2015年贵州省炭疽芽胞杆菌分离鉴定及MLVA分型分析

目的了解菌株的分子流行病学特征,为贵州省炭疽疫情的预防控制提供科学依据。方法对2012-2015年贵州省间不同地区的409份标本(外环境388份、患者19份和牲畜2份)进行炭疽芽胞杆菌分离培养,采用革兰染色镜检、青霉素抑制试验和噬菌体裂解试验对可疑炭疽菌落进行鉴定,分析菌株检出情况。运用MLVA-15技术对炭疽芽胞杆菌分离株进行基因分型获得各VNTR位点的扩增长度并计算重复单元的重复数目。结合各VNTR位点重复数目,利用NTsys 2.10e软件对不同地区菌株进行聚类分析。结果从409份标本中分离出34株炭疽芽胞杆菌,检出率为8.31%。其中341份土壤检出33株,检出率为9.68%;17份患者皮肤病灶渗出液检出1株,检出率为5.88%。2015年分离出炭疽杆菌的阳性率最高,占48.72%(19/39)。MLVA-15分析显示,34株菌株被分为3个MLVA型;聚类分析显示,34株菌株被分为A和B两簇,其中A簇又被进一步分为A1和A2分支。来自相同地区或年份的多数菌株聚类关系相对较近。结论 2012-2015年贵州省间各种疑似炭疽送检标本中,土壤的检出阳性率最高,贵州省炭疽芽胞杆菌菌株具有MLVA型别多样性,型别分布和聚类关系具有明显的地域性。

内蒙古炭疽芽胞杆菌多位点串联重复序列分型分析

炭疽芽胞杆菌是引起人和动物炭疽的病原菌,牛、羊等食草动物为主要传染源,人类主要通过接触炭疽病畜毛皮和食肉而感染,也可以通过吸入含有炭疽芽孢的粉尘或气溶胶而感染.我国炭疽自然疫源地分布广泛,炭疽病例时有发生.内蒙古地区是主要的炭疽自然疫源地,每年都有病例发生.炭疽杆菌是一种相对保守的细菌,很多基因分型方法都不能对其分型,Keim等[1]首次将MLVA8方法用于炭疽芽抱杆菌基因分子分型中,其选择6个染色体上VNTR多态性位点和2个质粒上VNTR多态性位点联合建立了MLVA8分析方法,是比较有效的区别不同炭疽芽胞杆菌的方法.

短芽孢杆菌属菌株几丁质酶分离纯化及其抗真菌活性的初步测定

以本室筛选的海洋产几丁质酶短芽孢杆菌属（Bacillus brevis sp）菌株Bspl，经往复式摇床振荡培养96h后，发酵液先后采取75％的硫酸铵盐析、透析、几丁质亲和层析和SDS-PAGE等方法对几丁质粗酶液进行分离纯化和鉴定。几丁质亲和层析一步纯化后，经过SDS-PAGE电泳测定该酶的分子量为22．8ku，其比活力为86．65，纯化倍数为1．707，产率为32．1％。纯化的几丁质酶能抑制病原真菌的生长，对病原真菌的拮抗作用具有广谱性，

地衣芽胞杆菌对实验性家兔阴道炎影响的研究

目的通过探讨地衣芽胞杆菌活菌制剂对实验性家兔细菌性阴道病的影响,恢复家兔阴道微生态平衡和正常菌群环境。方法(1)采用注射用氨苄西林和甲硝唑生理盐水溶液注入家兔阴道进行冲洗,建立家兔阴道脱污染动物模型。(2)取40只阴道脱污染家兔,其中20只接种大肠埃希菌,20只接种金黄色葡萄球菌,建立家兔阴道感染模型。(3)地衣芽胞杆菌对家兔阴道菌群失调的调整作用:采用不同浓度的地衣芽胞杆菌菌液(106CFU/m l、108CFU/m l、109CFU/m l)对感染家兔阴道进行接种,分析和考察地衣芽胞杆菌对家兔阴道菌群失调的影响以及对家兔阴道黏膜的影响。结果(1)动物经过金黄色葡萄球菌感染,通过地衣芽胞杆菌治疗后,动物阴道内芽胞杆菌、肠杆菌、乳杆菌数量明显上升,葡萄球菌数量明显下降,白细胞数量减少,黏膜红肿减轻、分泌物减少,治疗作用明显。(2)大肠埃希菌感染动物经地衣芽胞杆菌治疗后,动物阴道内芽胞杆菌、乳杆菌数量明显上升,肠杆菌数量明显降低,白细胞数量减少,黏膜红肿消失、分泌物减少。结论地衣芽胞杆菌对实验性家兔金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌阴道炎的治疗有效。地衣芽胞杆菌与乳杆菌的作用相似,具有维持阴道菌群平衡的作用。

2010-2019年云南省人间炭疽流行特征分析

目的分析2010-2019年云南省人间炭疽流行病学特征,为防控工作提供科学指导。方法运用描述性流行病学方法对2010-2019年云南省人间炭疽监测数据进行分析。结果全省10年共报告炭疽病例94例,其中皮肤炭疽93例,占总数的98.94%,未分型1例;炭疽全年均有发病,发病呈现明显季节性分布特点,主要集中在5~10月(80例,占85.10%);从性别构成比上看,男性70例,女性24例,男女发病比例为2.9∶1;炭疽病例最小发病年龄为1岁,最大发病年龄为92岁,以30~59岁发病最多(70例,占74.47%)。职业以农民发病最多(85例,占90.43%)。全省报告炭疽病例分布在8个州(市)的15个县(区),其中楚雄州报告病例数最多,其次昆明市、昭通市、文山州丽江市、大理州,主要疫区县为元谋县、鲁甸县、永胜县、禄劝县。结论云南省炭疽疫情稳中有降,发病呈现老疫区反复不断.农民为最主要的感染人群,需加强健康教育宣传,以提高对炭疽的防病能力。继续加强畜牧兽医部门与卫生部门的合作,联合进行疫情的规范化处置。

2018-2019年宁夏皮肤炭疽流行特征及实验室检出情况分析

目的了解2018-2019年宁夏皮肤炭疽疫情的流行特征及炭疽芽胞杆菌检出情况,为宁夏皮肤炭疽防控工作提供科学依据。方法使用描述性流行病学方法分析2018-2019年宁夏皮肤炭疽疫情的三间分布规律,采集疑似病例样本进行炭疽芽胞杆菌分离培养及Real-time PCR检测。结果2018-2019年共报告皮肤炭疽病例45例,时间集中在8月份(占57.78%),分布在11个县区(占50.00%),职业以农民为主(占58.00%)。对人体标本病原培养70份,共分离到炭疽芽胞杆菌12株,总检出率为17.14%;Real-time PCR检出率为64.29%,在患者使用抗生素前采样的标本分离率(64.29%)明显高于患者使用抗生素后采样的标本分离率(10.71%)。结论宁夏皮肤炭疽疫源地面积较广,处于较低散发水平,炭疽芽胞杆菌检出率较低,使用抗生素前采样检出率明显高于使用抗生素后,Real-time PCR可用于炭疽芽胞杆菌的辅助诊断。

两起炭疽突发疫情中炭疽芽孢杆菌的分离鉴定

目的 2008年青海省牧区发生2起牧民宰杀病死牛引起的疑似炭疽疫情,采集样品做炭疽杆菌分离鉴定。方法以生化、噬菌体裂解、青霉素敏感等实验对采集的患者标本、动物标本、环境标本的纯培养菌株进行鉴定。结果 2起疫情均从动物标本中检出炭疽芽孢杆菌。结论疫情中炭疽杆菌的检出率同实验室检测技术、送检标本的质量和及时性有密切关系。