我国中药药物警戒的历史沿革与发展现状分析

目的:对我国中药药物警戒工作进行全面总结,梳理发展中存在的问题并提出解决思路,以期为建立符合中药特点的药物警戒体系、提高中药安全用药水平提供参考。方法:通过梳理中药药物警戒历史发展情况与现状,分析近年来应用在中药药物警戒的新技术,讨论中药药物警戒发展中存在的问题,从中药安全性研究、中药质量评价、临床警戒体系建设等方面提出解决思路。结果与结论:目前我国中药药物警戒在实际工作中还存在缺乏中药上市后安全性研究指导原则、质量评价体系及医疗机构中药药物警戒体系尚不完善等问题,需要监管部门、医疗机构和中药生产企业等各方的共同努力,加快中药安全性研究指导文件出台和医疗机构中药药物警戒体系的完善、加强中药质量评价体系和药物警戒监管科学的研究、落实中药饮片生产企业的责任等,协同推进中药药物警戒体系建设。

纳豆激酶的体外溶栓作用研究

目的探讨纳豆激酶(NK)的体外溶栓效果,筛选高产NK的优质菌株。方法采用改良纤维蛋白原平板法,取不同菌株(1、3、6、8、10、11、12、13号)纳豆枯草杆菌发酵大豆,观察其发酵液、粗酶液体外6、18、24 h溶解纤维蛋白原的效果(测定不同时间的溶圈直径),并与标准尿激酶(UK)的溶栓效果比较。结果发酵液和粗酶液均有溶栓作用,作用6、18 h 3、6、8号菌株的发酵液及粗酶液18 h的溶栓作用强于尿激酶,尤其是6号菌株。结论NK 3、6、8号菌株体外溶栓作用确切;6号菌株产生的NK酶量多,且溶栓能力强、作用时间相对较长,属优质高产菌株。

高效液相色谱法测定健康受试者血浆中吡罗昔康的药动学研究

目的：建立吡罗昔康血药浓度的高效液相色谱(HPLC)测定法,进行人体药动学研究。方法：采用HPLC法,测定16名健康受试者口服安吡昔康后血浆中吡罗昔康浓度。结果：口服受试制剂(单剂量含安吡昔康13．5 mg,27 mg,多剂量13．5 mg,qd×10 d)后,估算的吡罗昔康的药动学参数t_(1/2)β分别为(59±s5),(59±9),(59±6)h；t_(max)分别为(4．8±1．5),(4．3±1．3),(4．4±0．7)h；c_(max)分别为(1．20±0．20),(2．4±0．3),(5．0±0．6)mg·L^(-1)；V1/F分别为(10±3),(10±4),(11±3)L；V/F分别为(12±3),(12±3),(13±3)L；AUC_(0-(?))分别为(93±11),(223±40),(122±23)mg·h·L^(-1)；MRT_(?)为(65±6),(68±8),(69±9)h。结论：本方法结果准确,灵敏度高,吡罗昔康在大部分人体内的过程符合二室开放模型,其主要药动学参数与国内外文献报道数据一致。

铂类抗肿瘤药物的研究进展

目的综述铂类抗肿瘤药物的作用机制及新型铂类抗肿瘤药物的设计策略。方法查阅国内外近10年相关文献,对其进行归纳、总结,从铂类抗肿瘤药物的研究概况、作用机制及新型药物的设计策略几方面进行了介绍。结果铂类药物在抗肿瘤领域发挥着重要作用,为解决现有药物存在的耐药性、组织毒性等缺点,靶向给药、Pt(Ⅳ)模式前药、单功能团铂类抗肿瘤药物等更先进的设计策略越来越受到重视。结论铂类药物及新型铂类药物仍是抗肿瘤药物的研究热点,值得进一步研究开发。

葛根素的研究进展

通过分析、概括近年来关于葛根素的实验及临床研究的相关文献,就葛根素在心脑血管方面的研究进展进行阐述,旨在指导临床应用及实验研究。

金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药机制的初步研究

目的了解金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药机制。方法按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准,应用琼脂平板稀释法及MRSA特异性基因mecA的扩增鉴定MRSA,诱导产生万古霉素耐药株,然后以超声破碎法提取外膜蛋白(OMP),经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析OMP的成分,分光光度法扫描仪测定相关膜蛋白的相对含量。结果耐万古霉素金葡菌菌株中,分子量为45KD和14KD的膜蛋白的相对含量较金葡菌ATCC25923株和对万古霉素敏感的MRSA少。结论提示45KD和14KD膜蛋白减少或缺失与金葡菌对万古霉素耐药可能有密切关系。

重组别藻蓝蛋白(rAPC)的纯化与鉴定

报道了重组大肠杆菌表达的别藻蓝蛋白的下游生产工艺研究,并对产物进行了分析鉴定。工程菌株P1先在NBSBioFlo3000型5L自动发酵罐进行高密度发酵,融合蛋白获得了高效表达,且主要在细胞内以可溶形式存在。纯化前先将获得的菌体超声破碎,然后经硫酸铵沉淀、疏水层析和离子交换层析三步纯化,接着对纯化的重组别藻蓝蛋白(rAPC)进行SDS-PAGE、PAGE、Westernblot等电点分析。证明已获得纯度为96.4%的rAPC,其等电点为6.0,并且具有与天然APC相似的抗原性。

端粒保护蛋白过表达对HeLa细胞染色体端-端融合和端粒酶活性的影响

目的观察人端粒保护蛋白1(human protection of telom eres 1,hPOT1)基因过表达对HeLa细胞染色体端-端融合和端粒酶活性的影响。方法利用先前构建的hPOT1基因真核表达重组质粒pcDNA3-hPOT1,经脂质体介导瞬时转染HeLa细胞介导hPOT1基因过表达;秋水仙碱阻滞细胞周期于分裂中期,DAPI荧光染色分析染色体端-端融合;Telom erase PCR-ELISA试剂盒检测端粒酶活性。结果pcDNA3-hPOT1重组质粒转染HeLa细胞5 d后,染色体端-端融合几率增加,对端粒酶活性无明显影响。结论提示hPOT1蛋白可导致染色体端-端融合。

2001-2004年细菌耐药性监测及分析

目的了解我院乃至包头地区常见病原菌耐药情况,探讨2001～2004年细菌耐药及4年间耐药菌的变迁,为临床合理使用抗菌药物提供依据. 方法收集4年间我院临床标本分离病原菌及其药敏资料,用WHONET5.1软件进行统计分析. 结果共收集病原菌2 127株,分离率居前9位者分别为大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍氏不动杆菌、表皮葡萄球菌、阴沟肠杆菌、肠球菌属、金黄色葡萄球菌、弗氏柠檬酸杆菌,其中革兰阳性球菌 497株,占23.4%,革兰阴性杆菌1 630株,占76.6%;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)分别占68.2%和85.6%,未发现万古霉素耐药株;大肠埃希菌和克雷伯菌属产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率分别为24.4%和22.7%;鲍氏不动杆菌对第三代头孢菌素和亚胺培南的耐药率分别接近50%和16%,而喹诺酮类敏感率则＞70%;铜绿假单胞菌对头孢他啶和亚胺培南的耐药率达21.3%和13.4%. 结论本院常见病原菌耐药严重,临床应重视细菌学检查和耐药性资料的获得,合理使用抗菌药物,遏制抗菌药物的滥用.

北虫草体外抗病毒、抗肿瘤活性部位的筛选

目的:采用系统溶剂法对北虫草子实体提取分离,并对各提取部位进行抗病毒和抗肿瘤活性研究。方法:采用CPE法进行体外抗病毒(抗流感甲型病毒和抗疱疹病毒)实验,按Reed-Muench法计算各提取部位的药物半数有毒质量浓度(TC50)、半数抑制浓度(IC50)和选择指数(SI),观察各提取部位的抗病毒活性;用Alamar Blue法,采用体外肿瘤细胞株K562和MCF-7的增殖抑制实验模型,研究北虫草子实体的抗肿瘤活性。结果:抗病毒实验结果表明,氯仿相(CMCl)具有抗疱疹病毒HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ的活性,CMCl对HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ病毒的半数抑制质量浓度(IC50)分别为194.01μg/mL和173.34μg/mL,选择指数(SI)分别为:>1.29和>1.44;3个部位均没有抗流感甲型病毒活性。抗肿瘤实验结果表明,北虫草3个部位提取物,在中、高质量浓度(50、200μg/mL)时,对抑制K562的增殖都有一定的活性,活性高低为:乙醇相(CMEtOH)>氯仿相(CMCl)>乙酸乙酯相(CMEtOAc);3个部位相比较,仅CMCl对人乳腺癌细胞株MCF-7具有抑制活性,在10、50、200μg/mL的抑制率分别为(9.6±3.0)%、(46.1±8.9)%和(68.5±9.2)%,呈现明显的质量浓度依赖性。结论:在北虫草3个部位中,CMCl是抗肿瘤和抗病毒活性较高的活性部位,值得进一步开发利用。

v-Src蛋白在大肠杆菌中的高效表达、纯化及其活性分析

目的表达高纯度具有激酶活性的Src蛋白,为抗肿瘤药物研究提供蛋白质靶标。方法利用高效表达质粒pGEX-KT克隆v-src全基因,诱导表达得到的GST-Src融合蛋白经GlutationeSepharose4B亲和层析柱纯化后,采用Westernblotting和以polyGlu:Try(4:1)为底物的ELISA法鉴定其免疫原性和酪氨酸激酶活性。结果GST-Src蛋白表达量约占菌体总蛋白的30%,其中包涵体与可溶性蛋白的表达量分别约13.5和2mg·L-1,纯度分别约98%和85%,比活约1.13和0.62nmol·min-1·mg-1。结论本法表达的GST-Src融合蛋白表达量高、纯化效果好,且具有较高的激酶比活。

超声引导下细针穿刺联合液基细胞学检查对甲状腺微小结节的诊断价值

目的:探讨超声引导下细针穿刺联合液基细胞学检查(LCT)对甲状腺微小结节的诊断价值。方法:回顾性分析62例(62个)甲状腺微小结节在超声引导下细针穿刺联合液基细胞学检查病例的资料。结果:传统制片法标本满意率85.5%,结节阳性率43.5%,正确率85.2%,假阳性率14.8%。LCT制片法标本满意率96.8%,结节阳性率50.0%,准确率87.1%,假阳性率12.9%。结论:超声引导下细针穿刺甲状腺结节联合LCT能显著提高标本满意率、结节阳性率及准确率,具有临床应用价值。

外源脂肪酸及胆固醇对莱氏衣原体膜糖脂含量的影响

单葡萄糖甘油二酯(MGDG)和双葡萄糖甘油二酯(DGDG)是莱氏衣原体膜上主要的极性脂。糖脂的生理功能过去很少研究,至今仍不清楚。近年来实验结果表明,MGDG在膜上容易形成六角形Ⅱ结构,而DGDG则形成脂双层结构。六角形Ⅱ结构的出现与生物膜的生理功能的关系是当前瞩目的研究内容。本文首次研究了外源脂肪酸和胆固酵对莱氏衣原体AIH089菌株膜上糖脂含量的影响。

链霉菌Streptomyces rosealbus次级代谢产物的分离和鉴定

目的研究三七根际土壤链霉菌Streptomyces rosealbus的次级代谢产物,以了解其次级代谢物结构多样性,为生物活性筛选提供单体化合物。方法利用MCI柱色谱、凝胶柱色谱、ODS柱色谱、半制备高效液相色谱、制备薄层色谱等手段进行分离,利用理化性质及波谱学数据并结合相关文献对所得化合物结构进行鉴定。结果从Streptomyces rosealbus发酵液的乙酸乙酯萃取物中分离得到6个化合物,分别鉴定为angucylone (1)、gephyromycin (2)、dehydrorabelomycin (3)、dehydroxyaquayamycin (4)、galtamycinone (5)、quanolironⅠ(6)。结论化合物1-6均为芳香聚酮类化合物,且首次从链霉菌Streptomyces rosealbus的次级代谢产物中分离得到,化合物1为新化合物。

陕西省医疗机构抗肿瘤药品短缺现状分析

目的调查陕西省医疗机构抗肿瘤药品短缺情况,为解决该类药品短缺问题提供参考。方法采用问卷调查法对陕西省各地市医疗机构抗肿瘤短缺药品现状进行分析,主要包括抗肿瘤药品短缺品种和短缺原因等。结果存在短缺现象的抗肿瘤药品有24种,其中短缺最严重的有4种,短缺频次由高到低依次为:丝裂霉素、平阳霉素、氟尿嘧啶和长春新碱;在短缺品种中,至少有27家医疗机构反映丝裂霉素的短缺现象较突出,有10家医疗机构反映平阳霉素存在短缺现象。结论陕西省医疗机构抗肿瘤药品短缺现象较严重。政府部门应发挥政策引导作用,干预原材料市场价格波动,鼓励更多企业投入生产或开发更多可替代药品。

记忆门诊痴呆患者服用中药依从性的调查分析

目的探讨影响痴呆患者服用中药依从性的因素。方法对东直门医院记忆门诊1 315例患者的临床资料进行回顾分析,使用logistic回归分析影响患者服用中药依从性的因素。结果患者痴呆程度越重(OR=1.181,P<0.000 1)、年龄越大(OR=1.330,P<0.000 1)服用中药依从性越好,文化程度为大学者相对文盲(OR=0.397,P=0.003)依从性更好,伴心血管系统疾病者(OR=0.760,P=0.017)的依从性差。结论痴呆程度越重、年龄越大、文化程度越高以及无心血管系统疾病的患者服用中药的依从性越好。

基于柔性微弦的微组织纤维化力学测量装置

为研究组织纤维化的病理机制,建立适用于抗纤维化药物筛选的体外模型,本研究在微弦力学传感器上构建了基于NIH/3T3细胞的纤维化微组织模型,并通过原位实时成像分析微组织纤维化过程中的形态和力学变化。结果显示,在无外源转化生长因子β(TGF-β)刺激条件下,该微组织模型在培养72 h后,自发开始发生纤维化,表现为α-平滑肌肌动蛋白表达及纤连蛋白的沉积;微组织纤维化过程中的力学变化表明,组织收缩力是评测纤维化进程的理想量化指标。通过测量上皮细胞和前列腺素E2对纤维化组织收缩力的抑制作用,验证了该模型作为抗纤维化药物筛选工具的可行性。该研究有望为抗纤维化药物评估和筛选平台的开发提供参考。

6种清洁手术预防性应用抗菌药物情况观察

目的：了解我院清洁手术抗菌药物的应用情况，为加强我院抗菌药物的管理及促进合理用药提供参考。方法抽查2013年1季度6种清洁手术共370例病历抗菌药物的使用情况。结果370例病历中，预防应用抗菌药物114例，使用率为30热．81％，预防性应用抗菌药物共涉及5类10种，排序居首位的是头孢唑林；单一用药108例，二联用药6例；术前0．5～2 h给药82例（71．93％），6例手术时间＞3 h，其中4例术中追加用药，术后24 h内停药30例，24～48 h者2例，48～72 h者28例。结论我院清洁手术预防性应用抗菌药物仍存在指征掌握不严、给药时机不合理、用药疗程过长、品种选用不当、盲目联用、配药溶媒量大等不合理现象，我院围手术期抗菌药物预防应用有待规范。

细胞隧道纳米管结构组分对其形成和维持的影响

由于细胞隧道纳米管(tunneling nanotube,TNT)生成的分子机制的多样性,目前尚未发现靶向TNT的低毒、广谱药物。本研究使用细胞松弛素D(cytochalasin D,cytoD)、乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸(EGTA)、甲基β环糊精(Mbc)分别破坏HEK293细胞间TNT结构的微丝、N型钙黏蛋白和胆固醇,来研究TNT结构组分对其形成和维持的影响。结果表明,破坏F-actin对TNT的生成频率的抑制作用最为明显,而对已存在的TNT的生存时间影响较小,钙黏蛋白是影响TNT的生存时间的关键分子,而胆固醇的水平对TNT的生成频率和生存时间的作用均有一定影响。本研究表明,通过干预TNT的结构组分控制TNT数量,有望成为筛选靶向TNT的药物的新方向。