微波消解-ICP-MS法测定冬虫夏草及生境土壤砷含量

本研究旨在筛选冬虫夏草优良产区及低富砷能力的冬虫夏草真菌菌种,为冬虫夏草砷含量影响因素的确定和人工培育冬虫夏草的质量控制提供科学依据。采用微波消解-电感耦合等离子体质谱法对26个产区的冬虫夏草及其生境土壤砷含量进行了测定与分析,并对二者砷含量的关系进行了探讨。研究发现,冬虫夏草砷含量超标现象具有普遍性,超标率约为96.15%,产区土壤砷含量多符合国家标准,超标率仅为30.77%。结果分析表明,冬虫夏草砷含量是否符合国家标准与产区土壤砷含量是否符合国家标准之间无必然联系,不同产区的冬虫夏草菌株富砷能力的差异导致了冬虫夏草砷含量的不同,推测四川雅江县是冬虫夏草天然的优良产区,马尔康产区的冬虫夏草真菌菌种具有高富集砷能力的菌种,而丹巴县和黑水县两地的冬虫夏草中的真菌菌种为低富砷能力的菌种。

甘肃祁连山冬虫夏草内生真菌的分离及其代谢产物活性评价

目的分离甘肃祁连山冬虫夏草内生真菌,并探讨其代谢产物的生物活性。方法采用3种不同培养基,用组织匀浆法和组织切块法对冬虫夏草不同部位内生真菌进行分离纯化。分别对其代谢产物的酶抑制活性、抗菌和抗氧化活性进行评价。利用形态学和分子生物学方法进行高活性菌株分类鉴定,利用现代色谱分离技术对高活性化学成分进行跟踪分离。结果分离得到42株内生真菌,发酵得到84个待测样品,对腺苷脱氨酶(ADA)抑制活性>40%者占比52%。其中高活性菌株Aspergillus sp.C-1乙酸乙酯相样品ADA抑制活性>90%,对5种供试菌均有抑菌活性,二苯基苦基苯肼(DPPH)和羟自由基清除率均>85%,总还原力为(0.039±0.002)mg的L-抗坏血酸(VC)当量,分子鉴定与Aspergillus fumigatus有99%同源性。追踪分离出2个具有ADA抑制活性的化合物,其中C1被鉴定为大黄素甲醚(physcion),IC_(50)为3.58 mmol/L。结论甘肃祁连山冬虫夏草内生真菌资源丰富且次级代谢产物具有良好的生物活性,是活性物质发现的良好来源。

继代培养对冬虫夏草菌品质及抗氧化活性的影响

为探究继代培养对冬虫夏草菌品质及抗氧化活性的影响,对冬虫夏草CS17菌株进行继代培养,并测定其在不同继代培养过程中菌丝生物量、核苷类物质组成及含量、抗氧化活性的变化差异。结果表明:冬虫夏草CS17菌株连续培养6代所得菌丝生物量为0.47~0.79 g,在第3代积累量最高,为0.79 g;冬虫夏草CS17菌株连续培养6代所得菌丝体中腺苷、肌苷、鸟苷、胞苷、尿苷总含量为1.005~6.516 mg/g,在第2代样品积累量最高,为6.516 mg/g。不同继代培养代数培养过程中,冬虫夏草菌丝体DPPH自由基、ABTS+自由基清除能力及总还原力均表现为先上升后下降趋势,第2代样品DPPH自由基、ABTS+自由基清除能力及总还原力最强,第3代至第6代逐渐降低。冬虫夏草CS17菌株连续培养6代所得菌丝体中,菌丝生物量在第3代达到最高,5种核苷类总含量在第2代样品中积累量最高,抗氧化活性在第2代样品中表现较好。

从考古与典籍中看冬虫夏草的传播与知识流变

冬虫夏草是产自我国西部高寒山区、具有极高药用价值的珍贵物种。考古资料证明,早在两千多年前,中国古人已开始食用虫草,而最早描述冬虫夏草的文献出现在公元4世纪。通过梳理藏医药文献与汉家典籍,寻找冬虫夏草的传播痕迹与人们对其认知的变化。文章聚焦于清代本草文献与文人笔记,结合著者身份经历、编撰方式、撰写内容等追索古人对冬虫夏草的认知随文本流变的脉络;同时经过各类典籍在内容侧重点与行文特点上的比较,揭示出医家与文人对于冬虫夏草认知上的异同,探索冬虫夏草在清代的传播情况。

基于CiteSpace对冬虫夏草寄主蝙蝠蛾的研究热点及趋势的可视化分析

冬虫夏草是产于我国青藏高原的一种传统名贵中药,是冬虫夏草菌(Ophiocordyceps sinensis)侵染蝙蝠蛾幼虫形成的虫菌结合体。冬虫夏草的昆虫寄主种属于鳞翅目(Lepidoptera)蝙蝠蛾科(Hepialidae)。自20世纪50年代以来,研究人员对冬虫夏草寄主的种类进行了大量的研究,截至2023年,冬虫夏草菌潜在寄主昆虫有63种。本研究全面检索Web of Science(WoS)和中国知网(CNKI)上1965年12月27日—2023年7月22日关于冬虫夏草寄主蝙蝠蛾研究的相关文献,经手动筛选最终纳入中文文献547篇、英文文献358篇。采用Microsoft Excel 2018对蝙蝠蛾研究的年发文量绘图,利用CiteSpace 6.1.R3文献计量学工具绘制蝙蝠蛾研究的作者、机构、关键词共现、关键词聚类及关键词突现知识图谱。结果显示,有关蝙蝠蛾研究的中英文文献总体均呈线性增长趋势,中文文献发文量于2016年达到顶峰,英文发文量于2021年达到顶峰,且目前的研究热度不断攀升。陈仕江、Cao Li分别为中、英文文献发文量最多的作者,从作者单位角度分析,英文文献发文作者绝大多数来自国内,因此中国相关研究机构为冬虫夏草研究领域的主力军。重庆市中药研究院、Chinese Academy of Sciences分别为中、英文文献发文量最多的机构,且英文文献形成了以Chinese Academy of Sciences为首的核心发文机构。中、英文关键词分析显示,蝙蝠蛾幼虫的研究热点集中在种类及分布、生物学特性、人工饲养等方面,其中如何通过人工侵染技术提高蝙蝠蛾的感染率依然是技术难题。优质冬虫夏草菌的筛选和寄主蝙蝠蛾的驯化,以及寄主与菌种间的最优化配置将是未来研究的热点。本文可为今后蝙蝠蛾研究的选题和前沿分析提供一定的借鉴。

不同包装和贮藏条件对蛹虫草品质的影响

为了探索和研究蛹虫草保鲜的包装和贮藏条件,采用托盘保鲜膜包装、PE密封包装、PE真空包装、透气保鲜盒包装和黑色塑料袋包装处理新鲜蛹虫草子实体,分析不同贮藏条件下蛹虫草的品质变化及贮藏期。结果表明,蛹虫草在4℃条件下的贮藏效果优于室温;室温条件下透气保鲜盒和托盘保鲜膜效果良好,在4℃条件下PE密封包装效果最好。

蝙蝠蛾被毛孢发酵专用菌株筛选

为筛选适用于液体发酵的高活性菌株。通过观察5个菌株菌落形态,比较5个菌株菌丝体的收率及腺苷、甘露醇、总氨基酸和粗多糖含量。结果发现:T_(1)菌株菌丝体收率和甘露醇含量最高,T_(5)菌株腺苷、总氨基酸和粗多糖含量最高。灰色关联度法分析表明,T_(5)菌株综合表现最优,可作为发酵优选菌株。

不同种类氨基酸对蛹虫草发酵液中虫草素含量的影响

[目的]研究液体培养基中添加氨基酸对蛹虫草发酵液中虫草素含量的影响,并确定8种氨基酸最佳添加浓度。[方法]考察24种氨基酸(添加浓度为1 g/L)对虫草素含量的影响,采用DPS V18.10软件进行差异显著性分析,并对促进虫草素合成作用显著的8种氨基酸添加浓度进行研究。[结果]L-赖氨酸、L-半胱氨酸、L-精氨酸、L-天门冬酰胺、L-甘氨酸、L-丙氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-组氨酸、肌氨酸对蛹虫草发酵液中虫草素含量具有不同程度的提高作用;4 g/L的L-甘氨酸对虫草素的合成促进作用最强,发酵液中虫草素含量为1022.25 mg/L。[结论]该研究为蛹虫草液体发酵生产虫草素提供参考依据。

原生质体紫外诱变选育灵芝新菌种的研究

对灵芝原生质体进行了紫外诱变处理 ,经过粗筛和精筛后 ,从中选出多糖含量和产量明显高于原始菌株的两株诱变株 430 2 0 #和 430 2 6#。经过 1 0代PDA斜面继代培养及其摇瓶试验和连续 3次 3t罐的中试试验 ,表明所得诱变株为比原始菌株更优秀的稳定高产、高多糖含量的灵芝生产菌株。本研究为选育适合发酵的灵芝生产菌种提供了一种快速。

新疆虫草与冬虫夏草中甘露醇、多糖和氨基酸的含量比较研究

为开发利用新疆虫草的药用价值提供理论依据，并与不同产地的冬虫夏草的含量进行比对。采用高碘酸钠比色法测定D-甘露醇含量、苯酚-硫酸法测定多糖含量；应用氨基酸自动分析仪分析虫草的氨基酸类型和含量。结果表明：3个产地的冬虫夏草中D-甘露醇的含量为78．5．115．2μg／g，多糖的含量为2．24．3．59％；新疆虫草中D-甘露醇的含量为120．3mg／g，多糖的含量为3．32％。3种冬虫夏草和新疆虫草中均含有18种氨基酸。新疆虫草中含有较丰富的D-甘露醇、多糖和氨基酸，为综合评价新疆虫草内在质量和开发新疆虫草提供了科学依据。

原生质体紫外诱变选育蛹虫草新菌种的研究

对蛹虫草原生质体进行了紫外诱变处理 ,从中筛选出 41 0 2 2 #和 41 0 2 8#两株诱变株 ,其子实体产量分别达到 4 1和 4 3g(干重 /罐头瓶 ) ,虫草多糖含量达到 7 3 %和 6 9% ,都明显高于原始菌株。经过 1 0代PDA斜面继代培养及其 3 0 0罐头瓶大米培养基栽培试验 ,所得诱变株为比原始菌株更优秀的稳定高产、高多糖含量的蛹虫草生产菌株。

青藏高原那曲地区冬虫夏草资源分布空间分析方法

冬虫夏草(Cordyceps sinensis)是分布在我国青藏高原的可再生资源,具有极其名贵的中药材价值,而目前我国冬虫夏草资源的分布区域尚不清楚。以西藏那曲地区为例,根据冬虫夏草资源分布的生境条件,结合冬虫夏草的生态特性指标,利用地理信息系统(GIS)空间分析方法对冬虫夏草的空间分布区域进行了分析。结果表明,那曲地区冬虫夏草资源主要分布于那曲的东部,分布面积约为4.93万km2,占地区总面积的12.54%。与实地调查结果比较,提出的基于GIS空间分析的冬虫夏草分布区分析方法精度较高,说明空间分析方法在冬虫夏草资源调查评价上具有一定的可行性,为今后的冬虫夏草资源调查等相关研究提供方法支持。

三江源区冬虫夏草资源适宜性空间分布

冬虫夏草(Ophiocordyceps sinensis)是生长在青藏高原高寒地区的一种珍稀物种资源,具有极高的药用和经济价值,然而冬虫夏草资源的数量特征与空间格局尚不明确。以三江源区为例,结合冬虫夏草的生境条件,选取适宜冬虫夏草生长的生态环境指标,利用地理信息系统(GIS)中的空间分析方法对冬虫夏草资源的适宜性空间分布进行了研究,并用野外实地采样和入户调研数据进行验证。结果表明:三江源区冬虫夏草资源主要分布在东南部和中南部,分布面积约为18.45×10~4km^2,占该区总面积的50.74%。达日县、甘德县、玉树县、称多县、玛沁县、班玛县、久治县这7个县冬虫夏草适宜性面积占到了该县50%以上的面积,是三江源区冬虫夏草资源的主产区。基于GIS空间分析的结果与实地调查结果相符,说明利用空间分析方法划分冬虫夏草资源的适宜性分布区域是可行的,可为系统的全面调查冬虫夏草资源的分布及保护与合理开发利用冬虫夏草资源提供科学依据。

冬虫夏草(Cordyceps sinensis)菌丝体固体发酵粉化学成分的分析

本研究对一种冬虫夏草(Cordycepssinensis)菌丝体固体发酵粉的化学成份进行了分析,包括粗成份,生物活性成份,脂肪酸,氨基酸,金属元素等。冬虫夏草菌丝体固体发酵粉中3′-脱氧腺苷含量40.81μg/g、腺苷含量745.4μg/g;甘露醇的含量为165.8mg/g,多糖含量为157.3mg/g;谷氨酸,天门冬氨酸,苯丙氨酸是三大类主要氨基酸;不饱和脂肪酸是优势脂肪酸,以亚油酸,油酸为主。和文献记录的结果相比,虫草发酵粉中3′-脱氧腺苷,甘露醇的含量明显高于冬虫夏草子实体中相应成份的含量;各种氨基酸的含量和水平与冬虫夏草子实体中相应氨基酸的含量和水平相当;虫草发酵粉中的其它化学成份和冬虫夏草子实体中相应成份基本一致。

用蛹虫草固体发酵法高效生产虫草素的研究

目的：研究并建立用蛹虫草固体发酵方式高效生产虫草素的最佳方法。方法：通过对不同菌株在固体发酵过程中各生长期的虫草素含量变化进行跟踪测定以及正交旋转组合设计、正交试验设计等方法，影响虫草素产量和含量的各影响因子（包括菌种、生长期、培养基配方和环境条件等）进行系统优化。结果：JF-1是虫草素生产的最佳菌株，现蕾期是收获提取虫草素的最佳时期；最佳的培养基配方为水料比1．1：1（mL·g^-1营养水中酵母膏、蛋白胨、葡萄糖的用量分别为22．6，6．0，25．4g·L^-1水pH6．6；最佳的环境条件为：光照强度4400lx，每13光照时间18h，温度18—22℃。结论：用以上方法固体发酵生产虫草素，经过约13d的培养，培养基中虫草素达到0．60％，比传统液体发酵方法的最高产量高近2倍，并且培养时间缩短2d。

人工培养蛹虫草与冬虫夏草的主要活性成分比较

蛹虫草为珍稀中药材,基于为培养出含有类似天然冬虫夏草主要活性物质的蛹虫草提供基础依据的目的,对人工培养蛹虫草及菌丝体、子实体和冬虫夏草及菌丝体中的氨基酸、多糖、虫草素等活性物质含量与组成进行了测定,结果表明:人工培养蛹虫草与冬虫夏草在氨基酸种类上完全一致,但人工培养蛹虫草中赖氨酸、酪氨酸含量显著升高,组氨酸则显著降低;二者组成的多糖基本一致,但冬虫夏草特有一个分子质量约100 kD的组分,该组分占多糖总量的1.38%,人工培养的蛹虫草的虫草素含量显著高于冬虫夏草。以上成分的细微变化是否是造成二者药理活性差异的原因还有待研究。

不同蛹虫草菌株栽培蚕蛹虫草的形态性状及活性成分含量比较

选择5株蛹虫草菌株感染家蚕5龄第3天幼虫生产蚕蛹虫草,通过观察检测蚕蛹虫草的形态性状及采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定虫草素和腺苷的含量,为筛选高产优质蛹虫草菌株提供依据。不同菌株栽培生产的蚕蛹虫草的外观形状、生长状况以及活性成分含量均有明显差异:1-Y菌株栽培的蚕蛹虫草整体形状较接近于野生的冬虫夏草,MS菌株栽培的蚕蛹虫草子座形状较佳,17-3菌株栽培的蚕蛹虫草僵虫体形状较佳;1-1菌株栽培的蚕蛹虫草总质量和僵虫体质量均最高,干质量分别达到1.460 g和1.170 g;MS菌株栽培的蚕蛹虫草子座总数量、子座总长度及子座质量占虫草总质量的比率等指标均极显著高于其他菌株(P<0.01),分别达15.100根、44.877 cm和41.357%;1-Y菌株栽培的蚕蛹虫草整体所含虫草素最高,达8.92 mg/g,MS菌株栽培的蚕蛹虫草整体所含腺苷最高,达2.22 mg/g,并且5株供试菌株栽培的蚕蛹虫草僵虫体中的虫草素含量均高于子座,而子座中的腺苷含量均高于僵虫体。研究结果表明,蛹虫草菌株是影响人工栽培蚕蛹虫草形态性状及活性成分含量的重要因素,初步认为1-Y菌株和MS菌株具有较高的生产应用价值。

北虫草及其活性成分的研究与开发

冬虫夏草为非常珍贵的天然药材,资源严重缺乏,价格已超过黄金,无法满足社会需求。因北虫草的化学成分和药理功能与冬虫夏草非常相似,其主要功能活性物质含量高于天然冬虫夏草,被作为冬虫夏草的最佳替代品,受到广泛关注和重视,本文总结了近年来北虫草及其生物活性成分的研究与开发结果。

添加前体促进蛹虫草发酵生产菌丝体和虫草菌素的研究

研究了不同前体及营养物对蛹虫草液体发酵产菌丝体和虫草菌素的影响,并优化了其添加条件。结果表明添加前体及营养物能大幅提高蛹虫草液体发酵菌丝体及其中虫草菌素的含量,通过对9种供试前体及营养物进行筛选,确定能有效提高菌丝体及其中虫草菌素含量的物质是腺嘌呤、甘氨酸、腺苷、L-谷氨酰胺4种。2种前体及营养物能够通过协同互补作用提高虫草菌素产量,腺苷的组合添加效果明显高于腺嘌呤组,特别是2g/L腺苷和16g/LL-谷氨酰胺组合添加胞内虫草菌素含量达到了25.92mg/g(是原来的282.97%),菌丝体产量也达到28.5g/L(是原来的157.89%)。

蛹虫草对锌的耐性与富集特征

在培养基内添加不同量的锌,研究其对蛹虫草子实体的形成、子实体和菌丝体生物量、子实体多糖含量和葡萄糖含量的影响,以及蛹虫草子实体和菌丝体对锌的富集能力。结果表明锌对上述各项都有影响。液体培养条件下,锌浓度在453906mg/L范围内可以促进菌丝体生长,锌浓度超过4077mg/L时,菌丝生长受到抑制。培养基锌的浓度在4077mg/L以下时,蛹虫草菌丝体锌的富集量随着液体培养基锌浓度的提高而提高。固体培养条件下,锌含量在226453mg/kg范围内可以促进蛹虫草子实体生长,并且在此含量范围内,蛹虫草子实体中葡萄糖含量较高。培养基锌含量在680906mg/kg时,子实体多糖含量较高。培养基锌含量在2038mg/kg以下时,蛹虫草子实体中锌的富集量随着培养基锌含量的提高而提高,在培养基锌含量为2038mg/kg时,子实体中锌的含量达到28570mg/kg(干重)。