芽胞杆菌生产嘌呤核苷研究进展

嘌呤核苷在食品和医药领域都有广泛的应用。应用芽胞杆菌生产嘌呤核苷类物质的研究始于 6 0年代 ,其后对合成途径及其代谢调控机制相继进行了深入的研究 ,以下就此做详尽的综述 ,并以肌苷、鸟苷为例 ,对利用芽胞杆菌发酵生产嘌呤核苷的菌种选育和工艺调控的进展做全面的回顾。

利用啤酒酵母提取RNA的氨法工艺研究Ⅱ

采用氨法破壁提取RNA ,当酵母质量分数为 10 % ,氨为 1 0 %时 ,采用分步沉淀法 ,调蛋白质的等电点后 ,再加入复合蛋白质沉淀剂去除蛋白质 ,可获得纯度在 83%的优质酵母RNA ,核酸的提取率是干酵母的2 %以上。

改进肌苷发酵条件的研究

采用枯草芽孢杆菌的突变株ＧＭＩ－７４１，在１．２Ｌ自控发酵罐中发酵通过调节搅拌转速和通气量、增大接种量及低糖发酵流加补料等，使肌苷产率有所提高，发酵周期有所缩短。

用大肠杆菌游离细胞酶法合成核苷药物

研究了采用大肠杆菌游离细胞核苷磷酸化酶合成核苷药物过程中反应平衡常数和底物转化率的计算方法及其变化规律，阐明了游离细胞内核苷磷酸化酶的活力与细胞的培养、菌体的预处理方式密切相关。实验结果表明，大肠杆菌湿菌体经４°Ｃ干燥处理２～３ｄ后，胞内核苷磷酸化酶不易失活，并能有效地降低胞内抑制物对酶反应的抑制作用。与湿菌体相比，干燥菌体用于酶反应时底物的转化率可提高３３．５％。

利用啤酒酵母生物合成胞苷三磷酸的研究

研究了利用游离的啤酒酵母将胞苷一磷酸(CMP)合成为胞苷三磷酸(CTP),采用HPLC法分析反应过程中各工艺参数对转化率的影响并对其主要因素进行了正交优化。结果表明,在25g酵母量中加入20mL底物溶液,其中包括CMP60mmol/L、葡萄糖150mmol/L、磷酸盐缓冲液(钠盐)250mmol/L、氯化镁8mmol/L、pH为6.0,温度35℃、反应时间2.0h,在此反应体系下,通过添加适量ATP、吐温,CTP的转化率可维持在80%以上。

N^2·9-二乙酰基鸟嘌呤的合成

介绍了用 N,N-二甲基吡啶 (DMAP)为催化剂合成 N2· 9-二乙酰基鸟嘌呤的新方法 ,并对催化剂及其他因素的影响进行了研究。方法操作简便 ,反应时间短 ,产品收率达 76%。

固定化细胞转化脱氧胸苷合成2'-脱氧腺苷

目的选择最优的载体包埋固定化AEM0957细胞酶促催化脱氧胸苷和腺嘌呤合成脱氧腺苷。方法分别用琼脂、聚丙烯酰胺、明胶、卡拉胶、海藻酸钠、聚乙烯醇等6种材料包埋固定细菌AEM0957细胞,以此为催化剂转化脱氧胸苷合成脱氧腺苷。结果通过优化反应条件,聚丙烯酰胺固定化细胞催化脱氧胸苷的转化率可达57%,高于游离细胞反应能力,并能多次重复使用,10次重复反应的转化率仍能够保持在32%左右。结论聚丙烯酰胺在稳定性、转化性能等方面优于其它材料,该研究为脱氧腺苷的工业化生产奠定了重要基础。

从青霉菌丝体中提取核糖核酸的研究

文中研究了从青霉菌丝体中提取纯化核糖核酸的工艺条件。采用盐碱法破碎细胞,调抽提液pH值至4.6以沉淀部分蛋白质,然后用中性蛋白酶AS1.398处理分级沉淀后的上清液,详细考察了蛋白酶用量、反应温度、初始pH值和反应时间对核酸纯度的影响。酶解液经截留相对分子质量为6.0×104的超滤膜过滤后,核糖核酸的纯度和得率分别是72.1%和0.42%。

稀碱法提取酵母RNA的正交试验研究

采用正交设计试验法对稀碱法提取酵母ＲＮＡ工艺过程中的菌悬液浓度、稀碱浓度、反应时间和沉淀剂用量等因素进行了研究。用方差分析处理实验结果表明，１０％酵母浓度、１．０％碱、２．５％氯化钙和６０分钟反应时间是提取酵毒ＲＮＡ的适宜条件，并将其用于啤酒厂废酵母泥的ＲＮＡ提取试验。

浓盐法提取啤酒酵母中RNA的研究

对影响浓盐法提取啤酒酵母中RNA的条件进行了研究,确定其较优生产条件为:温度95℃,加盐量10%,提取时间120 min,调等电点pH4.2沉淀蛋白质后4℃静置8 h。在此条件下,从45 g湿酵母(相当于10 g干酵母)中可提取0.5308 g RNA,蛋白质含量为0.0615%,A260/A280为1.988。

鹅去氧胆酸氨基酸衍生物的合成

鹅去氧胆酸(Chenodeoxycholic acid简称CDCA)是70年代进行临床研究、可用于胆固醇胆石症的治疗药物,能使胆石逐渐溶解,但该药毒副作用较大,因为CDCA易被肠道内细菌7-脱羟酶的作用生成石胆酸(LC),引起腹泄、腹部痉挛、高转氨酶血症等毒副作用。据国外文献报道。

枯草芽孢杆菌C1-B941的D-核糖发酵中间试验

使用转酮醇酶变异株—枯草芽孢杆菌C1－B941进行了D－核糖发酵中间试验。3000L发酵罐试验结果表明，发酵培养基中的葡萄糖浓度为18％时，发酵周期约为64h，发酵转化率达36．84％。发酵液经离子交换树脂纯化后，可以直接用于生产VBZ合成的中间体—N－D－核糖醇基－3，4－二甲苯胶。

鸟嘌呤的化学合成

鸟嘌呤(guanine,1),是抗病毒药阿昔洛韦(无环鸟苷)和更昔洛韦的重要中间体。可用发酵所得鸟嘌呤核苷酸(5′-GMP)经水解生成鸟苷,再除去核糖而得到1。

酵母发酵法制备核糖核酸研究进展

核糖核酸(RNA)是一种遗传物质,参与细胞蛋白质合成和免疫调节等生理活动。RNA及其降解物在药物开发、保健品和食品添加剂等领域具有良好的应用前景。利用富含RNA的酵母发酵提取RNA是生产RNA的有效途径。概述了酵母发酵法制备RNA的进展及其应用。

质谱在寡核苷酸药物质量控制中的应用

介绍了质谱在寡核苷酸质量控制方面的应用 .合成寡核苷酸及类似物作为反义治疗剂在病毒感染和一些癌症治疗方面有良好的前景 .寡核苷酸作为药物 ,其结构特性必须进行确证 .寡核苷酸浓度和纯度的分析可使用色谱或电泳技术 ,对寡核苷酸的碱基组成、序列、同一性 ,修饰基团 ,色谱或电泳分析方法无能为力 .质谱的高鉴别能力使其能有效、灵敏、快速和精确地确定寡核苷酸的这些特性 .

酶化学法制备AraA

AraA中文名称为9-β-D-阿拉伯呋喃糖基腺嘌呤，通常简称为阿糖腺苷，是一种广谱嘌呤核苷类抗病毒药，具有抑制病毒和肿瘤细胞生长的能力。目前，我国主要采用化学全盛法生产AraA。然而用化学合成法生产AraA反就步骤多。

活性炭单柱提取肌苷新技术研究

活性炭单柱提取肌苷新技术研究李永泉，张进，姚恕，郑莲英，俞峰（杭州大学生物系杭州３１００２８）（浙江大学化工系杭州３１００２７）关键词：肌苷，提取技术，活性炭单柱１前言目前，国内肌苷发酵后处理工艺落后，在分离提取工序中肌苷损失严重，收率一般只有５０％...

烯丙基作为保护基在修饰寡核苷酸合成中的应用

研究了烯丙基作为核苷糖环羟基保护基在寡核苷酸及其类似物的合成中应用的可能性.烯丙基保护基可用PdCl2在温和的条件下脱除,适合应用于对碱不稳定的寡核苷酸的合成应用烯丙基保护基成功地合成了三胸苷二碳酸酯和二胸苷亚硫酸酯.

利巴韦林(病毒唑)的生产方法及研究进展

介绍了利巴韦林的理化性质、用途、生产方法,重点介绍发酵法生产利巴韦林的生产现状。依据基因工程原理简述了利巴韦林高产菌的构建策略与研究实例,并对利巴韦林的市场前景进行了展望。

核糖核酸生产工业化及其在临床上应用的探讨

通过物理化学等方法将微生物中核糖核酸提取出来，并进一步提纯，达到医用水平；对提取工业化及其在临床上的应用作了一定的探讨。