超高效液相色谱串联质谱法对饮料中6种雌激素的测定

目的:建立一种高效快速检测饮料中雌二醇、雌三醇、雌酮、己烯雌酚、己二烯雌酚和己烷雌酚等6种雌激素的超高效液相色谱串联质谱法。方法:选取三种具有代表性的饮料基质,加入乙腈和QuEChERS萃取包提取2次,合并提取液,50℃氮吹至干,残渣用甲醇一0.5%氨水(体积比9∶1)溶解。以甲醇和0.5%氨水溶液为流动相,使用C18色谱柱进行分离,以LC-MS/MS多反应监测模式开展定性及定量分析,外标法定量。结果:结果表明,方法检出限为0.3μg/kg~3.0μg/kg。在添加水平为10μg/kg~100μg/kg范围内的平均回收率为72.5%~119%,相对标准偏差为6.7%~11.4%。本方法灵敏度高、前处理快捷高效,适用于饮料中6种雌激素的检测与定量分析。

PPAR激动剂的定向设计、虚拟筛选及合成

过氧化物酶体增殖因子活化受体 (PPAR)是核受体超家族的一员 .基于受体结构的药物分子设计与组合化学策略相结合 ,构建了过氧化物酶体增殖因子活化受体 (PPAR)激动剂的虚拟化合物库 .将已知小分子配体 (GW40 95 44 )与PPAR晶体复合物进行剥离 ,得到受体的活性构象 ,并利用此活性受体分子与虚拟库中小分子进行对接和虚拟筛选 ,得到理论上结合较强的化合物 ,并对这些化合物进行合成 ,共合成 9个新化合物 .活性筛选结果显示化合物对PPAR具有一定的亲和力 ,其中有三个化合物显示出对PPARα ,PPARγ的双重激动作用 。

类固醇类激素GC-MS分析中酮基衍生化技术研究进展

类固醇类激素以其独特的生理生化效应而备受关注,气相色谱-质谱联用技术已经成为类固醇类激素分析检测的重要手段。由于类固醇类激素含有羟基、酮基等极性官能团,GC-MS分析时检测灵敏度不高,色谱分离峰形差,需通过衍生化技术将其转化成极性较低、易挥发、热稳定性高的化合物,以改善色谱分离峰形、提高检测灵敏度,使之适用于GC-MS痕量分析。目前,类固醇类激素羟基等含有活性氢原子官能团的衍生化技术发展较为成熟,但酮基衍生化仍缺乏系统研究。本文对类固醇类激素酮基衍生化技术研究进展进行了综述,主要介绍了烯醇化-硅烷化、肟化-硅烷化等酮基衍生化技术的反应原理、应用现状,并对目前存在的问题及进一步的研究方向进行了讨论和展望,为类固醇类激素酮基衍生化技术的研究提供参考。

亚麻木酚素提取与纯化的研究进展

研究表明亚麻木酚素具有抗肿瘤、抗氧化、抗骨质疏松、抗心脑血管疾病等作用,而从亚麻籽中高效的提取分离亚麻木酚素已经成为当今的研究热点。综述国内外对亚麻木酚素的检测方法、提取工艺、分离纯化工艺和开发应用等方面的研究进展,并讨论各种方法的优缺点。

高效液相色谱法测定微乳体系中胰岛素含量的前处理方法比较

目的 :研究反相高效液相色谱测定微乳体系中胰岛素含量的前处理方法 ,并对 3种前处理方法进行了比较。方法 :采用TritonX 10 0破乳、盐酸酸解、水饱和正丁醇萃取 3种方法对胰岛素微乳体系进行前处理 ,用RP HPLC对处理后样品中胰岛素的含量进行测定。结果 :TritonX 10 0、酸解、萃取 3种方法回收率分别为98 7%～ 10 0 6 % ,94 1%～ 96 8% ,89 2 %～ 92 7% ;RSD分别为 1 5 8%～ 3 2 0 % ,2 0 8%～ 4 30 % ,4 0 7%～6 0 9%。结论 :3种方法中 ,以TritonX 10 0破乳法的结果较为精确 ,回收率较高 ;操作较为方便简单、快速可靠 ;对胰岛素稳定性没有影响 ,样品消耗量较少。

氢化可的松的合成研究进展

氢化可的松是哺乳动物主要的肾上腺皮质激素类药物和重要的甾体药物合成的中间体。本文简要综述了其全化学合成、半合成法及全生物合成方法、路径的国内、外现状及相关进展情况,并对其发展方向进行了评述和展望。

分泌型重组人生长激素工程菌的高密度发酵

目的 研究葡萄糖剂补加策略 ,以获得大肠杆菌的高密度发酵和人生长激素 (HGH)的高表达。方法 采用批式发酵和补料批式发酵方式 ,葡萄糖的补加采用逐渐增加的方式 ,包括pH、DO和浓度控制。结果 获得HGH的表达量为 30 0mg/L ,光密度达到 12 4(A60 0 )。结论 在大肠杆菌中表达异源蛋白时 ,葡萄糖的补加方式是关键因素 。

褪黑素载药纳米粒的优化设计及研制

目的 :探讨采用复合乳液 -溶剂挥发法制备褪黑素载药纳米粒的最佳工艺条件。方法 :以聚乳酸、壳聚糖可降解生物材料为载体 ,明胶为分散剂 ,span - 80和tween - 80混合液为微乳液 ,根据微粒的表面形态、粒径大小分布、包封率、载药量选择最佳工艺条件 ,制备褪黑素载药纳米粒。结果与结论 :原子力显微镜下可见纳米粒表面圆滑 ,分布均匀。正交设计效应曲线图直观分析和方差分析结果显示 ,搅拌速度、溶剂挥发温度、聚乳酸与褪黑素投药比、壳聚糖浓度是影响制备工艺的主要因素。在 30℃ ,10 0 0r/min搅拌速度 ,搅拌时间 4 5min ,m(褪黑素 ) :m(聚乳酸 )为 1:5 ,V(Tween - 80 ) :V(Span - 80 )为 5 :1,壳聚糖质量浓度为 1%条件下 ,可制备成平均粒径为 4 5 .84nm ,包封率为 38.33% ,载药量为 8.35

苯甲醇制备苯甲酸的实验研究

制备了十六烷基三甲基磷钨杂多酸铵,并用其作为催化剂催化过氧化氢氧化苯甲醇制苯甲酸,分析了反应温度、反应时间、过氧化氢用量、催化剂用量对苯甲酸产率的影响。结果表明苯甲酸产率可达到86.3%.

生长激素脂质体的研制

用冰冻熔融法制备脂质体 ,包封率可达 2 9% ,当n(卵磷脂 )∶n(胆固醇 ) =5∶2 ,超声时间 3min ,中性环境 ,冰冻 2 4h或 4℃贮藏 3d ,其稳定性良好 ,包封率 ( 2 9.1± 0 .4 ) % 。

复相乳液法制备聚乳酸/胰岛素缓释微胶囊

探讨复相乳液法制备聚乳酸(PLA)/胰岛素缓释微胶囊的制备工艺.以聚乳酸为包裹载体,胰岛素为模型药物,通过复相乳液法制备出胰岛素缓释微胶囊,通过考察稳定剂、超声时间及功率、搅拌速度、聚乳酸分子量等条件对粒径大小及其分布、表面形态的影响,初步探讨了聚乳酸包裹胰岛素微胶囊的制备工艺.经粒度分析仪、扫描电镜、激光共聚焦显微镜观察结果显示,制备的微胶囊表面光滑圆整,平均粒径在4μm左右.复相乳液法制备载药微球工艺简单,乳液稳定性好,可以负载具有生物活性的药物.

3β-羟基-5-雄甾烯-17β-羧酸甲酯的合成新法

以孕烯醇酮醋酸酯为起始原料 ,经溴仿反应、酯化反应制得 3β-羟基 - 5雄甾烯 - 17β-羧酸甲酯 ,总收率 6 9%。

生物法提取薯蓣皂素工艺研究

以正交试验方法研究了生物法从黄姜中提取薯蓣皂素的工艺条件。试验结果表明,生物法提取薯蓣皂素的最佳工艺:以黑曲霉为菌种,黄姜细度60目,0.5%尿素作为氮源,发酵90h,薯蓣皂素的收率最大。并且在此条件下,薯蓣皂素的收率较直接酸水解法提高了35.5%。

杜仲中环烯醚萜类物质对性激素转化的调控作用

杜仲是中国传统名贵滋补药材,有补益肝肾、强筋壮骨、固经安胎的功效,而这些功效与性激素水平息息相关,故本文研究了杜仲中3种主要的环烯醚萜类物质(京尼平、京尼平苷和京尼平苷酸)对性激素的转化作用。以卵巢颗粒细胞的肿瘤细胞系KGN作为激素的转化系统,孕烯醇酮为转化底物,分别测量环烯醚萜类物质干预24h后培养基中的孕酮、睾酮以及雌二醇的浓度,并提取细胞的RNA,以反转录实时荧光定量法来研究其催化酶3β-HSD、CYP17A1以及17β-HSD表达水平的影响。研究结果表明,50μmol/L的京尼平能显著提升3β-HSD、CYP17A1以及17β-HSD的表达水平,从而显著促进睾酮和雌二醇的合成。

堀越氏芽孢杆菌S184产河豚毒素的发酵条件优化

采用快速有效的数学统计方法对堀越氏芽孢杆菌(Bacillus horikoshii)S184产河豚毒素的发酵条件进行了优化。利用Plackett-Burman设计,从众多影响产河豚毒素的因素中筛选出影响较大的3个因素:蛋白胨、磷酸盐质量浓度和接种体积分数。在此基础上,再利用响应面法中的杂合设计进行优化,通过拟合得到响应曲面函数,并获得了最佳的实验条件。在该实验条件下,河豚毒素产量从666.65 ng/L提高到1 900.60 ng/L。

[1,6-双(L-α,-二氨基丙酸)]催产素的合成

通过7+2片段组合方式,,采用液相法合成了全新的含非蛋白质氨基酸L-α,β-二氨基丙酸(L-D ap)的催产素的类似物。合成中所需的保护氨基酸的α-氨基均采用苄氧羰基(Z)保护,L-D ap的侧链氨基采用叔丁氧羰基(Boc)保护。先用逐步增长方式采用对硝基苯酚酯法缩合得到重要中间体七肽片段,再用叠氮法缩合得到保护九肽。Z-保护用催化氢化法脱除,Boc-保护用CF3COOH脱除。共合成了含L-D ap的新化合物8个,所有寡肽都通过了氨基酸分析以及质谱确证。

双氯灭痛-β-环糊精包含物的研制

通过冷冻干燥法和共沉淀法制备了双氯灭痛-β-环糊精包含物,经X-射线粉末衍射仪鉴定均已形成了包含物,收率、含量、工艺重现性等方面冷冻干燥法优于共沉淀法。冷冻干燥法和共沉淀法制备的包含物溶解度与单药相比分别增大0.85倍、0.67倍,溶出速率(T_(50))分别提前5.32min、2.90min,经方差分析有非常显著性差异(P<0.01)。

新型催眠药褪黑激素的合成

目的 研究适合工业化生产褪黑激素的合成工艺 .方法 由邻苯二甲酰亚胺成盐 ,氮烷基化 ,碳烷基化后经由Japp- Klingem an反应和 Fischer吲哚合成法关环 ,脱羧脱保护后得 5 -甲氧基色胺 ,乙酰化后得褪黑激素 .结果 以比文献高出 2 0 %的收率合成目标物 ,产品经质量鉴定 ,达到药用标准 .结论 该法操作简便 ,生产设备投资低 ,成本小 。

利用重组大肠杆菌生产人生长激素发酵工艺的研究

在摇瓶培养和发酵罐培养条件下,研究了E.coli/BL21(DE3)/pET30a(+)-hGH工程菌的不同发酵工艺条件。确立了该工程菌的最优化工艺参数:M9-2培养基,37℃、pH值为6.8-7.4、诱导起始菌体密度为OD600达3.0-4.0,IPTG浓度为1mmol/L,诱导时溶氧控制为50%以上,补料为10%甘油、5%Yeast extract和5%Tryptone。该工艺条件经过连续三批发酵,证实稳定可行,目的蛋白在胞间质呈可溶性表达,表达量占菌体总蛋白的20%以上。

羟丙基壳聚糖包覆胰岛素微球的性能研究

以壳聚糖和环氧丙烷为原料合成了羟丙基壳聚糖,并以此为壳材,以胰岛素为芯材,制备了平均粒径为13.34μm的微球,并考察了微球的各种性能。通过红外光谱表征了羟丙基壳聚糖和微球的化学结构;热重分析考察了羟丙基壳聚糖微球和包覆胰岛素后微球的热稳定性;采用光学显微镜和扫描电镜观察了不同液体中微球和干品微球的形貌;采用紫外分光光度计绘制胰岛素标准曲线和测定微球的包埋率;并对微球室温下、模拟胃液和模拟肠液中进行了微球稳定性考察。所制备的微球表面光滑、致密、平均粒径适中,且分布较窄,收率和包埋率较高,室温下稳定。根据稳定性考察得出,微球有缓释的功效。