抗酸染色联合PAS染色和六胺银染色在感染性疾病病理学实验教学中的应用

为配合医学整合课程体系改革,结合临床病理诊断常用的感染性疾病的辅助诊断方法,将抗酸染色、高碘酸-Schiff(periodic acid-Schiff,PAS)染色和六胺银染色阳性病例切片引入病理学感染性疾病章节的实验教学,显示出病变组织致病微生物。通过对不同班级进行问卷调研,绝大多数同学认可特殊染色在感染性疾病章节中的应用,认为不仅丰富了课堂内容,学习了结核杆菌和真菌在病变组织中的形态学特征及其导致的组织病理变化,而且加深了对感染性疾病理论知识的理解,深刻认识到病理学研究内容除了疾病的病理变化之外,还要探讨疾病发生的病因以及好发部位。同时,这些增加的特殊染色切片改变了本章节实验教学切片普通光学显微镜下色彩的单调性——单一的“红-蓝”色调,丰富了镜下色彩,提高了学生的学习兴趣,活跃了课堂气氛。

Wnt/β-catenin信号通路的中药调控与创面愈合

创面愈合是由于外伤、糖尿病溃疡、压疮、感染和术后创面不愈合等多种因素导致的如表皮、真皮、肌肉、筋膜等局部组织的损伤,其愈合过程是一个复杂且动态的程序,涉及到多种细胞反应和周围微环境的相互配合。目前,创面发病率呈逐年增长的趋势,造成了全球范围内巨大的社会和经济负担,老龄人口中发生的慢性损伤随着年龄的增长而逐年攀升。当前,修复创面的药物种类及方法多样,一定程度上减轻了患者的生理、心理和经济社会压力。中药单体及复方制剂修复创面具有独特的优势和力量,引起社会各界广泛的关注及应用,Wnt/β-catenin是调节细胞增殖、分化及凋亡,高度参与创面修复,是皮肤损伤修复过程中最重要的经典信号通路之一。Wnt/β-catenin信号通路通过中药单体及复方制剂降低机体创面中蛋白激酶、炎症反应,促进血管新生和表皮干细胞等表达,对创面愈合的治疗具有重要的参考价值。本文复习国内外相关文献,对Wnt/β-catenin信号通路与创面的关系及中药单体和中药复方通过调控该信号通路影响创面愈合的机制进行归纳总结,为中药治疗创面损伤提供新的思路和方向。

图文结合习题在组织学与胚胎学教学中的应用

目的本研究旨在研究图文结合习题和不同类型教学视频在组织学和胚胎学教学中的应用效果。方法选取我校2021级影像班和全科医学班学生为研究对象,实验组采用图文结合习题,对照组采用传统纯文字习题。两组学生在教学过程中使用相同的教学视频辅助教学。课程结束后,对两组学生的切片成绩和期末成绩进行比较和相关性分析,使用调查问卷评价两组的教学效果。结果实验组学生的成绩和高分段学生人数均显著高于对照组。实验组切片成绩和期末成绩之间存在密切相关性,实验组图文结合习题相关知识考点试题中,超过50%得分率的试题数量显著高于对照组。调查问卷显示,图文结合习题配合教学视频中的微课视频更有利于知识的掌握。结论使用图文结合习题能更好地加强组织学与胚胎学理论知识和实践内容的联系。

临床医学综合能力(西医)考试背景下的组织学与胚胎学教学改革与实践

随着社会进步和医学科学的发展,越来越多的医学生为提升自身能力及就业竞争力选择继续深造,临床医学综合能力(西医)是报考临床医学专业及部分基础医学专业的考生必考的研究生入学考试科目。组织学与胚胎学是一门重要的医学基础课程,与临床医学综合能力(西医)考试科目中的生理学、病理学、生物化学、诊断学、内科学、外科学等基础与临床课程存在着广泛而密切的联系。本文旨在探索分析组织学与胚胎学教学如何更科学地与临床医学综合能力(西医)考试紧密结合,以激发学生学习兴趣,培养学生临床思维、临床综合能力和探索求知的科研精神,达到进一步提升教学质量的目的。

原钙黏蛋白7的结构和功能及与肿瘤的关系

钙黏附蛋白是一类钙依赖性的黏附分子,是一种细胞跨膜糖蛋白,介导正常组织、肿瘤组织中细胞-细胞间的黏附作用,原钙黏蛋白(protocadherin,PCDH)是其最大的亚家族。PCDH广泛分布于中枢神经系统,根据基因结构分为非成簇原钙黏蛋白和成簇原钙黏蛋白。PCDH7属于非成簇PCDHs家族,在人类基因组中定位于4p15,主要在人类的脑和心脏中表达,具有与经典钙黏附蛋白相似的作用,介导细胞之间的识别和黏附。在多种肿瘤中均检测到不同程度PCDH7的异常表达,PCDH7可能与肿瘤的增殖、侵袭、转移和预后相关。本文对PCDH7的基因结构和功能与肿瘤的关系作一综述。

US-FNAC结合CT、CgA和TG免疫组织化学染色在甲状腺髓样癌诊断中的应用

目的探讨超声引导下细针穿刺细胞学(ultrasound-guided fine-needle aspiration cytology,US-FNAC)联合降钙素(calcitonin,CT)、嗜铬素A(chromogranin A,Cg A)、甲状腺球蛋白(thyroglobulin,Tg)诊断甲状腺髓样癌(medullary thyroid cancer,MTC)的应用价值。方法对7例US-FNAC诊断且术后组织病理学确诊的MTC临床资料和超声特点、细胞病理学特征进行综合分析。细针穿刺标本采用常规涂片1~2张自然风干后刘氏染色液快速染色,现场进行细胞病理学评判,确保取得满意的细胞量,同时将剩余标本注入液基细胞保存液中保存,采用液基薄层制片,HE染色及CT、CgA和Tg免疫组织化学染色。结果7例MTC细胞均中等量到大量,均有散在突出的大细胞、双核细胞、浆样细胞或核偏位不规则细胞;6例伴梭形细胞,细胞病理学表现与MTC细胞学诊断标准基本相符,CT、CgA胞质均弥漫强阳性表达,Tg阴性,细胞病理学诊断为MTC。结论US-FNAC技术可提高甲状腺结节细针穿刺标本满意度,结合液基薄层制片与CT、CgA免疫组织化学染色可提高MTC术前诊断准确性,对MTC治疗具有重大的临床意义。

细胞因子诱导的记忆样NK细胞与实体瘤免疫治疗的研究进展

自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)是一种先天性淋巴细胞,在抵御病毒感染和肿瘤侵袭中发挥着关键作用,是先天免疫系统的重要组成部分。NK细胞不具有抗原特异性,而近期的研究表明,NK细胞在半抗原暴露、病毒感染或联合细胞因子的激活后,表现出适应性和记忆样特征,后者可通过IL-12/15/18的短暂刺激诱导来实现。与正常NK细胞相比,这些细胞因子诱导的记忆样NK细胞能够长期增殖、存活,并且IFN-γ的产生及对肿瘤细胞的细胞毒性的效应器功能都得以增强,这使其成为肿瘤免疫治疗的优选细胞。在复发性/难治性急性髓系白血病的临床研究证明,细胞因子诱导的记忆样NK细胞过继性治疗是安全并有效的。细胞因子诱导的记忆样NK细胞已经开始肝癌等实体瘤的临床前研究,本文综述目前关于细胞因子诱导的记忆样NK细胞在实体瘤中的临床前研究的最新进展,为实体瘤免的疫治疗提供新思路。

SIRT1激动剂促进老化内皮细胞增殖和成血管能力

目的探讨沉默信息调节因子2相关酶1(silent mating type information regulation 2 homolog-1,SIRT1)抑制剂EX-527与激动剂SRT1720对老化内皮细胞成血管能力的影响。方法采用体外培养大鼠原代主动脉内皮细胞衰老技术,通过培养细胞的自然倍增建立大鼠主动脉内皮细胞(rat aorta endothelial cell,RAEC)衰老的细胞模型。内皮细胞的衰老用SA-β-Gal染色进行鉴定。衰老细胞模型建立后,对衰老的RAEC分别给予SIRT1抑制剂EX527和SIRT1激动剂SRT1720干预。运用Ki-67免疫荧光染色检测内皮细胞增殖,采用基质胶内皮管形成实验检测内皮细胞内皮管形成,应用蛋白印迹技术检测内皮细胞eNOS表达。结果SIRT1激动剂抑制老化RAEC增殖能力、内皮管形成能力和eNOS表达的降低,而SIRT1抑制剂使老化RAEC的增殖能力、内皮管形成能力和eNOS表达降低。结论SIRT1促进RAEC的增殖和内皮管形成,并增强RAEC中eNOS的表达;SIRT1改善衰老内皮细胞受损的成血管能力可能与其抑制衰老RAEC eNOS表达的下调有关。

三白草酮通过铁死亡相关通路改善化疗药物阿霉素诱导的心肌细胞损伤

目的探讨三白草酮(sauchinone,Sau)对化疗药物阿霉素(doxorubicin,Dox)诱导的心肌细胞损伤的改善作用及铁死亡相关机制。方法选用心肌细胞系H9c2细胞,首先对Sau的细胞毒性进行分析,然后检测Sau对Dox细胞毒性的影响,并用SIRT1抑制剂分析SIRT1/Nrf2信号通路在Sau影响Dox心肌细胞毒性中的作用。以CCK-8细胞活性检测,乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、丙二醛(MDA)及4-羟基壬烯醛(4-HNE)活性或水平的试剂盒检测,细胞内Fe^(2+)水平的FerroOrange染色和Fe^(2+)水平检测试剂盒检测,线粒体膜电位JC-1染色,SIRT/Nrf2信号通路蛋白和谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)水平的Western blot检测等评估心肌细胞损伤程度和Sau作用机制。结果在Sau浓度为0~10μmol/L时,H9c2细胞活性不变;Sau以剂量依赖性改善Dox诱导的H9c2细胞活力降低;Sau对H9c2细胞线粒体膜电位水平、Fe^(2+)浓度、脂质过氧化物水平、SIRT/Nrf2信号通路蛋白GPX4水平无明显影响;Dox诱导H9c2细胞线粒体膜电位降低、Fe^(2+)和脂质过氧化物水平升高、SIRT1/Nrf2信号通路活性与GPX4水平显著降低,Sau对Dox诱导的上述毒性具有明显抑制作用,该抑制作用可被SIRT1/Nrf2信号通路抑制剂阻断。结论Sau可通过激活SIRT1/Nrf2信号通路降低Dox诱导的心肌细胞铁死亡,以发挥其保护作用。

卵巢两性母细胞瘤一例并文献复习

目的探讨卵巢两性母细胞瘤(ovarian gynandroblastoma,GA)临床病理特征、鉴别诊断及治疗,为病理诊断和临床治疗提供依据。方法回顾性分析1例卵巢两性母细胞瘤的临床病理特征及免疫组织化学表型,并对国内外相关文献进行复习。结果大体标本呈灰黄色乳头状突起,质脆;HE染色见成人型颗粒细胞瘤和支持-间质细胞肿瘤成分;免疫组织化学结果显示calretinin、inhibinα、vimentin呈阳性,CK8/18呈部分阳性,网状纤维染色显示瘤细胞巢周围阳性,MC、CA199、EMA、CKP呈阴性表达,Ki-67增殖指数约10%。结论卵巢两性母细胞瘤是一种十分罕见的卵巢性索-间质肿瘤,其诊断依赖于临床表现、HE染色检测及免疫组织化学分析,治疗方法以手术切除为主。

tRNA衍生片段与恶性肿瘤

转运RNA(tRNA)是蛋白质翻译的衔接分子,tRNA衍生片段(tRNA-derived fragments,tRFs)有5种类型:tRF-1、tRF-2、tRF-3、tRF-5及i-tRF(中间体tRF),tRFs在众多恶性肿瘤中呈异常表达,且与患者预后不良相关。此外,tRFs通过调节细胞周期和参与癌症转移机制影响肿瘤细胞的生物学进程,展现出成为肿瘤预后标志物的潜力,深入研究tRFs在恶性肿瘤中的作用机制有助于肿瘤早期诊断和靶向治疗。本文综述了tRFs参与的生物过程、在不同肿瘤中作用机制及当前临床研究中的新进展,为后续tRFs研究提供新的见解。

新生小鼠小脑颗粒神经元的原代培养与鉴定

目的通过改进已报道的新生小鼠小脑颗粒神经元培养方法,以获得纯度更高,杂质更少,状态更佳的颗粒神经元。方法将小鼠小脑组织剪碎,经木瓜蛋白酶消化后得到单细胞悬液,采用Percoll非连续性密度梯度离心法分离出颗粒神经元前体细胞,种植在基质胶包被过的培养皿中并在培养20 h后给予阿糖胞苷(5μmol/L)处理8h。使用激光共聚焦显微镜及神经元特异性标志物微管相关蛋白2(MAP2)对小脑颗粒神经元细胞进行纯度鉴定。结果细胞存活率达98.03%±1.048%;神经元纯度为99.71%±0.2%。结论该方法获取的颗粒神经元存活率和纯度较高,是一种小鼠小脑颗粒神经元体外培养的可靠方法。

结直肠癌中NRF2的表达与肿瘤相关巨噬细胞的关系及临床意义

目的检测核因子E2相关因子(nuclear factor erythroid2-related factor 2,NRF2)在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织中的表达,探讨NRF2表达与肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associatedmacrophages,TAMs)、上皮间质转化过程(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系及临床病理意义。方法利用TIMER2.0数据库分析结直肠癌组织中NRF2表达以及NRF2与TAMs的关系;收集2017年5月至12月在山西省肿瘤医院被确诊为CRC的病例,采用免疫组织化学方法检测207例结直肠肿瘤组织和其中能收集到的90例癌旁正常组织中NRF2蛋白表达情况与临床病理特征的关系,以及EMT、TAMs分布情况。结果CRC中NRF2阳性率显著高于正常癌旁组织;肿瘤浸润前缘(tumor invasive front,TF)TAMs分布均高于肿瘤中心(tumor center,TC)。NRF2高表达与TNM分期、脉管癌栓、淋巴结转移、Vimentin蛋白以及TF中CD163+TAMs分布呈正相关。生存分析结果显示:NRF2低表达组生存期明显高于高表达组,是CRC患者的不良预后因素之一。结论NRF2在CRC患者中过度激活,通过靶向调控下游基因直接发挥作用促进上皮向间质转化过程;诱导巨噬细胞极化为M2型TAMs调控免疫反应间接发挥作用,从而增加癌症侵袭特性,缩短CRC患者生存时间。

右胸腔巨大孤立性纤维瘤1例及文献复习

目的探讨孤立性纤维瘤(solitary fibrous tumor,SFT)的临床与病理特征及诊断。方法应用HE染色及免疫组织化学染色观察并分析本院诊断的1例SET(女性患者,52岁,肿块位于右侧胸腔)临床病理特征及免疫组织化学表型,并复习相关文献。结果大体标本呈灰白灰红色,17 cm×14 cm×10 cm;镜下见部分区域细胞丰富,局灶轻度异型,未见明确核分裂像,无明显坏死;免疫组织化学表型:CD34、BCL2、STAT6阳性,TLE1部分阳性,Ki-67增值指数3%,CKpan、SMA、DES、S100、P63、MUC4阴性。结论孤立性纤维性肿瘤较为罕见,在形态学、免疫组织化学表型上具备一定的特殊性,但由于良性和转移性肿瘤在临床表现、影像学、组织病理学上均相似,故手术的完全切除和长期随访至关重要。

多学科协作式肺康复护理模式在慢性阻塞性肺疾病稳定期患者中的应用——评《中国慢性阻塞性肺疾病患者健康教育指南》(2023版)

《中国慢性阻塞性肺病患者健康教育指南》(2023版)由国家呼吸医学中心(中日友好医院)、中国医师协会呼吸医师分会、中国医学科学院呼吸病学研究院以及中国呼吸专科联合体联合编著,人民卫生出版社出版。慢性阻塞性肺疾病,简称COPD,是一种长期性的呼吸系统疾病。

多索茶碱与噻托溴铵粉在慢阻肺中的联合治疗效果分析——评《慢性阻塞性肺病患者居家肺康复》

《慢性阻塞性肺病患者居家肺康复》由严谨主编,是一本专注于慢阻肺(COPD)患者日常管理与康复训练的实用指南,由人民卫生出版社出版。慢性阻塞性肺疾病,即慢阻肺,是一种具有进行性、不完全可逆性气流受限特征的慢性肺部疾病。其主要特征是慢性气道炎症和肺部气流受限。

液基细胞学联合免疫细胞化学对肺腺癌胸腔积液的诊断价值

目的研究液基细胞学联合免疫细胞化学染色对肺腺癌胸腔积液的诊断价值。方法收集中山大学附属第三医院病理科2022年6月至2023年2月送检的50例胸腔积液样本,以细胞蜡块免疫组化作为诊断标准,其中30例确诊为肺腺癌,20例为非腺癌积液(包括17例非肿瘤积液、2例小细胞肺癌和1例肺鳞癌),均采用液基薄层制片技术中的沉降式液基薄层细胞制片技术(liquid-based cytology technology,LCT)和膜式薄层细胞制作技术(thinprep cytologic test,TCT)制片,行免疫细胞化学染色,比较分析液基细胞学免疫细胞化学染色的可行性。结果液基细胞学联合免疫细胞化学诊断结果与细胞蜡块免疫组织化学诊断结果一致,但TCT制片法明显优于LCT制片法,样本间细胞数量一致,分布均匀,阳性染色定位准确,细胞质和细胞核呈色清晰。TTF-1、napsin A、CK7在TCT联合免疫细胞化学检测肺腺癌的灵敏度分别100%、91.66%、93.10%,特异性为100%、100%、83.33%;而P40在1例肺鳞癌中弥漫表达。结论液基细胞学联合免疫细胞化学在胸腔积液肺腺癌的诊断中表现出较高的敏感性和特异性,在临床工作尤其是晚期患者原发灶难以获取的患者具有重要价值;因其操作时间短,在缩短报告时长方面更显示出巨大优势。

YTHDF1和YTHDF2在hSOD1^(G93A)突变型ALS转基因小鼠脊髓中的表达

目的检测m^(6)A识别蛋白YTHDF1和YTHDF2在ALS转基因小鼠脊髓中的表达变化,阐明其异常表达与ALS疾病进展的动态关系。方法选取hSOD1^(G93A)突变型ALS转基因小鼠与同窝野生型(WT)小鼠,分别在发病前期(出生后70 d)、发病早期(出生后95 d)、发病中期(出生后108 d)和发病晚期(出生后122 d)分离脊髓,Western blot和免疫荧光染色双标技术检测YTHDF1和YTHDF2在小鼠脊髓中的蛋白表达与定位,qRT-PCR检测小鼠脊髓中YTHDF1和YTHDF2 mRNA表达。结果与WT小鼠相比,在70 d、95d、108 d和122 d ALS转基因小鼠脊髓中YTHDF1的mRNA水平和蛋白水平表达均降低,YTHDF2的mRNA水平和蛋白水平表达均升高。免疫荧光双标染色结果显示,在ALS转基因小鼠和WT小鼠脊髓前角均可检测到YTHDF1/神经元核抗原(NeuN)和YTHDF2/NeuN双阳性细胞,在疾病后期可检测到YTHDF1和YTHDF2与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)双阳性细胞,提示YTHDF1和YTHDF2主要在脊髓神经元中表达。结论YTHDF1和YTHDF2在ALS转基因小鼠脊髓中表达异常与ALS脊髓运动神经元退变密切相关。

IL-6在肿瘤靶向和免疫治疗中的作用

炎症作为一把“双刃剑”,与恶性肿瘤的发生、发展及对靶向、免疫治疗的疗效关系密切,可促进或者抑制肿瘤的进展。其中,IL-6作为炎症细胞因子中的重要成员,调控多种肿瘤的病理过程,在临床中被广泛应用并监测,可作为肿瘤细胞增殖、浸润的生物标志物,被认为是衔接炎症与肿瘤最为核心的细胞因子之一。近年来靶向、免疫治疗的出现显示出了良好的疗效,但靶向治疗后部分患者易产生耐药,免疫治疗在实体瘤患者中的平均有效率也较为有限,如何提高靶向和免疫治疗疗效,扩大受益人群是亟待解决的问题。抑制IL-6及其信号转导通路可重启肿瘤-免疫循环,打破免疫抑制的掣肘同时改善免疫微环境,使靶向、免疫治疗更为行之有效。

小鼠睾丸特异表达蛋白GM1142抗体制备与应用

目的制备睾丸特异性表达蛋白GM1142的多克隆抗体,研究其小鼠睾丸组织的表达与定位情况,为进一步探究其在精子发生中的功能奠定基础。方法通过生物信息学分析选取小鼠GM1142 N端1-153个氨基酸为抗原肽,通过分子克隆技术构建重组原核表达载体pET42b-T7-GM1142N153-8×His,诱导表达后纯化并用以免疫新西兰大白兔和小鼠制备GM1142的多克隆抗体。蛋白免疫印迹和免疫荧光染色检测GM1142在小鼠各组织、不同发育时期的睾丸、以及睾丸中各细胞类型中的表达与定位特征。结果GM1142在睾丸中特异性高表达;免疫荧光染色结果显示GM1142在小鼠精原细胞和早期精母细胞的胞质中呈现强荧光信号。结论GM1142在睾丸中特异性高表达并可能在精原细胞发育和精母细胞减数分裂中具有重要作用。