当归多糖对免疫细胞增殖作用的实验研究

探讨当归多糖对免疫细胞的直接和间接作用。用MTT法分别检测当归多糖 (PCA)对PBMC的直接作用、PCAPBMC培养液对PBMC的间接作用 ;用流式细胞术检测PCA作用于健康人PBMC后各种免疫细胞表型的改变 ;检测PCA注射BALB/c小鼠后脾细胞增殖变化和巨噬细胞的吞噬能力。当归多糖对PBMC具有直接的抑制作用 ,而当归多糖PBMC培养液可促进PBMC增殖。PCA注射BALB/c小鼠后脾细胞增殖能力和巨噬细胞吞噬能力均得到了不同程度的增强。研究结果为进一步阐明当归多糖的免疫机理提供了理论依据。

人狂犬病免疫球蛋白使用效果观察

为了解人狂犬病免疫球蛋白的作用效果 ,我们将观察对象随机分成了A、B、C三组 ,分别采用三种措施进行狂犬病的预防治疗 ,即 :A组联合使用狂犬病疫苗与人狂犬病免疫球蛋白 ;B组联合使用狂犬病疫苗与抗狂犬病血清 (马源 ) ;C组仅注射狂犬病疫苗 ,并采用小鼠中和试验对这三组成员在免疫后 3、7、14、4 5天及 1年时的中和抗体水平进行检测。结果表明 :狂犬病疫苗与人狂犬病免疫球蛋白或抗狂犬病血清联合使用 ,可使体内更早出现抗狂犬病的中和抗体。

河南省9个县农村地区儿童第二类疫苗接种率及影响因素调查

目的了解河南9个县农村地区第二类疫苗接种情况及其影响因素,评价第一类替代疫苗现状,为全省提高第二类疫苗接种率和制定第一类疫苗使用策略提供参考依据。方法采用单纯随机抽样方法,抽取濮阳市、新乡市、南阳市、商丘市、洛阳市5个地市9个县18个乡镇32个村的1 463名2～7周岁农村儿童,疫苗接种知识及主要影响因素从调查儿童监护人获得,疫苗接种记录来自于儿童预防接种证,用EPiData 3.1软件建立数据库,采用Ex-cel 2003和SPSS 17.0进行数据统计分析。结果 9个县农村儿童中第一类替代疫苗率最高的是甲肝灭活疫苗第一针,占20.6%,其次是首针次ACYW135(1)流脑疫苗和AC流脑结合疫苗(1),分别占适龄接种对象的13.8%、12.9%。第二类疫苗以b型流感嗜血杆菌(Hib)第一针次接种率最高,达到46.4%,Hib疫苗三针次接种率为12.6%,其次是水痘疫苗接种率为23.2%;口服轮状疫苗(RV)、23价肺炎(PPV23)疫苗接种率较低,分别为9.5%和7.3%。单因素与多因素logistic回归分析结果表明,接种方式、儿童类别、疫苗价格高低都是影响第二类疫苗接种针次多少的主要因素,乡镇门诊化接种4～6针次和7针次以上的比例分别为22.5%、6.9%,高于村级接种比例12.8%和1.9%;散居儿童疫苗接种针次高于托幼儿童(P<0.01);监护人文化程度、家庭收入、接种通知方式、儿童是否留守等对二类疫苗接种针次影响不大或无影响(P>0.05)。结论不同县第二类疫苗替代一类疫苗率和种类不同;第二类疫苗接种率因各地接种方式、价格因素、重视程度和家长认知程度不同而差别较大;扩大以乡为单位接种门诊实施范围、降低第二类疫苗接种价格并加大托幼机构第二类疫苗的宣传等有利于提高第二类疫苗的接种率和接种针次。

围产期孕妇生殖道B族链球菌感染高危因素分析及母婴结局探讨

目的调查沈阳地区围产期孕妇生殖道B族链球菌(group B streptococcus,GBS)定植率和感染高危因素及对母婴结局的影响,以便预防和控制围产期妇女GBS感染,优化母婴结局。方法对2017年9—11月在医院作孕期检查的31～40周孕晚期孕妇691例取阴道拭子及直肠拭子进行GBS培养、分离鉴定,分析GBS定植率;采用卡方检验进行GBS感染的单因素分析,采用多因素二元Logistic回归进行GBS感染的高危因素分析;对比两组孕妇及新生儿结局。结果沈阳地区孕晚期孕妇生殖道GBS定植率为7.67%(53/691),其中阴道试子阳性率为4.63%(32/691),直肠试子阳性率为6.22%(43/691);孕妇GBS感染的危险因素显示,在教育程度、生产史、分娩方式、甲状腺异常、妊娠期高血压、妊娠期贫血和妊娠期糖尿病,组间差异均无统计学意义(P>0.05);孕妇GBS感染危险因素,年龄、体质量、流产史和生殖道感染,组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);经多因素二元Logistic回归分析结果显示,年龄、体重、流产史和生殖道感染为影响GBS感染发生的独立危险因素,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05);感染组孕妇胎膜早破、早产发生率高于对照组,经比较差异有统计学意义(P<0.05);产后出血发生率经比较差异无统计学意义(χ2=0.624,P>0.05);感染组新生儿胎儿窘迫、绒毛膜羊膜炎、新生儿黄疸发生率高于对照组,经比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论沈阳市孕妇生殖道GBS定植率较高,建议对孕晚期孕妇开展GBS常规筛查。年龄、体重、流产史和生殖道感染为GBS感染发生的独立危险因素,有必要对本地区的围产期孕妇进行健康宣教,减少GBS感染的发生,进而改善母婴结局。

狂犬病毒CTN-1株在Vero细胞上的适应传代研究

本文报导了用我国狂犬病毒固定毒人二倍体细胞适应株（ＣＴＮ－１）进行Ｖｅｒｏ细胞适应传代研究。通过连续传代培养，滴度可达８．０ｌｏｇＬＤ_（５０）ｍｌ，达到了ＷＨＯ规定的不需浓缩的标准。病毒用０．０１ＭＯＩ感染细胞其产量与１Ｍｏｌ感染量相仿。病毒增殖高峰在４－５天，维持达１５天无明显下降，且可连续收获４－５次。因此，该毒种符合ＷＨＯ提出的疫苗生产毒种要求，可用于狂犬病疫苗生产。

肠道病毒71型疫苗质量控制研究进展

手足口病(Hand foot and mouth disease,HFMD)已成为西太平洋区严重的公共卫生问题之一,肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)是引起HFMD的主要病原体,研发疫苗是控制HFMD流行的有效手段。目前世界范围已有5个EV71全病毒灭活疫苗进入临床试验,其中中国研制的3种EV71疫苗已分别完成III期临床试验,结果表明3种疫苗都具有良好的安全性和保护效果。在EV71疫苗研发中,抗原质控的方法和标准是研发的瓶颈,其中抗原活性测定是工序工艺优化、免疫原性评价和剂量确定的关键指标。综述了EV71疫苗抗原质控的研究进展。

从土壤中提取细菌和芽孢核酸用于PCR的研究

本文探讨了土壤中提取细菌及其芽孢DNA用于PCR扩增检测的方法。我们采用的碘化钠裂解 ,玻璃粉吸附方法 ,可以有效提取和纯化土壤中的细菌及芽孢的核酸 ,操作简便 ,不需要特殊设备。提取的核酸可直接用于PCR扩增反应。我们用炭疽芽孢杆菌A16R疫苗株的芽孢和类鼻疽伯克霍尔德氏菌污染土壤 ,使用这一方法从中提取核酸 ,并用于PCR扩增 ,证实了该方法的实用性。

2004—2013年深圳市乙型病毒性肝炎流行特征分析

目的了解深圳市乙型病毒性肝炎（乙肝）流行特征,为制定乙肝防控策略提供科学依据。方法用描述性流行病学方法对2004—2013年深圳市乙肝疫情资料进行分析。结果深圳市2004—2013年共报告乙肝病例90 292例,剔除慢性病例71 435例,年均报告发病率为19.72/10万,发病率最高年份2007年为33.29/10万,最低年份2013年为9.32/10万。发病年龄构成中,〈15岁占1.58%,15～44岁占89.91%,≥45岁占8.52%;以20～30岁为发病高峰期;男性多于女性,男女性别比为3.33∶1（14 503/4 354）;工人发病数最多,占总病例数42.3%;市郊发病率高于市区。结论深圳市近6年乙肝发病率呈下降趋势;〈15岁儿童病例显著减少,表明乙肝疫苗接种成效显著。

国产腮腺炎和进口麻风腮疫苗免后腮腺炎HI抗体比较

报道了用国产流行腮腺炎减毒活疫苗和美国产麻－风－腮减毒活疫苗接种８～９岁小学生后，采血进行ＨＩ抗体测定比较，其抗体阳转率均在８０％左右，ＧＭＴ为７．３５～１０．０３。

广州首起输入性基孔肯雅热的调查分析

广州网络报告的疑似"登革热"患者经广州市疾病预防控制中心流行病学调查、血清学检测、病原学分离培养等做出的诊断为首例输入性基孔肯雅热。又经中国疾病预防控制中心和广东省疾病预防控制中心对疑似基孔肯雅热患者作进一步基孔肯雅病毒抗体和核酸等检测,并对扩增出的基孔肯雅病毒特异性片段进行了序列测定和分析。核苷酸同源性比较显示,E2区(336nt)和NS1区(314nt)的核苷酸序列与意大利基孔肯雅病毒分离株ITA07-RA1及多株印度的基孔肯雅病毒分离株的序列高度同源(98%以上)。根据现场流行病学和实验流行病学的调查结果,可以确认这例疑似境外感染的输入性登革热实为基孔肯雅热病例,也是中国首例输入性基孔肯雅热病例。

2013—2018年上海市闵行区老年人接种23价肺炎球菌多糖疫苗的异常反应监测

目的评估2013年9月15日—2018年8月31日期间,上海市闵行区≥60岁老年人群接种1剂23价肺炎球菌多糖疫苗后的安全性。方法采用主动监测和被动监测,对接种过1剂23价肺炎球菌多糖疫苗的≥60岁老年人群进行疑似预防接种异常反应(adverse events following immunization,AEFI)监测。结果主动监测的AEFI报告发生率为167.64/10万,未见罕见严重AEFI;被动监测AEFI报告发生率为41.86/10万,主要为一般反应(36.84/10万),以局部红肿和发热为主。54.00%的AEFI发生在疫苗接种后24 h内,且一般反应持续时间均未超过3 d。AEFI报告发生率为2.50/10万,为血管水肿和淋巴结肿大。经统计学分析,主动监测和被动监测的AEFI报告发生率,差异无统计学意义(χ2=4.337、P>0.05)。结论 23价肺炎球菌多糖疫苗具有良好的安全性,可以在老年人群中大规模接种。

病毒活疫苗冻干保护剂筛选研究

为提高冻干病毒性活疫苗的成品滴度和稳定性及提高疫苗生产的出品率，本研究通过对多种保护剂成分如明胶、山梨醇、蔗糖、乳糖、右旋糖苷、精氨酸等及其配比的大量反复筛选试验，已初步选定了数种可供选择并进一步优化完善的冻干保护剂配方。与现行冻干保护剂相比，其疫苗出品率在相同投入下可提高三倍。

环境中“活的非可培养(VBNC)”细菌的研究进展

1982年徐怀恕等通过对V.cholerae和E.coli存活规律的研究,首次发现并提出了细菌“活的非可培养”状态(Viablebutnonculturablestate,VBNC),即细菌处于不良环境条件下,其细胞通常缩成球形(最近许多研究中发现还有些细菌表现为体积增大,细胞伸长),用常规方法培养不能使其生长繁殖,但仍然具有代谢活性,在DNA合成抑制剂的作用下,添加一定量的营养物培养时,这些细胞虽然不能分裂,但仍可以伸长生长,证明其仍然存活,并非死亡。处于VBNC状态的细菌,在一定的条件下可以复苏,并具有潜在的致病性,如V.cholerae即通过这种形式实现越冬。至今已有多种细菌进入VBNC状态的报道,许多G-菌及某些不形成芽胞的G+菌在不良环境条件下都可能进入该状态。这些细菌通过进入VBNC状态,得以渡过难关并存活下来,成为细菌的一种特殊存活形式。现在,细菌VBNC状态已作为微生物学的一个全新概念,受到极大的关注,它对传统的微生态学、食品安全、水质监测、菌种保藏及流行病学研究等均提出了新的挑战,也为人们应用基因工程菌的危险性评估提供了新的认识,本文对环境中VBNC细菌的研究进展进行了综述。

麻疹、腮腺炎、风疹三联减毒活疫苗的安全性和免疫原性研究

为了评价国产麻疹、腮腺炎、风疹三联减毒活疫苗(MMR)的安全性和免疫原性,按整体随机抽样原则,以进口同类疫苗和国产各单价疫苗作为对照,开展现场临床观察;比较不同疫苗组免疫后的反应率、抗体阳转率、保护率及几何平均滴度(GMT)。试验组与对照组接种后,除了试验疫苗的中、强发热反应率高于进口对照疫苗的发热反应率(8.60%与2.00%)外,未见其它有显著差异的不良反应。试验组麻疹免后抗体阳转率高于进口对照疫苗(99.5%与94.6%),麻疹抗体GMT也高于单价麻疹对照疫苗的GMT;试验疫苗与进口MMR疫苗的风疹抗体阳转率、腮腺炎抗体阳转率相比,均无显著性差异。实验研究结果显示,试验MMR疫苗与进口MMR疫苗具有相似的临床反应及良好的免疫原性。

滴鼻免疫有效的诱导粘膜及系统免疫反应

为了探讨粘膜疫苗滴鼻免疫对小鼠不同粘膜部位和系统免疫部位的影响 ,将BALB/c小鼠随机分为三组 ,每组 15只 ,FSM— 2 117或FS— 5 416 4× 10 7cfu/只经滴鼻途径免疫小鼠 ,间隔两周 ,4次免后 7天活杀 ,收集鼻咽、肺、肠、生殖道冲洗液和血清 ,ELISA法检测其中特异性抗福氏、宋内氏LPSIg和AIgG ;分离NALT、鼻通道、脾、小肠PP淋巴细胞 ,细胞中加入全菌破碎抗原共培养 ,于不同时间取出细胞 ,提取RNA做RT PCR。两株菌苗经鼻内免疫均诱发了鼻咽、肺、胃肠道和生殖道等不同粘膜部位及血清中特异性抗福氏、宋内氏LPSIgA、IgG的显著增加(P <0 0 1) ;免疫动物的NALT、NP、PP结淋巴细胞在体外经抗原刺激后均在不同时间出现IFN γ和IL 4mRNA的表达 ,而TGF βmRNA的表达在免疫前后无明显变化。疫苗经鼻粘膜免疫可诱导不同粘膜部位及系统免疫反应的发生 。

深圳市2010—2013年百日咳流行病学特征及抗体水平分析

目的通过对深圳市2010—2013年百日咳流行病学特征及健康人群百日咳抗体水平进行分析,为预防控制百日咳提供依据。方法采用描述性流行病学方法对深圳市2010—2013年法定传染病报告系统中的百日咳病例个案数据及2013年深圳市健康人群百日咳抗体水平进行分析。结果深圳市2010—2013年共报告百日咳病例176例,报告年均发病率为0.54/10万,其中2011年最高（0.72/10万）。报告病例中〈18月龄的占94.89%,有春夏季高发的现象,病例报告单位以深圳市儿童医院为主（92.05%）。2013年640份健康人群血清百日咳Ig G抗体阳性率为46.25%,其中≥20岁组的最高（70.67%）,4-5岁组的最低（25.45%）。各年龄组健康人群百日咳抗体水平阳性率差别有统计学意义（χ^2=19.01,P〈0.001）。结论深圳市近几年百日咳报告病例以18月龄以下儿童为主,除20岁以上成人外,其他年龄组人群百日咳抗体水平普遍不高,应针对适龄儿童制定针对性的百日咳防控策略。

A群脑膜炎球菌多糖-破伤风类毒素结合物中游离多糖测定方法的建立

本文建立一种测定A群脑膜炎球菌多糖 破伤风类毒素 (PS TT)结合物中游离多糖的方法。用 80 %乙醇使PS TT结合物沉淀 ,再用 6 0 %乙醇洗涤沉淀使未结合多糖溶解 ,使与TT结合的和未结合的多糖分离并分别测定。该方法可有效分离结合的与未结合的多糖并分别测定 ,结合物中外加多糖可定量回收。本方法适用于测定A群脑膜炎球菌多糖

肠道病毒71型抗原ELISA定量检测方法的建立及应用

目的建立肠道病毒71型（EV71）抗原ELISA定量检测方法,用于EV71疫苗生产工艺中抗原定量检测。方法选取抗EV71单克隆抗体作为包被抗体,HRP标记抗EV71多克隆抗体作为酶标二抗,建立EV71抗原ELISA定量检测方法。该方法经系统验证后,应用于定量检测2BS及Vero细胞基质EV71疫苗生产工艺过程样品的抗原含量。结果验证结果显示,该方法的线性范围为3.125~50.000 U/m L,样品回收率为92.0%~110.0%,变异系数小于8.8%;孵育时间及温度在一定范围内偏差的样品回收率为100.8%~113.8%;检测其他肠道病毒中抗原其A值均小于cut-off值;试剂于37℃孵育3 d后的检测样品回收率为101.4%~112.4%;2BS及Vero细胞基质EV71疫苗生产工艺过程样品的适用性检测中,抗原回收率为92.1%~114.9%。结论建立并验证EV71抗原ELISA定量检测方法,其准确度、精密度、耐用性均优良,特异性强、稳定性好,适用于不同细胞基质的EV71疫苗及多价手足口病疫苗生产工艺过程的质量控制。

人免疫球蛋白中肠道病毒71型中和抗体效价的测定

采用经典微量细胞病变法,应用近两年分离自中国手足口病（HFMD）高发区的3株肠道病毒71型（EV71）病毒株,对中国不同血液制品厂家生产的35批人免疫球蛋白制品进行抗-EV71中和效价检测。结果显示,3株不同EV71病毒株间的抗-EV71中和效价差异均在4倍以内,差异无显著的统计学意义（F=2.323,P〉0.05）。根据这3株毒株检测结果判定,35批人免疫球蛋白的抗-EV71均为阳性,肌肉注射用免疫球蛋白（简称肌丙）的抗-EV71-GMTs（525.9）显著高于静脉注射用免疫球蛋白（简称静丙）的GMTs（252.3,F=66.518,P〈0.01）。30批静丙的抗-EV71-GMTs中和效价分布在128.0-384.0之间。应开展原料血浆中抗-EV71中和效价的筛选,研制高效价的EV71特异性免疫球蛋白制品,用于HFMD的治疗和预防。

抗菌肽抗菌机制及其应用研究进展

抗菌肽是一类小分子肽,具有广谱的抗菌活性。以往对抗菌肽抗菌机制的研究主要集中在细菌细胞膜的作用上,包含"桶板"模型、"毯式"模型,"环形孔"模型和"凝聚"模型。近年来相继发现某些抗菌肽可以作用于细菌细胞内部,与核酸物质结合,阻断DNA复制、RNA合成;影响蛋白质合成;抑制隔膜、细胞壁合成,阻碍细胞分裂;抑制胞内酶的活性。本文从胞内机制和胞外机制两个角度对抗菌肽的抗菌机制进行综述,以期阐明各类抗菌肽的作用机制,为进一步研究菌株耐药性、杀菌效果及其杀菌机制提供科学根据。