周郁鸿治疗慢性再生障碍性贫血经验及其用药组方规律探索

再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA),简称再障,是以造血干细胞损伤、全血细胞减少为特征的一组综合征。国内报道发病率为7.4/106,其中慢性再障占80%以上,慢性再障发病慢,病程较长,部分患者会转变为输血依赖的重型再障,预后较差^([1])。

超微针刀松解颈肩部激痛点治疗颞下颌关节紊乱综合征临床观察

颞下颌关节紊乱综合征(temporomandibular di-sorders,TMD)是受凉、熬夜、过度咀嚼、口腔咬合、精神心理压力等多种因素作用下机制未明的,表现为单侧(少数双侧)颞下颌附近酸胀疼痛、张口受限、关节弹响绞锁等症状的颌面疼痛性疾病,常伴有头痛、耳鸣、颈肩部症状,以20~40岁青壮年女性多见^([1])。有学者发现,TMD患者的头颈姿势异于健康人,呈头前伸、前倾状态^([2-3])。

hsa-circ-002179靶向miR-143-3p调控自噬-凋亡平衡在胃癌5-氟尿嘧啶化疗耐药性中的作用研究

目的探究hsa-circ-002179靶向miR-143-3p调控自噬-凋亡平衡对胃癌的5-氟尿嘧啶(5-Fu)化疗耐药性的影响。方法通过5-Fu处理AGS细胞构建5-Fu耐药细胞模型(AGS/5-Fu),采用CCK8法检测5-Fu对AGS和AGS/5-Fu细胞活性的影响,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中hsa-circ-002179和miR-143-3p的表达;通过流式细胞术和Western blot分别检测细胞凋亡水平与自噬相关蛋白LC3、Beclin-1和p62的表达。同时,通过软件预测hsa-circ-002179与miR-143-3p的结合位点,并采用RIP和双荧光素酶实验验证其结合作用。结果与对照组比较,耐药组的细胞活性[(172.33±9.53)%比(106.00±6.16)%,P<0.01]和自噬水平升高、凋亡率(20.5%比43.8%,P<0.01)降低,hsa-circ-002179表达升高[(4.46±0.34)比(1.05±0.66),P<0.01];转染si-002179后,耐药细胞活性降低[(80.00±2.45)%比(102.67±7.13)%,P<0.05],而凋亡水平升高(31.3%比21.8%,P<0.05)。RIP和双荧光素酶报告实验证实hsa-circ-002179与miR-143-3p直接结合,且与对照组比较,耐药细胞中miR-143-3p的表达降低[(0.38±0.05)比(1.04±0.07),P<0.01]。并且,hsa-circ-002179能够调控miR-143-3p的水平。同时,miR-143-3p抑制剂处理能够升高转染si-002179后的耐药细胞自噬水平。自噬抑制剂处理降低了耐药细胞的自噬水平和细胞活性,升高凋亡水平;在此基础上转染OE-002179则升高自噬水平和细胞活性,降低凋亡水平,进一步转染miR-143-3p模拟物可以逆转以上变化。结论hsa-circ-002179靶向miR-143-3p可能可以调控自噬-凋亡平衡,进而影响胃癌细胞的5-Fu化疗耐药性。

温针灸结合耳穴贴压治疗寒凝湿滞型肩周炎临床疗效及安全性研究

肩周炎以肩关节疼痛和活动不便为主要症状,好发于50岁左右人群,若不能及时治疗,会严重影响肩关节功能^([1])。其病因可能与肩周受凉、慢性劳损、外伤等因素有关,早期肩部酸痛,后期组织粘连,出现严重功能障碍^([2])。目前西医多采用止痛药物治疗,但病情严重者会出现关节活动受限类后遗症^([3])。

浅论《血证论》治脾阴以治血证

唐容川所著《血证论》提出脾阴对于血证类疾病治疗具特殊意义,即脾阴濡润,方能津血充盛,五脏六腑得到滋养,四肢百骸得以进行正常的功能活动。脾阴能够濡润脾脏并激发脾的生理功能,当脾阴生理功能正常使得津血生化有源,濡养周身脏腑组织。笔者通过分析脾、脾阴功效及二者与血证的关系,并结合卵巢早衰型闭经及人乳头瘤病毒(HPV)感染二则案例,结合临床运用阐述从脾阴论治血证的体会。

五味消毒饮联合棉条外用对青少年甲沟炎的临床疗效观察

甲沟炎是一种最常见的累及甲单元的感染性疾病,发病率较高,约占全科门诊足部疾病的20%,其中大拇趾甲最易受累[1-3]。常因侧缘甲皱襞被相邻的甲板损伤,出现炎症性肉芽肿反应,进而出现疼痛、流脓以及甲皱襞肥厚等表现,严重影响患者生活质量[4]。甲沟炎主要见于青少年,研究发现其危险因素有过度或不合适的侧缘甲板的修剪、反复趾甲损伤、趾甲外伤、穿鞋过紧以及无能力护理趾甲等[3]。甲沟炎有高发病率、高复发率等特点,经久不愈可迁延为慢性甲沟炎或者脓性指头炎,少数患者可能出现骨髓炎,严重影响青少年的学习及生活[5]。本文选取在杭州市第三人民医院甲病联合门诊(骨科+皮肤科)就诊的青少年甲沟炎患者,采用五味消毒饮联合棉条外用治疗,取得满意疗效,现报道如下。

CPC/PMMA复合骨水泥联合明胶海绵预防伴椎体前壁破裂骨质疏松性椎体骨折术中骨水泥渗漏的疗效观察

随着老龄化社会的到来,骨质疏松性椎体压缩性骨折发病率呈现不断上升趋势[1],临床上常采用经皮椎体后凸成形术治疗老年骨质疏松性椎体压缩性骨折并取得了良好效果[2]。随着该技术的普及,相关手术并发症也日益凸显,尤其是骨水泥渗漏问题[3]。目前骨水泥以聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)的应用最为广泛,但其缺乏生物活性且弹性模量高;而磷酸钙骨水泥(CPC)虽具有一定的强度,后期降解后存在支撑力不够的问题。在单独使用时两者均非理想的骨水泥,有研究表明CPC/PMMA两种材料按一定比例调配可兼顾两者的优点,是临床上具有应用潜力的骨水泥[4]。在临床中老年骨质疏松性椎体骨折常伴随着椎体前壁的破裂,骨水泥易从破裂的骨皮质处渗漏,为减少骨水泥的渗漏、提高手术的安全性,笔者采用明胶海绵封堵裂口、CPC/PMMA复合骨水泥注射治疗,取得了满意的效果,现报道如下。

基于尿控技术的改良经尿道前列腺钬激光剜除术治疗大体积前列腺增生临床观察

良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)是引起中老年男性下尿路症状的常见原因,经尿道前列腺电切术(transurethral resection of the prostate,TURP)是泌尿外科治疗BPH的“金标准”^([1])。TURP对于前列腺体积较小的BPH患者疗效确切,但用于治疗前列腺体积>80 mL的BPH患者时,术中出血量明显增加,术后下尿路症状改善不明显,且术后持续膀胱冲洗时间以及导尿管留置时间延长^([2-3])。美国泌尿外科协会指南指出,钬激光或铥激光前列腺剜除术是目前大体积前列腺增生和小体积前列腺增生患者均适用的微创治疗方法^([4])。

活血方定向透药联合早期康复训练治疗斜外侧腰椎椎间融合术后残留腰腿痛疗效观察

斜外侧入路腰椎椎间融合术(oblique lumbar interbody fusion,OLIF)在退行性脊柱侧弯、多节段腰椎间盘突出及腰椎管狭窄等脊柱退行性疾病中广泛应用,并取得了较好的疗效^([1])。但是,部分患者术后出现左侧髂腰部疼痛,以腹股沟或大腿疼痛及感觉障碍为主,发病率为4.55%~28.5%^([2]),严重影响患者生活质量,甚至产生焦虑症状。临床多建议早期锻炼及口服非甾体消炎药(NSAIDs)、肌松药等缓解症状,但大量或长期服用可能造成肝肾功能损伤及消化道溃疡等副作用^([3])。

电针尺泽、上巨虚对急性呼吸窘迫综合征患者血清血管生成素-1、2的影响

急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)的特征性病理变化为受损的内皮细胞和上皮细胞使肺泡中充满富含蛋白的水肿液^([1])。在炎症、损伤及血管生成的过程中,血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)起到稳定内皮细胞的作用^([2])。血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)可活化内皮细胞,降低内皮细胞间连接的稳定性,促进血管的炎症性重塑,且与ARDS的发展存在明显的相关性^([3-4])。尺泽穴为肺经“合穴”,电针尺泽有平喘及降低炎症因子的作用^([5])。

Kiss-1/GPR54系统在PCOS模型大鼠卵巢颗粒细胞中的表达及对卵泡发育障碍的作用机制

目的初步探讨Kiss-1/GPR54系统在多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠卵巢颗粒细胞中的表达,并分析其与PCOS之间的关联。方法筛选出14只动情规律的雌性SD大鼠,按照随机数字表法分为正常对照组和模型组,每组7只。其中模型组大鼠予来曲唑-羧甲基纤维素混悬液0.1mg/(kg·d)连续灌胃21 d以构建PCOS大鼠模型。收集大鼠血清、卵巢组织、卵巢颗粒细胞。然后计算大鼠卵巢指数,对卵巢组织进行苏木精-伊红染色法,采用酶联免疫吸附测定法检测血清激素水平,免疫荧光染色检测颗粒细胞中亲吻素(Kp)、G蛋白偶联受体54(GPR54)荧光强度,实时定量反转录聚合酶链式反应检测颗粒细胞中Kiss-1、GPR54基因表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠卵巢囊状扩张卵泡及闭锁卵泡增加,卵泡颗粒细胞层变薄;卵巢指数增大[(1.22±0.10)mg/g比(0.82±0.13)mg/g,P<0.05];血清黄体生成素[(66.32±3.98)IU/L比(11.87±5.54)IU/L]、睾酮[(33.72±3.57)ng/mL比(8.40±2.94)ng/mL]、Kp水平[(1506.79±154.82)pg/mL比(289.57±89.20)pg/mL]均升高(P<0.05);卵巢颗粒细胞中Kp荧光强度[(1601852.67±378567.82)比(3685156.00±359825.63)]、GPR54荧光强度[(1298372.25±297701.61)比(2961456.58±309119.01)]及Kiss-1基因表达[(0.10±0.03)比(1.11±0.14)]、GPR54基因表达[(0.10±0.05)比(1.00±0.13)]均降低(P<0.05)。结论卵巢表达的Kiss-1/GPR54系统可能通过调节颗粒细胞从而影响PCOS大鼠卵泡发育。

苦藏花素协同吉非替尼抑制非小细胞肺癌细胞增殖的作用研究

在我国,约35%~40%的非小细胞肺癌患者由表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)编码基因突变所致[1],吉非替尼作为第一代表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs),是EGFR突变的晚期非小细胞肺癌的标准一线治疗方案,但其获得性耐药是疗效限制的主要问题[2-3]。苦藏花素是藏红花最重要的生物活性成分之一,含量仅次于藏红花苷,药效研究表明,苦藏花素具有显著的抑菌作用和抗肿瘤药理活性[4-6]。为深入研究苦藏花素的抗肿瘤作用,本课题组进行了苦藏花素对人非小细胞肺癌细胞株A549、H1650和PC9的增殖作用研究,发现苦藏花素对A549细胞增殖抑制作用最明显,故本研究选择以人肺癌A549细胞为受试细胞,研究苦藏花素与吉非替尼对人肺癌细胞增殖的协同作用,为在临床中联合应用藏红花治疗非小细胞肺癌提供理论依据。

傅萍从心肾论治卵巢储备功能减退不孕症经验

卵巢储备功能减退(diminished ovarian reserve,DOR)是指卵巢内卵母细胞数量减少和(或)质量下降,导致卵巢功能不足,引起生育能力下降,同时伴有抗苗勒管激素水平降低、窦卵泡计数减少、促卵泡激素水平升高[1]。DOR病因可能与遗传因素、年龄因素、医源性因素、免疫及感染因素、环境-社会心理和生活方式有关[2]。DOR患者生育力降低,表现为不孕、复发性流产、辅助生殖治疗中卵巢对促排药物不敏感或反复移植失败等。如《素问·上古天真论》所言“五七,阳明脉衰,面始焦,发始堕”,女子五七阳明脉气血渐亏,肾阴癸水衰减,则难有子。傅萍教授系江南何氏女科传人,第五批全国老中医药专家学术经验继承工作指导老师,对DOR不孕症的临床诊治独具心得,多从心肾论治,主张“静能生水”,强调调“心”的重要性。现将傅萍教授论治DOR不孕症经验总结如下。

红景天对急性呼吸窘迫综合征小鼠肺内皮细胞BMP9表达的影响

目的探讨红景天对肺血管通透性和骨形态发生蛋白9(BMP9)表达的影响。方法将90只C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组和红景天低、中、高剂量组,每组18只。采用盲肠结扎穿孔法造模,假手术组开腹后关腹,红景天低、中、高剂量组分别用40、80、160 mg/kg红景天灌胃5 d,假手术组和模型组灌胃等量生理盐水。处死后,计算各组小鼠肺湿/干重比值,利用伊文思蓝染色法检测肺内皮细胞的渗透性,对小鼠肺组织进行免疫组化、Western blot法检测BMP9表达水平。使用脂多糖(LPS)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)形成内皮细胞炎性损伤模型,用CCK-8法检测细胞活性,筛选出合适的红景天给药浓度。将细胞分为对照组(无LPS诱导)、LPS组和25、50、100μg/mL红景天组,应用实时荧光定量PCR和Western blot检测BMP9表达情况。结果与模型组比较,红景天低、中、高剂量组小鼠肺湿/干重比值[(7.42±0.25)、(6.75±0.25)、(5.93±0.27)比(8.39±0.39),P<0.01]和肺内皮细胞的渗透性[(620.73±0.36)%、(469.26±0.39)%、(179.20±0.36)%比(706.86±0.37)%,P<0.05或P<0.01]均显著降低,且与红景天剂量呈正相关。Western blot和免疫组化检测发现,与假手术组比较,模型组BMP9表达明显减少;而红景天低、中、高剂量组BMP9表达较模型组增加,且与剂量呈正相关。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组比较,LPS组HUVEC中BMP9 mRNA相对表达量显著下降[(0.18±0.08)比(1.00±0.11),P<0.01];与LPS组比较,红景天给药组BMP9 mRNA相对表达量随给药浓度增加而增加[(0.39±0.09)、(0.52±0.10)、(0.78±0.09)比(0.18±0.08),P<0.05或P<0.01],但均低于对照组。Western blot检测细胞BMP9蛋白表达发现,LPS诱导细胞炎性反应可以导致BMP9表达明显下降,红景天给药组的BMP9表达量均高于LPS组,且与剂量相关。结论红景天减轻了急性呼吸窘迫综合征小鼠肺损伤并在体外缓解了LPS诱导的内皮损伤,其肺血管保护作用可能与增加BMP9表达有关。

基于PI3K/AKT信号通路探讨针刺对脑缺血再灌注损伤模型大鼠线粒体自噬的机制研究

目的 观察针刺疗法对脑缺血再灌注损伤(CIRI)模型大鼠脑组织线粒体自噬的影响,并探究其对脑组织保护作用的机制。方法 40只SD大鼠根据随机数字表法分为假手术组、CIRI组、非穴位针刺组、针刺穴位组,每组6只。通过改良线栓法建立CIRI模型大鼠,针刺穴位组针刺“大椎”“人中”“百会”三穴,非穴位针刺组针刺穴位左侧旁开0.3 cm处,假手术组和CIRI组不行针刺。针刺疗法72 h后,通过Zea Longa法评价大鼠神经功能,分离大鼠脑组织,通过TTC法检测脑组织梗死体积,JC-1法检测脑组织线粒体膜电位。通过Western blot检测自噬相关蛋白及PI3K-AKT信号通路相关蛋白表达。结果 与假手术组比较,CIRI组大鼠神经功能损伤评分明显升高[(3.50±0.96)分比(0.00±0.00)分,P<0.05],CIRI组大鼠脑组织线粒体自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、Bcl2腺病素EIB19KD相互作用蛋白(BNIP3)水平[(4.48±0.75)比(1.00±0.14),(4.77±0.44)比(1.00±0.09),P<0.05]显著升高,p62水平[(0.98±0.14)比(5.01±0.17),P<0.05]降低,自噬增强,线粒体膜电位降低[红/绿荧光比(1.08±0.10)比(4.99±0.13),P<0.05],同时PI3K-AKT信号通路相关蛋白磷酸化水平显著降低[p-PI3K:(1.04±0.08)比(5.09±0.07),p-AKT:(0.99±0.15)比(4.43±0.14),p-mTOR:(0.84±0.08)比(5.00±0.16),P<0.05];与非穴位针刺组比较,针刺穴位组CIRI模型大鼠脑组织损伤减轻,表现为大鼠神经功能损伤评分[(2.17±0.90)分比(3.17±0.69)分,P<0.05]、脑梗死体积百分比[(31.25±1.97)%比(39.23±1.89)%,P<0.05]以及脑半球肿胀百分比[(3.42±0.32)%比(4.98±0.37)%,P<0.05]显著降低(P<0.05),线粒体膜电位升高[红/绿荧光比(3.24±0.13)比(1.25±0.06),P<0.05],自噬水平降低,同时PI3K-AKT信号通路相关蛋白p-PI3K、p-AKT和p-mTOR水平显著升高[p-PI3K:(3.07±0.14)比(1.18±0.12),p-AKT:(3.50±0.15)比(1.42±0.13),p-mTOR(2.65±0.16)比(1.01±0.11),P<0.05]。结论 针刺疗法可能通过激活PI3K/AKT信号通路抑制线粒体自噬,从而实现对CIRI模型大鼠的脑保护作用。

陈浩波辨治先兆流产合并绒毛膜下血肿经验

绒毛膜下血肿(subchorionic hematoma,SCH)是指在妊娠期胎盘的绒毛膜与底蜕膜间分离出血形成血液积聚,常可导致不良妊娠结局[1]。部分SCH患者无明显临床症状,超声检查提示孕囊与子宫肌层之间存在液性暗区或低回声区[1]。SCH在自然妊娠妇女中的发病率可高达25%[2],在反复妊娠丢失以及辅助生殖妇女中发病率更高[3-4]。近年来,由于阿司匹林、低分子肝素等抗凝剂在孕期的使用,SCH发病率呈上升趋势[5-6]。目前SCH发病机制尚未明确,临床治疗方法局限、效果不佳[7]。陈浩波教授是温州市名中医,从事中医妇科工作30余年,对SCH的中医辨证论治具有丰富的经验,临床疗效好,现将陈教授诊治SCH的经验介绍如下,以飨同道。

基于AMPK/mTOR自噬信号通路研究达格列净对糖尿病肾病模型大鼠肾损伤改善的作用机制

目的研究达格列净对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)模型大鼠肾损伤的改善机制。方法40只清洁级Wistar雄性大鼠分为空白对照组(蒸馏水灌胃)、模型组(蒸馏水灌胃)、达格列净低剂量组[达格列净片1 mg/(kg·d)灌胃]、达格列净高剂量组[达格列净片10 mg/(kg·d)灌胃]各10只,干预12周。观察各组大鼠体质量、24 h尿量、24 h尿蛋白、随机血糖、血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)的差异;苏木精-伊红染色观察各组大鼠肾脏组织病理变化;免疫组化检测各组大鼠肾组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达;实时荧光PCR(qRT-PCR)检测各组大鼠肾组织AMPK、mTOR mRNA表达。结果空白对照组、达格列净高剂量组、达格列净低剂量组、模型组大鼠体质量依次降低,24 h尿量、随机血糖、24 h尿蛋白、BUN、Scr依次升高,组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。模型组、达格列净低剂量组、达格列净高剂量组大鼠肾脏组织病理变化比较,肾小球大小逐渐恢复,细胞排列依次紧密有序,肾小管上皮细胞空泡样变性逐渐减小,细胞排列整齐度依次增加,出血减少。空白对照组、达格列净高剂量组、达格列净低剂量组、模型组大鼠肾脏组织AMPK蛋白表达[(0.36±0.03)、(0.27±0.02)、(0.21±0.02)、(0.18±0.02)]依次降低(P<0.01),mTOR表达[(0.13±0.02)、(0.17±0.02)、(0.26±0.02)、(0.31±0.03)]依次升高(P<0.01),AMPK mRNA相对表达量[(1.00±0.08)、(0.77±0.07)、(0.52±0.05)、(0.26±0.03)]依次降低(P<0.01),mTOR mRNA相对表达量[(1.00±0.06)、(1.17±0.08)、(1.76±0.13)、(2.31±0.16)]依次升高(P<0.01)。结论达格列净可激活AMPK/mTOR自噬信号通路,保护肾小球滤过屏障,减少蛋白尿,延缓DN大鼠的疾病进程。

胡柚皮黄酮对棕榈酸诱导的脂肪变性肝细胞中线粒体膜电位以及自噬相关蛋白表达的影响

目的观察胡柚皮黄酮(PTEC)对棕榈酸(PA)诱导的肝细胞脂肪变性的影响。方法MTT、油红O染色联合检测,设立0.3 mmol/L PA诱导HepG2细胞建立脂肪变性模型,不同浓度(0、20、40、80、160 mg/L)PTEC干预后,采用油红O染色法观察肝细胞脂肪变性;荧光探针法观测细胞内活性氧水平及线粒体膜电位变化;免疫印迹法检测自噬效应蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白质1轻链3(LC3)及P62蛋白表达。结果PA(0.3 mmol/L)诱导后,HepG2细胞内脂滴[(39.13±3.15)比(1.00±0.13),P<0.01]和活性氧[(18.56±1.48)比(1.00±0.25),P<0.01]含量明显增高;与PA组比较,PA+40、80、160 mg/L PTEC组细胞内脂滴[(16.35±4.00)、(6.26±1.69)、(2.76±2.05)比(39.13±3.15),P<0.01]和活性氧[(9.13±1.12)、(7.00±0.45)、(5.03±1.00)比(18.56±1.48),P<0.01]均明显降低,并在荧光显微镜下观察到线粒体膜电位恢复;进一步通过Western blot检测发现,LC3和Beclin-1蛋白表达上调,P62蛋白表达下调。结论PTEC能改善肝细胞脂肪变性和氧化应激反应,机制可能与其调控线粒体自噬,维持线粒体功能稳定有关。

牟重临运用“肝脾同调”法临床验案举隅

肝脾相关理论起源自《黄帝内经》及《难经》。《难经·七十七难》曰:“见肝之病,则知肝当传之于脾,故先实其脾气,无令得受肝之邪也。”肝脾的相关性,主要体现在肝主疏泄与脾主运化的协调平衡。脾之运化得肝之疏泄方能运转自如,肝之疏泄功能亦有赖于脾之滋养。诚如黄元御《四圣心源》所言:“然土气不升,固赖木气以升之。而木气不达,实赖土气以达焉。”

三叶青黄酮通过TLR4/NF-κB通路调控NLRP3小体激活改善大鼠心肌细胞缺氧再复氧损伤的作用及机制

目的探究三叶青黄酮(RTHF)对大鼠心肌细胞缺氧再复氧(H/R)损伤的作用及其可能机制。方法以大鼠心肌细胞H9C2为研究对象,分为对照组、H/R组、H/R+低浓度RTHF(L-RTHF)组(25μg/mL)、H/R+中浓度RTHF(M-RTHF)组(50μg/mL)和H/R+高浓度RTHF(H-RTHF)组(100μg/mL)。通过CCK-8法检测各组细胞活力;试剂盒检测各组细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)含量;DCFH-DA探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot检测各组细胞中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、消皮素D的N端切割产物(GSDMD-N)、Toll样受体4(TLR4)、磷酸化核因子κB p65(p-NF-κB p65)、核因子κB p65(NF-κB p65)的表达水平。结果与对照组比较,H/R组H9C2细胞活力[(71.33±1.70)%比(100.00±2.94)%,P<0.01]、SOD水平[(15.54±0.36)U/mg prot比(34.54±0.87)U/mg prot,P<0.01]降低,ROS相对DCF强度[(3.72±0.12)比(1.00±0.10),P<0.01]和LDH水平[(387.57±9.37)U/L比(182.80±11.53)U/L,P<0.01]升高,NLRP3[(2.75±0.04)比(1.00±0.02)、(4.71±0.18)比(1.00±0.11),P<0.01]、Caspase-1[(3.02±0.11)比(1.00±0.06)、(3.33±0.09)比(1.00±0.12),P<0.01]、ASC[(3.32±0.12)比(1.00±0.09)、(5.30±0.15)比(1.00±0.10),P<0.01]、GSDMD-N[(3.69±0.14)比(1.00±0.13)、(3.23±0.08)比(1.00±0.06),P<0.01]、TLR4[(4.00±0.12)比(1.00±0.09)、(5.68±0.20)比(1.00±0.10),P<0.01]、p-NF-κB p65[(6.81±0.16)比(1.00±0.10)、(3.25±0.07)比(1.00±0.05),P<0.01]相对mRNA和蛋白水平升高;与H/R组比较,H/R+M-RTHF组和H/R+H-RTHF组的细胞活力[(77.00±2.16)%、(82.00±2.16)%比(71.33±1.70)%,P<0.05或P<0.01]、SOD水平[(23.43±1.50)U/mg prot、(28.66±1.22)U/mg prot比(15.54±0.36)U/mg prot,P<0.05或P<0.01]升高,ROS[(3.24±0.05)、(2.57±0.04)比(3.72±0.12),P<0.05或P<0.01]、LDH[(332.77±5.76)U/L、(253.36±9.43)U/L比(387.57±9.37)U/L,P<0.05或P<0.01]水平降低,NLRP3[(1.86±0.06)、(1.56±0.09)比(2.75±0.04),(2.97±0.11)、(1.86±0.06)比(4.71±0.18),P<0.05或P<0.01]、Caspase-1[(2.06±0.13)、(1.27±0.06)比(3.02±0.11),(2.12±0.15)、(1.42±0.09)比(3.33±0.09),P<0.05或P<0.01]、ASC[(2.40±0.25)、(2.19±0.14)比(3.32±0.12),(2.46±0.08)、(1.28±0.05)比(5.30±0.15),P<0.05或P<0.01]、GSDMD-N[(2.43±0.07)、(2.19±0.13)比(3.69±0.14),(1.91±0.07)、(1.46±0.07)比(3.23±0.08),P<0.05或P<0.01]、TLR4[(3.52±0.09)、(1.88±0.11)比(4.00±0.12),(4.04±0.32)、(2.07±0.07)比(5.68±0.20),P<0.05或P<0.01]、p-NF-κB p65[(4.09±0.12)、(3.03±0.20)比(6.81±0.16),(1.93±0.31)、(1.39±0.12)比(3.25±0.07),P<0.05或P<0.01]相对mRNA和蛋白水平降低,且这种变化呈现RTHF剂量依赖性。结论在H/R诱导的大鼠心肌细胞中,RTHF可能通过抑制ROS和TLR4/NF-κB通路调控NLRP3小体激活,进而抑制细胞焦亡。