间断小剂量DEN诱发大鼠肝癌模型研究

目的:建立实验动物死亡率低、诱癌时间短及与人肝癌的发生过程相似的肝癌模型。方法:取3～4个月龄SD大鼠65只,随机分为两组,实验组大鼠给予0.2%二乙基亚硝胺(diethylnitrosa mine,DEN)灌胃,按体质量10mg/kg给药,每周5次,至14周停药。对照组给予等量生理盐水灌胃。结果:实验组大鼠体质量、一般精神状况均不如对照组,P<0.05。诱癌第14周所有实验组大鼠均诱发出肝细胞性肝癌。结论:间断小剂量给予DEN,可以方便、简单、稳定地建立大鼠肝癌模型。

藻红蛋白介导的光敏反应可诱导人肝癌7721细胞凋亡

目的 :探讨藻红蛋白介导的光动力效应对肝癌细胞的杀伤机制是否与诱导瘤细胞凋亡有关。方法 :对培养的人肝癌细胞进行光动力治疗处理 ,通过观察DNALadders的形成和形态学改变 ,判断凋亡的发生与否。结果 :可观察到在经过光动力治疗处理一定时间后 ,772 1细胞出现典型的凋亡形态学改变 ,同时伴有特征性的DNALadders出现。结论 :藻红蛋白介导的光敏反应杀伤肿瘤细胞与诱导人肝癌细胞凋亡相关 ,是一种很有前景的光动力药物。

血管内皮生长因子在肺癌组织中的表达及其临床意义研究

目的 :研究血管内皮生长因子 (vas cularendotheliagrowthfactor ,VEGF)基因在肺癌中的表达及与肺癌临床病理生理特征和预后的关系。方法 :采用免疫组化方法(LSAB法 ) ,检测 114例肺癌组织、癌旁组织和 3 0例肺良性病变组织中的VEGF表达水平。结果 :1)肺癌组织中VEGF表达水平(78 70± 17 11)显著高于癌旁组织 (4 6 76±2 1 97)和肺良性病变组织 (17 70± 15 5 3 ) ,P <0 0 1;癌旁组织显著高于肺良性病变组织 ,P <0 0 5。 2 )VEGF表达水平与肺癌原发肿瘤大小、淋巴结转移状态、pTNM分期、细胞分化程度均有密切关系 ,P <0 0 1。 3 )多元回归分析发现VEGF在腺癌中表达最高 ,鳞癌次之 ,腺鳞癌最低 ,P <0 0 1。 4)肺癌组织中VEGF高表达组患者 5年生存率 (18 18% )明显低于低表达组 5年生存率 (61 19% ) ,P <0 0 1;VEGF表达水平与肺癌患者术后生存期呈显著负相关 ,P <0 0 1。结论 :肺癌组织中VEGF的表达异常参与了肺癌的发生、发展、转移 。

肿瘤患者外周血淋巴细胞与肿瘤细胞体外化疗药敏研究

目的 :研究肿瘤患者外周血淋巴细胞 ( peripheralbloodlymphocytes ,PBL )的体外化疗药物敏感性 ,以及与肿瘤细胞化疗药敏的相关性。方法 :采用MTT法测定了 14 2例肿瘤患者PBL及其肿瘤细胞对 17种临床常用化疗药物的敏感性。结果 :神经胶质瘤患者PBL与肿瘤细胞对15种化疗药的敏感性相关性好 ,差异无统计学意义 ,P >0 0 5 ;骨肉瘤患者PBL与肿瘤细胞对 13种化疗药的敏感性相关性好 ,差异无统计学意义 ,P >0 0 5 ;乳腺癌患者PBL和肿瘤细胞对 12种化疗药物的敏感性差异有统计学意义 ,P <0 0 5或P<0 0 1。结论 :神经胶质瘤和骨肉瘤患者PBL对化疗药物的敏感性具有良好的正相关性 。

饮水微囊藻毒素污染促肝癌作用实验研究

目的 :探讨饮用水低剂量微囊藻毒素对大鼠实验性肝癌形成的促癌作用。方法 :应用二乙基亚硝胺 (DEN)致大鼠肝癌前病变细胞增生灶 (Gamma -谷氨酰转肽酶阳性灶 )发生的短期实验模型研究经饮水摄入低剂量微囊藻毒素的促肝癌作用。结果 :二乙基亚硝胺启动后连续 9周饮用含微囊藻毒素0 5 2 9μg/L的藻培养水 ,大鼠肝Gamma 谷氨酰转肽酶阳性灶数量和面积均出现上升趋势。结论

肝硬化患者肝脏炎症对AFU诊断肝癌价值的影响

目的 :研究岩藻糖苷酶 (AFU)作为肝癌标志物在有炎症活动的肝炎后肝硬化这一特殊人群中的诊断价值 ,以寻找有效的方法应用于肝炎后肝硬化患者肝癌的筛查。方法 :收集肝炎后肝硬化患者血清 4 2例 ,肝癌患者血清 4 3例 ,慢性肝炎患者血清 2 4例 ,疑似肝癌患者 6例 ,正常人血清 5 3例 ,分别以酶法和免疫放射方法对AFU和甲胎球蛋白 (AFP)进行定量检测。结果 :肝炎后肝硬化患者AFU含量为4 5 5 64± 15 3 5nmol/ (mL·h) ,肝癌患者为 5 0 2 2± 2 30 2 4nmol/ (mL·h) ,慢性肝炎患者 5 0 0± 12 7 0 5nmol/ (mL·h) ,三者均明显高于正常人血清 32 4± 5 7nmol/ (mL·h)。肝癌患者AFU水平虽然高于肝硬化患者 ,但统计学检验二者差异无显著意义 ,P >0 0 5。同时测定各组患者血清中AFP含量 ,肝癌患者AFP含量显著高于肝硬化和慢性肝炎患者 ,P <0 0 0 1。方差分析显示肝硬化和肝癌血清中AFU活性不随AFP水平的升高而升高。结论 :AFU在肝炎后肝硬化患者、慢性肝炎和肝癌患者血清中均明显升高 ,AFU的测定难以对肝炎后肝硬化和肝癌进行区分。

腹腔灌注顺铂射频热疗联合EF方案治疗晚期胃癌临床观察

目的:观察腹腔灌注顺铂(DDP)射频热疗联合静脉注射表阿霉素(EPI)、5氟尿嘧啶(5FU)治疗晚期胃癌的疗效及安全性。方法:共入组晚期胃癌56例,其中管状腺癌5例,低分化腺癌26例,黏液腺癌16例,印戒细胞癌9例,治疗方案为DDP40mg/m2加入44℃生理盐水1500～2000mL中,行腹腔灌注。然后腹腔射频热疗1.5h,温度42℃～43℃,d1、d8;EPI50mg/m2,静脉冲入,d1;5FU500mg/m2,静脉滴入6～8h,d1～d5。21d为1个周期,至少应用4～6个周期。结果:可评价疗效51例中,CR4例,PR25例,SD16例,PD6例,总有效率为56.9%(29/51),中位肿瘤进展时间5.3个月,中位生存期12.4个月,主要不良反应为骨髓抑制、恶心、呕吐。结论:腹腔灌注DDP射频热疗联合静脉注射EPI、5FU治疗晚期胃癌疗效较好,毒性可耐受。

藻红蛋白应用于肿瘤光动力治疗的研究

目的 :探讨藻红蛋白介导的光敏反应对肿瘤细胞S180生长抑制作用 ,研究新型光动力药物。方法 :将不同浓度的藻红蛋白加入到细胞培养基中 ,随之以激光辐照 ,MTT法测定细胞存活率。结果 :激光能量恒定于 2 5.6J/cm2 时 ,S180细胞生存率随着藻红蛋白的浓度的增加而降低。说明藻红蛋白的激光光敏反应对S180瘤细胞有很强的杀伤、破坏作用 ,这种效应在一定的激光能量范围内 ,与藻红蛋白本身的浓度相关。而单用藻红蛋白或激光处理 ,均不对细胞造成显著杀伤。结论 :藻红蛋白是一种毒性较小 ,很有前景的光敏剂 ,可望应用于肿瘤光动力治疗。

丹参酮ⅡA对MKN-45细胞生长的影响

目的:研究丹参酮ⅡA(Tanshi-noneⅡA,TanⅡA)对人胃癌细胞株MKN-45的生长抑制作用。方法:选用人胃癌细胞株MKN-45,运用MTT法、流式细胞术(FCM)和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)半定量法检测细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和各组p53mRNA表达。结果:TanⅡA可明显抑制MKN-45细胞的增殖,其抑制作用具有时间-效应和剂量-效应关系。当2·0μg/mL TanⅡA处理MKN-45细胞96h,增殖抑制率达(74·84±0·41)%。FCM检测肿瘤细胞DNA变化,观察到TanⅡA使MKN-45细胞周期阻滞于G2/M期,出现浓度依赖性的亚“G1”峰,同时野生型p53表达增加。结论:TanⅡA能有效地抑制人胃癌细胞株MKN-45的增殖,其可能的机制与凋亡有关。肿瘤防治杂志,2005,12(19)

注射用奈达铂治疗头颈部鳞癌与食管癌及非小细胞肺癌Ⅱ期临床试验研究

目的:评价比较以奈达铂(NDP)为主的化疗方案与以顺铂(DDP)为主的化疗方案对头颈部鳞癌、食管癌和非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)的疗效及不良反应。方法:患者随机分为两组。试验组:头颈部鳞癌及食管癌,NDP联合5氟尿嘧啶(5FU)和四氢叶酸(CF);NSCLCNDP联合诺维本(NVB);对照组:以DDP替代NDP,两组其他用药均相同。所有患者均接受2个周期以上的化疗。结果:2002年5月～2003年11月共有194例患者入组,其中188例完成试验,6例出组。头颈部鳞癌60例,食管癌60例,NSCLC68例。头颈部鳞癌试验组有效率为46.67%,对照组有效率为46.67%,χ2=0.2820,P=1.0000;食管癌试验组有效率为35.48%,对照组有效率为13.79%,χ2=2.4506,P=0.7470;NSCLC试验组有效率为31.43%,对照组有效率为15.15%,χ2=1.4315,P=0.1553。试验组与对照组的不良反应比较,除恶心、呕吐的发生率差异有统计学意义(χ2=3.4124,P=0.0006),前者明显低于后者外,血常规、腹泻、便秘、乏力等不良反应发生率差异均无统计学意义。结论:以NDP为主的联合化疗方案治疗头颈部鳞癌、食管癌、NSCLC疗效肯定,不良反应中呕吐明显减少,轻中度骨髓抑制,其余不良反应可以耐受。

β-葡萄糖苷酶激活苦杏仁苷诱导LoVo细胞凋亡及活性对Bax与bcl-2基因表达和Caspase-3的影响

目的观察苦杏仁苷被β葡萄糖苷酶特异激活后对大肠癌LoVo细胞凋亡的影响。方法分别将不同浓度的苦杏仁苷加β葡萄糖苷酶作用于大肠癌LoVo细胞株24h,通过细胞形态学、DNA凝胶电泳、流式细胞仪观察细胞凋亡变化,RT PCR方法检测细胞bcl2、BaxmR NA表达变化,Caspase3试剂盒检测细胞Caspase3酶活性的变化。结果0.1～1.0mmol/L的苦杏仁苷与250nmol/L的β葡萄糖苷酶作用于细胞24h后,可见到以凋亡为主的形态变化细胞核固缩、染色质凝集及核碎裂、染色质片段化,琼脂糖凝胶电泳见DNA断裂成有规律的特征性梯状条带,流式细胞仪分析显示在G1期细胞前出现亚二倍体峰;RT PCR检测显示BaxmRNA表达升高,而bcl2mRNA表达无变化;Caspase3酶活性呈剂量依赖性增加。结论苦杏仁苷被β葡萄糖苷酶特异性激活后能导致LoVo细胞凋亡,这一过程中,Bax基因表达上调及Caspase3酶活性增加与LoVo细胞凋亡有关。

VEGF及其受体KDR表达与宫颈癌细胞增殖及侵袭转移的关系

目的 :探讨血管内皮生长因子 (vascu larendothelialgrowthfactor ,VEGF)及其受体(kinaseinsertdomaincontainingreceptor ,KDR)在早期宫颈癌的表达和临床意义。方法 :采用免疫组织化学SP法检测 75例早期宫颈癌(ICC)、18例宫颈上皮内瘤样病变 (CIN)和 15例正常宫颈上皮 (NCE)中VEGF、KDR和增殖细胞核抗原 (Ki 67)的表达。结果 :VEGF、KDR、Ki 67在NCE、CIN和ICC的阳性表达率分别为 2 6 67% ( 4 /15 )、61 11% ( 11/18)和77 3 3 % ( 5 8/75 ) ,13 3 3 % ( 2 /15 )、 61 11%( 11/18)和 69 3 3 % ( 5 2 /75 )及 13 3 3 % ( 2 /15 )、72 2 2 % ( 13 /18)和 96 0 0 % ( 72 /75 )。从NCE到CIN再到ICC ,VEGF、KDR和Ki 67的阳性表达率均逐渐升高 ,P <0 0 5。VEGF、KDR在ICC的表达均与盆腔淋巴结转移、脉管浸润、组织学分级和Ki 67表达有关 ,P <0 0 5 ;而均与患者年龄、FIGO分期、组织学类型和间质浸润深度无关。有盆腔淋巴结转移、脉管浸润、组织学分级为Ⅲ级及Ki 67高度表达者的VEGF、KDR阳性表达率分别显著高于无盆腔淋巴结转移、无脉管浸润、组织学分级未超过Ⅱ级及Ki 67表达在中度以内者 ,P<0 0 5。VEGF与KDR在ICC的表达呈显著正相关 ,r =0 5 6,P <0 0 1;并且两指标均阳性表达者 ,其Ki 67高度表达、

恶性心包积液置管引流并腔内化疗的疗效观察

为探讨B超引导下心包内穿刺并置管引流加腔内化学药物注入治疗恶性心包积液的疗效。对58例恶性心包积液患者在B超引导下经皮穿刺进入心包腔后置入导丝,沿导丝将中心静脉导管置入心包腔,彻底引流后每周给予化学药物治疗。经治疗后17例完全缓解,21例部分缓解,有效率为65.5%。无心包缩窄及窦道形成。初步研究结果提示,心包内穿刺置管引流加腔内化疗治疗恶性心包积液,具有方便、有效、安全等特点,有助于延长晚期肿瘤患者的生存期和提高其生活质量。

食管鳞癌中HPV-16/18感染与c-erbB-2、p53和Rb表达及其意义

目的 :探讨食管鳞癌组织中人乳头瘤病毒HPV 16 / 18感染与c erbB 2、p5 3和Rb表达及其意义。方法 :采用聚合酶链反应 (PCR)法检测 90例活检存档的食管鳞癌蜡块中HPV 16 / 18的感染情况 ,从中随机选择 2 0例 ,采用免疫组化法检测单独的HPV 16感染及c erbB 2、p5 3和Rb表达。结果 :PCR检测食管癌组织HPV 16 / 18的感染率为 31 1% (2 8/ 90 ) ;免疫组化法检测食管癌组织中单独的HPV 16的感染率为 5 5 % (11/ 2 0 )。食管癌组织表达c erbB 2、Rb和p5 3和Rb的阳性率分别为 75 % (15 / 2 0 )、6 5 % (13/ 2 0 )和 80 % (16 / 2 0 )。HPV 16感染与c erbB 2、Rb和p5 3表达之间未见相关性。HPV 16感染以及c erbB 2、p5 3和Rb表达与淋巴结转移之间差异无显著性 (P >0 0 5 )。p5 3表达与食管癌组织学分级之间差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,而HPV 16感染以及Rb和c erbB 2表达与食管癌组织学分级之间差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 :食管癌组织中HPV 16 / 18感染与c erbB 2、p5 3和Rb表达之间的关系是复杂的 ,尚有待于进一步研究。

NGAL基因5′侧翼区转录调控元件的分段定位鉴定

目的 :对中性粒细胞明胶酶相关脂萼蛋白 (neutrophilgelatinase associatedlipocalin ,NGAL)基因 5′侧翼区的转录调控元件进行分段定位鉴定。方法 :以双荧光素酶报告基因检测系统检测NGAL基因 5′侧翼区 ( -14 3 1～ +84)转录调控元件与转录调控蛋白之间的相互作用。结果 :在NGAL基因 5′端 -945～ -65 8和 -65 7～ -4 172个区段发现了转录增强子元件与转录激活蛋白之间的相互作用 ,而在 -4 16～ -15 2区段则发现了转录沉默子元件与转录抑制蛋白之间的相互作用。结论 :在NGAL基因5′侧翼转录调控区可能至少存在着 2个转录增强子元件和

表皮生长因子受体EGFR和Ki67在非小细胞肺癌中的表达及其相关性研究

目的 :探讨表皮生长因子受体 (epi dermalgrowthfactorreceptor ,EGFR)和Ki67在非小细胞肺癌 (non smallcelllungcancer,NSCLC)中的表达及其与NSCLC发生、发展及预后的关系。方法 :对经随访资料完整的术后NSCLC组织标本 60例、癌旁组织 2 0例和肺正常组织 5例 ,采用SP免疫组化法检测EGFR和Ki67。对术后辅助性化疗 3 6例 ,分析疗效与EGFR和Ki67表达的关系。结果 :NSCLC中EGFR表达阳性率为 65 % ,阳性细胞的棕黄色颗粒位于细胞质 ;Ki67表达阳性率为 81 67% ,阳性细胞的棕黄色颗粒位于细胞核 ;2 0例癌旁组织及 5例正常肺组织未见阳性染色细胞。癌组织EGFR和Ki67表达与癌旁组织相比差异有统计学意义 ,P <0 0 1。NSCLC中EGFR和Ki67阳性表达与年龄、性别、吸烟与否、肿瘤细胞的病理类型差异无统计学意义 ,P >0 0 5 ;与肿瘤大小、病理分级、淋巴结转移和TNM分期密切相关 ,P <0 0 5。EGFR和Ki67表达阳性者 3年生存率分别为19 86%和 3 1 3 3 % ,低于阴性表达 70 11%和90 91% ,P <0 0 5 ;接受术后辅助性化疗的患者 ,EGFR和Ki67阳性表达复发转移率分别为 70 3 7%和 62 5 0 % ,高于阴性表达 11 11%和 0 ,P <0 0 5。结论 :EGFR和Ki67在NSCLC中的异常或过度表达与肿瘤发生、发展密切相关 。

非小细胞肺癌患者手术前后血清中内皮抑素和VEGF水平变化及相关性研究

目的:探讨非小细胞肺癌(non-smallcell lung cancer,NSCLC)患者手术前后血清中内皮抑素(endostatin)和血管内皮生长因子(vasular endothelial growth factor,VEGF)水平的动态变化规律及两者水平变化的相关性。方法:用ELISA法检测46例NSCLC患者手术前后血清中endostatin和VEGF的水平。结果:1)NSCLC患者术后7d血清endostatin水平为(23·41±5·12)ng/mL,显著高于术前[(20·85±4·56)ng/mL]和术后1d[(18·89±4·67)ng/mL]血清endostatin水平,P值分别为0·011和0·000;术后7d血清VEGF水平为(3·75±0·71)ng/mL,显著高于术前[(1·72±0·46)ng/mL]和术后1d[(2·22±0·58)ng/mL]血清VEGF水平,P值均为0·000。2)NSCLC患者术前血清endostatin与VEGF水平呈非常显著负相关,r=-0·380,P=0·009。3)NSCLC患者术后7d血清endostatin水平与VEGF水平呈非常显著正相关,r=0·351,P=0·017。结论:NSCLC患者手术前、后血清endostatin和VEGF水平存在动态变化,且两者手术前后的水平变化有显著相关性,检测NSCLC患者手术前后血清中endostatin和VEGF水平可能是进一步预测肺癌恶性行为的有用指标。肿瘤防治杂志,2005,12(19)

异源性双原发癌16例分析

回顾分析1996年1月～2003年12月收冶的16例异源性双原发癌患者临床资料,16例患者年龄36～77岁,中位年龄54岁。第一原发癌分别为食管癌4例,直肠癌、鼻咽癌、卵巢癌和子宫内膜癌各2例,胃窦癌、结肠癌、贲门癌和右肺癌各1例;Ⅰ期1例,Ⅱ期5例,Ⅲ期9例,Ⅳ期1例。第二原发癌分别为直肠癌8例,结肠癌4例,胃窦癌2例,十二指肠癌和右乳腺癌各1例;Ⅰ期2例,Ⅱ期10例,Ⅲ期4例。初步研究结果提示,异源性双原发癌患者的第二原发癌比第一原发癌检出时间提前,两者发生的时间间隔越长,治疗效果越好。

Survivin基因在鼻型NK/T细胞淋巴瘤的表达及与p53和bcl-2基因表达的关系

目的 :探讨Survivin基因在鼻型NK/T细胞淋巴瘤的表达及其与p5 3、bcl 2蛋白表达的相关性。方法 :应用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白 -过氧化酶连接法 (SP法 ) ,检测Survivin、p5 3、bcl 2基因在2 4例鼻型NK/T细胞淋巴瘤和 17例良性淋巴结病变中的表达。结果 :鼻型NK/T细胞淋巴瘤Survivin基因阳性表达率 4 5 8% ( 11/2 4 ) ,良性淋巴结病变Survivin基因阳性表达率 11 8% ( 2 /17) ,且主要局限于少数生发中心细胞 ,P <0 0 2 5。Survivin基因表达上调与p5 3高表达密切相关 ,P <0 0 5 ,但与bcl 2蛋白无明显相关性 ,P >0 0 5。结论 :Survivin基因的异常表达而引起的凋亡抑制可能在鼻型NK/T细胞淋巴瘤的发生进展中有一定的作用 ,且其与p5 3异常表达显著相关 ,但与bcl

广州地区肺癌的病例-对照研究

目的 :探讨广州地区人群发生肺癌的危险因素。方法 :将 1 998- 2 0 0 1年新诊断的原发性肺癌病例 4 45例按性别、年龄 1∶1配对选取 4 45例健康者进行对照研究、问卷调查、建立数据库、单因素分析和多因素条件Logistic回归分析 ,筛选肺癌的主要危险因素。结果 :单因素分析发现 32个暴露因素与肺癌发生有关 ;多因素分析发现肺癌有 9个主要危险因素和 1个保护因素 ,他们是 :1 )吸烟OR及 95 %CI为 3 1 9(2 1 8～ 4 6 7) ;2 )被动吸烟来源于父亲OR为 2 4 3(1 5 1～ 3 90 ) ;3)被动吸烟来源于配偶OR为2 33(1 2 6～ 4 30 ) ;4 )肺结核病史OR为 2 36 (1 1 3～ 4 94 ) ;5 )家庭用煤为燃料OR为 3 4 4 (1 38～8 5 7) ;6 )常食用腌、酸菜OR为 3 83(2 34～ 6 2 7) ;7)常食用咸鱼OR为 4 4 9(2 86～ 7 0 6 ) ;8)经常下厨用猛火炒菜OR为 4 4 5 (3 0 3～ 6 5 6 ) ;9)职业接触金属类毒物OR为 8 76 (2 2 8～ 33 6 4)。 1 0 )经常体育锻炼OR为 0 5 9(0 33～ 1 0 6 ) ,可能是一个候选的保护因素。结论 :肺癌的发生与多种暴露因素有关 ,从其病因学来看 。