金樱子叶衍生碳点的制备及其对金樱子不定芽的影响

为了探讨碳点对植物组织培养的影响,本论文以金樱子叶为碳源,采用一步水热法制备荧光碳点(JCDs),再以金樱子茎段为外植体建立再生体系,研究J-CDs对金樱子不定芽生长的影响。结果表明,J-CDs生物相溶性好,在pH值2-8范围内保持稳定,适用于植物组织培养。添加J-CDs可以促进金樱子不定芽生长,实验组金樱子不定芽株高比对照组高3-4倍,植株健壮,枝叶伸展,生长良好。当J-CDs浓度为0.9mg·mL^(-1)时,金樱子不定芽叶绿素总含量和可溶性蛋白含量达到最大值,SOD和POD酶活性最大,分别比对照组增加了56.25%和41.82%。本研究利用金樱子生物质制备荧光CDs,促进金樱子不定芽生长,为植物繁育提供了新方法。

剪顶对红松苗木非结构性碳水化合物和内源激素质量分数及不定芽发生的影响

在位于黑龙江省尚志市的东北林业大学帽儿山实验林场老山人工林实验站,以6年生红松(Pinus koraiensis)裸根苗为试验材料,进行不同剪顶时间(高生长速生期、高生长结束后)、不同留干高度(低留干40 cm、高留干70 cm)的剪顶处理,以不剪顶为对照,试验设置5种处理(2剪顶时间×2留干高度+对照),每处理3次重复,每重复40株苗木;每种处理随机选取60株苗木,剪顶后每20 d调查不定芽数量和萌芽株数,测定不定芽长度和基径;选取不定芽发生效果最佳处理(高生长速生期低留干40 cm)的苗木、对照苗木,测定苗木针叶和茎干的可溶性糖质量分数、淀粉质量分数、细胞分裂素质量分数、生长素质量分数、赤霉素质量分数、脱落酸质量分数;以红松苗木不定芽萌发和生长、红松苗木针叶和茎干的非结构性碳水化合物及内源激素质量分数变化为评价指标,以剪顶时间、留干高度为影响因素,采用双因素方差分析法、邓肯(Duncan)多重比较法,从生理角度分析剪顶时间和留干高度及其交互作用对红松苗木不定芽生长指标的影响。结果表明:剪顶时间、留干高度对红松苗木不定芽生长指标的影响显著。高生长速生期剪顶更有利于不定芽发生,低留干苗木的不定芽数量更多,而高留干苗木的不定芽长度更长。剪顶后,红松苗木针叶和茎干非结构性碳水化合物质量分数变化均无显著规律。不定芽萌发前,苗木针叶和茎干内,细胞分裂素质量分数、生长素质量分数显著上升,脱落酸质量分数显著下降;针叶的赤霉素质量分数显著上升,茎干的赤霉素质量分数变化不显著。剪顶促进红松苗木不定芽发生,最优剪顶时间为高生长速生期;低留干促进不定芽萌发数量增加,高留干促进不定芽长度增加。剪顶后,红松苗木不定芽发生与非结构性碳水化合物质量分数变化关系不大,但与内源激素变化有关;针叶和茎干内细胞分裂素、生长素质量分数上升,脱落酸质量分数下降,在红松苗木不定芽发生中起重要作用。

水稻愈伤组织诱导及不定芽分化培养体系建立

目的:筛选高效诱导水稻愈伤组织及不定芽分化培养体系的培养基,为水稻基因工程育种奠定基础。方法:以优质水稻品种(润珠香占)成熟胚为外植体,研究成熟胚愈伤组织出愈情况、不同培养基以及植物生长物质浓度配比对愈伤组织诱导及不定芽分化的影响。结果:水稻愈伤诱导培养基出愈率大小为N6>B_(5)>MS>WPM,N_(6)与B_(5)、MS、WPM差异显著;2,4-D浓度愈伤组织诱导率大小为B_(4)>B_(3)>B_(5)>B_(6)>B_(2)>B_(1),B_(4)与各处理组之间差异显著;植物生长物质浓度配比对愈伤组织不定芽分化率大小为T_(5)>T_(7)>T_(6)>T_(1)>T_(8)>T_(3)>T_(2)>T_(4),T_(5)与各处理组之间差异显著。结论:水稻成熟胚愈伤诱导的最佳培养基及2,4-D质量浓度分别为N6、2.0 mg/L;不定芽分化最佳植物生长物质6-BA、KT、NAA质量浓度比为1∶1∶1,不定芽分化率最高。

鲁丽苹果叶片高效不定芽再生体系的优化

以鲁丽和GL-3等苹果组培苗离体叶片为外植体,研究了极性及伤口处理对叶片高效不定芽再生的影响。结果表明:放置叶片时,远轴面接触培养基时,鲁丽和GL-3叶片不定芽再生率分别为81.14%、93.21%;近轴面接触培养基时,叶片不定芽再生率分别为92.71%和95.73%,且鲁丽叶片平均不定芽数高于GL-3。处理伤口时,鲁丽整叶横切叶片不定芽再生率为91.20%,显著高于0.8 cm×0.5 cm横切处理;GL-3整叶横切叶片不定芽再生率也高于0.8 cm×0.5 cm横切处理,且2个品种叶片横切处理后不定芽玻璃化程度均显著降低。鲁丽不定芽再生,最适叶片放置方式为近轴面接触培养基,适宜伤口处理方式为整叶横切,研究结果为种质资源的挖掘利用和基因功能验证奠定基础。

远缘杂种牡丹分生结节诱导及不定芽分化

该研究以亚组间和组间远缘杂种牡丹的叶柄为外植体,探索一种操作简便、适用于多个品种的分生结节诱导方法,并在部分品种中研究分生结节分化不定芽的条件。结果表明:将11个品种的叶柄薄层接入含有0.5 mg·L^(-1)萘乙酸(NAA)+1.0 mg·L^(-1)氯吡脲(CPPU)+0.5(或0)mg·L^(-1)噻苯隆(TDZ)的SH培养基中,在黑暗条件下培养60~100 d,可以在10个品种中一步诱导出分生结节,诱导率达到52.08%~83.33%;一步法诱导的分生结节是通过愈伤组织间接产生。将分生结节接入含有0.5(或1)mg·L^(-1) CPPU+0.5 mg·L^(-1) TDZ的改良WPM培养基中,在光照、每15 d继代一次的条件下,可以诱导3个品种的不定芽分化,分化率为6.67%~33.33%;较低浓度的CPPU和TDZ共同使用对于不定芽分化有促进作用,而单独使用高浓度的CPPU不利于不定芽分化。该研究筛选出了一步法诱导分生结节的通用培养基,并在部分品种中实现了不定芽分化,为建立远缘杂种牡丹植株再生体系提供了重要参考。

药剂处理对红松截顶苗木不定芽发生的影响

为探究药剂处理对红松截顶苗木不定芽发生的影响,以5年生红松裸根苗为试验材料,于生长季初期统一截顶后,每15 d采用不同的药剂赤霉素(GA_(3))(200、500、1000 mg/L)、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)(100、300、500 mg/L)、KMnO_(4)(0.1%、0.2%、0.3%)对苗木进行喷施处理,以喷施清水处理为对照,调查经不同药剂处理红松截顶苗木的不定芽发生情况。结果表明,药剂处理(除1000 mg/L GA_(3)和0.1%KMnO_(4)外)提高了红松截顶苗木不定芽的发生率,与对照相比,萌芽株率提高了5.72%~48.58%,萌条数提高了15.37%~175.94%。GA_(3)促进红松截顶苗木的适宜质量浓度为200 mg/L,该处理可提高萌芽株率34.28%,萌条数提高了33.63%;6-BA促进红松截顶苗木的适宜质量浓度为500 mg/L,该处理可提高萌芽株率48.58%,萌条数提高了175.94%;KMnO_(4)促进红松截顶苗木的适宜质量浓度为0.2%,该处理可提高萌芽株率42.85%,萌条数提高了95.18%。采用500 mg/L 6-BA对红松截顶苗木进行处理可以获得促进不定芽发生的较好效果。

2种溲疏叶片不定芽诱导的组织培养体系构建

【目的】通过溲疏属植物叶片诱导不定芽,建立完整的组织培养体系,为构建溲疏属植物遗传转化体系和分子育种提供参考,也为从头驯化野生溲疏属植物种质资源的创新提供理论依据和实践指导。【方法】以2种陕西秦岭常见野生溲疏属植物(小花溲疏和钩齿溲疏)的带叶茎段作为外植体,通过初代培养、继代培养和生根培养建立其快速繁殖体系,再利用培养植株的叶片诱导愈伤组织和不定芽诱导的方式建立其叶片诱导不定芽体系。【结果】外植体最佳消毒方式为75%乙醇表面消毒10 s,0.1%升汞表面消毒3 min,其成活率为100%,污染率为0。小花溲疏丛生芽增殖最佳的培养基配方为MS+2 mg·L^(-1)6-BA,其增殖系数为2.8。钩齿溲疏丛生芽最佳培养基配方为MS+5 mg·L^(-1)6-BA,其增殖系数为4.53。生根培养最佳的培养基配比为1/2 MS+0.8 mg·L^(-1)IBA,其小花溲疏的生根系数为1.74,钩齿溲疏的生根系数为7.86。选择30天生根苗从上至下第2~4节叶片作为诱导愈伤组织的外植体材料。小花溲疏叶片诱导愈伤组织最佳的培养基配比为WPM+1 mg·L^(-1)2,4-D,其诱导率为63%,钩齿溲疏叶片诱导愈伤组织最佳的培养基配比为WPM+0.1 mg·L^(-1)2,4-D,其诱导率为70%。【结论】以小花溲疏和钩齿溲疏的叶片作为外植体,成功建立了诱导不定芽形成和植株再生体系。小花溲疏叶片不定芽分化最佳的培养基配比为MS+2 mg·L^(-1)6-BA+0.3 mg·L^(-1)IBA,钩齿溲疏叶片不定芽分化最佳的培养基配比为MS+5 mg·L^(-1)6-BA+0.05 mg·L^(-1)NAA。

基于不定芽诱导的白花前胡高效再生体系研究

为建立基于不定芽诱导的白花前胡高效再生体系,以野生白花前胡(Peucedanum praeruptorum Dunn)植株的茎尖组织为外植体,研究了不同激素及浓度对不定芽诱导和生根的影响,并通过形态学和细胞组织学观察了不定芽的超微结构。结果表明,不定芽诱导的最佳培养基为基本培养基(MS)+2.5 mg·L^(-1)6-苄基腺嘌呤(6-BA),不定芽的诱导率达到100%,不定芽的诱导倍数为7.3倍;最佳生根培养基为1/2MS+0.2 mg·L^(-1)萘乙酸(NAA);最佳的移栽方式为待植株高3 cm以上,具有3~5条根,根系长达2 cm时,水培炼苗30 d,再移栽,移栽成活率达到100%。该体系为白花前胡的组织培养再生提供了新的途径,缩短了种苗繁育的周期。

油松成熟胚培养不定芽状态对其生根状况的影响

油松（Pinus tabulaeformis）是我国特有的针叶树种，木材坚实，富含松脂，耐腐朽，是优良的建筑、电杆、枕木、矿柱等用材。油松是北方的主要造林树种之一，它分布广，适应性强，根系发达，树姿雄伟，枝叶繁茂，有良好的保持水土和美化环境的功能（徐化成，1993）。

影响黄瓜直接不定芽诱导的品种等因素研究

以黄瓜(CucumissativusL.)子叶节为外植体,研究了品种、6-苄氨基嘌呤、外植体大小及硝酸银对黄瓜直接不定芽诱导的影响。结果表明:不同黄瓜品种直接不定芽数量诱导存在显著差异,但长度诱导无显著差异;6-苄氨基嘌呤对直接不定芽数量和长度的诱导作用显著,其中4.0mg/L为数量诱导适宜浓度,其出芽率和每外植体出芽数达到最高,分别为100.0%和11.1,0.5mg/L为长度诱导适宜浓度,其平均芽长12.0mm;外植体的大小对直接不定芽数量和长度均具显著影响,随着子叶的增大诱导直接不定芽的数量和长度增加,其中单片完整子叶为最适宜大小,其出芽率、每外植体出芽数和平均芽长分别达到100%、6.7和17.1mm;硝酸银也对直接不定芽数量诱导影响显著,其中2.0mg/L为适宜浓度,出芽率和每外植体出芽数分别达到97.2%和4.2,但对芽长有抑制作用。

大叶黄杨无芽茎段不定芽再生及其起源

In order to improve the resistance of Euonymus japonicus , its ability of adventitious shoots regenerating from inter_node stem_segment were researched on MS medium in vitro . The effect of both plant growth regulators and carbon resources in media on adventitious shoots differentiating was studied. Regenerating system of E. japonicus was established successfully. Adventitious shoots were highly obtained from inter_node explants inoculated on MS media supplemented with 6_BA 1 7 mg\5L -1 + IBA 0 005 mg\5L -1 or 6_BA 1 9 mg\5L -1 + IBA 0 03 mg\5L -1 . The regenerating ratio reached to 52 4% and 46 7% respectively. Media for inducing adventitious roots were 1/2MS+ IAA 0 5 mg·L -1 . Adventitious shoots originated from surface tissue of inter_node stem_segment.

福建山樱花不定芽诱导和植株再生规模化繁殖试验

取长约4 cm的3年生福建山樱花中选树的春梢为外植体,接种于添加6-BA和IBA的MS培养基中,诱导产生不定芽。结果表明:当培养基为1/4 MS时,能有效地防止外植体的褐化死亡;添加1.0 mg/L 6-BA和0.01 mg/L IBA的培养基上,外植体能快速生长,且无玻璃化苗发生。增殖阶段以添加1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L GA3的MS培养基最好,1个周期的增殖率可达600%。当外殖体高约4 cm时,即转入1/2MS+1.0 mg/L NAA+0.2 mg/L IBA培养基进行生根诱导培养,25 d后即可陆续生根并长成完整植株,35 d生根率可达92.1%。以1/3份珍珠岩+2/3份泥炭混合基质为移栽基质时,试管苗移栽成活率可达94%。该试验中各项指标已达到快速繁育苗木的要求,其技术措施可直接应用于规模化生产。

外植体和培养因子对哈密瓜不定芽诱导的影响

用S-24和网纹香两个哈密瓜品种为材料,研究不同外植体和基本培养基、激素、蔗糖等因子对不定芽诱导率的影响,结果表明:1)两品种不同外植体的不定芽诱导率为子叶柄>子叶>茎尖>真叶;胚轴和根不能诱导不定芽,其中子叶柄是最适外植体,5～8日龄效果较好。2)在6-BA、zT、KT、2ip和2,4-D五种激素中,6-BA的诱导效果最好,其最适浓度为0.5mg/L。3)LS培养基能显著提高两个品种的诱导率和生活力。4)培养基中附加ABA 1.0mg/L可显著提高S-24的诱导率,而附加ABA 2.0mg/L和马铃薯提取液10g/L可显著促进网纹香不定芽的诱导效果。

枣树离体叶片不定芽再生体系建立的研究

建立了木枣无菌试管苗快繁体系,以无菌苗叶片为外植体,对影响离体叶片不定芽直接再生的因素进行了研究.试验结果表明,TDZ比BA能更有效地诱导叶片不定芽的再生;褐化是抑制不定芽再生频率提高的关键因子,培养基中添加PVP、V c及改变生长素的种类和浓度均不能促进不定芽再生;添加A gNO3能够减轻褐化并可以大幅度提高再生频率,同时培养初期经过3周避光培养更有利于提高再生效率.因此,以附加2.0 m g/L TDZ和0.2 m g/L IBA的M S培养基,并添加5.0 m g/L A gNO3,可以高效诱导木枣离体叶片不定芽再生,再生频率最高达98.3%.不定芽在附加0.2 m g/L IBA和0.5 m g/L GA3的M S培养基上进行继代伸长培养,当不定芽长至3 cm时,转接至附加0.4 m g/L IBA的1/2 M S培养基上可以良好地诱导生根.

甜瓜子叶不定芽分化过程中PAL活性和木质素含量变化研究

用组织培养的方法使甜瓜子叶脱分化形成愈伤组织，继而在分化培养基上形成不定芽。以此为系统，测定不定芽发生过程中ＰＡＬ活性变化和木质素含量变化．以肉桂酸、香草酸、苯甲酸、阿魏酸和咖啡酸为抑制剂，研究它们对不定芽发生的影响以及对系统中ＰＡＬ活性变化和木质素含量变化的影响。结果表明，五种抑制剂均抑制不定芽的发生。ＰＡＬ活性、木质素含量和愈伤组织分化成管胞、不定芽发生四者之间有密切的关系。

胡杨叶片不定芽再生体系的研究

该文以胡杨试管苗叶片为材料 ,进行了不同培养基及不同影响因子对胡杨叶片不定芽再生能力影响的试验 .结果表明 :胡杨叶片再生的最适培养基是MS +BA 0 .5mg L +NAA 0 1～ 0 2mg L +腺嘌呤 4 0mg L +水解乳蛋白 5 0 0mg L +白砂糖 2 5g L +琼脂 5g L ,再生频率达 10 0 % ;叶片培养的最佳取材位置是自茎尖展叶始第 1～ 3片叶 ;叶片正面向上或正面向下接种培养 ,对其形成不定芽无显著影响 ;由丛生芽和愈伤组织两个途径得到的无菌苗上的叶片在再生能力方面没有明显差异 .

银白杨叶片不定芽再生影响因素的研究

该文以银白杨无菌试管苗叶片为外植体 ,进行了不同培养基及不同因子对银白杨叶片不定芽诱导的研究 ,建立了叶片不定芽再生植株体系 ,为今后的遗传工程改良奠定了基础 .结果表明 :银白杨叶片不定芽诱导的最适培养基是MS附加 6 BA和NAA(5∶1) (即MS +6 BA 0 5mg L +NAA 0 1mg L +蔗糖 2 5 % +琼脂 0 5 5 % ,pH 5 8) ,不定芽再生率达 95 %以上 ;当 6 BA NAA <5时 ,叶片不定芽再生率和再生系数均降低 ,当 5≤ 6 BA NAA≤ 30时 ,随着比值的增大 ,不定芽再生率明显下降 ,不定芽再生系数也减少 ;叶片不定芽再生能力强的最佳取材位置是自试管苗顶端向下伸展叶的第 1～ 3片叶 ;生根试管植株叶片的不定芽再生能力强于无根试管植株 ;叶片不定芽诱导的最佳光照时间为每天 14h .

辐射百合鳞片扦插诱生的不定芽植株变异研究

百合辐射后鳞片扦插获得不定芽植株 ,在其生长发育过程中发现 :不定芽植株的花瓣、雄蕊、雌蕊及叶等器官都有变异。其中雄性器官变异率最高、类型最多 ,包括无花粉、花粉败育、雄蕊萎缩、雄蕊部分败育等类型。不同基因型的百合产生雄性不育变异类型有差异。从不定芽植株的突变率考虑 ,pollyana辐射诱发变异的适合剂量是 1～ 2Gy,王百合 (LiliumregaleWilson)及Romano的合适剂量是 1～ 3Gy。

蚬壳花椒叶片不定芽诱导与内源激素的变化规律

目的建立蚬壳花椒离体再生体系并测定其内源激素量的变化。方法以蚬壳花椒组培苗叶片为外植体,接种在附加不同激素组合的MS培养基上,诱导愈伤组织不定芽的分化。同时,采用酶联免疫吸附法(ELISA)对愈伤组织分化过程中赤霉素(GA3)、生长素(IAA)、脱落酸(ABA)、玉米素核苷(ZR)4种内源激素的量进行测定。结果蚬壳花椒叶片不定芽诱导的最适培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L,诱导率最高可达61%。内源激素测定发现,分化过程中ZR、IAA的量相对较高,ABA量一直保持较低的水平,GA3在分化前期和中期均呈上升趋势。结论ZR、IAA是蚬壳花椒叶片愈伤组织不定芽分化的主要因素,培养基中适当添加GA3可能有利于提高芽的分化率;ABA可能是此过程中的负调控因子。

茶树不同组织体细胞胚、不定芽分化的研究

根据茶树子叶柄、叶柄断面离腋芽的距离,将外植体依次分为C_1、C_2、C_3和L_1、L_2、L_3.通过上述外植体和不同培养基的研究结果表明:子叶柄外植体在MT_1和MT_3培养基上培养,其不定芽及总分化率是C_1>C_2>C_3;体细胞胚的分化率是C_3>C_2>C_1.叶柄外值体只有L_1在MT_3培养基上培养分化了芽,MT_1培养基的胚性愈伤组织诱导率比MT_3培养基高,其体细胞胚、不定芽的分化率是L_1>L_2、L_3.经挑选的胚性愈伤组织在MT_1和MT_2培养基上交叉培养,保持分化能力在15个月以上.体细胞胚、不定芽都能在MT_4培养基上增殖.