人参多糖干预创伤性骨关节炎模型大鼠前列腺素E_(2)/6-酮-前列腺素F_(1α)的表达

背景:目前已有研究发现植物人参提取物对骨关节炎有明显的改善作用,但是关于人参多糖提对骨关节炎的治疗作用尚未见报道。目的:探讨人参多糖干预创伤性骨关节炎模型大鼠前列腺素E_(2)/6-酮-前列腺素F_(1α)的表达变化。方法:选取60只雄性SD大鼠,随机分为健康组、模型组、人参多糖低、中、高剂量组、地塞米松组,除健康组外,其余大鼠均建立创伤性骨关节炎模型。造模成功后,健康组与模型组采用生理盐水0.2 mL腹腔注射,人参多糖低、中、高剂量组分别采用0.1,0.25,0.5μg/mL人参多糖0.2 mL腹腔注射,地塞米松组采用0.2 mg/kg地塞米松腹腔注射,均每3 d注射一次,连续干预4周。给药结束后采用ELISA法检测大鼠血清中前列腺素E_(2)、6-酮-前列腺素F_(1α)水平,Mankin’s评分法检测大鼠膝关节软骨功能,苏木精-伊红染色观察大鼠膝关节病理形态,免疫印迹与PCR分别检测关节软骨组织中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素10的表达。结果与结论:①与模型组比较,人参多糖中剂量组、地塞米松组大鼠血清前列腺素E_(2)降低,6-酮-前列腺素F_(1α)升高(P<0.05);与人参多糖中剂量组、地塞米松组比较,人参多糖高剂量组大鼠上述指标显著改善(P<0.05);人参多糖中剂量组及地塞米松组无差异(P>0.05);②与模型组比较,人参多糖中剂量组、地塞米松组大鼠Mankin’s评分降低(P<0.05);与人参多糖中剂量组、地塞米松组比较,人参多糖高剂量组Mankin’s评分显著降低(P<0.05);人参多糖中剂量组及地塞米松组无差异(P>0.05);③模型组与人参多糖低剂量组大鼠软骨组织层明显变薄,深达骨质层的裂隙及软骨细胞大量丢失,潮线严重断裂、模糊,滑膜层胶原纤维增多、增粗,可见大量软骨细胞被破坏,排列不规则;人参多糖中剂量组、地塞米松组较模型组改善;人参多糖高剂量组较人参多糖中剂量组改善;④与模型组比较,人参多糖中剂量组、地塞米松组大鼠关节软骨组织中肿瘤坏死因子、白细胞介素1β表达降低,白细胞介素10表达升高(P<0.05);与人参多糖中剂量组、地塞米松组比较,人参多糖高剂量组大鼠骨关节中上述指标显著改善(P<0.05);人参多糖中剂量组及地塞米松组无差异(P>0.05);⑤提示人参多糖可改善创伤性骨关节炎大鼠炎性水平及病理形态,降低Mankin’s评分,其中人参多糖高剂量组效果最好,其作用机制可能与调控前列腺素E_(2)/6-酮-前列腺素F_(1α)表达水平有关。

人参多糖的理化性质、生物学作用及其在动物生产中的应用

人参多糖作为人参重要的有效成分之一,具有调节机体免疫力、抗氧化、抗肿瘤、抗菌、提高机体代谢能力等作用。近年来研究发现,除了人参根,人参茎叶、果实和花中也含有各种人参多糖等有效成分,提高了人参植物资源的利用价值。人参多糖不仅具有替代抗生素的作用,还可通过影响肠道菌群的结构,提高动物的生产性能,为动物天然饲料添加剂的选择和应用提供了原材料。本文根据近年来国内外研究,对人参多糖的理化性质、生物学作用及其在动物生产中的应用进行简要的综述,为今后对人参多糖的研究与应用提供参考。

人参多糖治疗葡聚糖硫酸钠诱导溃疡性结肠炎作用机制研究

目的探讨人参多糖治疗葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法将50只C57/B6小鼠随机分为空白对照组(A组,等量生理盐水),模型对照组(B组,等量生理盐水),人参多糖低、中、高剂量组(C1组、C2组、C3组,50,100,200 mg/kg),各10只。A组小鼠自由饮水,B组、C1组、C2组、C3组小鼠予3%DSS溶液,连续7 d,构建UC模型。建模成功后,各组小鼠灌胃相应药物干预6 d。每日测定小鼠体质量,评估疾病活跃指数(DAI)。给药结束后处死小鼠,测定结肠长度;采用苏木精-伊红(HE)染色法观察结肠病理形态变化;采用异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖检测肠道渗漏水平;采用实时荧光定量核酸聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测结肠白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、胱天蛋白酶3(caspase 3)mRNA表达水平;采用免疫印迹(Western blot)法检测结肠Occludin、ZO-1、核因子-κB p65(NF-κB p65)、caspase 3蛋白表达水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中IL-6,IL-1β,TNF-α含量。结果与B组比较,C1组、C2组、C3组小鼠体质量和结肠长度均显著增加(P<0.05),DAI评分和结肠损伤程度均显著降低(P<0.05);结肠Occludin,ZO-1蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);肠道渗漏水平,结肠IL-6,IL-1β,TNF-α,NF-κB p65,caspase 3 mRNA表达水平,血清IL-6,IL-1β,TNF-α含量均显著降低(P<0.05)。结论人参多糖能缓解DSS诱导的UC相关疾病症状,改善小鼠机体炎性反应,降低结肠组织凋亡程度,该作用机制可能是通过抑制NF-信号通路实现的。

人参多糖注射液及原料药细菌内毒素检查方法学研究

目的建立人参多糖注射液及原料药细菌内毒素检查的方法。方法按《中国药典》2010年版一部附录ⅩⅢD,确定本品细菌内毒素限值,并研究人参多糖注射液及原料药对细菌内毒素检查试验的干扰情况。结果人参多糖注射液在稀释36倍及以下时,对试验无干扰作用,人参多糖在0.08mg·mL-1稀释浓度及以下时对试验无干扰作用,其细菌内毒素限值为每1mg半乳糖醛酸中含内毒素应小于6EU。结论鲎试剂法可用于本品的细菌内毒素检查。

人参多糖的提取分离及其体外抗肿瘤作用

目的:从人参中提取分离人参多糖,对其进行初步鉴定分析,观察人参多糖的体外抗肿瘤活性。方法:采用水提醇沉法和Sevage法提取人参多糖,应用红外光谱对其结构进行初步的鉴定分析;小鼠前列腺癌RM-1细胞株和人宫颈癌HeLa细胞株分为对照组和不同浓度(50、100、200、300、400和500mg·L-1)人参多糖组,MTT法检测各组细胞的生长抑制情况,通过细胞毒性T细胞(CTL)实验检测不同浓度人参多糖对肿瘤细胞的间接杀伤作用,即细胞毒性乳酸脱氢酶(LDH)释放率。结果:人参多糖的提取率为8.76%,经鉴定成分为多糖。MTT实验,不同浓度人参多糖处理RM-1和HeLa细胞24h后,与对照组比较,各浓度人参多糖组细胞存活率差异均无统计学意义(P>0.05)。CTL实验,与对照组比较,不同浓度人参多糖组细胞毒性LDH释放率显著升高(P<0.05);随着人参多糖浓度的增加,细胞毒性LDH释放率先升高后降低,人参多糖浓度为100mg·L-1时,细胞毒性LDH释放率最大。结论:人参多糖可以通过激活T细胞来间接抑制肿瘤细胞生长,起到抗肿瘤的作用。

人参多糖和猪苓多糖对大鼠肠道黏膜淋巴细胞功能的影响

目的观察人参多糖和猪苓多糖对大鼠肠道黏膜淋巴细胞功能的影响。方法分离SD大鼠外周血单个核细胞(PBMC)、派伊尔结淋巴细胞(PPL)、肠道上皮内淋巴细胞(IEL)和黏膜固有层淋巴细胞(LPL),分别与不同质量浓度的人参多糖和猪苓多糖共同培养,检测上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)水平变化。结果人参多糖和猪苓多糖均可以使PBMC和PPL培养上清液中TNF-α和IFN-γ水平升高;2mg/mL猪苓多糖可以使IEL培养上清液中TNF-α和IFN-γ水平升高;人参多糖和猪苓多糖可以使LPL培养上清液中TNF-α和IFN-γ水平降低。结论人参多糖和猪苓多糖对大鼠肠道黏膜淋巴细胞功能具有调节作用。

人参多糖对K562细胞增殖抑制及诱导分化的实验研究

目的 研究人参多糖(GPS)对人白血病细胞株(K562)增殖抑制及诱导分化的影响。方法 采用细胞体外培 养技术,MTT法检测细胞增殖抑制,光镜和电镜观察细胞形态变化;联苯胺(Benzidine)、糖原染色(PAS)、过氧化物酶 (POX)、非特异性脂酶(α- NAE)细胞化学染色分别检测K562细胞向红系、粒系、巨核系分化的特征;免疫细胞化学检测细胞 表面分化抗原及因子表达(CD14、CD15、HIR2、EPO、GM CSF);FAS及FAS L等检测细胞凋亡情况。结果 GPS对K562细胞 的增殖有明显抑制作用并能诱导K562细胞向红系或粒系细胞分化,表现为:①K562细胞的增殖受到抑制;②K562细胞形 态学上可见细胞体积缩小,核直径减小,核仁减少或消失,核染色质浓缩,胞浆丰富,核浆比例降低,可见中晚期粒、红系细 胞;③K562细胞血红蛋白(Hb)、糖原、α- NAE的表达明显增加,而过氧化物酶(POX)的表达与对照无显著性差异;④细胞表 面分化抗原CD15、HIR2、EPO、GM CSF的表达明显增强,CD14的表达与对照无显著性差异;⑤细胞凋亡明显增加。结论 人 参多糖(GPS)能明显抑制K562细胞增殖并能诱导其凋亡并使K562细胞向成熟方向分化。

放疗联合人参多糖注射液治疗鼻咽癌的临床观察

目的 :观察放射治疗联合人参多糖注射液治疗鼻咽癌的疗效和对免疫功能的影响。方法 :将131例初治鼻咽癌患者随机分为放疗联合人参多糖组 ( 64例 )和常规放疗组 ( 67例 ) ,观察两组局部肿瘤消退率 ,1年总生存率 ,无瘤生存率及无远处转移生存率 ,观察两组治疗前后T细胞亚群、自然杀伤 (NK)细胞活性及淋巴因子 激活杀伤 (LAK)细胞活性的变化。结果 :两组治疗后 3个月临床检查 ,放疗联合人参多糖组和常规放疗组鼻咽肿瘤完全消退率分别为 96 6%和 93 3% ,颈淋巴结转移灶完全消退率分别为 85 7%和78 0 % ,鼻咽肿瘤CT消退率分别为 60 3%和 51 7% ;放疗后 1年总生存率分别为 10 0 0 %及 96 5% ,放疗后 1年无瘤生存率分别为 84 4 %及 74 6% ,放疗后无远处转移生存率分别为 93 8%及 88 1%。放疗联合人参多糖组外周血NK细胞及LAK细胞活性增高 ,T3、T4 值增高 (均P <0 0 5) ,常规放疗组治疗前后外周血T3、T4 值降低 (P <0 0 5) ,NK细胞、LAK细胞活性差异无显著性 ,未发现人参多糖有毒副作用。结论 :人参多糖在放疗中对改善鼻咽癌患者机体免疫功能有一定的作用 。

人参多糖对乳酸菌发酵及酸奶质构特性的影响

以人参多糖为研究对象,通过测定pH值、滴定酸度、乳酸菌菌落总数、黏度、持水力和质构等指标,研究人参多糖对酸奶发酵剂中保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌两种乳酸菌的发酵及酸奶质构特性的影响。结果表明,人参多糖可促进这两种乳酸菌产酸及其菌数增殖,其中添加质量分数为0.9%的人参多糖可使乳酸菌的产酸速度提高为空白对照的1.2338倍,并且可使菌数增殖提高为空白对照的144.44倍。但人参多糖会使酸奶的硬度、黏聚性和胶着性下降,并使其黏度降低,当人参多糖的添加量为0.5%时,黏度降低为空白对照的78.42%;人参多糖的添加对酸奶的保水性没有明显影响。

人参多糖和当归多糖诱导人内皮细胞表达造血生长因子的实验研究

目的 :研究和论证人参和当归促进血细胞生成及“补气生血”的现代生物学机理。方法 :采用造血生长因子生物活性检测与免疫细胞化学等技术 ,研究经人参多糖 (GPS)和当归多糖 (APS)诱导的人脐静脉内皮细胞株 (Ecv30 4 )上清液 (HEcCM)中造血生长因子的活性及粒单系集落刺激因子 (GM CSF)、IL 3和IL 6在内皮细胞的表达。结果 :GPS和APS体外诱导制备的HEcCM能显著促进粒单系造血祖细胞(CFU GM )和多向性造血祖细胞 (CFU Mix)的增殖 ;同时 ,GPS和APS能不同程度地促进内皮细胞GM CSF、IL 3和IL 6蛋白表达。结论 :GPS和APS能上调造血微环境中的内皮细胞分泌造血生长因子来调节血细胞的生成。

人参多糖和猪苓多糖对CIA大鼠肠道黏膜免疫细胞功能的影响

目的:观察人参多糖和猪苓多糖对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠肠道黏膜淋巴细胞功能的影响。方法:采用皮内注射Ⅱ型胶原(COL-Ⅱ)建立CIA大鼠模型,分离模型大鼠PP结淋巴细胞(PPL)、肠道上皮内淋巴细胞(IEL)和固有层淋巴细胞(LPL),分别与不同浓度的人参多糖和猪苓多糖共培养48 h后,检测培养上清中TNF-α和IFN-γ含量的变化。结果:与加入RPMI1640培养液的空白对照组比较,不同浓度的人参多糖和猪苓多糖,均可使PPL分泌TNF-α减少,但使IFN-γ的分泌增加;而IEL和LPL分泌TNF-α和IFN-γ的水平均有不同程度的降低。结论:人参多糖和猪苓多糖对CIA大鼠PPL具有不同的免疫调节作用;而对于IEL和LPL,则可导致其免疫活性降低。

人参多糖提取工艺优化及其组成分析

以超临界脱脂、脱皂苷后的人参渣为原料,采用超临界辅助热水浸提法提取人参多糖,采用正交试验确定提取人参多糖的最佳工艺条件。结果表明:在萃取压力30 MPa、萃取温度80℃、萃取时间1.5 h、物料粒度0.20 mm、原料-夹带剂比例1∶2.5(g/m L)时,人参多糖提取率为(38.03±1.43)%,多糖纯度为(54.71±2.16)%,与热水浸提法相比,提取率和纯度分别提高了16.15%和13.44%。采用高效液相色谱法和高效凝胶渗透色谱法对人参多糖中的单糖组成和多糖平均分子质量进行分析,发现人参多糖含有较多的葡萄糖以及少量的半乳糖、阿拉伯糖,且超临界辅助热水浸提法中这3种单糖的含量均显著高于热水浸提法。超临界辅助热水浸提法与热水浸提法提取的人参多糖重均分子质量分别为123 847 u和127 016 u,但是超临界辅助热水浸提法的人参多糖中多糖种类多于热水浸提法。

人参多糖对人早幼粒白血病细胞株(HL-60)增殖的影响

目的：探讨人参多糖（GPS）对人粒单系造血祖细胞（CFU-GM）和人早幼粒白血病细胞株（HL-60）增殖分化的影响。方法：采用造血细胞体外培养，形态学观察，免疫细胞化学，流式细胞术等实验血液学技术。结果：GPS在体外能抑制HL-60细胞增殖，而同等剂量的GPS能明显促进正常粒单系造血祖细胞的增殖分化；在本实验条件下未见GPS对HL-60细胞有明显的诱导分化作用。结论：GPS可能通过阻止HL-60细胞从静止期（G0期）进入增殖周期（S/G2+M）期，抑制DNA的合成等途径进而抑制细胞的增殖；提示GPS有可能成为既能促进正常造血，又能抑制人白血病等肿瘤细胞增殖的天然诱导剂。

植物乳杆菌C88联合人参多糖的免疫调节作用

以环磷酰胺诱导昆明小鼠建立免疫抑制模型后,分别给其灌胃人参多糖、人参多糖联合植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)C88。实验结束后,采用酶联免疫吸附实验检测了小鼠血清中的白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,Ig G),并利用碳廓清法检测了小鼠吞噬细胞吞噬能力,评价了人参多糖(water-soluble ginseng polysaccharides,WGPA)联合植物乳杆菌C88的体内免疫调节作用。结果表明WGPA联合益生菌C88可明显增强免疫抑制小鼠吞噬细胞的吞噬能力和迟发型超敏反应,显著上调血清中IL-2、IL-4、IFN-γ、TNF-α、Ig G水平,下调IL-10水平,并呈现剂量依赖性,且联合用药组的作用明显强于人参多糖WGPA单独用药组。综上所述,植物乳杆菌C88联合人参多糖可以发挥一定的免疫调节作用。

人参多糖与人参皂苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞造血细胞因子表达的作用比较

目的了解骨髓多能间充质干细胞(BM-MSC)主要造血因子mRNA表达水平,比较人参多糖和人参皂苷对BM-MSC造血因子mRNA表达的影响。方法 采用Real-timePCR技术,观察人参多糖(20μg/mL)或人参皂苷(20μg/mL)作用于大鼠BM-MSC12、24、36h时间点造血因子IL4、Csf2、Kitlg、Csf1、IL6、Lif、Csf3、IL11、Epo和IL3等10个基因mRNA相对表达水平。结果 正常大鼠BM-MSC未检测到IL4和Csf2mRNA表达,以内参基因GapdhmRNA作参比,Kitlg、Csf1、IL6、Lif、Csf3、IL11、Epo和IL3等mRNA相对表达量依次减弱。Epo和IL3mRNA表达在人参多糖与人参皂苷作用后各个时间点均无明显影响(P>0.05)。人参多糖在12h和36h时间点对BM-MSC的Csf1、IL6、Lif、Csf3和IL11等5个造血因子mR-NA表达有显著促进作用(P<0.05),在24h时间点对Csf1、IL6、Lif、Csf3和Kitlg等5个造血因子mRNA表达有显著促进作用(P<0.05)。人参皂苷在12、24和36h时间点对BM-MSC有促进表达的基因分别为1个(Csf3),3个(Csf3、IL6和Lif),5个(Csf3、IL6、Lif、IL11和Kitlg)。结论 在药物作用早期人参多糖对BM-MSC造血细胞因子mRNA表达的促进作用强于人参皂苷;随着作用时间延长,人参皂苷的促进作用逐渐增强并超过人参多糖的作用。

人参多糖及IL-2对小鼠黑色素瘤细胞体内的抑制效应

目的 探讨依赖人参多糖及IL 2的肿瘤浸润淋巴细胞 (tumorinfiltratinglymphocyte ,TIL)在体内抗肿瘤作用。 方法 建立B1 6 黑色素瘤小鼠模型 ,将 30只C57小鼠随机分为 4组 ,1组瘤体周围皮下注射IL 2 ,2组注射IL 2和人参多糖 ,3组注射人参多糖 ,4组仅注射生理盐水作为对照组 ,通过测量瘤重、瘤体积和抑瘤率观察其抗肿瘤作用。同时取瘤周部位皮肤组织 ,光镜和电镜观察TIL细胞的形态和分布特征。 结果 人参多糖与IL 2联合体内应用抗肿瘤作用显著强于对照组 (P <0 0 5 )。实验组瘤周区可见不同程度的淋巴细胞浸润 ,其中以 2组为多 ,且可见TIL细胞与肿瘤细胞有膜接触。 结论 人参多糖与IL 2联合体内应用抗肿瘤作用显著强于对照组 。

乙醇浓度对人参多糖分离的影响

研究了不同浓度的乙醇对人参多糖分离的影响.结果表明,乙醇浓度在很大程度上影响着人参多糖的分离效果和产率.通过对不同浓度乙醇提取和沉淀的多糖组成和相对分子质量的分析,得出了分离人参多糖的简便方法:依次用体积分数为70%,50%,30%的乙醇和蒸馏水提取,经大孔树脂和透析分离,可分别得到皂甙、单寡糖、中性多糖和酸性多糖;人参水提取液经40%,60%,70%的乙醇分步醇沉,可分别得到不同相对分子质量的多糖和单寡糖.

人参多糖对粒单系造血祖细胞增殖分化的影响

本文采用造血祖细胞体外培养、造血生长因子生物活性检测、免疫细胞化学等实验血液学技术检测人参多糖 (GPS)体外作用对人粒单系造血祖细胞 (CFU GM)增殖分化的影响及GPS刺激制备的胸腺细胞培养上清液(HTCM)、脾细胞培养上清液 (HSCM)、骨髓基质细胞条件培养液 (HBMSCM)中GM CSF的生物活性。结果发现 :①在有外源性粒单系集落刺激因子 (GM CSF)存在的情况下 ,GPS能显著促进CFU GM的增殖与分化。②经GPS体外诱导制备的胸腺细胞、脾细胞、骨髓基质细胞的条件培养液能明显提高人CFU GM的产率。③经GPS体外刺激后 ,胸腺细胞、脾细胞、骨髓基质细胞GM CSF蛋白表达水平较对照组明显提高。结果表明GPS可能通过直接和 或间接途径促进胸腺细胞、脾细胞和造血诱导微环境中的基质细胞合成和分泌GM CSF或GM CSF样活性 ,进而促进CFU

人参多糖抗肿瘤作用机制研究新进展

目的介绍人参多糖的理化性质和药理作用,探讨人参多糖抗肿瘤作用机制。方法以国内外研究结果为依据,总结人参多糖抗肿瘤作用及其机制的研究现状。结果和结论开展人参多糖抗肿瘤研究具有十分广阔的前景,其抗肿瘤的确切机制,药代动力学及药物最佳应用途径、剂量等方面仍需要进一步研究。

人参多糖对创伤脓毒症患者免疫功能和细胞因子的影响

目的研究人参多糖对创伤脓毒症患者炎症因子及免疫功能的影响,探讨人参多糖在外科感染治疗中的作用。方法 48例创伤脓毒症患者随机分为治疗组24例和对照组24例,对照组采用经典SSC治疗,治疗组在上述治疗基础上加用人参多糖,疗程为7 d。分别观察治疗前和治疗后2组患者相关临床资料和生存分析,比较APACHEⅡ评分,血浆内毒素,肿瘤坏死因子(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-10(IL-10),CD14+单核细胞HLA-DR,NK细胞和T细胞亚群CD4+、CD8+、CD4+/CD8+百分率的变化。结果治疗组患者机械通气和使用升压药的时间较对照组均明显缩短(P均<0.05);2组APACHEⅡ评分治疗前比较无显著性差异,治疗后第7天时治疗组明显低于对照组(P<0.05)。2组之间28 d病死率比较无显著性差异(P>0.05)。与对照组比较,治疗组内毒素、TNF-α、IL-6水平明显下降,IL-10水平明显升高,CD14+单核细胞HLA-DR,NK细胞和T细胞亚群CD4+、CD8+、CD4+/CD8+均明显上升(P均<0.05)。结论人参多糖可以减轻创伤脓毒症患者的炎症反应,改善其免疫功能,缩短机械通气和使用升压药的时间。