荧光原位杂交检测宫颈脱落细胞中人类染色体末端酶基因的扩增及临床意义

目的探讨人类染色体末端酶(hTERC)基因在宫颈不同病变脱落细胞中的扩增和临床意义。方法收集2008年1月—2009年5月来北京大学深圳医院宫颈门诊就诊的309例患者的宫颈脱落细胞标本,按细胞学分组分为未见上皮内瘤变(NILM)72例,未明确诊断意义的不典型鳞状细胞(ASC-US)71例、不除外高度上皮内病变的不典型鳞状细胞(ASC-H)19例、低度鳞状上皮内病变(LSIL)80例、高度鳞状上皮内病变(HSIL)49例和鳞状细胞癌(SCC)18例;按组织学分组分为正常或慢性宫颈炎33例、宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ级168例、CINⅡ/Ⅲ级84例和SCC组24例。用荧光原位杂交(FISH)方法检测宫颈脱落细胞中hTERC基因的扩增。结果在NILM、ASC-US、LSIL、ASC-H、HSIL和SCC中,hTERC基因扩增阳性率分别为5.56%、14.09%、15.00%、42.11%、67.35%、100%。在正常或慢性宫颈炎、CINⅠ级、CINⅡ/Ⅲ级和SCC中,hTERC基因扩增阳性率分别为6.06%、7.74%、54.76%、100%。随细胞学和组织学病变程度增加,hTERC基因扩增阳性率均增加(P<0.001)。hTERC基因在HR-HPV阳性与阴性组中扩增率为29.08%与11.11%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。hTERC基因检测CINⅡ/Ⅲ级以上病变的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为64.81%、92.54%、82.35%和83.04%。结论 hTERC基因扩增与宫颈细胞学和组织学异常密切相关,且随着病变程度增加其扩增阳性率增加,可作为预测宫颈癌前病变进展的生物遗传学标志物。

人类染色体罗伯逊易位及其与疾病相关性

人类罗伯逊易位是指罗伯逊融合,主要有D/D、D/G、G/G三种类型的易位。易位涉及到着丝粒、rRNA基因、断裂点位置及相关基因的活性等的变化,因此对机体的影响也是多方面的,其中减数分裂时配子的不平衡分配是导致后代各种多发症的原因。同时,罗伯逊易位在人类核型的演化过程中也可能起着一定的作用。

9种新的人类染色体异常核型报告

发现９种新的人类染色体异常核型，分别为：４６，ＸＸ，ｔ（２；１０）（ｑ３３；ｑ１１）；４６，ＸＹ，ｔ（１０；１２）（ｑ２６；ｑ２２）；４６，ＸＹ，ｔ（６；１５）（ｐ２３；ｑ２３）；４６，ＸＹ，ｔ（１；６）（ｐ３６；ｑ２１）；４６，ＸＹ，ｔ（１；１９）（ｐ３２；ｐ１３）；４６，ＸＹ，ｔ（１６；１８）（ｑ２２；ｑ２１）；４６，ＸＹ，ｉｎｖ（１）（ｐ３６ｑ２５）；４６，ＸＹ，ｔ（１３；１７）（ｑ１２；ｑ２５）；４６，ＸＹ，ｔ（１５；２１）（ｑ２６；ｑ１１）。异常核型是导致自然流产和不育的原因。

新疆维、汉妇女宫颈癌人类染色体端粒酶基因的研究

目的:探讨维吾尔族(维族)、汉族妇女宫颈癌在感染HPV高危亚型之后,其致癌机制——人类染色体端粒酶(TERC)基因扩增的特点及差异性。方法:采用荧光原位杂交技术(FISH)检测23例维吾尔族和22例汉族宫颈癌患者的TERC基因扩增的情况。结果:23例维吾尔族宫颈癌患者TERC基因扩增率为86.96%,22例汉族宫颈癌TERC扩增率为90.90%。随着临床分期增高,维吾尔族、汉族宫颈癌患者的TERC基因扩增均无明显增加。维吾尔族、汉族宫颈癌在HPV各亚型感染之间,TERC基因平均扩增倍数差异无统计学意义。维吾尔族宫颈癌总的TERC基因扩增倍数与汉族差异有统计学意义,主要与维吾尔族宫颈癌患者中多重感染的比率高于汉族宫颈癌有关。结论:TERC基因的扩增在维、汉族宫颈癌的发生中均为早期事件。维吾尔族宫颈癌患者中多重HPV高危亚型感染比例较高,导致TERC基因扩增明显,可能是维吾尔族宫颈癌发病率高于汉族的原因之一。

双参数人类染色体流式分析及分选

用ＦＡＣＳＶａｎｔａｇｅ型流式细胞分选仪对人二倍体成纤维细胞的单分散染色体悬液进行双参数、双激光染色体核型分析及分选。人类染色体可分出２１个集团，除９至１２号染色体外，其余均能被单独分离。经染色体特异性探针池ＦＩＳＨ鉴定，染色体分选纯度可达９０．５％。

人类染色体图像分析与识别系统在外周血染色体核型分析中的应用

染色体数目或结构异常所致的疾病称为染色体病。染色体核型分析(即染色体检查)是确诊染色体病的主要方法。自Caspersson等于1970年发表第一张人类染色体显带照片以及1971年巴黎国际命名会议以来,现已发现人类染色体数目异常和结构畸变3000余种,染色体病综合征100余个。因此染色体检查十分重要。 一、资料和方法 1.对象 我室自1986年～1999年,已为4140例遗传咨询者及其他相关患者进行了外周血染色体检查。

宫颈病变中人类染色体端粒酶基因与高危型人乳头瘤病毒感染相关性研究

目的应用荧光原位杂交技术(FISH)探讨宫颈病变中人类染色体端粒酶(hTERC)基因的异常扩增情况及其与人乳头瘤病毒(HPV)感染在宫颈病变中的关系。方法对115例宫颈疾病患者,以病理检查为"金标准",根据宫颈活检病理诊断结果将其分为4组:对照组(包括宫颈组织正常及宫颈炎症)、宫颈上皮内瘤样变(CIN)Ⅰ组、CINⅡ～Ⅲ组和宫颈浸润癌组,对患者宫颈分泌物分别进行HPV杂交捕获Ⅱ代(HPV-HC2)检测、FISH检测。结果 (1)hTERC基因在对照组、CINⅠ组、CINⅡ～Ⅲ组和宫颈浸润癌中组的扩增率分别为21.1%、86.7%、93.8%和100.0%。宫颈浸润癌组、CINⅠ组和CINⅡ～Ⅲ组hTERC基因扩增率与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)83例HPV阳性患者中,hTERC基因扩增率为91.6%(76/83),32例HPV阴性患者中,hTERC基因扩增率为43.7%(14/32),差异有统计学意义(P<0.05)。(3)hTERC基因扩增与HPV阳性率的相关系数为0.520,两种检测方法有很好的一致性,hTERC基因检测总体评价高于HPV-HC2的检测。结论 hTERC基因的扩增与宫颈病变程度及HPV感染呈正相关,其扩增提示CIN有恶性进展潜能,其扩增情况可作为CIN病情进展的预测指标。

秋水仙素在人类染色体G显带制作中的应用与讨论

人类外周血淋巴细胞培养及染色体G显带标本制作技术,是诊断染色体畸变的常用方法。染色体G显带制作技术较局限,每一个处理步骤及使用试剂的阈值均可决定制备的成败,其中秋水仙素处理是获得标本相的关键步骤。经过多次实验观察,笔者分析、总结了实验中每一个步骤的精确数值,细胞培养至68小时已具备旺盛的分裂能力,在阻断培养的4小时内任意时间加入相应剂量的秋水仙素,能获得形态完好、大小适中、分散均匀、轮廓清楚的中期染色体标本相。

引物原位标记技术快速检测人类染色体非整倍性

染色体数目异常是人类染色体疾病的重要类型,经常导致胚胎丢失、胎儿流产、婴儿死亡、先天畸形和神经发育异常等出生缺陷。文章应用引物原位标记(Primed in situ labeling,PRINS)技术快速检测人类染色体非整倍性,率先采用更新的非ddNTP阻断的多色PRINS技术,对人类外周血淋巴细胞和精子等多种样本进行标记;然后对不同靶标序列的标记效率及不同荧光色素的发光特点通过实验进行评估,获得关于PRINS技术的多项反应原理参数,并筛选标记顺序以获得均一稳定的标记效果,最后进行临床FISH探针与PRINS的标记比较实验。通过实验比较PRINS技术与传统FISH技术之间的标记特点与差别,评估PRINS的实际应用效果。在2.5h内标记了同一精子核内的多条染色体,单色以上标记达到99%。同时在人类外周血淋巴细胞中也得到较好的标记效果。与FISH技术相比,PRINS的这些优点使得它成为诊断染色体非整倍性变异的首选技术。

人类染色体与精神障碍

人类染色体是遗传物质—基因的载体,是细胞中遗传物质存在的形式。人类染色体在正常情况下数目是相对恒定的。根据人类染色体国际命名体制《人类细胞遗传学命名法国际体制》（ISCN1995）,正常男性核型是46,XY,正常女性核型是46,XX,正常男性和正常女性的染色体中22对（44条）为常染色体，1对（2条）为性染色体，男性的性染色体为XY，女性的性染色体为XX，人类的性别由性染色体XY（XX）决定。但人类染色体核型又是一个高度变异的体系，这主要是指在正常人群中，经常可以见到各种染色体形态的微小变异，诸如染色体结构、

人类染色体图象分析系统的研制

本文研制的人类G带（350—850条带纹）染色体图象分析系统以实用为目标,硬件以最低价格配备,软件追求高速度和操作方便。软件的研制采取适合于染色体的快速中轴提取法,与传统算法相比速度提高较大,以局部局配法并以全局最优的分类准则进行染色体匹配,可减少对样品的依赖,由此提高运用范围,本系统经临床验证与专家鉴定,证明其图样清晰,结合人机对话,操作方便,测试速度快,结果正确,可大大提高工作效率。该系统的性能达到国外同类产品水平,适用范围与价格更适合于我国国情。该染色体图象分析系统配备不同软件后可一机多用,适合各种医学图象分析。它将在临床分析诊断、基础实验研究、示范教学、资料的管理与积累等方面显示出巨大的优越性。

人类染色体R显带法改良初探

应用改良的Ｒ显带方法进行染色体显带，结果表明：染色体能及时显带，带纹清晰、丰富，其方法稳定、简便、易于识别、重复性佳．

1994～2003年由人类染色体异常引起的流产和不育文献资料分析

由染色体异常引发的疾病是多种多样的.根据最新文献统计癌、高血压、精神病[1]等均是由染色体异常及基因突变引起的.自发性流产和习惯性流产的形成原因也是多样的,但从正常妊娠角度出发,排除孕期药物因素,引起流产的原因主要还是集中在染色体异常方面.就全国范围来看,公开报道的由染色体异常引起的自发性和习惯性流产在中国大部分省区均有不等量的分布.笔者就1994～2003在国内专业期刊上公开发表的有关自发性和习惯性流产的专业文献进行了初步的计量统计分析.并在人类基因组计划完成的基础上建议,建立染色体异常及突变与自发性和习惯性流产的专家诊断咨询系统.为快速诊断和及时治疗提供现实依据.文中提到的文献仅指关于由染色体异常引发的自发性和习惯性流产文献.

人类染色体高序结构的扫描电镜观察研究

应用微铺展技术在扫描电镜下对人类染色体的高序结构进行了研究。观察了处于不同凝集水平的直径约为１００ｎｍ和２５０—３００ｎｍ的染色质纤维。分裂中期的染色体是由约３００ｎｍ直径的染色质纤维形成的。试验结果与染色体螺旋结构模型相似。

丝氨酸/精氨酸蛋白激酶在人类染色体上的定位

目的 确定丝氨酸 /精氨酸蛋白激酶 (SRPK)在人类染色体上的区位。方法 运用Southern印迹杂交及荧光原位杂交技术。结果 SRPK1定位于人类染色体 6p 2 1.2 -p 2 1.3 ,SRPK2 定位于人类染色体 7q2 2 - q2 3 .1。

不同悬液滴加剂量在人类染色体制备中的应用

目的探讨人类染色体制备过程中所需适宜的细胞悬液滴加剂量,以提高染色体分析效率及核型诊断准确性。方法使用染色体分散仪制片,预设相对稳定的制片环境(温度为27℃,相对湿度为55%),采用移液枪分别滴加10、20、30、40μL 4种不同剂量细胞悬液于清洁玻片上,比较不同剂量悬液制片后染色体自动扫描分析系统采集的有效细胞图占比、分裂相展开面积(R值)及染色体带纹辨析度。结果10μL组、20μL组、30μL组采集有效细胞图占比分别为81.36%、80.29%、80.64%,均大于40μL组(74.89%),差异有统计学意义(P<0.05);10μL组、20μL组、30μL组采集的有效细胞图占比比较,差异无统计学意义(P>0.05)。20μL组、30μL组、40μL组R值分别为0.21±0.04、0.25±0.07、0.28±0.08,均大于10μL组(0.16±0.03),差异有统计学意义(P<0.05);40μL组R值与20μL组比较,差异有统计学意义(P<0.05);20μL组R值与30μL组比较,差异无统计学意义(P>0.05);30μL组R值与40μL组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。20μL组、30μL组、40μL组染色体带纹质量评分分别为(2.25±0.72)、(2.45±0.83)、(2.65±0.81)分,均大于10μL组[(1.60±0.60)分],差异有统计学意义(P<0.05);20μL组、30μL组、40μL组染色体带纹质量评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在人类染色体制备过程中,使用染色体分散仪制片,预设相对稳定的制片环境(温度为27℃,相对湿度为55%),细胞悬液滴加剂量选择20~30μL较为适宜,可获得高质量染色体标本玻片,以提高染色体分析效率及核型诊断准确性。

人类染色体中的微切割与微克隆技术

微切割、微克隆是分子生物学的一项新技术 ,它对于基因的标记与分离、DNA文库的重组及遗传图谱的绘制都发挥着重要作用 .笔者介绍了这项技术在人类染色体中的应用情况 .

人类染色体的C带多态性研究进展

人类染色体对人的生长、发育、遗传和变异起着决定性作用,其结构功能的研究已成为现代医学生物学研究的中心课题之一,受到了广泛的重视。随着研究方法的创新,测试手段的改进,特别是各种带型的显示方法相继出现和完善。